内分泌与代谢病学专业优秀论文 calpain10和脂联素在脂肪及胎盘组织中的表达与妊娠糖尿病的相关研究

内分泌与代谢病学专业优秀论文CALPAIN10和脂联素在脂肪及胎盘组织中的表达与妊娠糖尿病的相关研究关键词妊娠糖尿病CALPAIN10脂联素基因表达胎盘组织基因多态性摘要胎盘作为孕期的一个特殊器官，是连接母婴的纽带，具有重要的内分泌作用，对母婴双方代谢均存在重要意义。妊娠糖尿病时胎盘中各种基因的表达水平会出现显著变化。脂联素及其受体己证实可在人胎盘组织内表达，CALPAIN10目前也已证实可在人体多种组织内表达，但这两种基因产物在妊娠糖尿病患者胎盘组织中的表达及其所作用机制尚不明确。第1章CALPAIN10基因多态性与妊娠糖尿病相关研究目的本研究拟通过对广东省汉族妊娠糖尿病孕妇进行CALPAIN10基因单核苷酸多态性（SNP43、19、63）检测，明确CALPAIN10基因单核苷酸多态性及其单倍型组合是否与广东省汉族妇女妊娠糖尿病相关联以及CALPAIN10基因单核苷酸多态性及单倍型组合是否与妊娠糖尿病临床代谢变量水平相关。方法1选取2006年9月2008年6月在广东省妇幼保健院产科门诊行常规产前检查并入院行择期剖宫产的广东籍汉族初产妇120例，其中正常孕妇（NGT）60例，妊娠糖尿病患者（GDM）60例。2收集全部受试者于孕2428周行75G葡萄糖耐量试验（OGTT）的结果，并详细询问病史记录孕前体重，测量身高，计算孕前体重指数（BMI），使用稳态模式（HOMAIR）评估胰岛素敏感性，HOMAIR空腹血糖X空腹胰岛素/225。2所有入选对象编号并于择期剖宫产术前1周内空腹10H后清晨抽静脉血23ML，贮存于20度冰箱集中待测，待产时重新测量身高、体重，计算孕晚期体重指数。采用盐析法由外周血有核细胞中提取基因组DNA。运用聚合酶链式反应（PCR）分别扩增CALPAIN10基因三个内含子内包含SNP19、SNP43、SNP63多态性的DNA片段，多态性的检测采用PCRSSP和PCRRFLP方法，各PCR产物电泳染色后经凝胶成像分析系统照像分析检测等位基因，每种带型选10个样本纯化DNA自动测序仪行核苷酸序列测定。3判读样本基因型并计算组内基因型及等位基因型频率，采用PHASEALGORITHM软件算法进行单倍型分型。应用SPSS130统计学软件，以HARDYWEINBERG平衡法检验各组基因频率的群体代表性，病例组与正常对照组之间等位基因分布差异显著性检验采用X2检验。结果1与正常对照组（NGT）相比较，GDM组患者年龄、妊娠期间体重指数变化（BMI）无差异。孕2428周空腹血糖、空腹胰岛素、HOMAIR水平GDM组显著增加（FBGT6056，P0000；FINST8555，P0000；HOMAIRT8646，P0000）。2与NGT组比较，GDM组CALPAIN10基因SNP43位点等位基因G的频率增加，分别为91、98，差异具有显著性（X24855，P0028）；GDM患者SNP43位点基因型GG、GA及AA的频率分别95、5及0，与NGT组（817、183、0）相比，GG基因型也显著升高（X25175，P0023）。3对CALPAIN10基因（SNP43、19、63）各种单倍型组合的表达率进行分析，结果发现单倍型组合为GG/DD/TT（112/112）在两组中的频率分别为17、133，与NGT组相比较，GDM组此种单倍型组合的表达率显著增加（X24324，P0037）。