il--22ra1基因多态性与系统性红斑狼疮发病相关性研究（可编辑）

IL22RA1基因多态性与系统性红斑狼疮发病相关性研究基因多态性与系统性红斑狼疮发病相关性的研究导论文课题起止时间生三旦二兰至生三旦中国医科大学辽宁年月中国医科大学研究生学位论文独创性声明本人申明所呈交的学位论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得我校或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料,与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。申请学位论文与资料若有不实之处,本人承担一切相关责任。口/。,日期论文作者签名三兰盗中国医科大学研究生学位论文版权使用授权书本人完全了解中国医科大学有关保护知识产权的规定,即研究生在攻读学位期间论文工作的知识产权单位属中国医科大学本人保证毕业离校后,发表论文或使用论文工作成果时署名单位为中国医科大学,且导师,为通讯作者,通讯作者单位亦署名为中国医科大学。学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅学校可以公布学位论文的全部或部分内容保密内容除外,以采用影印、缩印或其他手段保存论文。论文作者签名至兰重指导教师群一轻日期至竺兰目录一、摘要中文论著摘要英文论著摘要二、英文缩略语。三、论文前言月百葛材料与方法实验结果“讨论结论四、本研究创新性的自我评价五、参考文献,六、附录综述在学期间科研成绩致谢个人简介中文论著摘要基因多态性与系统性红斑狼疮发病相关性的研究吉言莉瞢,是一个可累及全身多个系统性红斑狼疮系统的慢性炎症性自身免疫性疾病。临床表现各异,可累及皮肤、粘膜、关节、肾脏、肺、心脏、血液系统等多个系统。病因不清,可能与遗传、性激素、感染及环境、机体免疫异常等多种因素有关。目前一般认为的发病是激素和环境因素触发了具有遗传易感性的个体发生了免疫异常,最终导致各个脏器损伤。近年来自细胞介素,作为主要由分泌的新等最早描述了,患者血清几型细胞因子受到国内外学者关注。水平的降低与之间存在关联。但是其作用机制还不明确,尚不明确也促进发生发展还是在发病中具有保护作用。所以我们假设受体在中可能有异常,导致作用的不一致性。必须与其特异性受体结合才能发挥作用。的受体是由条链组成的异源二聚体,分别称为和。受体的条链都能结合,且只有两条链在一起时才形成功能性的受体复合物,经信号传导途径系统向细胞内传递兴奋性或抑制性信号。近年来有研究表明,和受体可能与某些自身免疫性疾病,如自身免疫性肝病、银屑病、克罗恩病、红斑狼疮、类风湿性关节炎、自身免疫性多内分泌腺病综合征型等密切相关。同时,我们的前期研究结果发现,位于新西兰小鼠第号染色体附近的区域存在与鼠狼疮性肾炎发生密切相关的易感基因。我们推测在微卫星标计附近处的自细胞介素受体,基因外显子单核苷酸多态性在发病过程中可能起一定作用。目前,国内外学者对于人基因多态性与相关性的研究较少。本研究对例中国北方汉族人群儿剃外显子进行了基因测序,得到了中国汉族人尼嬲外显子基因多态性的分布情况,进而筛选出分布频率大于的能导致编码氨基酸改变的有义位点进行了疾病相关性分析。为进一步明确尼在发病过程中的作用。材料和方法一、实验材料一研究对象按年美国风湿病学会修订的分类标准,选取年中国医科大学附属第一医院并患狼疮性肾炎的住院患者共例,男例,女例。