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文档简介

1、设计性实验,丹参对垂体后叶素致兔心肌缺血的保护作用,【实验目的】,12/5/2020,free teamplate from ,2,学习用垂体后叶素造成急性心肌缺血的实验方法,观察药物抗心肌缺血的作用。,【实验原理】,12/5/2020,free teamplate from ,3,垂体后叶素可使全身血管(包括冠状血管)收缩,静脉注射后使动物产生急性心肌缺血状态,出现心室肌静息张力的增加和发展张力的下降,以及心电图ST段及T波的变化,可作为冠状动脉痉挛,急性发作的心绞痛模型。 垂体后叶素的注射剂量不同可引起不同程度的障碍,剂量不大时,可迅速恢复,因此可反复在同一动物身上进行多次实验。,【材料与

2、方法】,12/5/2020,free teamplate from ,4,一、实验动物:家兔1只 二、器材与药品:10ml注射器, 1ml注射器,手术台,婴儿秤, MedLab生物信号采集分析系统。垂体后叶素注射液,20氨基甲酸乙酯,丹参注射液,生理盐水。,三、方法与步骤:,12/5/2020,free teamplate from ,5,取家兔一只,称重,用25%乌拉坦溶液,按1g/kg(4ml/kg)静脉注射麻醉,麻醉后将兔背位固定于手术台上。 正中切口颈部皮肤,分离右侧颈总动脉,远心端结扎,并在近心端夹上动脉夹,以阻断血流,用虹膜剪作“V”形切口,将连于压力换能器的已充满肝素生理盐水的心

3、导管向心脏方向插入颈总动脉内,移去动脉夹,观察屏幕显示先出现血压波形,继续将导管插向左室腔。,当波形由血压波变成下沿达0mmHg附近具有明显舒张期而峰顶平坦的波形时,即表明导管口已通过主动脉瓣进入左室腔内,再送入导管约0.20.4cm,若还保持同样波形则可把心导管结扎固定。,将心电输入线的三个针形电报分别插入右前肢及右、左后肢皮下,记录II导联心电(或采用头胸导联) 。 MedLab生物信号采集处理仪参数设置: 记录方式:连续记录; 存盘方式:连续存盘; 第1通道: AC输入,放大倍数1000; 第2通道: DC输入,放大倍数200; 采样速率:1ms。,12/5/2020,free team

4、plate from ,8,将头皮针连接在已注满生理盐水的10ml注射器上,然后用头皮针头刺入耳缘静脉中,并用木夹或胶布固定。连续记录正常心室内压、心电。 (左室内压峰值:LVSP,mmHg。由心室压基线到曲线顶峰高度;左室舒张末压:LVEDP,mmHg。心室舒张末或收缩初室内压转折点到基线高度;左室内压正负变化速率最大值:dp/dtmax,mmHg/s。),LVSP,LVEDP,制作心肌缺血 由耳缘静脉注射垂体后叶素1.5U/kg(用生理盐水稀释到3ml),30秒注射完毕。并立即于注射后20s、40s、1min、2min、5min、10min、20min、30min,分别记录心功能参数及心电

5、图的变化,特别注意观察心率、ST段、T波的变化。,待心功能参数及心电图恢复正常后,由耳缘静脉注射解救药物丹参注射液2.5ml/kg,15min后再给同量的垂体后叶素,观察上述同样时间内心功能参数及心电图的变化。,【实验结果】,12/5/2020,11,实验结果以曲线表示,对已记录的实验结果进行回放重显、剪辑,对给药前后的波形进行测量 以表格形式记录实验原始数据 综合全实验室的实验数据结果进行统计处理,药物对垂体后叶素所致兔心肌缺血的对抗作用,【注意事项】,12/5/2020,free teamplate from ,13,ST段上移多发生在注射垂体后叶素后,立即至1.5min内,5min内恢复

