检验科免疫室作业指导文件

免疫室作业指导书编号第一版编制审核批准生效日期XX市第一医院检验科门诊室工作守则4门诊室消毒隔离措施5门诊室实验室安全与防护6门诊室内质控制度7门诊室的医院感染管理8门诊室工作流程9门诊室仪器维护保养及质控措施10门诊室复检规则11实验室各种传染病职业暴露后应急预案12标本采集及保存要求13爱德康全自动酶免疫仪标准操作规程14欧蒙全自动印迹仪操作规程16LICA500标准操作规程17荧光显微镜标准操作规程18特定蛋白分析仪标准操作规程19抗核抗体标准操作规程24抗双链DNA抗体标准操作规程28抗核抗体谱标准操作规程30抗中性粒细胞胞浆抗体标准操作规程32抗MPO,PR3，GBM抗体标准操作规程35自身抗体标准操作规程38乙肝病毒表面抗原标准操作规程42乙肝病毒表面抗体标准操作规程46乙肝病毒E抗原标准操作规程49乙肝病毒E抗体标准操作规程52乙肝病毒C抗体标准操作规程55TP抗体标准操作规程57HCV抗体标准操作规程60HIV抗体标准操作规程64ASO标准操作规68RF标准操作规程73CRP标准操作规程78免疫球蛋白的标准操作规程83补体C3的标准操作规程98补体C4的标准操作规程103过敏原标准操作规程108甲型肝炎病毒IGM抗体112丁型肝炎病毒抗体113戊型肝炎病毒IGM抗体117庚型肝炎病毒抗体120梅毒螺旋体诊断试验（凝集法）TPPA标准操作规程123甲苯胺红不加热血清反应实验TRUST标准操作规程128抗环瓜氨酸肽抗体检测（胶体金法）标准操作规程129梅毒螺旋体抗体标准操作规程（胶体金法）131人免疫缺陷病毒HIV12抗体标准操作规程（胶体金法）标准操作规程133呼吸道病原体谱IGM抗体检测标准操作规程（间接免疫荧光法）135过敏原检测140门诊室工作守则1入室前应穿工作服，并做好实验前的各项准备工作。2实验室内应保持肃静，不准吸烟、吃东西及用手触摸面部，无关人员禁入。4非必要物品禁止带入实验室，必要资料和书籍带入后，应远离操作台。5做好标本的登记、编号及试验记录，危急值及时登记并报告。未发出报告前，请勿丢弃标本。血液标本冰箱保存一周。6实验时手部污染，应立即用过氧乙酸消毒或浸于3来苏儿溶液中510分，再用肥皂洗手并冲洗干净；如误入口内，应立即吐出，并用11000高锰酸钾溶液或3双氧水漱口，根据实际情况服用有关药物。8实验过程中，如污染了实验台或地面，应用3来苏儿覆盖其上半小时，然后清洗；如污染工作服，应立即脱下，高压灭菌。9若出现着火情况，应沉着处理，切勿慌张，立即关闭电闸，积极灭火。易燃物品（如酒精、二甲苯、乙醚和丙酮等）必须远离火源，妥善保存。10工作结束时检查电器、门窗，水管等是否关闭，记录冰箱温度及室内温、湿度，用浸有消毒液的抹布将操作台擦拭干净，用浸有消毒液的墩布擦拭地面。并将试剂、用具等放回原处，生活垃圾与医疗垃圾分开，。每日用紫外线灯消毒两小时。11离室前工作人员应将双手用消毒液消毒，并用肥皂和清水洗净。12爱护仪器设备，经常清洁，注意防尘和防潮。门诊室消毒措施1每天工作结束后用消毒液对桌面和地面进行消毒。中午12点至2点开紫外灯两小时进行空气消毒。2非必要品禁止带入实验室，必要资料和书籍带入后，应远离操作台。3不慎发生标本污染工作台，不要立即用水冲洗，应先用纸巾、布等敷料加上消毒液消毒30分钟以上，然后再清洗。如污染工作服，应立即脱下，用消毒液浸泡消毒后再进行洗涤。4实验时手部污染，应立即用肥皂洗手并冲洗干净，再外用消毒药水，如误入眼中，应及时用洗眼器冲洗，如误入口内，应立即吐出，并用11000高锰酸钾溶液或3双氧水漱口，必要时根据实际情况服用有关药物。门诊实验室安全与防护1在工作区内禁止饮食，吸烟和存放食物及使用化妆品。2实验室里应保持整洁，不存放与工作无关的杂物。3工作台每天至少用消毒剂清洁一次，在溢渗传染物后要立即消毒、清洗；4进入工作区必须穿工作服，戴口罩、帽子。5实验工作区禁止无关人员出入，尤其要严禁儿童进入。6工作人员在处理传染性物质之后，以及在离开实验室时要洗手。7凡发生溢漏事故或接触传染性物质后，均应立即报告实验室监督员或实验室主任，并做好书面记录及采取相应措施。9工作人员在进入实验室工作区前，应在专用的更衣室（或缓冲间）穿着工作服或其它防护服。工作完毕后必须脱下工作服，不得穿工作服离开实验室。可再次使用的工作服必须先消毒后清洗。10工作时必须戴手套（两副为宜）。一次性手套必须先消毒后丢弃。11在实验室中必须配备有效的消毒剂、眼部清洗剂或生理盐水，且易于取用。可配备应急药品。门诊室内质控制度1每位工作人员必须加强质控意识，以质量控制工作为核心，认真做好各项质控试验和记录。2加强质量控制和专业理论知识的学习，规范操作，正确分析处理结果。3一旦发现失控，及时采取相应措施，纠正失控结果，并做好记录4质控的规则采取12S22S,13S41S5质控品应选择有批准文号的厂家，尽量选择第三方的质控品。6定性的项目只做一个水平的质控，定量项目应选择高低两个水平的质控品。7认真讨论、分析每次参加卫生部室间质评结果。总结经验教训。门诊实验室的医院感染管理检验科医院感染管理应达到以下要求1工作人员必须穿工作服,戴工作帽,必要时穿隔离衣，胶鞋，戴口罩,手套。2使用合格的一次性检验用品,用后进行无害化处理。