实验诊断学：临床常用免疫学检查

1、目 录,概 述,伴随着免疫学技术的发展和临床应用研究的不断深入，临床免疫学检测在实验诊断学中所占的比例逐步升高，广泛应用于免疫系统功能的评估，感染性疾病、自身免疫性疾病以及肿瘤的诊断、鉴别诊断与疗效观察。 免疫学检测是实验诊断的重要组成部分。,临床常用免疫学检查,本章节主要内容 A 经典免疫活性物质检测：免疫细胞（T，B细胞）, 免疫分子（球蛋白-Ig，细胞因子-CK） B 自身免疫检测，感染免疫检测 C 体液中的痕量物质检测：肿瘤免疫检测 * 激素，酶，治疗药物浓度，维生素等在临床生物化学检测中讲述。,免疫检测基本原理,沉淀反应 凝集反应 免疫标记技术,Ag+Ab,胶体金标记技术 荧光免疫技

2、术 酶联免疫测定 （电）化学发光测定 免疫印迹,基于一定反应环境（PH、温度、离子强度、反应时间）下的抗原抗体反应：,Immunoglobulin Test,免疫球蛋白基本原理 ： 抗 Ig的抗体 + 抗原 (Ig) 沉淀反应 （1）单向免疫扩散法（Radial Immunity Diffusion，RID): 利用抗免疫球蛋白抗体与免疫球蛋白进行抗原抗体反应，形成沉淀环，沉淀环直径与免疫球蛋白的浓度成比例。 操作： 抗Ig加入琼脂糖凝胶倒板打孔加样结果观察,fundamental of the test,Immunoglobulin Test,（2）自动化仪器定量检测原理： 速率散射比浊法：

3、 光沿水平轴照射时，碰到小颗粒的免疫复合物可导致光散射，散射光的强度与复合物的含量成比例，亦即待测抗原越多，形成的复合物也越多，散射光就越强。 特点： 速率散射比浊测定是一种抗原抗体结合的动态测定法。经典的沉淀反应皆在抗原抗体结合完成后进行复合物的定性或定量测定（终点法）；若在抗原抗体反应的最高峰（约在1min内）测定其复合物形成的速率（速率法），则可达到快速、准确定量的目的。,Immunoglobulin Test,人血清中有5种免疫球蛋白分子存在 ：,Immunoglobulin Test,IgG,1.血浆中含量最多、最重要 2.唯一能透过胎盘的Ig，对胎儿被动免疫 3.能与葡萄球菌A蛋白

4、（SPA）结合,参考范围： 血清IgG 7.016.6 g/L,IgG,临床意义 IgG 升高：再次免疫应答的标志 1.多克隆性升高即多种Ig亚型同时升高：慢性感染，慢性肝脏疾病，自身免疫性疾病（ SLE），RA 2.单克隆性升高即仅IgG升高：免疫增殖性疾病，如多发性骨髓瘤（IgG MM） IgG 降低： 1.先天及获得性免疫缺陷病 2.免疫抑制疗法,IgG,IgA,1.血清型为单体，分泌型为二聚体，主要以分泌型存在于组织液中 2.分泌型IgA主要由呼吸道、消化道、泌尿生殖道的淋巴样组织合成，反映这些部位的感染、炎症或者肿瘤病变,参考值范围 血清IgA 0.703.5 g/L,IgA,临床意

5、义 IgA 升高： IgA-MM、SLE、RA、Liverish、肾脏疾病 IgA 降低： 反复性呼吸道感染、非IgA型多发性骨髓瘤、免疫缺陷病、免疫抑制剂的使用等,IgA,IgM,1.分子量最大的Ig 2.胚胎早期即可合成，初次免疫应答作用 3.血细胞的天然抗体类型 4.B细胞的表面标志。,参考值范围： 血清IgM 0.502.60 g/L,IgM,临床意义： 初次免疫应答Ig IgM 升高： 病毒性肝炎早期、 肝硬化、RA、SLE IgM 降低： IgG型重链病、IgA-MM、免疫缺陷病、免疫抑制剂的使用、代谢性疾病等,IgM,1. 血液中含量很低 2. IgD 的功能研究仍在继续中 3.

