《猪传染性胸膜肺炎放线杆菌2、7、12型三重PCR定型检测技术》编制说明

1、安徽省地方标准编制说明标准名称猪传染性胸膜肺炎放线杆菌2、7、12型三重PCR定型检测技术任务来源安徽省质量技术监督局关于下达2018年第一批安徽省地方标准制修订计划的函，皖质函2018326号，项目计划号2018-01-180负责起草单位安徽农业大学单位地址安徽省合肥市蜀山区长江西路130号参加起草单位农业农村部猪肉质量安全控制重点实验室、安徽省动物疫病预防与控制中心、安徽华杰农牧科技有限公司、和县农业农村局、望江县畜牧兽医局、望江申江养殖有限公司标准起草人序号姓 名单位职 务职 称电 话1孙裴安徽农业大学副院长副教授138666899892高亚飞农业农村部猪肉质量安全控制重点实验室总裁高级

2、畜牧师158056788803占松鹤安徽省动物疫病预防与控制中心副主任高级兽医师189560486944王军安徽省动物疫病预防与控制中心实验室副主任中级兽医师189560486755陈祥国和县农业农村局科长189565420956赵家喜望江县畜牧兽医局局长189569352697王杰安徽华杰农牧科技有限公司总经理137056964488王希春安徽农业大学教授138659849659李杰安徽农业大学研究生1505510215310刘江望江申江养殖有限公司总经理1390181852611王勇安徽农业大学副教授1396665836612徐前明安徽农业大学副教制情况1、编制过

3、程简介1.1任务来源由安徽农业大学提出，安徽省质量技术监督局关于下达2018年第一批安徽省地方标准修订计划的函（皖质函2018326号），批准正式立项。收到立项文件后，由安徽农业大学、农业农村部猪肉质量安全控制重点实验室、安徽省动物疫病预防与控制中心、安徽华杰农牧科技有限公司、和县农业农村局、望江县畜牧兽医局等相关单位，成立了标准制订小组，成员有：孙裴、高亚飞、占松鹤、王军、陈祥国、赵家喜、王杰、王希春、李杰、王勇、徐前明等。标准起草过程：在参与单位及课题组多年研究经验的基础上，展开标准起草的准备工作，确定计划、方法和步骤。被批准立项后，标准起草组人员广泛收集相关技术资料、成果及在安徽省内（包

4、括合肥市、利辛县、凤阳县、和县、望江县等地）相关单位、企业进行样品收集。对所收集的资料进行全面分析、比较，确定了标准的指标设置和各项指标要求。对所收集样品进行验证性实验，并按计划完成了工作任务。2、制定标准的必要性和意义必要性：猪传染性胸膜肺炎放线杆菌（APP）是猪传染性胸膜肺炎的病原菌，该病是引起猪的一种高度传染性呼吸道疾病，本病的发生多呈最急性型或急性型病程而迅速死亡，急性暴发猪群，发病率和死亡率一般为50左右，最急性型的死亡率可达80100。病猪和带菌猪是本病的传染源，主要通过空气飞沫传播，在感染猪的鼻汁、扁桃体、支气管和肺脏等部位是病原菌存在的主要场所，病菌随呼吸、咳嗽、喷嚏等途径排出

5、后形成飞沫，通过直接接触而经呼吸道传播。也可通过被病原菌污染的车辆、器具以及饲养人员的衣物等而间接接触传播。该病是一种世界性疾病，给全世界约化养猪业造成巨大的经济损失，特别是近十几年来随着养猪集约化程度的不断提高，本病的流行也呈上升趋势，被国际公认为危害现代养猪业的重要疫病之一。中国于1987年首次发现本病，此后流行蔓延开来，危害日趋严重，成为猪细菌性呼吸道疾病的主要疫病之一。意义：目前APP已鉴定的有15个血清型，各型之间的交叉保护性不强，不同的血清型对猪的毒力也不同。本菌又可分为两个生物型，生物型为 NAD依赖型，生物型为NAD非依赖型。生物型菌株(包括1-12和15型)毒力强，危害大。生

6、物型（包括13、14型）可引起慢性坏死性胸膜肺炎。报道表明，我国流行的主要以血清1、3、7、2、4、5、10型为主。孙裴等人近几年调查研究发现，安徽省猪群流行的以血清2、7、12型为常见。血清2、7、12型属于生物I型，毒力强，危害大。因此制订猪传染性胸膜肺炎放线杆菌2、7、12型三重PCR定型检测技术，对于快速、正确诊断和危害程度评价、及时防治、快速处置猪传染性胸膜肺炎，具有十分显著的意义。3、制定标准的原则和依据，与现行法律、法规、标准的关系，特别是强制性标准的协调性猪传染性胸膜肺炎放线杆菌2、7、12型三重PCR定型检测技术编制遵循“先进性、实用性、统一性、规范性”的原则，方法准确可靠、

7、满足各项方法特性指标的要求。方法具有实用性，易于推广。标准的结构、编写规则及规范性技术要素严格按照GB/T 1.1-2009标准化工作导则 第1部分：标准的结构和编写进行制定。本标准所引用的其它标准均为现行有效的最新国家标准，符合国家相关法律、法规的要求。4、主要条款的说明，主要技术指标、参数、试验验证的论述主要条款：本标准的章节由：猪传染性胸膜肺炎放线杆菌2、7、12型三重PCR定型检测技术标准的范围、规范性引用文件、术语和定义、试剂和材料、仪器和设备、样品的采集运输和保存、操作步骤、生物安全及防污染措施以及相关附录9部分组成。其中条款六体现出样品采集的相关内容，条款七说明本方法的具体操作和

8、检测的详细内容。该标准的各项标准均符合国家有关法律法规，体系中主要的条款所遵循的基本原则，符合公开、公平、公正和诚实信用，依法高效的原则。主要技术指标、参数：本项目通过提取样品DNA、合成PCR扩增引物和三重PCR检测技术，对样品中2、7、12型猪传染性胸膜肺炎放线杆菌进行鉴定，筛选出快速、准确、经济实用的检测方法。试验论证的论述：方法成熟后在合肥市、利辛县、凤阳县、和县、望江县等相关单位、企业进行应用，结果表明该方法是快速、准确的。5、标准中如果涉及专利，应有明确的知识产权说明未涉及相应专利6、采用国际标准或国外先进标准的，说明采标程度，以及国内外同类标准水平的对比情况目前国内外尚无关于猪传染性胸膜肺炎放线杆菌2、7、12型三重PCR定型检测技术的国家标准或行业标准，根据标准化实施条例，建议将猪传染性胸膜肺炎放线杆菌2、7、12型三重PCR定型检测技术作为安徽省地方推荐性标准在全省实施。7、重大分歧意见的处理经过和依据无8、作为推荐性标准或者强制性标准的建议及其理由鉴于目前尚无关于猪传染性胸膜肺炎放线杆菌2、7、12型三重PCR定型检测技术相关的标准，本标准的颁布实施，对疾病检测、指导生产和推行标准化作业具有现实意义。且本方法具有快速、准确、