3严格执行无菌技术操作规程,静脉采血必须一人一针一管一巾一带微量采血应做到一人一针一管一片对每位病人操作前洗手或手消毒。4无菌物品如棉签,棉球,纱布等及其容器应在有效期内使用,开启后使用时间不得超过24小时使用后的废弃物品,应及时进行无害化处理,不得随意丢弃。5各种废弃标本应分类处理焚烧,入污水池,消毒或灭菌。6报告单应消毒后发放。7检验人员结束操作后应及时洗手,毛巾专用,每天消毒。8保持室内清洁卫生每天对空气,各种物表及地面进行常规消毒在进行各种检验时,应避免污染在进行特殊传染病检验后,应及时进行消毒,遇有场地,工作服或体表污染时应及时处理,防止扩散,并视污染情况向上级报告。9当工作环境被病人血清污染，必须立即消毒处理，报告主管人员，采取必要措施。10工作人员发生职业暴露后应消毒处理，必要时给予药物治疗，并向主管负责人报告，采取特殊措施。门诊室工作流程1穿白衣、戴口罩、戴手套。2试剂平衡将阴阳对照、室内质控从冰箱取出平衡30分钟。打开各个仪器打开主机。查看仪器的状态。3编号31当日上机标本都从1号开始，收到新标本后依次顺延往后排序。32编号时应核对病人条码信息是否一致，并告知门诊患者取结果的时间和地点33将平衡好的阴阳对照及质控添加到仪器程序中，编程后开始执行。3、此时打开录入电脑查看是否有遗留问题，实验结果应按照复检规则进行复检，复检后及时登记并通知门诊医生。4、三大常规的结果都是半小时出，阴道五联和血型，血沉都是1小时出，如遇病人高峰期出现拥堵，结果可能会延时，告知患者耐心等待，结果一出及时审核即刻上传并在自主打印机上自行刷卡取结果。5、需要复检的标本，及时联系患者并进行沟通，同时告知后续处理方案。6、收到检验单上盖有绿色通道章的标本，应第一时间进行处理并上传结果。7将已做的血标本收集整理放置冰箱冷藏7天后遗弃。尿和大便标本在上传结果后及时丢弃至医疗垃圾箱。门诊室复检规则由于现在工作量及血液参数的原因，目前各医院在血液常规检测方面都是采用自动化血液分析仪首先进行血常规自动检测，但设备检验在血细胞计数方面具有绝对优势，但在形态学方面就比人工识别略逊一筹了。现在各医院都是先用自动化的仪器筛检，然后对筛检出的少量有疑问（根据工作经验及参照上级医院的标准）的部分再进行人工镜检，以防止血液病等有问题的患者漏检，故我们根据我院的实际情况，制定自己的复检规则。1HGB200G/L或300109/L或1000/L或20涂片镜检。6LYM60的初检患者（成人），儿童70涂片镜检。7EO20涂片镜检。8BA5涂片镜检。以上9条为初次出现时镜检，对于上次镜检过的没有问题的，不再镜检。门诊室仪器维护保养及质控措施我室主要仪器为UNICELDXH800贝克曼血球分析仪和UNICELDXHSLIDEMAKERSTAINER制片染片机，PENTREMSCRP，LTS400阴道炎检测仪，ICHEMVELOCITY和IQ200SPRINT尿液分析仪，LTSE100大便分析仪。为了使仪器能够高质量的运行，使仪器报告的结果准确可靠，特制定以下仪器维护、保养和质控措施。1每天上班开始工作前和下班离开前要检查仪器的工作状态是否正常。2每天用中性的清洁液将仪器表面擦拭干净。3每天先做质控。4仪器每一个月做一次彻底的清洁保养，包括清洁外壳、瓶孔、滤网等5仪器每年请工程师做一次检定工作。实验室各种传染病职业暴露后应急预案为做好实验室工作人员职业暴露的预防与处理工作，降低职业暴露感染各种传染病的风险，保障科室工作人员的职业安全，有效预防职业暴露，以及卫生部医务人员艾滋病病毒职业暴露防护工作指导原则（试行）、实验室生物俺去管理条例等有关文件的规定，结合科室实际情况，制定实验室的各种传染病职业暴露后应急预案。本预案适用于医院实验室工作人员在各种传染病诊疗过程中发生的一切意外情况。医院常见的传染病包括乙型肝炎病毒（HBV）、丙型肝炎病毒（HCV）、艾滋病病毒（AIDS）、梅毒等。一、职业暴露是指工作人员在医院工作中意外被可疑传染病病人的血液、体液污染了皮肤或粘膜，或者被含有病人血液、体液污染了的锐器（载玻片等）刺破皮肤，有可能被感染的情况。二、工作原则预防为主、常备不懈、制度规范、管理到位、反应迅速、积极处理、措施果断、遏制危害。三、发生各种传染病职业暴露后的应急措施1发生各种传染病的血液、体液等溅洒于皮肤、粘膜表面应立即先用肥皂盒流动的水或生理盐水冲洗。2含有各种传染病的血液、体液等溅入口腔、眼睛等部位，立即用清水或生理盐水长时间彻底冲洗。3含有各种传染病的血液、体液的针头或玻璃刺伤皮肤时，立即在伤口旁近心端轻轻挤压，尽可能挤出损伤部位的血液，禁止进行伤口的局部挤压，然后用流动水或生理盐水彻底冲洗，再用05碘伏消毒创面。4及时网上填写职业暴露卡上报医院感染管理科，医院感染管理科核实情况并记录在案；同时将填写的职业暴露卡打印，由实验室主任签字，送达防保科，由防保科进行随访记录。5被含有各种传染病标本污染的工作服、衣物时，立即用1000MG/L含氯消毒液，浸泡3060分钟，然后冲洗干净。艾德康400全自动酶联免疫分析系统操作规程1添加一次性吸头，检查废液桶，废针桶，配制实验洗液。2启动电脑、打开设备电源开关，平衡稳定5分钟。开始实验21双击桌面“ADCSTATION”开启控制软件。