健康对照组例,来源于中国医科大学附属第一医院体检中心,男例,女例。组的年龄、性别比例差异无统计学差异,所有被研究对象均为北方人,无亲缘关系。二主要试剂液、异丙醇、水、引物上海生工、缓冲液、试剂盒上海生工、测序试剂盒公司、硝酸银、琼脂糖、无水碳酸钠、三氯乙酸、甲醇、硫代硫酸钠、甲醛、甲叉双丙烯酰胺、丙烯酰胺、乙醇、乙酸、回收试剂盒上海生工二、实验方法利用基因测序、聚合酶链式反应一单链构象多态性电泳技术对中国北方汉族人群基因单核苷酸多态性进行筛选,通过比较有义的基因型和等位基因在病例组与健康对照组中的分布,进而研尼与/的相关性。三、统计学分析进行统计学分析,有统计学意义。采用圣士虽三日禾在尼削基因第外显子处存在个有义位点,该位点存在种基因型,即/型、/型和/型。各型在病例组和健康对照组中的分布差异无统计学意义。结论细纠二外显子基因有义与中国北方汉族人群的易感性可能无相关性。关键词单核系统性红斑狼疮狼疮肾炎白细胞介素白细胞介素受体苷酸多态性英文论著摘要,一几一,、航一,也】吼诎,山瑚尼尼一一皿一,/,。/,嬲,伍删,佃,鸟,/,/、一唧。作用。为进一步研究基因变异与/之间的关系,我们以中国北方汉族人群为研究对象,采用直接测序的方法对外显子区域进行基因序列检测及筛选,应用聚合酶链式反应单链构象多态性电泳技术比较外显予基因有义在病例组和健康对照组中的分布,以探讨基因与发病的相关性。材料与方法一、研究对象按年美国风湿病学会修订的中国医科大学附属第一医院并患狼疮性肾炎的女例。健康对照组例,来源于中国医科大例,女例。组的年龄、性别比例差异无统计学差异,所有被研究对象均。为北方人,无亲缘关系。二、主要实验仪器、扩增仪、紫外光透照箱,。,涡旋振荡器,、振荡器,、电泳槽公司、一深低温冰箱,、普通冰箱国产,瑞士、电子天平、精密计国产型,、超高速低温离心机、测序仪、多功能恒温水浴、摇床、微波炉,、微量紫外可见分光光度计,三、主要试剂、红细胞裂解液,加双蒸水至。、裂解液,加双蒸水,调,最后定容至。,、缓冲液,。、提取用其它试剂蛋白酶,酚,氯仿,醋酸钠,乙醇,乙醇等。、扩增用试剂,聚合酶,引物、去离子水等,引物由上海生工生物技术服务有限公司合成。、缓冲液,硼酸,加蒸馏水水溶解,调,加水定容至。、琼脂糖缓,西班牙琼脂糖加入冲液中,加热沸腾使琼脂糖完全溶解,室温至左右倒入制胶板中,后取下琼脂糖凝胶放入缓冲液中备用。上海生工,溴化乙啶等。、电泳用其它试剂、胶回收用试剂柱式胶回收试剂盒购自上海生工生物技术服务有限公司,异丙醇,去离之水等。、测序用试剂,甲酰胺,测序胶,均为公司产品。、醋酸钠无水醋酸钠加去离子水,冰醋酸调,再定容至,高压灭菌。醋酸钠为试剂。克加去离子水,调,再定容至,高压灭菌。为试剂。、的聚丙烯酰胺丙烯酰胺,甲叉双丙烯酰胺加缓。冲液定容至、去离子水。、的称取过硫酸铵溶于、变性上样液甲酰胺加入克加入去离子水、二甲苯青、溴酚蓝混匀。、三氯乙酸三氯乙酸加入去离子水定容至。、甲醇甲醇加入去离子水定容至、硝酸银硝酸银加入去离子水定容至用时倍稀释。、硫代硫酸钠硫代硫酸钠加入去离子水定容至、碳酸钠无水碳酸钠加入去离子水定容至。