药物分析实验：实验四药物中特殊杂质的检查VIP

1、1,实验三 药物中特殊杂质的检查,徐新军 中山大学药物分析教研室 E-mail: TEL1,1、干燥失重,恒重：供试品连续两次干燥或炽灼后称重的差异在0。3mg以下即达恒重，干燥至恒重的第二次及以后各次称重均应在规定条件下继续干燥1h后进行。 第一次称重：12.0982g； 第二次称重：12.0985g； 样品：1.0534g; 第三次称重: 13.0538g; 第四次称重:13.0536g; 计算: 干燥失重%=(12.0982+1.0534)-13.0536/1.0534x100%=,读数：最小刻度0.05，供试品旋光度减空白 计算: =a/LC=a/(2xM/1

2、00)/(1-干燥失重%)= 右旋，以“+”表示，读取三次以上，取平均值。,2 比旋度,3 葡萄糖注射液含量测定,精密量取本品适量(约相当于葡萄糖10g),至100ml量瓶中. 药典规定葡萄糖含量应为标示量的95.0-105.0% 计算: =a/LC C= a/(Xl)=a/(52.75xl) 相当标示量%=100 x198/180 xa/(52.75xl)=2.0853a/l,4、关于结论,蛋白质：未有沉淀产生。 铁盐： 澄清，如显色，与对照溶液比较，不得更深。,6,一、目的要求,掌握本实验中药物特殊杂质的来源、检查方法和原理。,1,掌握特殊杂质检查的操作方法及杂质限量计算；,2,3,4,5

3、,1,7,二、实验原理,取本品0.10g ，加乙醇1ml 溶解后，加冷水适量使成50ml，立即加新制的稀硫酸铁铵溶液取盐酸溶液(9100)1ml ，加硫酸铁铵指示液2ml 后，再加水适量使成 100ml1ml ，摇匀；30秒钟内如显色，与对照液（精密称取水杨酸0.1g，加水溶解后，加冰醋酸1ml ，摇匀，再加水使成1000ml，摇匀，精密量取1ml ，加乙醇1ml 、水48ml与上述新制的稀硫酸铁铵溶液1ml ，摇匀）比较，不得更深(0.1) 。,限度=0.1/1000/0.1X100%=0.1%,氢化可的松中其它甾体的检查,1、进样或点样溶液浓度太低,98.6%,TLC检查其他甾体特点： （

4、1）简便易行，不需特殊的仪器； （2）不需对照品； （3）只能控制单个杂质的限量； （4）要求杂质与主成分的显色灵敏度接近。,氢化可的松,碱性四氮唑蓝试液 皮质激素C17-a-醇酮基具有还原性,在强碱溶液中能将四氮唑蓝定量地还原为甲瓒,取本品加氯仿-甲醇（9 ：1）制成3.0mg/ml作为供试液，精密量取适量，加氯仿-甲醇（9 ：1）稀释成0.06mg/ml作为对照液；照薄层色谱法，各取5l，分别点于同一硅胶G板上，以 为展开剂，展开后晾干，在105干燥10分钟，放冷，喷以碱性四氮唑蓝试液，立即检视，供试品溶液如显杂质斑点，不得多于3个，其颜色与对照液的主斑点比较，不得更深。,1,2,控制的总

5、杂质限量是多少?,2010年版-氢化可的松有关物质,【检查】有关物质 取本品，精密称定，用甲醇溶解并稀释制成每l m l 中约含氢化可的松0. 5mg的溶液，作为供试 品溶液；精密量取1ml，置100ml量瓶中，用甲醇稀释至刻 度，摇匀，作为对照溶液；另取泼尼松龙对照品，精密称定，加 流动相溶解并定量稀释制成每l m l 中约含5ug的溶液， 作为 对照品溶液。照含量测定项下的色谱条件，取对照溶液20uL注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，1使主成分峰高约为满量程的30%。再精密量取供试品溶液、对照溶液与对照品溶液各20uL，分别注入液相色谱仪，2记录色谱图至供试品溶液主成分峰保留时间的3倍，供试

6、品中如有与对照品溶液色谱图中泼尼松龙峰保留时间一致的 峰，3按外标法以峰面积计箅，4不得过0.5%;5其他单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积的0. 5倍（0. 5%),6各 杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的1.5倍。7供试品溶液色谱图中任何小于对照溶液主峰面积0.01倍的 峰可忽略不计。,HPLC法(主成分自身对照法）,判定方法： 规定杂质峰数目 规定杂质峰面积,2、系统适应性差 环维黄样星D (TLC)： 其他生物碱检查薄层色谱系统适用性差,无法分出环维黄杨星D中杂质; 由于点样量低,无法控制环维黄杨星D中杂质; 含量测定方法由于专属性差,难于控制样品中环维黄杨星D的实际含量。Gymnastone（HPLC）:,流动相：超纯水-乙腈(60:40,V/V)；检测器：PDA检测器，检测波长275nm。,30%70%（030 min）,70%（3050 min）,5-羟甲基糠醛,精密量取本品适量