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文档简介
1、课题1 菊花的组织培养,通过必修课的学习,我们已经了解到大多绿色开花植物都是靠种子来繁殖的。那么,有没有不用种子来培育植物的方法呢,植物组织培养是在人工培养基上,离体培养植物的器官、组织、细胞和原生质体,并使其生长、增殖、分化以及再生植株的技术,1.熟悉植物组织培养的基本过程; 2.理解细胞分化的概念及离体植物细胞的脱分化和再分化; 3.通过联系农业生产实际,培养学生活学活用,理论联系实际的能力,植物组织培养概念:在无菌和人工控制条件下,将离体的植物器官、组织、细胞,培养在人工配置的培养基上,给予适宜的培养条件,诱导其产生愈伤组织、丛芽,最终形成完整的植株,又称:植物离体培养,一)植物组织培养
2、的基本过程,植物组织培养的基本过程,外植体,愈伤组织,芽、根,植物体,植物组织,愈伤组织,长出丛芽,生根,移栽成活,将来自已分化组织的已停止分裂的细胞从植物体部分的抑制性影响下解脱出来,恢复细胞的分裂活性,脱分化,经脱分化的组织或细胞在一定的培养条件下可有转变为各种不同细胞类型的能力,再分化,植物细胞全能性的表达,2.培养基的配制(MS培养基) 大量元素、微量元素、有机物、植物激素(生长素、细胞分裂素,二)影响植物组织培养的因素,1.外植体的选取 不同植物的组织培养难度 同一种植物的不同组织培养难度( 材料的年龄、保存时间,a、植物激素使用顺序对分化的影响,b、植物激素使用量对分化的影响,促根
3、分化,抑芽形成,促芽分化,抑根形成,促进愈伤组织生长,4. 消毒 在培养的整个过程中,都需要是一个无菌环境,3. 环境条件 pH、温度、光照等条件也很重要,一)制备MS固体培养基,MS培养基包括20多种营养成分,实验室一般使用4保存配制好的培养基母液来制备,1、配制各种母液,无机物中大量元素浓缩10倍,微量元素浓缩100倍,常温保存,激素类、维生素类以及用量较小的有机物一般可按1mg/ml的质量浓度单独配制成母液,用母液配制培养基时,需要根据各种母液的浓缩倍数,计算用量,2、配制培养基,配制培养液,调PH,培养基的分装,3、灭菌,分装好的培养基连同其他器械一起进行高压蒸汽灭菌,1、选材:菊花茎
4、段,取生长旺盛的嫩枝,二)外植体消毒,2、消毒,流水冲洗,酒精处理,消毒液处理,三)接种,污染的主要来源是空气中的细菌和孢子,接种室消毒是至关重要的。用70的酒精喷雾使空气消毒,酒精或新洁尔灭搽洗工作台并用紫外线照射20分钟,1、接种室消毒,2、无菌操作要求,操作要在酒精灯火焰旁完成,每次使用器械后,都需要用火焰灼烧灭菌,接种后立即盖好瓶盖,3、材料的切取和接种,四)培养,接种后的锥形瓶最好放在无菌箱中培养,培养期间应定期消毒 培养温度控制在18-22 每日用日光灯光照12h,五)移栽,移栽生根的菊花试管苗之前,应先打开培养瓶的封口膜,让试管苗在培养间生长几日,1、打开封口膜,2、清洗转移,用
5、流水清洗根部的培养基,将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境下生活一段时间,3、移栽,幼苗长壮后,移栽到土壤中,六)栽培,幼苗移栽后,每天观察并记录幼苗的生长情况,适时浇水、施肥,直至开花,1、培养基的灭菌(高压蒸汽灭菌) 2、外植体的消毒(酒精、氯化汞) 3、接种的无菌操作(酒精、酒精灯灼烧) 4、无菌箱中的培养; 5、移栽到消过毒的环境中生存一段时间,在整个操作过程中,是如何来实现无菌环境的,本课题内容小结,菊花组织培养,基础知识,实验操作,植物体的组织培养,影响组织培养的因素,细胞分化 细胞全能性 组织培养过程,营养 激素 环境条件,MS固体培养基制备 外植体消毒 接种 培养 移栽 栽培
6、,1.下列关于愈伤组织的说法中不正确的是( ) A.愈伤组织的细胞能够进行细胞分裂 B.用叶培养形成的愈伤组织细胞能够进行光合作用 C.培养愈伤组织的培养基中应含有有机养料 D.人们可以从愈伤组织中提取所需物质,B,2.植物组织培养过程中的脱分化是指( ) A.植物体的分生组织通过细胞分裂产生新细胞 B.未成熟的种子经过处理培育出幼苗的过程 C.植物的器官、组织或细胞,通过离体培养产生愈伤组织的过程 D.取植物的枝芽培育成一株新植物的过程,C,D,3.胡萝卜的韧皮部细胞通过组织培养,能发育成新的植株。下列有关的叙述中,不正确的是( ) A说明高度分化的植物细胞具有全能性 B植物细胞的全能性得以表达要离开母体 C新植株的形成是细胞分裂和分化的结果 D高度分化的动物细胞也具有全能,4.植物细
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