四、实验步骤一酚氯仿法提取基因组、外周血白细胞制备肝素抗凝血,离心转/分分钟,吸出上层血浆,余下的细胞加红细胞裂解液作用分钟,待红细胞完全裂解后,离心,去上清即得到外周血白细胞,冻存、冻存的白细胞加裂解液及蛋白酶/,水浴过夜、分装两管,每管,离心、加酚,振荡分钟,离心、取上清置另一管中,加酚氯仿振荡分钟,室温离心、取上清加氯仿振荡,室温离心、取上清加倍体积无水乙醇及/体积醋酸钠,放置,出现絮状物,离心、弃上清,乙醇洗沉淀,离心、弃上清,干燥、加适量溶解,溶解后定量测浓度,冻存。二引物设计及扩增在网上查询外显子的核苷酸序列,设计多对引物表,要求覆盖已知外显子并包括两翼侧链序列,长度在左右。随机选取例健康人和例患者的标本进行扩增,在型山,每对引物仪上进行,总反应体系,/,用稀释的聚合酶,模板,去离子水,反,应条件预变性后,加入稀释的聚合酶,个循环,末次延伸,置保存。,三产物回收纯化、产物在琼脂糖凝胶中电泳,约,染色,在紫外光透照箱内切下目的条带,放入离心管中、离心管中加入、置于水浴中,将其融化,期间摇动几次,加异丙醇、转管至柱中,室温放置,离心,离心、弃收集管中溶液,往柱子中加入、弃液,重复一次、弃液,离心,室温放置、换新底管,加入、离心,底管内即为回收到的目的产物。四基因测序、测序反应体系如下,在管中反应。测序反应条件为,。纯化产物引物去离子水总体积让乙醇挥发干净,加入溶解在仪上变性,加入孔测序板中上机测序。、测序纯化的测序产物在测序仪进行测序。应用软件进行序列分析,设设定的程序进行自动化电泳,定杂合峰高大于的为杂合序列。通过与数据库标准序列进行比对,获得基因多态性信息。五分析、根据测序结果,重新设计引物,得到适合的短片段序列引物,同时提高分析精度,设计的上游引物为盯,下游引物为她,所得的目的短片段的分子量为。、扩增在型仪中进行,总反应体系山,稀释的聚合酶,山,每对引物/,用,模板,去离子水,反应条件预变性,个循环,末次延伸,置保存。、制备聚丙烯酰胺凝胶取的聚丙烯酰胺,山,混匀,立即用吸管吸取胶液,缓慢注入两玻璃板间的空隙中,直至灌满模具顶部。立即插入相应的点样梳。由于凝胶在聚合过程中有回缩,所以应小心添加些胶液于梳子处,水平放置,室温聚合后,将封口玻璃胶带掀去,放入电泳槽,凹型玻璃贴紧电泳缓冲液槽,用大号固定夹固定住两侧。在上下电泳槽内灌入电泳缓冲液。小心取出点样梳,用槽内的缓冲液反复冲洗点样孔,以去除可能存在的未聚合的聚丙烯酸胺和气泡。拆下电泳装置,取出聚丙烯酰胺凝胶,放到一个银染盘内,置于摇床上倒入三氯乙酸固定倒入甲醇固定用蒸馏水冲洗遍,倒入银染液硝酸银溶液中加入甲醛,银染用蒸馏水冲洗遍,将胶置于预冷的显影液中碳酸钠中加入硫代硫酸钠、甲醛毫升显色至出现清晰的银染带显色后将胶置于固定液中乙醇,冰醋酸,蒸馏水用蒸馏水浸泡聚丙烯酰胺凝胶干燥制片,观察结果,根据测序结果确定银染带型与变异碱基的对应关系,观察照像。五、统计学分析尼外显子基因位点基因型数目用直接计数法,计算基因型频率和等位基因频率。基因多态性在病例组与健康对照组之间比较应用检验进行相关性分析。应用软件进行统计学分析,为差异具有显著性意义。实验结果一、皿外显子基因的测序结果以例健康人和例患者的外显子基因进行测序,发现第外显子上的巧是能够导致编码氨基酸序列改变的有义位点。测序结果显示该位点有种基因型型/纯合子图型/杂合子图型/纯合子图。图,一外显子基因位点处的基因型二、分析结果扩增全部病例组和健康对照组样品,并进行分析。基因型依电泳条带分为种,分别命名为型/纯合子型,型/杂合子型,型/纯合子型图。图,位点在胶片上的对应带型三、比删外显子基因位点基因型和等位基因在病例和健康对照组中的分布频率种基因型在病例组中的分布频率/型纯合子,/型杂合子,/型纯合子种基因型在健康对照组中的分布频率/型纯合子、/型杂合子、/型纯合子。