6、 成熟B细胞表面标志,IgD,参考值范围 血清IgD 0.602.0 mg/L,IgD,临床意义：较少用到 IgD 升高： IgD-MM、单核细胞增多、 白血病 IgD 降低： 丙种球蛋白病,IgD,IgE,介导超敏反应 （Type I）,参考值范围 血清IgE 0.100.90 mg/L,IgE,临床意义 IgE 升高： IgE-MM、重链病、肝病、结节病、 炎症反应、过敏性疾病、寄生虫感染 IgE 降低： 丙种球蛋白病、肿瘤、免疫抑制疗法,IgE,血清M蛋白检测,参考值： 蛋白电泳法:阴性 临床意义： M蛋白血症单克隆免疫球蛋白病，也被称为骨髓瘤蛋白血症、副蛋白血症。 是以血中丙种球蛋白增

7、高为特点的亚临床现象，此症具有肿瘤倾向，常见于多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症及淀粉样变性等疾病 。,补体系统检测,活化的补体及其片段的功能 A: 活化的补体复合物: 细胞裂解 (by MAC) B: 补体活化片段: 调理作用 (by C3b、C4b、iC3b) 炎症作用 (by C3a、C4a、C5a),调理作用,过敏毒素,细胞裂解,补 体 检 测,（1）溶血试验-补体活性 （2）C3 检测-含量 （3）C4 检测-含量,溶血试验血浆总补体溶血活性 CH50 (1) 检测原理： CH50，试管法 溶血介质 (Ab) + sheep RBC (Ag) Ag-Ab (IC)活化 C1 溶血反应 50%

8、 溶血点,CH50: RBC lysis system,(2) 参考值范围 ： 50100u/mL (3) 临床意义： 补体经典途径的活性 (C1C9),Total Complement(CH50),升高： 急性炎症、组织损伤、肿瘤 降低： 先天或后天性 后天性：严重感染、SLE、RA、急性肾脏疾病、肝脏疾病、大面积烧伤,Total Complement(CH50),(1) 检测原理 免疫比浊法 乳胶颗粒 (包被有 抗C3抗体) + 抗原 (C3) 免疫复合物浊度分析,C3 Test,反应特点： 在特定的反应条件下 (pH、离子强度、温度，合适的Ab:Ag 比例 ) ，免疫复合物的浓度与反应体

9、系的浊度成正比,(2) 参考值范围 : 0.801.50g/L,C3 Test,(3) 临床意义： 在补体系统占最多的组分，是补体经典途径和旁路途径激活的关键物质。 升高： 急性炎症反应、肿瘤 降低： SLE、肾脏疾病、RA,C3 Test,(1) 检测原理 免疫浊度分析，类似于 C3 乳胶颗粒(包被有C4抗体) + 抗原(C4) 免疫复合物浊度分析,C4 Test,(2) 参考值范围 : 0.20 0.60g/L,C4 Test,(3) 临床意义： 升高： 急性风湿热、关节炎、组织损伤 降低： SLE、肾脏疾病、RA,C4 Test,传统淋巴细胞计数法 (1) 检测原理 SRBC + T-c

10、ell受体(TCR) ERFT (Erythrocyte Rosette Forming Test，E玫瑰花环实验),T Lymphocyte Test,分为：EaRFC (活化-花环形成细胞) EsRFC (稳定-花环形成细胞) EtRFC (总-花环形成细胞),（2）方法：显微镜检查 以每个淋巴细胞粘附3个或3个以上羊红细胞者为花环形成细胞，显微镜下计数其占淋巴细胞的比例。 花环形成细胞包括： EaRFC、EsRFC、EtRFC,T Lymphocyte Test,T Lymphocyte Test,(3)参考值范围： EaRFC (活化-花环形成细胞) ：23.63.5%； EsRFC

11、(稳定-花环形成细胞) ：3.32.6%； EtRFC(总-花环形成细胞)：64.46.7% CD3+T ：69.44.86%； CD4+T ：41.175.28%； CD8+T ：24.584.02%；,(4) 临床意义： 降低： 免疫功能下降 肿瘤、病毒感染、严重外伤 升高： 甲状腺炎、甲亢、SLE、急性免疫排斥反应,T Lymphocyte Test,传统淋巴细胞计数法 (1) 检测原理 SRBC + Ab + C + B细胞受体 EAC-RFC,B Lymphocyte Test,(2) 方法 ：显微镜检查 红细胞-抗体-补体花环形成试验(EA-RFC)，B细胞表面有膜表面免疫球蛋白、

