免疫学实验教学课件ppt

1、免 疫 学 实 验 任课教师： 杨晓燕 tel： 68485813(o) e mail： ,免疫学试验注意事项,1、必须穿白大衣进实验室,2、实验中注意实验室秩序，禁止喧哗打闹,3、爱惜实验器材，如发生损坏应及时报告,4、节约实验药品,5、实验结束后，要回收的玻璃器材如载玻片等，放于指定容器内；废品弃于垃圾袋内，严禁丢弃在水槽中,6、实验完毕，清理桌面，班长安排清洁，老师检查后，做清洁同学方可离开,试验报告书写格式,1、试验主要步聚,2、试验结果,3、结论,4、讨论,试 验 题 目,血清学反应,即体外进行的ag-ab反应，由于抗体主要存在于血清中，故又称血清学反应,特点,1)高度特异性,2)分

2、子表面的可逆性结合,3)ag、ab比例合适才会出现肉眼可见的反应,肉眼可见的凝集物,影响条件,1、电解质：0.85% nacl等,2、酸碱度：ph69,3、温度：370c,ag-ab反应种类,1、凝集反应,2、沉淀反应,3、补体结合反应,4、中和反应,5、免疫标记技术,实验一 凝集实验,一、实验内容,1、直接凝集实验(玻片法)血型鉴定,每人做,2、间接凝集实验类风湿因子检测,小组做,二、目的要求,1、掌握血清学反应概念、特点、影响条件 及类型,2、了解凝集反应的原理、类型及其用途,3、熟悉常用凝集反应的实验方法及结果判定,凝集反应,颗粒性抗原(细菌、细胞等)与相应抗体在适当的条件下发生特异性结

3、合反应，出现肉眼可见的凝集物，称为凝集反应,颗粒性ag凝集原； 相应ab凝集素,颗粒性抗原,光镜下可见，肉眼观呈混浊悬液，如细菌、rbc等,可溶性抗原,光镜下不可见，肉眼观呈澄清透明，如蛋白质、多糖抗原等,凝集反应,沉淀反应,凝集反应类型,直接凝集反应,间接凝集反应,1、直接凝集反应,1)玻片法,2)试管法,已知ab,测ag，为定性实验,已知ag,测ab，为定量实验,用途：鉴定菌种、菌种分型、血型检查,用途：诊断肠热症(widal reaction,诊断布氏菌病(wright reaction,2、间接凝集反应 (1)间接凝集试验 已知可溶性ag包被载体,检测未知ab。 例如：间接乳胶凝集试验

4、检测类风湿因子等,2)反向间接凝集试验 已知ab包被载体,检测未知可溶性ag 例如：某些传染病和原发性肝癌的早期诊断验,3）间接凝集抑制试验 例如：妊娠试验,4）协同凝集试验,用于检测传染病早期血液及分泌液中的微量ag,三、试验内容,一)血型鉴定(每人作,abo血型,1、材料,已知ab:标准血清：抗a和抗b血清,待测ag:rbc血型抗原,2、方法,1)取血(无名指尖或耳垂)制备2-5%rbc悬液,2)加血清各1滴,3)加rbc各1滴,4)牙签搅和混匀,5)结果判断(10-15min后,a凝集、b不凝集a型血,a不凝集、b凝集b型血,a凝集、b凝集ab型血,a不凝集、b不凝集o型血,在白背景上观察,(rbc凝集,(rbc不凝集,4、注意事项,1) rbc悬液浓度 2-5,2) 牙签搅拌混匀时，不能使抗a和抗b血 清混合,3)在白色背景上观察效果好,二)类风湿因子检测,ag: 变性igg ab: 抗变性igg(类风湿因子,间接乳胶凝集试验,方法,a、取