统计学分析结果显示,种基因型在病例组和健康对照组中的分布无统计学差异。等位基因和在病例组中的分布频率分别为和,在健康对照组中的分布频率分别为和,组比较差异无统计学意义。儿外显子基因多态性可能与北方汉族人易感性无关。讨论是一种涉及免疫异常及免疫调节因子紊乱的复杂的多基因遗传病,是伴有多种自身抗体和免疫复合物沉积而致的感染和多种器官损害以肾损害最常见的自身免疫病,目前其病因和发病机制尚未明确。由于细胞因子在的发病中起重要作用,因此各种细胞因子基因多态性日益受到重视【。目前已知与有关基因有、幽、】、中性粒细胞集落刺激因子【、免疫球蛋白砌吠删、珊、和以、雌激素受体基因【】等余种基因。细胞因子受体编码基因中许多位点存在多态性,而有些位点的多态性可导致相应的氨基酸改变,从而引起受体的功能改变,并进一步影响信号转导系统,最终使机体对疾病的易感性及疾病的严重程度发生改变。几是类细胞因子,由活化的细胞和细胞等产生,大量研究证实,几可与上皮细胞、腺泡细胞、肝细胞、角质形成细胞、结肠上皮下肌成纤维细胞等作用,诱导其产生细胞因子、趋化因子、急性反应蛋白等炎性因子和多种抗菌肽。必须与其特异性受体结合才能发挥作用。是由条链组成的异源二聚体,分别称为和,这条链都能结合几,且只有条链在一起时才形成功能性的受体复合物,经信号传导途径系统向细胞内传递兴奋性或抑制性信号。有研究表明,可能与某些自身免疫性疾病,如自身免疫性肝病、银屑病、克罗恩病、红斑狼疮、类风湿性关节炎、自身免疫性多内分泌腺病综合征型等密切相关。有文献报道【】,低水平表达与密切相关,与的关系待于进一步研究。我们前期通过建立回交小鼠模型应用多态性微卫星数量性状位点,分析表明,位于新西兰小鼠第号染色体附近的区域存在与鼠发生密切相关的易感基斟。在距上基因,研究发现它位于狼疮游处为淋巴细胞膜表面特殊区域,鞘脂胆固醇富集区的含量下降可干扰免疫受体的信号传导过程。其他学者在定位新西兰鼠的易感基因中还确定了另外个易。感片段即、,分别位于上游及下游附近【处有在微卫星标计附近基因。我们推测基因外显子多态性在发病过程中可能起一定作用。若位于外显子区,可能影响蛋白质的氨基酸序列,可对所编码的蛋白功能产生影响若位于启动子区就有可能直接影响该基因的表达水平若位于内含子区,则有可能影响基因转录时的剪接。国内外尚没有关于儿以多态性的研究报道,本研究首次探讨基因外显子区域分布频率大于的有义位点与中国北方汉族人群发病相关性分析。通过方法对外显子基因进行的筛选,发现了个位于第外显子上塔的有义位点。该位点各基因型频率及等位基因频率在病例组和健康对照组的分布无统计学差异叼,提示尼挖见外显子基因多态性可能与北方汉族人易感性无关。但我们仅仅是对中国北方汉族人群中基因的一个的基因频率、基因型频率进行了比较,尚不能排除该基因与中国汉族人的相关性,需全面研究该基因的遗传变异,进而最终明确基因与中国汉族人易感性的关系。结论该位点各基因型频率及等位基因频率在病例组和健康对照组的分布无统计学差异踟。外显子基因有义与中国北方汉族人群的易感性可能无相关性。本研究创新性的自我评价本研究首次对中国汉族人皿/彤巧/,栗霄立,佐楠,王力宁,等初步探讨回交鼠和狼疮性肾炎相关的易感基因中国免疫学杂志,卿嘭,/栗霄立,李艳秋,王力宁,等基因多态性与发病关系的临床研究中国免疫学杂志李艳秋,栗霄立,王力宁,等中性粒细胞集落刺激因子基因多态性与系统性红斑狼疮相关性的研究中华风湿病学杂志/,崩蚧燃/,/豫瞪,/棚/】。