12、Fc受体、补体受体等。 羊红细胞经相应的抗红细胞抗体(EA)致敏，可由补体激活，通过Fc受体结合B细胞可形成花环样细胞，以检测B细胞总数(相对值)。 B细胞抗原受体（BCR、SmIg）检测 B细胞分化抗原（CD19、CD20）检测,B Lymphocyte Test,(3) 参考值范围 ： EA-RFC(EA-花环形成细胞)： 812%； EAC-RFC(EA-补体-花环形成细胞)：812%； M-RFC(鼠-红细胞花环)： 5.711.3% B细胞抗原受体（BCR、SmIg）检测 SmIg：1628%、 SmIgG：413%、 SmIgM：713%、 SmIgA：14%、 SmIgD：58%

13、、 SmIgE：01.5%、 B细胞分化抗原（CD19、CD20）检测 CD19+B：11.743.73%,B Lymphocyte Test,(4) 临床意义： 升高： SmIg阳性细胞升高，B细胞性恶性增值，毛细胞白血病、慢淋、巨球蛋白白血病 降低： SmIg阳性细胞降低，体液免疫下降，严重免疫缺陷病或者免疫抑制疗法，丙种球蛋白缺乏症,B Lymphocyte Test,T、B细胞分化抗原检测,淋巴细胞： T 、 B 、NK细胞 外观相同，功能不同, 可依据细胞膜上的CD分子的不同加以区分并检测其功能。,方案1 : 流式细胞仪计数（FCM）,方案2 : 传统细胞计数法,FCM,Flow c

14、ytometry原理,FCM进行淋巴细胞分类计数策略,不同类型的分化成熟的淋巴细胞表面标志不同，用其特异性白细胞分化抗原的单克隆抗体可以把各种亚群计数并分离开来。 不同亚群的淋巴细胞与相应单抗结合，再与荧光标记二抗结合，在流式细胞仪中计数各种淋巴细胞的总数和百分率。 CD3+见于T淋巴细胞、NK细胞 CD4/CD8是T淋巴细胞亚群的分类标志 CD19+见于B淋巴细胞 CD16+、CD56+见于NK细胞,FCM分类淋巴细胞,参考值范围 CD3+细胞为T淋巴细胞 占淋巴细胞总数的61%85%，CD3+CD4+(Th)为28%58%，CD3+CD8+(Ts)为19%48% Th/Ts为0.92/1

15、CD19+细胞为B细胞 占淋巴细胞总数的（11.743.37）%,FCM分类淋巴细胞的临床意义,CD3+细胞 CD3+ 降低见于自身免疫性疾病； CD3+CD4+(Th)降低见于恶性肿瘤、免疫缺陷病、免疫抑制疗法； CD3+CD8+(Ts)降低见于自身免疫性疾病或变态反应性疾病 。 Th/Ts比值 升高见于病毒性感染、变态反应等 Th/Ts比值降低见于艾滋病（常0.5） CD3+、CD4+、CD8+ 增高，且CD1、CD2、CD7增高，见于急性淋巴细胞白血病 。 CD19+细胞为B细胞 增高，可见于B细胞性淋巴细胞白血病，降低见于免疫抑制疗法或化疗病人,NK细胞免疫检测,NK细胞活性检测原理：

16、 将用同位素铬51Cr（也可用其他同位素如3H-TdR 、3H-Dr、125I-UdR ）标记的靶细胞与淋巴细胞共同培养时，靶细胞可被NK细胞杀伤。同位素便从被杀伤的靶细胞中释放出来，其释放的量与NK细胞活性成正比。通过测定靶细胞51Cr的释放率即可反应NK细胞的活性。,参考范围： 51Cr释放法： 自然释放率：10%15%; 自然杀伤率：47.6%76.8% 51Cr利用率：6.5%47.8% 临床意义： 肿瘤、免疫缺陷病患者NK细胞活性下降，免疫排斥时则升高。,肿瘤免疫检测,肿瘤标志物（Tumor marker，TM） 是指在肿瘤的发生和增殖过程中，由肿瘤细胞本身所产生的或者是由机体对肿瘤