22用户登录选择用户名输入密码“登录”23“开关机维护”相应位置放好微板“维护开始”维护完成后查看微板剩余量，（正常半孔水，少表示相应短针堵孔，多表示相应长针堵孔。）点“退出”关闭对话框24点击“开始试验”“添加新批次”25点中起始位置输入标本号回车自增，或右下角输入标本数量“”点回车自动生成标本号。注如果是扫条码“回车自增”反选注意标本号”处输入的标本号不能重复，一个标本号可以同时加载多个实验方法。26如果所有标本项目一样直接选择实验项目点击“确定”如果有特殊项目标本，点击“特殊标本”。输入按项目分类好的标本编号（建议按标本号顺序输入不容易出错丢标本项目等如下图）选定项目点击对应标本号前空白区域，“确定”27根据显示添加试剂、质控、血清、反应板等（右击可以查看相应位置详细信息）“调度运行图”28运行时序图界面点击“开始执行”，弹出“TIP头起始装载位置”界面（默认为第一盒第一个），点击“确定”开始实验注意实验前请确认加入足够的试剂，运行过程中，禁止添加标本、试剂等，以免发生危险确认可移动部件推置到位，微板条孔按压平整3实验结束后可在实验结果里边查看实验结果31查看实验结果点击左侧“实验结果”进入微板结果界面32查看结果双击实验项目（或选中后点查看）打开该项目结果33修改结果点击要修改的标本号弹出对话框可修改结果，（登录人跟操作人不同时不可修改）“确认”“锁定结果”实验结束后重复23操作步骤，冲洗洗板头4直接读数点击软件左侧“直接读数”弹出直接读数对话框打开电源“开”选择方法名称选择滤光片输入标本号（只输标本号阴阳对照质控等不用输入）“开始”完成（方法名称处空白，拿出微板关闭退出）艾德康400全自动酶联免疫分析系统操作规程常见报错处理以下报警“失电后全部初始化”“INITX（Y）”绝对不允许点1装针时报警装针失败装针失败，是否重试是原位置装针（确认该位置有TIP头）否忽略装针（手动安装后或确认已装有TIP头）2探测失效是会脱掉TIP头，重新装载，重新探测液面。否出错的通道就会在原位吸液。（这样通道里就没有液体请慎重）3、空管检测加样本，质控，试剂时没有液体重试添加液体后，点“重试”继续加样。忽略忽略添加该液体。终止终止整批次试验。4、吸试剂、质控时，探测到液体，试剂量不够是添加相应液体后点“是”。脱针重新装针重新探测吸液5、加血清时有纤维蛋白或凝块堵针吸液错误，请手动更换吸头，然后点确定。重新探测液面高度改变，手动更换吸头，再弹出该对话框后点“是”是液面高度没有发生变化，手工更换吸头后。否脱掉所有吸头，重新装针探测加样（推荐）（最新版本是重新更换吸头吸液。否忽略当前标本继续加样。）点“否”后报警通道会出现以下分液错误报警“忽略”即可6实验过程中洗板时洗液不足是注意泄压（拔开泄压管路）添加对应桶内洗液接好管路等5秒以上点“是”7、开始探测位置到探测到液面的距离小于10MM重试重新探测液面。忽略在原位置吸液，有可能吸不到液体。如果连续出现，说明通道中有堵塞的情况，请及时处理。用捅针工具疏通钢针下面的小孔及时联系工程师8、试剂仓吸液时，通道探测到液面差距大于10MM是将重新上针重试否则到达最低的通道位置吸液。如果连续出现，说明通道中有堵塞的情况，请及时处理。用捅针工具疏通钢针下面的小孔联系工程师9、脱针失败是如果通道还有针点“是”否如果通道没针，查看检测片是否在下端。（联系工程师）10、仪器运行过程中意外掉针解决方法确认是否确实掉针手动装针后点击“是”。如手工安装确认后有下图提示点击“是”忽略如连续出现，请及时联系工程师检查拾真检测出现故障或吸头问题11、抓板失败是再执行一次该位置的抓板动作。（请确认没有抓起微板，否则会扔掉微板再抓。）否忽略此次抓板，继续执行下一步。（确定抓起微板，或手工转移微板。）12、CAN打开失败检查仪器是否正常上电。拔下CAN卡U口重新插好。检查黄色CAN卡灯显示（绿灯显示正常。红灯显示不正常。）重新安装驱动。（驱动位置右击图标，属性，查找目标）以上操作无效联系工程师。13吸头点数不足出现该报警提示吸头点数不足，点“是”后还可以继续试验请及时补充吸头点数，否则报警如下图出现该报警必须添加吸头点数后才可以试验步骤如下跟工程师联系要吸头点数条码号。系统管理里边“试剂点卡管理”扫描条码中输入工程师给的条码号点击“添加”14、系统找不到指定路径是电子格式设置路径输入错误（或路径文件夹被删除）重新选择15、发送数据库0击桌面图标点击“属性”点击“打开文件位置”查找“”文件夹右击添加到压缩文件，将压缩文件发送给工程师提供的邮箱EUROBLOTMASTERII全自动免疫印迹仪1开启设备开启设备（电源开关位于设备的左后方），显示屏显示主界面。用ENTER确认。2选择检测程序更多检测程序的信息见54章节，用或翻页用UP或DOWN选择程序，用ENTER确认。3输入起始膜条序号输入实验开始膜条的序号，用或选择起始位置，用ENTER确认。4输入膜条数请输入需温育的膜条数量，用或输入膜条数，长按或输入步进为3，用ENTER确认。说明膜条数可循环增减，如当达到最大值50时，继续按，膜条数会变为1。5选择灌注方式用YES/选择自动灌注，用NO/选择手动灌注。6自动灌注界面显示实验所用液体通道、试剂名称和所需量的信息提示，请按提示准备试剂。用ENTER确认准备完毕，程序会自动灌注AF泵。7手动灌注按灌注液体到导管，按延迟此通道导管灌注，当实验过程中第一次用到此通道时，会提示用，进行灌注。