,】。综述白细胞介素与自身免疫性疾病关系的研究进展白细胞介素是几细胞因子家族的成员之一。由活化的、细胞以及细胞所分泌。近年来有研究表明,和受体可能与某些自身免疫性疾病密切相关。因而,这些自身免疫性疾病的发病机制与几和受体的作用之间的关系成为近年来国内外研究的热点。一、的来源、分子结构、编码基因年等【】在用刺激的淋巴细胞瘤细胞中分离到一个新的基因。该基因编码的蛋白质具有细胞因子的特征,由个或个氨基酸组成,与有的氨基酸同源性。他们把该新型分子称为白细胞介素,相关的细胞衍生的可诱导因子儿。随后他们又从抗抗体刺激的人外周血单个核细胞中克隆到人。年,等【】也发现了小鼠的人同源体。由于该分子与也之间具有相似性,其受体属于型细胞因子受体超家族,其可由白细胞产生并作用于白细胞,故称之为白细胞介素,。在细胞培养后,用和刺激其表达效果最佳【】。在体外由或诱导活化的胸腺淋巴瘤、细胞、肥大细胞、细胞及嗜酸性粒细胞产生,并且可在之内快速诱导几产生,不需要蛋白质的合成,但依赖于途径的激活体内应用后,除了作用于免疫系统使之表达外,可刺激胃肠、肝、肾、心、脑等多个器官表达【。人和小鼠都有个氨基酸组成。小鼠包括一段信号肽,大部分与相同的氨基酸残基位于末端,分子量约为【。人几与小鼠也分子有的相似性,与人有的相似性【】。是家族的一员,家族还包括、几、以及。与虽然在氨基酸序列上具有一定同源性,但它们的三级结构、功能却有差异。几、儿和超家族和有相似功能【。超家族通过/和/复合物进行信号转导【,超家族和诱导磷酸化不像几那样直接形成相互缠绕的二聚体,而是以单体的形式与其受体结合。分子由六条螺旋体排列成非平行结构,产生一个单节显性捆绑样蛋白。人和小鼠/基因都由个外显子和个内含子组成,全长约为。人几基因包含外显子外显子外显子显子外显子外显子,外显子前编码非编码区,外显子剩余部分和外显子,外显子的前是蛋白表达部分,外显子的剩余部分编码非编码区。基因组结构包含一个短的位于假定的盒下游个核苷酸处起始的、由个核苷酸组成的非编码外显子,编码个氨基酸长的蛋白,包括个半胱氨酸,其蛋白序列与核苷酸序列同相比分别有、一致性】,非编码外显子在和基因即另一个编码相关的细胞因子基因中未被发现【】。人也基因是单拷贝的,定位于第条染色体长臂区类,距离几/基因。在这个基因组距离干扰素吖丫基因区域,存在与哮喘和肠炎类疾病相关的一个细胞因子簇。小鼠也/基因定位于第条染色体上,也与硎吖基因位于同一区域【】。人与小鼠的基因结构非常相似,外显子有至核苷酸相一致。,分子个氨基酸中前个氨基酸被认为起到信号肽作用,末端氨基酸分析结果表明,成熟蛋白序列起始于第个氨基酸,所以成熟蛋白分子是由个氨基酸组成】。二、的受体、结合蛋白及信号转导的受体是由条链组成的异源二聚体,分别称为【和嘲,均属于型的细胞因子受体家族,条链组成高亲和缅血力受体,并具有生物学活性。其中是几受体复合体的一部分,又称。为蛋白质,链在两个受体复合物几受体复合物和受体复合物间是共用链,并可能是其他同源物的共用链。因此,这个蛐而又称为链被命名为两个受体共用链,为孤核受体。眦为蛋白,胞外区域,存在个连接糖基化部位/,信号肽,跨膜结构域,胞浆结构域,至少存在个潜在磷酸化的,其中有个潜在的招募部位模体。由在初级区的两个分离部分组成的一个非连续表位构成,这条初级区与螺旋区,环,区相符合。