17、细胞反应而产生的或者异常升高，反映肿瘤存在和生长的一类物质，包括蛋白质、激素、酶(同工酶)、多胺等。 TM可在肿瘤患者血液或体液中检测到。是肿瘤诊断重要的实验室指标，还可应用于肿瘤复发的早期发现、疗效观察等。,一种肿瘤可分泌多种TM，而不同的肿瘤或同种肿瘤的不同组织类型可有相同的TM，而且在不同的肿瘤患者体内，同一种TM 的含量变化也较大。 单独检测一种TM，可能会因为测定方法的灵敏度不够而出现假阴性，联合检测多种TM 有利于提高检出的阳性率。为此，选择一些特异性较高、可以互补的TM联合测定，对提高肿瘤的检出率是有价值的,肿瘤免疫检测,常用的肿瘤标志物,甲胎蛋白(AFP)： 参考范围：200

18、g/L为可疑，500 g/L可确诊，可用于肝癌普查、疗效观察及预后的判断；,常用的肿瘤标志物,癌胚抗原(CEA)： 参考范围：5 g/L 1. 广谱性标志物 2. 97 健康成人血清CEA浓度在5g/L以下 3. 在所有胃肠道恶性肿瘤患者血清中CEA均可增高。如胰腺癌、结肠癌、直肠癌、胃癌 4. 肺癌、乳腺癌等亦有升高 5. 吸烟者于2.5g/L 5g/L,常用的肿瘤标志物,糖类抗原19-9(CA19-9)： 参考范围：37000 U/L CA19-9是消化系统肿瘤的相关标志物，是至今报道的对胰腺癌敏感性最高的标志物，有助于胰腺癌的鉴别诊断和病情监测 急性胰腺炎、胆汁淤积型胆管炎、胆石症、急性

19、肝炎、肝硬化等出现不同程度升高 肿瘤切除后浓度会下降，如再上升，则可表示复发,糖类抗原125(CA125)： 参考范围：35000 U/L CA125是卵巢癌和子宫内膜癌的首选标志物，是用于卵巢癌的早期诊断、疗效观察、预后判断、监测复发及转移的最重要指标。 升高也可见于多种妇科良性疾病，如卵巢囊肿、子宫内膜病、宫颈炎及子宫肌瘤。,常用的肿瘤标志物,糖类抗原72-4(CA72-4)： 参考范围：4000 U/L 是目前诊断胃癌的最佳TM 之一，对胃癌具有较高的特异性，对良性病变的鉴别诊断有较高的特异性。 CA72-4与CA125联合检测，作为诊断原发性及复发性卵巢肿瘤的标志，特异性可接近100。

20、,常用的肿瘤标志物,糖类抗原l5-3(CA15-3)： 参考范围：4000 U/L 是乳腺癌的最重要的特异性标志物。 3050乳腺癌患者的CA15-3明显升高，是乳腺癌患者诊断和监测术后复发、观察疗效的最佳指标。 CA15-3动态测定有助于期和 期乳腺癌患者治疗后复发的早期发现。,常用的肿瘤标志物,非小细胞肺癌相关抗原(CYFRA 21-1)： 参考范围：2.0 g/L 非小细胞肺癌最有价值的血清TM，尤其对鳞状细胞癌患者的早期诊断、疗效观察、预后监测有重要意义 在疾病的发展过程中，CYFRA 21-1值的变化常常早于临床症状和影像检查,常用的肿瘤标志物,神经元特异性烯醇化酶 ( NSE)：

21、参考范围：15 g/L 1. NSE被认为是监测小细胞肺癌的首选标志物 2. 6080 的小细胞肺癌患者NSE升高 3. NSE是神经母细胞瘤的标志物，灵敏度可达90 4. 在缓解期，8096 的患者NSE含量正常，如NSE升高，提示复发,常用的肿瘤标志物,鳞状细胞癌抗原(SCC)： 1. 性质为糖蛋白 2. 是一种特异性很好而且是最早用于诊断鳞癌的标志物 3. 有助于所有鳞状上皮细胞起源癌的诊断和监测，例如：子宫颈癌、肺癌(非小细胞肺癌)、头颈部癌、食管癌、鼻咽癌等,常用的肿瘤标志物,总前列腺特异性抗原(T-PSA)： 1. T-PSA是前列腺癌的特异性标志物，也是目前公认的唯一具有器官特异