通常利用这项功能添加底物液。用UP或DOWN选择灌注管路，用ENTER确认，表示所有泵灌注完毕。建议多配置4ML试剂用于补偿容器死体积和管道的冲洗。8确认废液瓶灌注每个通道后，显示屏显示废液瓶是否为空用YES/确认。9开始检测用YES/确认，EUROBLOTMASTERII开始进行一次检测。10插入膜条出现提示（通过文字和声音）后，将膜条放置于温育槽内。用YES/确认。通过适度按压膜条有粘性的一端，将膜条固定在温育槽的底部。显示屏中显示当前运行检测的步骤“单步”代表“当前步骤剩余时间”，“总共”代表“检测剩余时间”。数字和字母小时和分钟给出完成检步骤或检测大致所需的时间HHMM。经过几个中间步骤11加样出现提示（通过文字和声音）后，将未经稀释样本加到温育槽中。添加未经稀释的样本。用YES/确认以上步骤结束后，请确认是否进行最终吸液步骤。12吸液如果在流程设置中预置自动吸液为有效，则程序到此步骤自动吸液，不再提示用户，如果在流程设置中预置自动吸液为无效，则按以下步骤操作用YES/选择吸液，用NO/选择不吸液，直接进入维护清洗程序，用ESC选择退回主界面。说明预置方法见配置模块功能描述13回收试剂如果在流程设置中预置试剂回收有效，则吸液完成后，会自动进行AF通道的试剂回收。如果在流程设置中预置试剂回收无效，则吸液完成后，不会进行试剂回收。说明预置方法见配置模块功能描述14实验结束用YES/选择灌注清洗，用NO/选择不灌注清洗，返回主界面。15清洗用YES/选择清洗管路，用NO/选择不清洗管路，直接返回主界面。16抽空管路用YES/选择排空管路，用NO/选择不放弃当前操作，退回主界面LICA500标准操作规程1操作前处理在仪器启动之前，进行系统的全面检查是非常重要的。11LICA500免疫分析系统单元12开启仪器左侧黑色电源开关,待风扇转动稳定,控制单元开启打印机,开启显示屏,开启计算机2开机21点击仪器右侧“黄色”按钮，待仪器复位正常打开LICA500联机软件，输入用户名和密码，进入软件系统（默认用户名，密码KMRD）3、开机后准备工作31耗品准备添加一次性枪头到枪头架，添加8孔反应杯到反应堆栈，添加清洗液，添加通用液，批量输入32点击批量输入起始管架号起始编号样本数量点击确定选择“全选”添加项目选择所要的项目确定33单击界面“试管架”，单击加载管架，“输入管架号”在仪器样本区插入试管架。34切换至工作列表界面，核对样本信息无误，点击“启动”试剂加载35进入试剂界面加载试剂出现加载试剂对话框按位扫描试剂，条码把扫描好的试剂插入试剂区。36定标操作点击“添加样品”选择“单个添加”输入管架号格式1,1输入“样本号或扫校准号条码”回车确定单击界面“试管架”，单击加载管架，“输入管架号”进入试剂界面选择试剂“定标”，根据说明书在“输入浓度框”中输入项目浓度点点击开始定标。切换至工作列表界面，核对样本信息无误，点击“启动”4、每日结束后保养在常规工作结束后，确保运行每日保养是非常重要的。每日保养包括41清洁LICA500仪器板面42清理LICA500废枪头抽屉43倾倒LICA500废液槽废液44取出LICA500试剂仓中的试剂，盖上试剂盖放入28冰箱45对LICA500进行复位操作5系统关机当常规标本运行完毕，并且所需要的每日保养程序完成，系统可以关闭了。LICA500关机操作长按仪器右侧”黄色“开关电源按钮，待仪器发出“滴”一声后，关机操作完成。ICA500仪器背左面的总开关即可。（建议LICA500在每天都需要进行实验的情况下，总开关保持不关机）荧光显微镜操作规程使用前先检查汞灯的已运行时间，然后开启汞灯电源。1标本的放置（1）把ND挡板向左拔出，停于挡板位置，阻断荧光。（2）拉出左右两侧的滤光片转换杆（能让可见光通过）（3）打开显微镜的光源（不要开太亮），把玻片放置于载物台，所要观察的标本置于视野中心。2根据所需的激发波长推进左右两侧的滤光片杆，停于适当位置。3标本对焦（1）关闭显微镜的光源。（2）把ND滤片向右侧推进，停于最左边的空孔位置。（3）把视场光栅控制杆置于“0”（打开）位置。（4）标本对焦。4调节视场光栅（1）将视场光栅控制杆置于“C”（关闭）位置。（2）调节视场光栅对中螺旋，使视场光栅的向在视场中居中。、（3）逐渐开大视场光栅，并调节对中螺旋使视场光栅像的八边与视场边缘内接。注意事项1应一次把全部玻片观察完毕，勿中途切断电源，否则需待冷却后（约30分钟后）在打开电源。至少开机30分钟才可关机，以免缩短灯泡寿命。2荧光色素于普通光线照射下易消失，故未观察的标本宜置不透光盒内储存于冰箱（45）。而在荧光显微镜之紫外线照射下亦易使荧光消失，故照射宜速。3每周至少将荧光显微镜开机一次，以免显微镜发霉损及镜头及滤光镜。BECKMANCOULTERIMMAGE800特定蛋白分析仪标准操作文件1目的规范IMMAGE800的操作程序，确保临床特定蛋白检验结果准确2适用范围适用于标本的临床特定蛋白测定3方法原理速率散射法此时90散射信号会相应增强。速率透射法在0的光强度会减弱。这一减弱会转变为增强的光信号光信号LOG10光强度系统监控装置每5秒钟监测一次散射光信号。在反应结束时，仪器会自动计算光信号变化的速率。