互补受体连接位点由在五个受体部分的组成圈。还可和其他型细胞因子受体形成异二聚体分子,如与形成的异二聚体分子参与了的信号通路。/广泛分布于包括免疫细胞在内的全身各组织,但主要分布于正常的胰、肝、结肠、小肠、肺、肾、皮肤组织,并不存在于免疫细膨。受体在结构上与和受体复合物极为相似,但受体和受体只有第一链能结合配体,而受体的条链都能结合,且只有两条链在一起时才形成功能性的受体复合物,几先于结合,只有形成/复合体暴露一个结合位点才与受体链结合【】。类细胞因子受体家族成员在细胞外区域高度相关,都有串联的类纤维结合素区域,基因定位也有一定的相似性,小鼠特异性结合链大约为,由个外显子组成,位于第条染色体,与人特异性结合链是同线群基因【刀。小鼠和分别定位于染色体和。人/和、和基因都定位于第条染色体,定位于,也/和位于第条染色体,和/的基因定位于第条染色体,定位于,而位于第条染色体【瑚。/链负责恢复。基因被表达在正常的肝和肾中,表明在这些组织中可能起调控基因表达的作用。链在和受体复合物间共用是首例受体复合物带有属于类细胞因子受体家族的受体链,建立了一个新的相关的配体的新模式,已证实有个新配体、与有序列同源性。链被广泛的表达,因此活性主要被限制于造血器官的细胞。但为什么当其功能被要求仅限于胞内的亚类时也广泛表达的发现证实了仅一致性就足够允许配体共用受体复合物的两条链,表明低同源的配体可以仅共用一个受体链,特别是链。事实上所有同源物的相同残基大多位于这个蛋白一半的末端,带有最高同源性在螺旋区区域,表明这个区域参与相同受体的部分相互作用。新的配体可能有自己的独特的配体结合链象对,分享第二链显示信号。在同源物的螺旋区保守的残基可能参与他们受体复合物的共有第二链的相互作用。因此,试图提出链也作为其他同源物第二链并被命名为对于共有受体两条链【。年有篇文章【。报道发现结合蛋白几,该蛋白由个氨基酸组成,和/砌和匝刚的胞外结构分别有和的同源性,且与类细胞因子受体家族的其他成员也有较高的同源性,如与儿有与有与组织因子有与条受体链有/的同源性,但缺少跨膜和胞浆区。编码该蛋白的基因位于第条染色体区类体,该基因由个外显子和个内含子组成,并编码一个个氨基酸的蛋白和一个个氨基酸的前导序列,距离基因。由于该蛋白能结合,就称之为结合蛋白几能结合兄并阻断的生物学活性,如阻断儿诱导的的激活等,被认为是的拮抗剂。等【】报道发现了一个新的型细胞因子家族成员,命名为,被认为是的可溶性受体,实际上与是同一物质。由于可溶性受体与配体结合有特异性、高亲和性,在体内可以调节的生物活性,所以可能在调节炎症反应方面有重要作用。在胎盘、脾、乳腺、肺、结肠中高表达,在消化系统、女性生殖系统和免疫系统也有表达。原位杂交表明的主要表达细胞是单核细胞和上皮细胞【】。与家族特别是和具有较高同源性,但与其他可溶细胞因子受体形式不一样,没有相应的膜结合部分。其缺少疏少穿膜结构域,以游离形式存在,在体外其可与几结合并中和其生物活性。等口】于年报道了的信号转导通路。在大鼠肝细胞瘤细胞株中发现诱发和而非也的活化,进而引起,的酪氨酸残基的磷酸化,其中是儿信号转导所必需的。这一发现增加了几和的相似之处。由于是与/相联系的,故认为与/有联系。他们同时也发现了两者的不同之处利用磷酸化/,/,和激酶的特异性抗体发现激活条主要的通路,/,激酶,还诱导位上的丝氨酸残基的磷酸化,且证明丝氨酸残基的磷酸化是刺激后的反应启动子,是最大转化活化所必需的,且只部分依赖于通路,这些都是没有的作用。