22、性TM 2. T-PSA也可用于高危人群前列腺癌的筛选与早期诊断，是第1个由美国癌症协会推荐用于筛查50岁以上男性前列腺癌的TM,常用的肿瘤标志物,游离前列腺特异性抗原(F-PSA)： 1. 单项的血清T-PSA测定不能明确鉴别前列腺癌和良性的前列腺增生，通过F-PSA/T-PSA 比值达到这一目的 2. F-PSA/T-PSA 比值小于10提示前列腺癌；F-PSA/T-PSA 比值大于25提示前列腺增生 (T-PSA 2205 g/L),常用的肿瘤标志物,肿瘤标志物检测应用注意事项,关于普查： 经济允许的情况下，TM用于高危人群的普查。如在乙型肝炎表面抗原(HBsAg)携带者和肝硬化患者中检

23、测甲胎蛋白 年龄50岁男性PSA普查,肿瘤标志物检测应用注意事项,检测的影响因素的控制 如标本采集、药物，避免假阳性、假阴性,肿瘤标志物检测应用注意事项,关于TM的定位： TM基本上不能对肿瘤定位，因为绝大多数TM无器官特异性，只有极少数的TM如PSA具有器官特异性，但不具肿瘤特异性,肿瘤标志物检测应用注意事项,关于确诊： TM无足够的灵敏度，不能排除假阴性结果，同时还有假阳性的可能，因此，通常不能单凭TM进行确诊，要结合影像学检查、临床表现 但AFP、-HCG)和降钙素等有助于确诊 大多数TM与疾病分期有关，且浓度与肿瘤大小(如结肠癌CEA浓度与肿瘤大小有关)或分期(如几乎所有的TM在肿瘤晚

24、期时呈现较高的浓度)之间通常存在着关联，但这只是总体而言不能根据个体测得值来判断肿瘤大小，也不能以TM的浓度来精确地指示各期肿瘤,肿瘤标志物检测应用注意事项,疗效检测： TM最重要的价值，是能明确手术、放疗或药物治疗是否有效，任何标志物半寿期显著超过正常半寿期，均与残留肿瘤不断产生TM有关，表示手术切除得不完全，或肿瘤抗药，或肿瘤复发 一般认为： 无效：TM浓度与治疗前相比下降50 ； 有效：TM浓度与治疗前相比下降90 ； 显效：TM浓度下降至非恶性肿瘤的参考值内,常用的肿瘤标志物组合,肿瘤 首选标志物 补充标志物 肺癌 CEA、NSE、CYFRA21-1 TPA、SCC、降钙素 肝癌 AF

25、P AFU、CEA、GGT、ALP 乳腺癌 CA15-3、CEA hCG、降钙素 胃癌 CA72-4 CEA、CA19-9 前列腺癌 PSA、f-PSA PAP 结肠直肠癌 CEA CA19-9 、CA50 胰腺癌 CA19-9 CA12-5 、CA50、CEA 卵巢癌 CA12-5 HE4 CEA、hCG、CA19-9 骨肿瘤 本-周蛋白、2-MG,自身免疫疾病,正常的机体拥有一套强有力的机制用以对抗各种病原因素的冲击，借助于这套机制，机体得以远离感染性疾病 同样也是这套机制，亦即我们称之为免疫系统，有时会出错进而攻击机体本身，这些错误发生的免疫应答过程被称为自身免疫。自身抗体的存在或T细胞

26、杀伤机体自身抗原成分这一病理过程的持续存在就是这种病理现象存在的依据,IgM (类风湿因子也可以是 IgG 或IgA)型类风湿因子的结构. 这类变性的IgG刺激机体产生的免疫球蛋白分子能够结合机体正常的IgG的 Fc 段，导致自身免疫应答，激活补体或被吞噬细胞吞噬，产生炎性介质导致组织炎性损伤，使患者发生骨关节炎及血管炎,类风湿因子（ RF）,Rheumatoid Factor Test,(1) 检测原理 RF (Ab) + IgG Fc 乳胶凝集实验 (LPAT),(2) 方法 乳胶颗粒(包被有Ag) + RF 凝集反应,Rheumatoid Factor Test,(3) 参考值范围 ：

