生物化学与分子生物学实验：绪论

1、生物化学与分子生物学实验,一、课程简介,课程设置 独立设课（必修），共72学时、2学分 课程目的 加深理解生物化学和分子生物学的理论知识； 培养良好的实验习惯和动手操作能力； 了解学科发展前沿技术 成绩计算 平时成绩60%，操作考核20%，理论考核20%,13级成绩统计,成绩具体计算方法,平时成绩：考勤10%，操作10%，实验报告40% 平时考勤：迟到早退每次扣1分，缺课一次扣5分。 平时操作：实行减分制(操作的规范，实验的态度，社会公德，实验失误等)。 实验报告：预习报告、实验记录的情况，能否对出现的问题提出合理的解析及提出解决方案，能否查阅资料后对实验原理、应用及操作步骤等各方面的发散性思

2、考等，书写用语是否规范，实验报告的格式，思考题、实验结果等。 操作考核：香菇多糖的制备与含量测定,内容设置特点,涵盖生物化学与分子生物学专业实验的主要基本操作单元：电泳、离心、柱层析、微量操作、紫外检测等 “药学基本实验技能测评”（2016年）-“生物学模块”的组成部分：水平电泳、垂直电泳、微量液体移取与配制、划平板、标准曲线绘制 单人操作，强调实验操作的规范化培训 设置经典及目前主流实验技术，前沿进展在教材及讲课过程中穿插教学,教学内容,两组串联实验-1,两组串联实验-2,15个基本单元操作,教学改革-单人操作,教学改革-单人操作,教学改革-单人操作,志愿者职责 - 协助研究生助教进行下次实

3、验所需的试剂配制等准备工作；- 协助研究生助教完成本次实验的部分后续处理。工作时间：每周根据报名志愿者的课程时间进行安排征集方式 每周上课时公布本周志愿者具体工作内容，感兴趣的同学到教辅老师处报名，人数控制在3-4人/周，先到先得。,教学改革-实验志愿者,第一次实验需征集3-5名志愿者 工作时间：10月10日（课后报名）,二、实验基本知识,什么是生物化学实验？ 人们根据研究的目的，利用科学仪器设备对组成生命物质的成分，通过分离纯化，制备成分子水平的物质并对其结构组成成分及生物活性进行测定的科学。 生化实验思维？ - 选择实验课题的思维能力 - 实验设计思维能力 - 数据处理思维能力,生化实验数

4、据的处理方法 列表法 解析法 作图法 - 正确处理坐标 - 合理选择坐标原点，恰当选择单位 - 准确地描绘图线（选择恰当的绘图软件及合理的拟合方程） - 正确解释图线的代表意义 - 运用内插法和外推法探索生化规律,标准曲线的绘制,图表标题,Y轴标题、坐标及单位,X轴标题、坐标及单位,清晰标记原始数据点,拟合方程及R2值,首要原则：避免自己被污染；同时避免自己污染样品。 防火：灭火器放置地点及使用方法。 腐蚀：注意防护，药箱。 毒性：注意防护。 生物安全：注意防护。 环保：试剂不能随便倒，倒入废液缸。,三、实验室安全,不在实验室内进食，水杯等餐具不要带入实验室。 上课要穿实验服，量取药品需作保护

5、。 重做需征得老师同意，临时调组要出示学院开具的证明。 完成实验后，将原始数据登记到实验室指定电脑内，经教师(或助教)检查同意，方可离开实验室。 公用试剂用毕，应立即盖严(配套滴管)放回原处。勿用身体直接接触药品。 使用仪器需按照教师指引进行，不得擅自使用未经教师批准使用的仪器。 不得穿露趾拖鞋进入实验室；不得披头散发进入实验室。,特别注意！,四、实验室主要仪器简介及微量移液器的使用,T6型紫外分光光度计,原理及注意事项见教案 需熟练掌握操作要点,离心机,需熟练掌握操作要点： 使用前严格配平； 转速不能超过指定范围； 离心力和离心转速之间的换算,垂直电泳设备,原理及注意事项见教案 需熟练掌握操