所以说虽然与也在结构上有一定的同源性,但它们的信号转导途径是不完全一致的。研究结果证实,与虽然在结构上有相似性,在信号传导途径上却存在着不同一是几和也在诱导酪氨酸磷酸化作用的细胞系过程中,仅表现出诱导丝氨酸磷酸化激活,而几不存在该作用。二是可以激活、/、激酶的路径,而不可以。这些信号转导通路的发现也使人们把和联系起来,因为也能激活及下游信号,一也激活通路。/和通路的协同作用被认为是调控急性期反应蛋白表达的原因,故几对肝、胰急性期反应蛋白的上调也认为是/和通路的协同作用。几的信号传导通过一个包括和的受体复合物进行,两条链必须聚集成受体复合物再结合后才能诱导信号。当与其中个受体或单独被转染细胞时,才能介导激活。几和激活相似的信号途径,如、和墙。单独过量表达或结合都不能使诱导活化,但与结合后可使激活。链与相关,链负责活化,其胞内域被胞内域的取代会造成激活模式的改变,证实了的激活是被胞内域介导在胞外域有一些残基是潜在的磷酸化位点。在胞内域内有个潜在的聚集位点的存在,磷酸序列。基因被表达在正常的肝和肾中,表明几在这些组织中可能起调控基因表达的作用。三,的细胞来源及调节白细胞介素一开始被认为是产生的细胞因子。近年来,一类在分化、生物学作用等方面都不同于和的细胞被发现它以分泌为主要特征,被命名为。在防御胞外细菌感染、介导慢性炎症以及自身免疫病等方面发挥重要作用嘲。与细胞相比,细胞分泌的要更多,但从和蛋白质水平来看,细胞无疑是目前为止分泌几最多的细胞。在分化中增强产细胞的表达】的核受体能调节几、的表达,仅参与、的诱导,不调节几的表达【】。相反,核受体对的表达至关重要,而对、不太重要【。作为的重要效应分子在其中同样发挥着重要的生物学作用。同时,几也可由汀细胞产生【。目前报道【刁分泌儿的自然杀伤细胞的亚群细胞并不具有传统细胞的杀伤功能,在刺激后主要分泌而不是吖。有文献报道发现仅诱导而无或干扰素的稳固的人类记忆细胞细胞、浆细胞样树突细胞通过和肿瘤坏死因子依赖途径作用于未致敏人皮肤归巢记忆细胞,可诱导出仅细胞仅产生几的差异性。参与细胞的效应功能。几与协同作用,可以增强炎症反应并造成组织损伤。几与共同表达被认为是自身攻击性细胞和促炎症细胞的标志【习。为家族成员,由细胞和呦胞产生,能增强机体抗微生物感染。和能诱导初始细胞产生几。细胞不表达,因此,几不能直接调节细胞的分化。由于同时具有分泌的几和的能力,由此推定两者表达的调节通路,如细胞因子的参与等方面可能存在相似但研究表明又存在一些差别。首先,在初始阶段,不像的诱导表达需要和的共同参与,表达只需要。其次,在促进几的表达方面需要其它细胞因子的参与,而单独就能促进产生。目前这些不同调节方式的分子基础仍不清楚,但从、的不同调节方式可以推测它们在体内发挥的功能有所不同。虽然体外实验发现、几、师都能诱导刺激几的表达但从一些感染性疾病如柠,感染和自身免疫性疾病如伴刀豆凝檬酸杆菌集素诱导的肝炎等研究发现,在体内环境中的的诱导表达只需而并不需要的参与。除了细胞外,几还可诱导细胞、细胞、单核细胞以及细胞除了不表达,也不能产生吖和几,说明还与一和的分化及细胞表达相关。四、调节上皮细胞的生物学活性人们一直研究其作用的靶细胞是什么。目前仍未在免疫细胞表面发现,因此人们就推测其靶细胞很可能是非免疫细胞。由于广泛表达而相对具有组织特异性,特别是在上皮高表达因此,上皮细胞很可能是的主要靶细胞。