27、凝集实验 ：阴性,(4) 临床意义： RF 阳性： 1. 类风湿关节炎患者阳性率为80%，滴度可1:160 2. SLE阳性率为2025%，硬皮病、皮肌炎阳性率为1024%，但滴度较低,Rheumatoid Factor Test,Antinuclear Antibody Test (ANA),(1) 检测原理 1. 肝细胞核内抗原与待测血浆(ANA)在一定条件下发生抗原抗体反应，形成复合物 2. 加入荧光标记的二抗，与抗原-抗体免疫复合物（IC）结合，进行间接免疫荧光检测,免疫荧光技术原理,(2) 方法 待测血浆预稀释 Ag(核抗原) + Ab(血清) IC IC + 第二抗体（FITC标记

28、） 间接免疫荧光检测 *FITC：异硫氰酸荧光素,Antinuclear Antibody Test (ANA),ANA的检测,(3) 参考值： 间接荧光检测： 血浆稀释比例 1:40 为阴性 阳性者在荧光显微镜下可以观察到ANA的荧光强度和荧光类型，如：均质型、核膜型、颗粒型，核仁型等,Antinuclear Antibody Test (ANA),(4) 临床意义： 用于自身免疫性疾病的辅助诊断（筛查实验）。 不同的自身抗体可以产生相同的ANA 荧光核型；不同的自身免疫性疾病可以产生多种相同的自身抗体，可以有相同的ANA 荧光核型 ANA阳性： 1. SLE阳性率为96%，滴度可1:16，

29、大多在1:1281:2048之间 2. 类风湿关节炎、硬皮病、皮肌炎会出现阳性，但滴度较低,Antinuclear Antibody Test (ANA),ENA抗体谱,可提取的核抗原抗体(ENA抗体谱) 即可提取性核抗原抗体谱，用于诊断和鉴别诊断自身免疫性疾病，其检测的抗体对应的抗原与ANA交叉，是ANA中的一部分。两者检测的原理不同，ENA抗体谱检测抗体，用western-blot方法，一次可以检测、区分出多种自身抗体，有助于鉴别诊断 ANA也检测抗体，用间接免疫荧光法检测，用于证实自身抗体存在，但不能明确是哪一种。ENA抗体谱检测是ANA检测的良好补充，在诊断与鉴别诊断自身免疫性疾病有时

30、具有一致性,Sm,Jo-1,Rnp,SSA,SSB,质控,Scl-70,上图为欧蒙免疫印迹法ENA抗体谱检测5份标本的结果 下图为3号的放大图，示SSA 、SSB阳性，其他抗体为阴性,ENA抗体谱检测的临床意义,ENA抗体谱用于确认多种自身抗体的存在： 抗Sm抗体为SLE所特有 抗RNP抗体阳性主要见于混合性结缔组织病 抗SSA抗体及抗SSB抗体阳性主要见于干燥综合征 抗Jo-1抗体见于多发性肌炎，抗Scl-70抗体仅见于进展性系统性硬皮病,其他常用的自身抗体,抗角质层蛋白抗体（AKA）、抗环瓜氨酸肽抗体（CCP）RA早期诊断相关自身抗体。 抗双链DNA抗体（ds-DNA） 在SLE活动期阳性

31、率高。 抗线粒体抗体（AMA）原发性胆汁性肝硬化与阻塞性肝硬化的鉴别诊断。 抗平滑肌抗体（ASMA）阳性自身免疫性肝炎的患者 抗胃壁细胞抗体（PCA）阳性恶性贫血和慢性萎缩性胃炎患者。 抗甲状腺球蛋白抗体（AG）阳性甲亢，慢性甲状腺炎患者。 抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA）诊断血管炎的特异性指标。,感染免疫检测,细菌,病毒,原虫,真菌,ASO 肥达试验 微生物学检验,抗体检测 核酸检测,抗体检测 抗原检测,微生物学检验,细菌,策略,Anti-streptolysin O test (ASO),(1) 检测原理 溶血素 O + Ab胶乳凝集实验,2) 方法 凝集法、免疫比浊法 3) 参考值范围