4与G/A基因型比较，CALPAIN10基因SNP43位点G/G基因型个体妊娠期体重指数变化（BMI）增加有显著性差异（T2793，P0006）。G/G基因型个体孕2428周空腹血糖、空腹胰岛素及HOMAIR水平与G/A基因型个体比较无显著性差异存在（FBGT1449，P0150；FINST1597，P0117；HOMAIRT1971，P0051）。5与其他单倍型组合相比较，CALPAIN10基因112/112单倍型组合个体孕2428周空腹血糖、HOMAIR水平及妊娠期体重指数变化上升，差异具有显著性（FBGT2523，P0013；HOMAIRT2189，P0031；BMIT2153，P0033）。空腹胰岛素水平在两组间无显著性差异存在（T1518，P0132）。结论1CALPAIN10基因SNP43位点G等位基因及GG基因型与广东地区汉族人群妊娠糖尿病遗传易感性相关。2CALPAIN10基因单倍型组合为112/112（SNP43、19、63）的广东地区汉族孕妇有较高的妊娠糖尿病罹患率。3CALPAIN10基因SNP43位点G/G基因型及112/112单倍型组合个体孕期体重指数变化明显增加。112/112单倍型组合个体胰岛素抵抗明显增加。第2章脂肪和胎盘组织CALPAIN10基因表达与基因型的相关研究目的本研究拟通过对广东省汉族妊娠糖尿病孕妇进行脂肪、胎盘组织CALPAIN10基因产物表达，明确脂肪及胎盘组织中CALPAIN10基因产物的表达是否与CALPAIN10基因单核苷酸多态性及各种单倍型组合相关。方法1选取2006年9月2008年6月在广东省妇幼保健院产科入院行剖宫产的广东籍汉族初产妇120例，其中正常葡萄糖耐量孕妇（NGT）60例；妊娠糖尿病患者（GDM）60例。经基因分型后（见第一部分结果）CALPAIN10基因SNP43G/G基因型个体106例；G/A基因型个体14例。CALPAIN10基因112/112单倍型组合（SNP43、19、63）个体9例；其他单倍型组合个体111例。2所有孕妇于剖宫产术中及分娩后半小时内分别取皮下脂肪和胎盘中央母体面组织各一块，直径分别约为03CM和1CM，避开钙化灶，放入经焦碳酸二乙酯（DEPC）处理的EP管中，置于液氮中。组织总RNA的提取应用TRIZOL二步法，脂肪、胎盘组织中CALPAIN10CDNA的特异性扩增与定量分析应用半定量逆转录聚合酶链反应（RTPCR）技术。UVP凝胶图像扫描系统对扩增产物的电泳条带进行扫描，计算吸光度（A），将ACALPAIN10和AACTIN的比值进行分析处理。3所有数据用均数标准差表示。两样本均数之间的比较选择T检验；实验结果采用SPSS130统计软件进行统计学分析。PLT005认为有统计学意义。结论1CALPAIN10基因SNP43位点G/G基因型个体脂肪组织CALPAIN10MRNA的表达水平显著下降，胎盘组织的表达则无差异性。2CALPAIN10基因112/112单倍型组合个体脂肪、胎盘组织中CALPAIN10MRNA的表达水平均明显下降。第3章脂肪和胎盘组织脂联素基因表达与CALPAIN10基因型的相目的本研究拟菜方法1研究对象同第二部分。2所有孕妇于剖宫产术中及分娩后半小时内分别取皮下脂肪和胎盘中央母体面组织各一块，直径分别约为03CM和1CM，避开钙化灶，放入经焦碳酸二乙酯（DEPC）处理的EP管中，置于液氮中。组织总RNA的提取应用TRIZOL二步法，脂肪、胎盘组织中脂联素CDNA的特异性扩增与定量分析应用半定量逆转录聚合酶链反应（RTPCR）技术。