4检测项目请参考检测项目SOP5运行条件51运行环境为保证仪器的正常运行，仪器必须在满足下列条件和维持相应环境的情况下使用5灰尘少、换气良好的环境。5避免阳光直接照射。5仪器仅供室内使用，环境温度为18至32，湿度为2085，海拔最高为1280米。5仪器的工作电源为220VAC、50/60HZ。有保护性接地。5仪器附近没有发射高频的机械（离心机、放电装置等）52安全条款521在使用对人体有危险或发生感染的样品时，请使用橡胶手套，不要直接接触。522在仪器上面和周围不要使用可燃性危险品、避免引起火灾和爆炸523在仪器运转过程中，勿触及样品针、试剂针、搅拌棒、反应容器、清洗机构等，避免人身伤害。524仪器的操作、保养应按规定的程序进行。525在电源开关处于ON状态下接触线路板有触电危险。526禁止打开仪器前右侧、背面及侧面面板，会损害线路板。527请勿用肉眼直视光源灯光，否则会伤害眼睛。一、开关机程序61开机1打开打印机、显示器2打开操作电脑3打开仪器开关62关机1当机器在STANDBY状态在UTILS中选择F12SHUTDOWN2等待一会，当屏幕出现SHUTDOWNCOMPLETEDPOWEROFFTHEIMMAGEANDREBOOTTHESYSTEM时，关仪器、操作电脑、显示器及打印机。7仪器设置主菜单下按设置，共有29项内容1CHEMCONFIGURATION定义试验菜单2PANELS定义试验组合3BARCODE条形码设置4REFERENCEINTERVAL参考值设定5REPORTSETUP报告设置6CALCULATIONS计算项目7UNITS单位设定8ANTIGENEXCESS抗原过剩检测9DATE/TIME时间/日期修改10HOSTCOMMUNICATION通讯参数11DEFAULTSETUP默认值设置12SAMPLECOMMENTS样本说明13DEMOGRAPHICSSETUP病人资料设置14PRINTSETUP打印机设置15LANGUAGE/KEYBOARD语言/键盘设置16CHEMPROTOCOLDISKETTE装载项目设置盘17INSTRUMENTSERIALNUMBER仪器序列号18USERDEFINEDCHEMISTRIES用户自定义试剂8试剂装载81读试剂卡把试剂卡放入样品架把样品架放入样品盘在RGTS/CAL中选F8READCARDS装试剂及读试剂把试剂盘放入仪器在RGTS/CAL中选F1READREAGENT设定缓冲液和稀释液位置在RGTS/CAL中选F3BUFFER/DILUENT在下拉菜单中选择液体名称在LOT中输入批号9项目定标读定标液卡把定标液卡放入样品架把样品架放入样品盘在RGTS/CAL中选F8READCARDS项目定标在RGTS/CAL中选定要定标的项目（位置号变蓝）选F4REQUESTCAL输入定标液架杯位在下拉菜单中向下箭头选择定标液批号选F9SAVE可选F6CALLDLIST观察定标液放在哪个位置放入定标液在主菜单选RUN当一个项目选定定标后，可以取消定标在RGTS/CAL中选定要取消定标的项目（位置号变蓝）选F7CANCELREQUEST10运行质控品101每天至少要求运行两个水平以上的质量控制血清，与标本同时测定；102重新定标、更换试剂、仪器保养及维修后应重新运行质控品11样本采集及处理请参考检测项目SOP12常规样本测定121单个编程进入SAMPLES屏幕在RACK中输入架号，在POS中输入位置号，在SAMPLEID中输入样本号在PANNEL中输入组合号和/或选项目选F10SAVE/NEXT到下一标本，贮存现有样品信息，继续编程另外样品。将样品放上样品架。若按样品架/位置编程，确认样品是否放在正确位置。若按样品号（ID）编程，确认样品管上的条码位置。将样品架放上样品转盘，按RUN。122批量编程用于多个样本所做的项目都相同进入SAMPLES屏幕在PANNEL中输入组合号和/或选项目选F4PROGRAMBATCH在RACKS中输入所用的架号（可单个架子号，如7或输多个架子号如710）在NOOFSAMPLESINBATCH中输入样本个数，选OK依次输入样本号，选F10ENDBATCH将样品放上样品架。若按样品架/位置编程，确认样品是否放在正确位置。若按样品号（ID）编程，确认样品管上的条码位置。将样品架放上样品转盘，按RUN。13急诊样本测定按常规样品编程方式编程STAT样品。在编程样品显示上的任何活动区域处选择STAT格。按NEXTF10（下一个）贮存现有样品编程，继续编程另外样品。将样品放上样品架。若按样品架/位置编程，确认样品是否放在正确位置。若按样品号（ID）编程，确认样品管上的条码位置。将样品架放上样品转盘，按RUN。14查看仪器状态141查看样本稀释杯状态进入STATUS菜单选1DILUTIONSEGMENTS如果稀释杯不够用，则可在CLEARSEGMENTS中输入要清除的稀释杯块位置（如输1或输入多个位置如14）然后选OK142查看样本盘状态进入STATUS菜单选2SAMPLECAROUSELSTATUS143查看仪器状态进入STATUS菜单选3INSTRUMENTSTATUSMONITOR如果状态有异常，会有红色报警。