32、： 凝集试验 ：阴性 免疫浊度分析 : 8mg/L,Anti-streptolysin O test (ASO),4) 临床意义： 升高(滴度1:400)： 近期有A群溶血型链球菌感染，如：活动 性风湿热、风湿性关节炎、急性肾小球 肾炎、急性上呼吸道感染等； 抗体由高滴度逐步下降：好转； 抗体恒定在高水平： 活动期。,Anti-streptolysin O test (ASO),注意： 假阳性：高胆固醇、黄疸、溶血等； 假阴性：金葡、铜绿色假单胞菌等， 可抑制溶血素“O”的活力。,Anti-streptolysin O test (ASO),伤寒和副伤寒沙门氏菌的Widal反应,1) 检测原理

33、 利用伤寒和副伤寒沙门氏菌菌液作为抗原，检测病人血清中有无相应抗体的一种凝集试验,2) 参考值范围 ：阴性 伤寒 ： H1:160； O1：80； 副伤寒甲、乙、丙三型： 1：80,Widal Test for Typhoid and Paratyphoid,3) 临床意义： 阳性: 阳性一般见于伤寒发病后一周 发病时间 阳性率 第一周： 10% 第二周： 6070% 第四周： 90%,Widal Test for Typhoid and Paratyphoid,病毒感染检测,TORCH试验 Toxoplasma 弓形虫 Rubella virus 风疹病毒 Cytomegalovirus 巨

34、细胞病毒 Herpes virus 疱疹病毒（包括I、II两型） ToRCH试验又称致畸5项试验，是产科产前常规检验项目，因此5种病原易导致胎儿畸形，故常组合检测,参考值： ToRCH试验：阴性,嗜异性凝集试验,(1) 检测原理 传染性单核细胞增多症系由EB病毒感染所致，患者体内产生一种凝集异种动物(如羊)红细胞的抗体，称IgM嗜异性抗体，可由嗜异性凝集试验进行检测,(2)方法 绵羊红细胞（Ag）+血清（Ab） 凝集反应,嗜异性凝集试验,(3) 参考值范围 ： 凝集效价 ：1:8 (4) 意义： 效价升高：见于EB病毒感染后23周嗜异性效价达到高峰，可1:56 (5) 注意： 本试验为非特异性

35、试验，效价增高也见于血清病、日本血吸虫病等,嗜异性实验,C-Reactive Protein,C-Reactive Protein C反应蛋白 作为体外辅助评价人体损伤程度的标志 。C反应蛋白主要由肝脏合成, 释放入血，在急性时相炎症反应时急剧升高 炎症反应以及其他病理过程如 冠脉疾病、 中风、心脏病发作等， CRP可以升高至正常时候的 2000 倍 CRP 也是心血管病的良好的预后指标,C-Reactive Protein (CRP) Test,1) 检测原理 CRP + Ab 凝集反应 或者 ELISA 或者 免疫浊度分析,Agglomeration,3) 参考值范围 ： 凝集试验 ： 阴

36、性（不凝集） ELISA 或免疫浊度分析 : 8mg/L,C-Reactive Protein (CRP) Test,4) 临床意义： CRP是急性时相反应蛋白，是极灵敏的指标。 CRP增高：化脓性感染、组织坏死、恶性肿瘤、器官移植急性排斥期等； 鉴别作用： 细菌性与非细菌性感染 细菌性感染 CRP：增高 非细菌性感染 CRP：不增高 器质性与功能性疾病 器质性性疾病 CRP：增高 功能性疾病 CRP：不增高 风湿热活动期与稳定期 风湿热活动期 CRP：增高 风湿热稳定期 CRP：不增高,C-Reactive Protein (CRP) Test,特异性IgE检测,过敏原特异性IgE的检测可以于体外确定导致I型超敏反应发生的变应原，进而指导脱敏治疗 常用检测方法为酶联化学发光免疫检测，多种过敏原一起检测，精度高，重复性好 临床意义： 增高时有助于确认过敏原，对过敏引起的疾病如过敏性哮喘、过敏性紫癜、过敏性休克、荨麻疹、食物过敏、药物过敏等疾病的诊断与鉴别诊断有极其重要的意义,梅毒螺旋体抗体检测,1) 检测原理 利用特异致敏粒子与病人血清中梅毒螺旋体抗体反应进行检测。即检测非特异性抗体(反应素)试验，主要抗原用心磷脂、磷脂酰胆碱和胆固醇的混悬液，检测抗心磷脂抗体 方法： Ag + Ab 胶乳凝集试验,2) 方法 (类似于 AS