UVP凝胶图像扫描系统对扩增产物的电泳条带进行扫描，计算吸光度（A），将AADIPONECTIN和AACTIN的比值进行分析处理。3所有数据用均数标准差表示。两样本均数之间的比较选择T检验；两计量观察指标之间的关系用直线相关分析。实验结果采用SPSS130统计软件进行统计学分析。PLT005认为有统计学意义。结论1CALPAIN10基因SNP43位点G/G基因型个体脂肪组织脂联素MRNA的表达水平下降，胎盘组织的表达则无差异性。2CALPAIN10基因112/112单倍型组合个体脂肪、胎盘组织中脂联素MRNA的表达水平均明显下降。第4章脂肪和胎盘组织CALPAIN10、脂联素基因表达与妊娠糖尿病胰岛素抵抗的相关研究目的本研究拟通过对广东省汉族妊娠糖尿病孕妇进行脂肪、胎盘组织CALPAIN10、脂联素基因产物表达，明确脂肪及胎盘组织中CALPAIN10、脂联素基因产物的表达是否与妊娠糖尿病发病相关及与胰岛素抵抗的相关性。方法同第二、三章。结论1妊娠糖尿病患者脂肪组织CALPAIN10、脂联素MRNA的表达显著降低，胎盘组织的表达则无差异性。2CALPAIN10MRNA的表达与脂联素MRNA的表达显著正相关。脂肪组织脂联素及CALPAIN10基因MRNA与妊娠糖尿病胰岛素抵抗密切相关。正文内容胎盘作为孕期的一个特殊器官，是连接母婴的纽带，具有重要的内分泌作用，对母婴双方代谢均存在重要意义。妊娠糖尿病时胎盘中各种基因的表达水平会出现显著变化。脂联素及其受体己证实可在人胎盘组织内表达，CALPAIN10目前也已证实可在人体多种组织内表达，但这两种基因产物在妊娠糖尿病患者胎盘组织中的表达及其所作用机制尚不明确。第1章CALPAIN10基因多态性与妊娠糖尿病相关研究目的本研究拟通过对广东省汉族妊娠糖尿病孕妇进行CALPAIN10基因单核苷酸多态性（SNP43、19、63）检测，明确CALPAIN10基因单核苷酸多态性及其单倍型组合是否与广东省汉族妇女妊娠糖尿病相关联以及CALPAIN10基因单核苷酸多态性及单倍型组合是否与妊娠糖尿病临床代谢变量水平相关。方法1选取2006年9月2008年6月在广东省妇幼保健院产科门诊行常规产前检查并入院行择期剖宫产的广东籍汉族初产妇120例，其中正常孕妇（NGT）60例，妊娠糖尿病患者（GDM）60例。2收集全部受试者于孕2428周行75G葡萄糖耐量试验（OGTT）的结果，并详细询问病史记录孕前体重，测量身高，计算孕前体重指数（BMI），使用稳态模式（HOMAIR）评估胰岛素敏感性，HOMAIR空腹血糖X空腹胰岛素/225。2所有入选对象编号并于择期剖宫产术前1周内空腹10H后清晨抽静脉血23ML，贮存于20度冰箱集中待测，待产时重新测量身高、体重，计算孕晚期体重指数。采用盐析法由外周血有核细胞中提取基因组DNA。运用聚合酶链式反应（PCR）分别扩增CALPAIN10基因三个内含子内包含SNP19、SNP43、SNP63多态性的DNA片段，多态性的检测采用PCRSSP和PCRRFLP方法，各PCR产物电泳染色后经凝胶成像分析系统照像分析检测等位基因，每种带型选10个样本纯化DNA自动测序仪行核苷酸序列测定。3判读样本基因型并计算组内基因型及等位基因型频率，采用PHASEALGORITHM软件算法进行单倍型分型。应用SPSS130统计学软件，以HARDYWEINBERG平衡法检验各组基因频率的群体代表性，病例组与正常对照组之间等位基因分布差异显著性检验采用X2检验。结果1与正常对照组（NGT）相比较，GDM组患者年龄、妊娠期间体重指数变化（BMI）无差异。