15结果分析结果查询及处理151选入RESULTS屏幕152在SAMPLEIDS中输入样本号（只能输入单个样本）或RANGE中输入起始样本号，在THRU中输入最后一个样本号（可多个）或在RACKS中输入架号（可同时输多个架子如14）153选F1DISPLAYRESULTS（在屏幕上显示结果）或选F8SENDTOHOST（送到中文电脑）或选F10PRINTREPORT打印报告（打印报告前可选F9REPORTFORMAT改变报告格式）16日常保养161每日保养1检查冲洗液余量及冲洗管道2检查废液桶及排废管道3检查仪器底部有无液体渗漏4检查注射器阀,管道和活塞头5清洁试剂针,样品针,试剂搅拌针和样品搅拌针外表面162每月保养1清洁仪器表面2清洗仪器所有风扇的过滤网3记录仪器工作次数163特殊保养1清洁打印机打印头2对样品盘,试剂盘和样品架清洁及消毒3每做10,000个测试需要更换反应杯4每做10,000个测试或注射器漏水需要更换注射器活塞头特别注意1在仪器通电时不要拔插电路板,不要连接或断开管道的任何接头2对电路板操作时要戴防静电护腕3注意观察仪器保养工作的正确过程,安全操作4清洁仪器的任何部件时要在仪器STANDBY状态下5在仪器启动和退出诊断程序时仪器所有机械部件必须没有阻碍抗核抗体（间接免疫荧光法）1实验目的专用于人血清或血浆中抗核抗体的体外检测。适应症多种自身免疫性疾病，尤其是风湿病。已证实抗核抗体（ANA对很多自身免疫性疾病有诊断价值。ANA的靶抗原为细胞核内的不同生化成分，包括核酸，细胞核蛋白和核糖体蛋白。在不同疾病中，特别是风湿性疾病，其抗体谱有一定的特异性。在炎症性风湿病中ANA阳性率在20和100之间，其中类风湿性关节炎中ANA阳性率最低，为2040。因而，检测ANA对于不同类型风湿病意义重大。2检验原理将稀释的血清与生物载片（反应区内固定有包被基质的生物薄片）温育，如果样品是阳性的，特异性IGG，IGA和IGM抗体与相应的核抗原结合。在第二次温育时，荧光素标记的抗人抗体与结合在生物基质上的抗体反应，形成荧光显微镜下所观察到的特异性荧光模式。3样本要求样本人血清或EDTA，肝素或柠檬酸盐抗凝的血浆。稳定性待测的患者血清样本可于28储存14天，稀释后的样本需在一个工作日内检测。定性检测时推荐的血清样本稀释待测血清样本用PBS吐温缓冲液1100稀释。例如将101UL血清样本加入到1000ULPBS吐温缓冲液中并充分混匀（如涡旋混匀4秒）。判断抗体滴度时推荐的血清样本稀释用PBS吐温缓冲液稀释待检血清样本。在每100UL的PBS吐温缓冲液中加入111UL前一步的浓缩液，并充分混匀（如涡旋混匀2秒），欧蒙公司推荐的样本起始稀释度为1104检验方法生物载片直接使用。因载片表面产生的冷凝水可破环基质，只有在载片平衡至室温时方可打开包装袋。用墨色防水记号笔在载片上做标记。不要触摸生物薄片。打开包装袋后，载片需要在15分钟内进行温育。请不要使用外包装袋破损的载片。FITC标记的羊抗人球蛋白（荧光二抗）荧光二抗在初次使用前请用加样器充分混匀。荧光二抗对光敏感，要避光保存。阴性和阳性对照血清直接使用，在初次使用前请用加样器充分混匀。PBS吐温缓冲液将1包磷酸盐溶于1L蒸馏水，加入2ML吐温20并充分混匀。配制好的PBS吐温缓冲液应保存在28，尽快使用，如果溶液变浑浊或者出现污染则不能使用。封片介质直接使用。加样板检查加样板是反应区亲水而周边疏水。必要时用一点家用洗涤剂清洗，再用足量的水冲洗，并用纸巾擦干净。如果需要，可使用消毒剂（如3的SEKUSEPTEXTRA）浸泡后，再用足量的水冲洗、并用纸巾擦干净。储存条件及有效期生物载片须于40至8保存，其它成分28保存。如果保存恰当，自生产之日起保质期为12个月。配制好的PBS吐温缓冲液应保存在28，尽快使用，如果溶液变浑浊或者出现污染则不能使用。此外，荧光二抗对光敏感，请避光保存。5使用仪器在荧光显微镜下观察检测结果。观察组织器官时用20物镜，观察细胞基质用40物镜。激发虑片488NM，分光虑镜510NM，阻挡滤镜520NM。6操作步骤（1）从冰箱中拿出试剂，放在温室当中30分钟，与此同时准备血清稀释。建议DNA稀释110ANA稀释1100稀释方案稀释度稀释方案110225LPBS吐温缓冲液25L未稀释的样本1100225LPBS吐温缓冲液25L110稀释的样本11000225LPBS吐温缓冲液25L1100稀释的样本注为了避免污染，每完成两步稀释，就需要个换一个吸头。2、加样将加样板放在泡沫板上，按顺序分别滴加25L稀释血清，避免产生气泡。3、温育将载玻片正面朝下，盖在加样板的凹槽中，反应立即开始，室温下避光30M。4、冲洗用PBS流水冲洗载玻片，立即放入PBS缓冲液的洗杯中浸泡7M,洗加样板，擦干。5、加样滴加20LFITC（荧光二抗）至加样板反应区。6、温育从洗板中取出一张载玻片，5S内擦干，立即盖在加样板凹槽中，室温下避光30M。注意擦载片背面、边缘水分，不要擦正面和间隙的水分，防止破坏基质。7、冲洗用PBS流水冲洗载玻片，立即放入PBS缓冲液的洗杯中浸泡7M,洗加样板，擦干。8、封片将盖玻片直接放在泡沫板的凹槽里，滴加封板介质至盖玻片，每一反应区约10L（一滴），从PBS缓冲液杯中取出载片，擦干，放在已经准备好的盖玻片上，立即查看并轻轻调整使盖板片嵌入凹槽里。