6、作要点（基本技能考核项目）,水平电泳设备,原理及注意事项见教案 需熟练掌握操作要点（基本技能考核项目）,层析装置,原理及注意事项见教案 需熟练掌握操作要点,PCR仪,原理及注意事项见教案 需熟练掌握PCR反应液的配制 需了解PCR技术的发展,酶标仪,原理及注意事项见教案 需熟练掌握操作要点 考核实验的单元操作之一,其他仪器,需了解其主要用途和操作方法,磁力搅拌器,天平,万向摇床,微量移液器的使用,用于移取液体样品的工具有移液管、滴管、微量移液器、注射器等，而辅助移液的工具则有洗耳球、电动辅助洗液器等。 微量移液器（俗称“移液枪”或“枪”）是一种取样量连续可调的精密取液仪器，基本原理是通过弹簧的

7、伸缩运动来实现吸液和放液。 大龙，Thermo 量程：1000，200，20，1 L,设定移液体积：旋转移液器活塞按钮进行体积调节，从数字视窗直接读数确定。,微量移液器的使用步骤-1,注意： 1、根据待量取体积和移液器量程选择适合的移液器； 2、严禁超出量程范围使用； 3、在尽可能减少操作的情况下，选择体积位于量程范围中断的移液器； 4、数字视窗所见即所得（单位为L）,装配移液吸头（tips）：将移液器末端垂直插入吸头，轻压上紧。,微量移液器的使用步骤-2,注意： 1、未装配吸头的移液器不可直接用于液体吸取； 2、不同量程的移液器对应不同颜色的枪头，不可混用（1000-蓝色，200/20-黄色

8、，10/1-白色）； 3、用移液器反复撞击吸头来上紧的方法是非常不可取的。,吸液（正向吸液）：将移液器按钮按到第一档，将吸头垂直进入液面3 mm以下，慢慢释放按钮以使液体进入吸头，吸液结束后在液面下停留1-2 s再将移液器移出。,微量移液器的使用步骤-3,放液：将吸头尖端靠在容器内壁，按下第二档将所有液体完全排出。,微量移液器的使用步骤-4,退枪头：使用完毕的枪头需丢弃于废液缸内，将枪头悬空置于废液缸上，按下管口推出器即可。,微量移液器的使用步骤-5,注意： 1、应确保使用的是洁净、无污染的枪头； 2、若枪头在使用过程中被污染，应及时更换枪头； 3、吸取同一种液体于不同离心管时，可不更换枪头，

9、但要确保枪头不会被离心管内原有的其他液体污染。,微量移液器使用注意事项,五、实验报告的书写,题目 预习思考题 （拟）操作步骤 实验材料 操作步骤及实验记录 实验结果记录与处理 实验讨论 思考题,预习报告,签到时检查；课上讲答案；批改实验报告时同时给分。操作步骤和实验材料在预习的时候先写好（预留现象记录位置）,实时如实记录；若实验过程中操作步骤及材料有修改或具体操作时间，应及时记录，不要事后补记！,今年教材中新增“结果记录与处理”部分，强调结果的完整记录和数据的规范处理过程。,5. 实验结果 包括实验结果图或对实验结果进行的计算、分析和原理解释。涉及到实验结果计算的必须详细列明计算过程，所有的实

10、验结果图必须注明使用的软件及拟合时的参数设置。电子版的结果图需不改变原始比例和组成，打印大小不超过1010cm，且电子版原图需发给老师备查。 6. 实验讨论 内容不限，主要可包括对实验过程中出现问题的思考，对实验的看法，有什么可以改进的地方，对实验失败，操作失误，实验异常现象的解析和总结，通过查阅资料后对实验原理、应用及操作步骤等各方面的发散性思考，对实验的一些操作的创新性意见的提出和改进等等。实验讨论 注意事项思考题。 7. 思考题 根据教材上的思考题进行回答，要抄题。,其他注意事项 实验报告禁止使用涂改液、橡皮甚至粘贴的方式进行修改，禁止撕毁实验报告中的某页。 应注明实验日期和实验同组人员。 要求进行现象描述及解释的实验内容最好以表格形式进行记录，每一步应准确、客观及具体的描述实验现象，并作出相应的解释。特别要注意，涉及到教案上没有明确规定反应时间的，必须在实验报告中记录实际使用的精确反应时间。 实验报告所用语言应尽量科学客观。,分班说明