孕2428周空腹血糖、空腹胰岛素、HOMAIR水平GDM组显著增加（FBGT6056，P0000；FINST8555，P0000；HOMAIRT8646，P0000）。2与NGT组比较，GDM组CALPAIN10基因SNP43位点等位基因G的频率增加，分别为91、98，差异具有显著性（X24855，P0028）；GDM患者SNP43位点基因型GG、GA及AA的频率分别95、5及0，与NGT组（817、183、0）相比，GG基因型也显著升高（X25175，P0023）。3对CALPAIN10基因（SNP43、19、63）各种单倍型组合的表达率进行分析，结果发现单倍型组合为GG/DD/TT（112/112）在两组中的频率分别为17、133，与NGT组相比较，GDM组此种单倍型组合的表达率显著增加（X24324，P0037）。4与G/A基因型比较，CALPAIN10基因SNP43位点G/G基因型个体妊娠期体重指数变化（BMI）增加有显著性差异（T2793，P0006）。G/G基因型个体孕2428周空腹血糖、空腹胰岛素及HOMAIR水平与G/A基因型个体比较无显著性差异存在（FBGT1449，P0150；FINST1597，P0117；HOMAIRT1971，P0051）。5与其他单倍型组合相比较，CALPAIN10基因112/112单倍型组合个体孕2428周空腹血糖、HOMAIR水平及妊娠期体重指数变化上升，差异具有显著性（FBGT2523，P0013；HOMAIRT2189，P0031；BMIT2153，P0033）。空腹胰岛素水平在两组间无显著性差异存在（T1518，P0132）。结论1CALPAIN10基因SNP43位点G等位基因及GG基因型与广东地区汉族人群妊娠糖尿病遗传易感性相关。2CALPAIN10基因单倍型组合为112/112（SNP43、19、63）的广东地区汉族孕妇有较高的妊娠糖尿病罹患率。3CALPAIN10基因SNP43位点G/G基因型及112/112单倍型组合个体孕期体重指数变化明显增加。112/112单倍型组合个体胰岛素抵抗明显增加。第2章脂肪和胎盘组织CALPAIN10基因表达与基因型的相关研究目的本研究拟通过对广东省汉族妊娠糖尿病孕妇进行脂肪、胎盘组织CALPAIN10基因产物表达，明确脂肪及胎盘组织中CALPAIN10基因产物的表达是否与CALPAIN10基因单核苷酸多态性及各种单倍型组合相关。方法1选取2006年9月2008年6月在广东省妇幼保健院产科入院行剖宫产的广东籍汉族初产妇120例，其中正常葡萄糖耐量孕妇（NGT）60例；妊娠糖尿病患者（GDM）60例。经基因分型后（见第一部分结果）CALPAIN10基因SNP43G/G基因型个体106例；G/A基因型个体14例。CALPAIN10基因112/112单倍型组合（SNP43、19、63）个体9例；其他单倍型组合个体111例。2所有孕妇于剖宫产术中及分娩后半小时内分别取皮下脂肪和胎盘中央母体面组织各一块，直径分别约为03CM和1CM，避开钙化灶，放入经焦碳酸二乙酯（DEPC）处理的EP管中，置于液氮中。组织总RNA的提取应用TRIZOL二步法，脂肪、胎盘组织中CALPAIN10CDNA的特异性扩增与定量分析应用半定量逆转录聚合酶链反应（RTPCR）技术。UVP凝胶图像扫描系统对扩增产物的电泳条带进行扫描，计算吸光度（A），将ACALPAIN10和AACTIN的比值进行分析处理。3所有数据用均数标准差表示。