6、;T波升高常在注射后立即至45s之间,25min至1小时,恢复正常。,参考文献:,1.苗戎, 陈静, 韩力军, 张莉. 复方丹参注射液对急性实验性心肌缺血左室舒张功能的影响J. 天津中医 , 1998,(03) 2. 苗戎,陈静,高岚. 复方丹参注射液对心肌缺血左室dp/dTmin的影响J. 现代中西医结合杂志 , 1998,(07) 3. 魏砚明, 欧阳五庆, 张黎, 王俊, 申进宝. 玉米幼芽提取物对垂体后叶素致家兔心肌缺血的保护作用J. 安徽农业科学 , 2007,(07),附:配对样本均数的t检验,所谓配对样本(paired sample)是指两个样本中的观察对象由于存在某种联系或具有

7、某些相近的重要特征而结成对子(matching),每对中的两个个体随机分配接受两种不同的处理。,主要有三种情况,医学研究中常见的配对样本: 配成对子的两个个体分别给予两种不同的处理(如把同窝、同性别和体重相近的动物配成一对;把同性别、同病情和年龄相近的病人配成一对等); 同一个体同时分别接受两种不同处理(如同一动物的左右两侧神经、同一份标本分成两部分); 同一个体自身前后的比较(如高血压患者治疗前后的舒张压比较、肝炎患者治疗前后的转氨酶比较等)。,对于配对样本数据,应该首先计算出各对差值的均数。当两种处理结果无差别或某种处理不起作用时,理论上差值的总体均数应该为0,故可将配对样本资料的假设检验

8、视为样本均数与总体均数=0的比较,所用方法为配对t检验(paired t-test),公式:,12/5/2020,18,其中,Sd为差值d的标准差,例:用简便法和常规法分别对12份人尿进行尿铅含量测定,所得结果如表10-1。问根据现有资料能否说明两种方法检测结果不同?,利用Excel进行医学统计t检验分析,单击“工具”菜单中的“数据分析”命令可以浏览已有的分析工具。如果在“工具”菜单上没有“数据分析”命令,应在“工具”菜单上运行“加载宏”命令,在“加载宏”对话框中选择“分析工具库”。 在进行两个样本均值相等假设分析时,可使用t-检验分析,根据情况选择:成对双样本均值分析、双样本等方差假设分析和

9、双样本异方差假设分析。,12/5/2020,22,成对双样本均值的t-检验分析:,当样本中的观察值存在配对关系时,可以使用“成对双样本t-检验”。例如对一个样本组在实验前后进行了两次检测,为确定实验前后样本均值是否相等,应使用成对t检验。,12/5/2020,23,12/5/2020,24,12/5/2020,25,数据录入:,数据分析,分析时,在“工具”菜单中,单击“数据分析”命令。在数据分析对话框中,选择t-检验:成对双样本均值分析,拉出成对双样本均值分析对话框,12/5/2020,26,选择输入项:,12/5/2020,27,其中有如下输入项:,变量1的区域:输入需要分析的第一个数据区域

10、的单元格引用。该区域必须由单列或单行数据组成。可单击输入框右面的按钮,回到电子表格上自数据开始的单元格向结尾的单元格拖动。此时变量1的区域(A1.K1)自动进入输入域中。然后单击输入域右面的按钮,回到原对话框。,12/5/2020,28,其中有如下输入项:,变量2的区域:输入需要分析的第二个数据区域的单元格引用。该区域必须由单列或单行的数据组成。输入方法同前。变量2的区域为(A2.K2)。,12/5/2020,29,假设平均差:在此输入期望中的样本均值的差值。缺省为0值,即假设样本均值相同。 标志:如果输入区域的第一行或第一列中包含有标志项,应选中此项:如果输入区域没有标志项,Excel将在输出表中生成适宜的数据标志。这里选中此项。 Alpha():在此输入检验的统计意义水平。该值范围为01之间。缺省为005。,12/5/2020,30,输出区域信息可选择如下单选项:,输出区域:在此输入对输出表左上角单元格的引用。Excel会自动确定输出区域的大小并显示信息。可单击输入框右面的按钮,回到电子表格上,单击输出开始的单元格(如A3),然

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