大肠癌中增殖细胞核抗原和胎盘型谷胱甘肽-s-转移酶、拓扑异构酶-ⅱ与p-糖蛋白耐药基因的表达及临床意义_临床医学论文_医药学论文__10492

大肠癌中增殖细胞核抗原和胎盘型谷胱甘肽S转移酶、拓扑异构酶与P糖蛋白耐药基因的表达及临床意义_临床医学论文_医药学论文_作者罗志谋，金晓龙，谢蕴，潘玉林，浦文兰，蔡沛然，洪亮【摘要】目的探讨大肠癌中增殖细胞核抗原KI67和胎盘型谷胱甘肽S转移酶GSTPI、拓扑异构酶TOPO及P糖蛋白PGP耐药基因的表达及临床意义。采用即用型免疫组化微波加热法，对170例大肠癌中KI67和GSTPI、TOPO、PGP耐药基因的检测。结果1170例大肠癌中KI67和GSTPI、TOPO、PGP的阳性表达率分别为5647和6705、4411、1941。2大肠癌中KI67的阳生率与GSTPI、TOPO阳性表达呈正相关P005。结论部分大肠癌患者的体内存在多向耐药基因，或增殖活性高的大肠癌具有介导癌细胞内原发存在对GSTPI、TOPO和PGP所介导的抗癌药物的耐药基因。因此，在化疗前对大肠癌中进行KI67与耐药基因的检测，有助于预后判断与选择合理联合用药，提高疗效与存活率，延长生存期，具有临床实际意义。【关键词】大肠癌；增殖细胞核抗原；耐药基因；免疫组化【ABSTRACT】OBJECTIVETOPROBEINTOTHEEXPRESSIONANDCLINICALSIGNIFICANCEOFNUCLEUSANTIGENINPROLIFERATIONCELLKI67ANDDRUGRESISTANCEGENEASGLUTATHIONESTRANSFERASEPIGSTPI，TOPOISOMERASETOPO，PGLYCOPROTEINPGPINLARGEBOWELCARCINOMAMETHODSTOTESTANDANALYZETHEKI67ANDDRUGRESISTANCEGENEASGSTPI、TOPO，PGPIN170CASESOFLARGEBOWELCARCINOMABYINSTANTMICROWAVEHEATIMMUNOHISTOCHEMISTRYRESULTS1POSITIVEEXPRESSIONRATESOFKI67，GSTPI，TOPO，PGPIN170CASESOFLARGEBOWELCARCINOMAWERE5647，6705，4411AND1941，RESPECTIVELY2REWERESOMECORRELATIONSAMONGTHEPOSITIVEEXPRESSIONOFKI67，GSTPI，ANDTOPOINLARGEBOWELCARCINOMAP005CONCLUSIONTHEREAREPRESENCEOFMULTIDRUGRESISTANCEGENESINSOMEPATIENTSOFLARGEBOWELCARCINOMAORRESISTANCETOGSTPI，TOPO，PGPEXISTEDINTHEFASTPROLIFERATIONCANCERCELLPRIMARILYSOBEFORESTARTINGTHECHEMOTHERAPY，DETERMINATIONOFKI67ANDTHEABOVERESISTANCEGENEMAYBEHELPFULFORCLINICIANSTOSELECTARATIONALREGIMEANDDOSAGETOIMPOVETHECURATIVEEFFECTANDPROLONGTHELIFESPAN【KEYWORDS】LARGEBOWELCARCINOMA；NECLEUSANTIGENINPROLIFERATIONCELL；RESISTAMEGANE；IMMUNOHISTOCHEMISTRY大肠癌具有较高的发病率和死亡率，在上海地区的发病率呈上升趋势，我国大肠癌占恶性肿瘤中的第四或第五位1。，对大肠癌的主要是手术与化疗，临床医生多采用联合方案或凭主观判断进行用药。最近有发现，肿瘤细胞内耐药蛋白往往是导致临床化疗失败的主要原因之一2。本文研究通过检测大肠癌化疗前肿瘤细胞的增殖活性与耐药性，旨在判断预后与为防止多种耐药性的诱导方面提供一定的临床病理依据。1材料与方法11材料收集我院病理科2003年1月2004年12月外科手术切除的大肠癌标本170例，术前均未做过化疗，男83例，女87例，年龄2988岁，平均6285岁。均经HE病理诊断明确。大肠癌的分化程度高分化管状腺癌42例，中分化管状腺癌70例，低分化管状腺癌29例，粘液腺癌26例，印戒细胞癌3例。大肠癌的临床分期A期25例，B期55例，C期82例，D期8例。12方法标本石蜡连续切片4张，厚3M，分别免疫组织化学即用型二步染色。检测药盒购自上海长岛抗体诊断试剂有限公司，单克隆抗体。KI67阳性者提示肿瘤细胞的增殖活性增强，恶性程度高，预后差；GSTPI阳性者提示肿瘤细胞对GSTPI所介导的抗癌药物顺铂有耐药倾向；TOPO阳性患者提示肿瘤细胞对拓扑异构酶抑制剂有耐药倾向；多药耐药MDR基因产物P糖蛋白PGP的阳性者提示肿瘤细胞对长春新碱类和阿霉素有耐药倾向。并用胃癌肿瘤细胞对KI67与GSTPI、TOPO、PGP标记阳性表达作为阳性的对照组。13结果判断在光镜观察阳性细胞呈棕褐色细胞颗粒状。KI67定位于细胞核内图1，GSTPI定位于细胞核或细胞质内图2，TOPO定位于细胞核内图3，MDR定位于细胞质和细胞膜上图4。根据肿瘤细胞的阳性数及其染色反应的深浅进行判定，采用高倍视野随机计数500个肿瘤细胞所占的比例，定位3级，未见阳性表达或阳性细胞数5为阴性，5阳性细胞30为阳性，30阳性细胞60为中度阳性，60的为强度。14统计学处理采用卡方检验，P005有统计学意义。2结果21KI67与3种GSTPI、TOPO、PGP耐药基因在大肠癌中检测结果本组大肠癌标本中，KI67的阳性表达率为564796/170，其表达增殖状态以阳性居多；GSTPI的阳性表达率为6706114/170，以强阳性表达居多；TOPO阳性表达率为441275/170，以强阳性表达居多；但PGP的阳性表达只有194133/170，并以弱阳性居多。说明大肠癌中KI67阳性表达与GSTPI、TOPO的阳性表达呈正相关R值分别是0974，0980，P005；但KI67的阳性表达与PGP的阳性表达不相关R值为0784，P005，提示大肠癌中KI67高表达阳性率的细胞肿瘤易对GSTPI和TOPO产生耐药性。见表1。表1大肠癌中KI67和GSTPI、TOPO及PGP的阳性检测结果22KI67和GSTPI、TOPO及PGP的表达在组织学类型中关系本组大肠癌中以中高分化的管状腺癌多见。大肠癌对KI67和3种GSTPI、TOPO、PGP耐药基因均有不同程度的阳性表达，与不同组织类型大肠癌的阳性表达呈正相关R值分别为0988、0993、0984、0958，P005。见表2。表2KI67和GSTPI、TOPO、PGP表达与组织类型关系23大肠癌患者年龄构成分布与KI67和3种GSTPI、TOPO、PGP耐药表达关系本组大肠癌中8089岁12例706；以7079岁病例数最多，为58例3411；6069岁45例2647；5059岁30例1765；4049岁20例1176；2939岁5例294。报道中在我国大肠癌的发病年龄高峰期为3050岁，国外为506