大量研究证实,见还可与腺泡细胞、肝细胞、角质形成细胞、结肠上皮下肌成纤维细胞等作用,诱导其产生细胞因子、趋化因子、急性反应蛋白等炎症因子和多种抗菌肽,如防御素、家族蛋白、家族蛋白,也触发涉及上皮细胞分化和生存的基因表达,因此认为能够参与抵抗细菌病原体的早期宿主防御,维护上皮中内环境稳定【。此外,也能上调角质形成细胞表达组织修复相关基因并促进上皮细胞分化增殖和迁移。体外实验还提示,在上皮相关炎症、宿主防御以及组织修复中具有潜在作用。总之,通过调节上皮细胞的生物学活性在参与宿主防御和上皮屏障作用等方面发挥着重要作用。五、以与自身免疫病、几与炎症肝病可促进肝细胞瘤细胞合成更多的急性期反应蛋白【,注射也的小鼠肝脏也能诱导急性期反应蛋白产生,而且注射后小鼠表达急速上升,提示可促进炎症反应。等【】应用基因敲除技术研究发现,在无特异性病原体状态下,也缺乏小鼠有正常的免疫系统,但其肝细胞对损害因素高度敏感,表达的细胞在缺乏小鼠肝损伤过程中起保护作用,缺乏小鼠的细胞无上述保护作用。同时等【司发现在急性肝炎中,所分泌的而非,具保护肝细胞免受急性炎症损伤的能力。因此具有促炎和抗炎双重作用。觚等】指出在鼠胰腺腺泡细胞中,上调胰腺炎相关蛋白的表达。、几与银屑病在银屑病患者中,由细胞分泌的调节角质形成细胞的分化【,另外,用处理重塑的皮肤引发符合银屑病特征的上皮过度增值和颗粒层消失阳】。其特异性受体表达于角质形成细胞,但并不表达于免疫细胞,因此对它们的活化无直接作用。对角质形成细胞的研究表明,可诱导抗微生物蛋白质、防御因子、急性时相蛋白、炎性细胞因子、趋化因子和细胞增生删。等报道几增加在上皮角质形成细胞中表达【】。越等研究表明提高、和在培养的角质形成细胞中表达,发现也表达增加,并能增强和的协同提高表达几、和也作用,嘲。作为细胞分泌的细胞因子之一,无论在体外体内都能诱导角质形成细胞增生过度并产生抗菌肽类,这也可以解释为什么银屑病患者皮损极少发生细菌或病毒感染还诱导角质形成细胞产生基质金属蛋白酶,从而导致组织重塑。在对小鼠模型的研究中】,作为关键性下游介质,与诱导的银屑病样皮肤炎症具有直接关系。将注射到小鼠耳部皮肤形成的银屑病样皮损有大量自细胞浸润和表皮棘皮样改变,是依赖于浸润到皮肤中的细胞产生的几而维持的。将儿注射到基因敲除小鼠,研究者观察到无角质形成细胞增生过度的现象。等湖用抗抗体注射银屑病小鼠后发现皮肤炎症反应减轻。另外,在银屑病患者皮损中表达程度和血清中几的浓度高于未影响皮损和正常个体【】。这些证据表明,几轴在银屑病等自身免疫性皮肤病中发挥潜在致病作用。、也与炎症性肠病克罗恩病和溃疡性结肠炎是人类炎症性肠病,的两种主要形式。克罗恩病以发生在胃肠道任何部位的透壁性肉芽肿性炎为特征,溃疡性结肠炎表现为局限于大肠的粘膜表浅弥漫性炎症,病因尚未清楚。患者炎症损害部位表达高,并且也与炎性介质的高表达有关,但在鼠的溃疡性结肠炎模型中,降低消化道炎症网。、与系统性红斑狼疮系统性红斑狼疮是一种经典的自身免疫病,它的病原学和发病机制仍未阐明,许多研究证实红斑狼疮的发病与免疫调控、遗传、激素、环境等诸多因素密切相关【】。免疫学研究发现机体免疫系统紊乱,细胞异常、细胞高度增生活化、免疫球蛋白增多、大量自身抗体产生抗核抗体、抗抗体、免疫复合物沉积、导致机体多组织器官的非感染性炎症是系统性红斑狼疮发病和进展过程中决定性的中间环节,而体液免疫异常是本病发生的关键,抗众多核抗原的自身抗体大量产生。组织损伤和功能失调主要通过免疫复合物的沉积和多种活性介质的直