7质控品选择使用每个实验室都应该建立适宜的具有不同量值的指控品，并运用相关的统计方法计算各质控范围，每次试验将质控品与患者样品同时检测，所有质控品的测定结果应在允许范围内，否则应分析异常变化的原因，建议使用新的试剂来确定异常变化的原因。8参考范围用过检测将抗献血者薛庆忠抗核抗体的滴度确定参考范围为抗体滴度16,000IU/ML可能会出现抗原过量的情况，对IMMAGE检测造成偏低的分析结果。如果患者的临床症状不符合检测得到的RF浓度，将样本稀释并重新检测。干扰1在起始样本稀释度下，检测以下物质在血清中对使用该方法学进行RF检测的干扰物质来源检测水平观察结果胆红素猪530MG/DL无脂类人甘油三酯50300MG/DL无血红蛋白人2001,000MG/DL无2冷藏或冷冻保存过长时间的样本可能造成异常的检测结果。3在不同的稀释度下进行检测，血清样本可能会产生不同的RF浓度值。这一现象的产生可能起因于RF和抑制剂形成了复合物，或血清中存在干扰物质。样本稀释度可以降低干扰物质的有效浓度，所以在稀释样本中得到的RF的最终浓度结果相比于未稀释原倍样本或稀释倍数较低样本的检测结果会增加。4使用浊度法进行RF的定量测定可能不宜应用于脂血样本，因为该样本具有强烈的光发散特性，会造成检测结果不准确。15参考值范围参考值范围BECKMANCOULTER100KU/L特异性抗体滴度很高。12临床意义过敏反应是一种对异物的超敏反应。这些异物通常无害，但在过敏反应患者中，则产生强烈的反应。除了遗传易感性，其他非遗传因素，像过敏原接触，营养状况，慢性疾病或病毒急性感染也在过敏反应具有一定的作用。特应性过敏反应是一种遗传性疾病。最常见的过敏反应为I型过敏反应，其特征是形成特异性IGE抗体。一旦跟过敏原接触很快就会产生诸如发红，水肿以及瘙痒等症状。在工业化国家，超过15的人患有立即过敏性反应。典型的过敏反应有鼻炎、通常所说的花粉热、结膜炎和哮喘。接触过敏原的次数越多，过敏反应就会越严重。如果发生系统性过敏反应，可能会出现危及生命的严重反应（全身性过敏反应）。吸入性过敏反应可由季节性过敏原树、草或种子的花粉引起，也可由常年性过敏原（尘螨、霉菌孢子、宠物的唾液和皮屑）引起。除了空气传播的过敏原（如花粉、灰尘和霉菌）可引起过敏反应外，还有食物也可引起过敏反应。最常见的食物过敏原有花生、大豆、小麦、贝类、鱼、牛奶、蛋类和坚果。食物过敏反应是IGE介导的过敏反应，在摄入食物后的几个小时内可出现相应的症状。可能的症状为唇、舌、喉部灼痛或瘙痒、恶心、腹部痉挛、腹泻和红斑，甚至可出现哮喘、气短、心跳加速、恐慌和精神错乱。有时坚果、贝类、鱼和花生甚至能引起全身型过敏性反应或者致死性过敏反应。由于保守的植物性过敏原引发的IGE抗体和相关植物制作的食物或者非食物类过敏原发生交叉反应。如对于白桦树花粉过敏的患者可能对苹果、胡萝卜、芹菜、榛果、马铃薯或者猕猴桃过敏。许多过敏原是含有低聚糖侧链的糖蛋白类，这些侧链结合在过敏原的蛋白骨架上。有时，患者体内会产生针对这种糖类结构的抗体。CCD是“引起交叉反应的糖类抗原决定簇”的简写。CCD普遍存在于大量植物或动物类过敏原中。由于它们结构的相似性，CCD可引起很强的交叉反因。尽管，目前对抗CCD类IGE抗体的重要性还不是十分清楚。但大多数情况下，认为它们与诊断无关，但同时又对体外诊断阳性结果的解释造成影响。因此，引入抗CCD类的特异性IGE抗体的检测可能会提供有用的信息，尤其当IGE阳性结果与临床表现不符时，会为我们解释检测结果提供帮助。13参考资料德国欧蒙医学实验诊断有限公司试剂盒说明书。编写审核批准批准日期甲型肝炎病毒IGM检测（ELISA）1原理本法是用抗人IGMU链捕获待测血清中特异性IGM，然后配以酶标记抗原及TMB等其他试剂，检测人血清（或血浆）中甲肝IGM抗体。2标本采集21采集前病人准备受试者应空腹22标本种类血清或血浆23标本要求采集病人静脉血2ML（可用EDTA抗凝），室温放置不超过4H，分离血清备用。3标本储存28保存不应超过1周，20不应超过3个月，70长期保存，应避免反复冻融。4标本运输密封，室温运输。5标本拒收标准污染、标本量不足、严重溶血或脂血不宜做此项检测。6试剂61试剂名称甲型肝炎病毒IGM检测试剂盒62试剂生产厂家北京万泰生物技术有限公司。63包装规格96TTEST/KIT64试剂盒组成包被反应板、酶标记抗体，阳性对照血清，阴性对照血清，浓缩洗涤液，显色剂A，显色剂B,终止液，封口膜，说明书，自封袋。65试剂储存条件及有效期28避光保存，有效期12个月。7仪器设备71仪器名称酶免疫8操作步骤81平衡将试剂盒各组分取出，平衡至室温（1825）30分钟，微孔板拆封后，余者及时以自封袋封存。82配液浓缩洗涤剂配置前充分摇匀（如有结晶充分溶解）浓缩洗涤剂和蒸馏水或去离子水按125稀释后使用。83编号将微孔条固定于支架，按序编号，试验设有阴阳及空白对照。84加样分别用加样器加入阴阳性对照及待测血清各50UL于相应孔中。85温育37温育20分钟。86洗涤用洗涤液充分洗涤五次，洗涤完扣干（每次应保持3060秒的浸泡时间）。87加酶分别在每孔中加入酶标记抗体50UL，空白孔除外，在震荡器轻轻摇匀。88温育37温育20分钟。89洗涤用洗涤液充分洗涤五次，洗涤完扣干（每次应保持3060秒的浸泡时间）。810显色每孔加入显色液A、B各50UL，振荡混匀，置37孵育30分钟。