两样本均数之间的比较选择T检验；实验结果采用SPSS130统计软件进行统计学分析。PLT005认为有统计学意义。结论1CALPAIN10基因SNP43位点G/G基因型个体脂肪组织CALPAIN10MRNA的表达水平显著下降，胎盘组织的表达则无差异性。2CALPAIN10基因112/112单倍型组合个体脂肪、胎盘组织中CALPAIN10MRNA的表达水平均明显下降。第3章脂肪和胎盘组织脂联素基因表达与CALPAIN10基因型的相目的本研究拟菜方法1研究对象同第二部分。2所有孕妇于剖宫产术中及分娩后半小时内分别取皮下脂肪和胎盘中央母体面组织各一块，直径分别约为03CM和1CM，避开钙化灶，放入经焦碳酸二乙酯（DEPC）处理的EP管中，置于液氮中。组织总RNA的提取应用TRIZOL二步法，脂肪、胎盘组织中脂联素CDNA的特异性扩增与定量分析应用半定量逆转录聚合酶链反应（RTPCR）技术。UVP凝胶图像扫描系统对扩增产物的电泳条带进行扫描，计算吸光度（A），将AADIPONECTIN和AACTIN的比值进行分析处理。3所有数据用均数标准差表示。两样本均数之间的比较选择T检验；两计量观察指标之间的关系用直线相关分析。实验结果采用SPSS130统计软件进行统计学分析。PLT005认为有统计学意义。结论1CALPAIN10基因SNP43位点G/G基因型个体脂肪组织脂联素MRNA的表达水平下降，胎盘组织的表达则无差异性。2CALPAIN10基因112/112单倍型组合个体脂肪、胎盘组织中脂联素MRNA的表达水平均明显下降。第4章脂肪和胎盘组织CALPAIN10、脂联素基因表达与妊娠糖尿病胰岛素抵抗的相关研究目的本研究拟通过对广东省汉族妊娠糖尿病孕妇进行脂肪、胎盘组织CALPAIN10、脂联素基因产物表达，明确脂肪及胎盘组织中CALPAIN10、脂联素基因产物的表达是否与妊娠糖尿病发病相关及与胰岛素抵抗的相关性。方法同第二、三章。结论1妊娠糖尿病患者脂肪组织CALPAIN10、脂联素MRNA的表达显著降低，胎盘组织的表达则无差异性。2CALPAIN10MRNA的表达与脂联素MRNA的表达显著正相关。脂肪组织脂联素及CALPAIN10基因MRNA与妊娠糖尿病胰岛素抵抗密切相关。胎盘作为孕期的一个特殊器官，是连接母婴的纽带，具有重要的内分泌作用，对母婴双方代谢均存在重要意义。妊娠糖尿病时胎盘中各种基因的表达水平会出现显著变化。脂联素及其受体己证实可在人胎盘组织内表达，CALPAIN10目前也已证实可在人体多种组织内表达，但这两种基因产物在妊娠糖尿病患者胎盘组织中的表达及其所作用机制尚不明确。第1章CALPAIN10基因多态性与妊娠糖尿病相关研究目的本研究拟通过对广东省汉族妊娠糖尿病孕妇进行CALPAIN10基因单核苷酸多态性（SNP43、19、63）检测，明确CALPAIN10基因单核苷酸多态性及其单倍型组合是否与广东省汉族妇女妊娠糖尿病相关联以及CALPAIN10基因单核苷酸多态性及单倍型组合是否与妊娠糖尿病临床代谢变量水平相关。方法1选取2006年9月2008年6月在广东省妇幼保健院产科门诊行常规产前检查并入院行择期剖宫产的广东籍汉族初产妇120例，其中正常孕妇（NGT）60例，妊娠糖尿病患者（GDM）60例。2收集全部受试者于孕2428周行75G葡萄糖耐量试验（OGTT）的结果，并详细询问病史记录孕前体重，测量身高，计算孕前体重指数（BMI），使用稳态模式（HOMAIR）评估胰岛素敏感性，HOMAIR空腹血糖X空腹胰岛素/225。2所有入选对象编号并于择期剖宫产术前