811终止每孔加终止液50UL，混匀。812测定用酶标仪单波长450NM测定各孔OD值，30分钟内完成测定，并记录结果。9结果判断与分析91临界值（CO）的计算临界值阴性对照孔OD值N21（如阴性对照大于01时应重新试验，小于005时，按005计算）92结果判定样品OD值S/CO1者为阳性样品OD值S/CO1者为阴性10质量控制每次试验用质控血清同步检测，以S/CO值绘制质控图，S/CO值应在控制范围内如失控，则要检查试剂有效期、储藏温度、试验温度是否正常、操作步骤是否正确，直至重新实验使其在控。11参考范围阴性2、临床意义抗HAVIGM在HAV感染后亚临床期即已出现，其滴度迅速上升，感染13周达到高峰，36个月后消失，1年后检测不到。抗HAVIGM是HAV急性感染的标志，已被公认为早期诊断甲型肝炎的依据。3、操作性能灵敏度高，特异性强。4、方法局限性样品显色深浅与样品中抗体的含量没有一定正相关。5、注意事项151每板建议设阴阳对照血清各两孔，设空白对照时，不加样品及酶标记抗体，其余各步相同。152洗涤时各孔均需加满，防止孔口内有游离酶未能洗净。153加试剂前应将试剂瓶翻转数次，使液体混匀。如果滴加，滴加前应弃去12滴。滴加时瓶体应保持垂直，以使滴量准确。注意勿将试剂滴在孔壁上。154所有样品都应按传染源处理。155封口膜使用说明1551微孔板拆封后，在取出当天所需的微孔条后，其余微孔条可以用封口膜封存以避免受潮。在封存时，请勿把封口膜站在微孔板底部，以免影响其透光性。1552微孔条温育时，以封口膜覆盖孔口，可避免其他因素对实验带来的非预期的影响。156不同品名、不同批号的试剂不可混用，以免产生错误结果。16当检测系统不能工作时，所采用的补救措施，应保证所有操作步骤正确无误，可以比对阴阳对照，肉眼判读，无法准确判读者，应留样带系统正常后复查。17参考文献中华人民共和国卫生部司政司编。全国临床检验操作规程（第二版）410412页。18其他必须按照规定使用经中国药品生物检定所检定并贴有“检定合格”防伪标签的试剂。血清丁型肝炎病毒检测（ELISA）1原理在微孔条上预包被丁型肝炎病毒（HDV）重组嵌合抗原，采用ELISA法检测丁型肝炎病毒抗体。样品加入已有样品稀释液的包被抗原反应孔中，在随后的温育过程中，若样品中含有特异性抗体，则该抗体与包被抗原形成抗原抗体复合物2标本采集21采集前病人准备受试者应空腹22标本种类血清或血浆23标本要求采集病人静脉血2ML（可用EDTA抗凝），室温放置不超过4H，分离血清备用。3标本储存28保存不应超过1周，20不应超过3个月，70长期保存，应避免反复冻融。4标本运输密封，室温运输。5标本拒收标准污染、标本量不足、严重溶血或脂血不宜做此项检测。6试剂61试剂名称丁型肝炎病毒抗体诊断试剂盒62试剂生产厂家北京万泰生物技术有限公司。63包装规格96TTEST/KIT64试剂盒组成包被反应板、酶标记抗体，样品稀释液，阳性对照血清，阴性对照血清，浓缩洗涤液，显色剂A，显色剂B,终止液，封口膜，说明书，自封袋。65试剂储存条件及有效期28避光保存，有效期12个月。7仪器设备71仪器名称酶免疫8操作步骤81平衡将试剂盒各组分取出，平衡至室温（1825）30分钟，微孔板拆封后，余者及时以自封袋封存。82配液浓缩洗涤剂配置前充分摇匀（如有结晶充分溶解）浓缩洗涤剂和蒸馏水或去离子水按125稀释后使用。83编号将微孔条固定于支架，按序编号，试验设有阴阳及空白对照。84加样品稀释液用加样器在微孔条中加入样品稀释液，每孔100UL，空下四孔准备加对照。85加样本和留空白将每份标本各10UL分别加入已有稀释液的孔中，留下一孔不加标本做空白对照，标好位置。86加对照在预先空下的四孔中用加样器分别加入阴性对照一孔，阳性对照血清3孔每孔100UL，标好位置。对照应在所有标本加完后再加，以保证阈值准确性。87温育充分混匀，37温育30分钟。88洗涤用洗涤液充分洗涤五次，洗涤完扣干（每次应保持3060秒的浸泡时间）。89加酶分别在每孔中加入酶标记抗体100UL，空白孔除外，在震荡器轻轻摇匀。810温育37温育30分钟。811洗涤用洗涤液充分洗涤五次，洗涤完扣干（每次应保持3060秒的浸泡时间）。812显色每孔加入显色液A、B各50UL，振荡混匀，置37暗处30分钟。813终止每孔加终止液50UL，混匀。814测定用酶标仪单波长450NM测定各孔OD值，30分钟内完成测定，并记录结果。9结果判断与分析91临界值（CO）的计算临界值01阳性对照孔OD平均值阴性对照孔OD平均值92阴性对照OD值大于005时应重新试验，小于005时以005计算。三孔阳性对照OD平均值大于06，方可认为试剂盒有效；若大于25按25计算；若一孔阳性对照OD值与三孔阳性对照OD平均值差异大于30，该孔应舍弃，并用另外两孔重新计算OD值。93结果判定样品OD值S/CO1者为阳性样品OD值S/CO1者为阴性10质量控制每次试验用质控血清同步检测，以S/CO值绘制质控图，S/CO值应在控制范围内如失控，则要检查试剂有效期、储藏温度、试验温度是否正常、操作步骤是否正确，直至重新实验使其在控。11参考范围阴性6临床意义在血清中抗HDV抗体阳性表明有急性或慢性HDV感染。7操作性能灵敏度高，特异性强。8方法局限性样品显色深浅与样品中