现场样品采集

1、 现场样品的采集、保存和运输保存在现场调查中，很重要的一项工作是现场样品的采集、和运输。正确采集、妥善保存、和尽快送检样品，以及随后对样 品检测结果进行正确的判读和分析。 一、样品采集的目的、作用和原则一是查明突发公共卫生现场调查的目的主要可分为两大类：尽二是进行卫生质量监测和评价。事件或疾病暴发流行的原因，采样具有其特殊性，检测对象和样品种类不同，管根据调查目的、 但应该遵循如下总原则： 标本和环境的注意生物安全：采样中避免造成人员感染、1.污染。采用防护装备，注意安全操作和安全包装样品。需要采取的具体措施包括如下两方面：个人防护：采样时要戴手套，接并注意手触不同患者时不能重复使用一副手套，

2、以免交叉感染，根据所估计的疫情采样中尽可能穿防护服，套是否有小的破损；采样后消毒要穿戴防护服和厚橡胶手选择不同的防护服；级别，如怀疑有高度传染力的病对污染区表面和溢出物进行消毒；套，原，需使用护目镜、呼吸面罩等；为了防止意外，确保安全，采恰当处理污染废弃样应备有急救包，供意外泄露时应急使用。用过的针头妥善污染的可废弃设备和材料应先消毒后废弃；物：收集消毒，并按规定销毁或损毁；在暴发疫点使用过的防护服、特殊情况也可在现材料等使用化学消毒剂消毒后再清洗，设备、 场建简易焚烧炉焚烧。1 / 14 以卫生质量评价为目的的样注意采样的代表性或针对性：2.品采集，影响采样代表性的因素包括采样量、采样部位、

3、采样时间、采样的随机性和均匀性，以及按批号抽样。同时还应考虑原料情况（来源、种类、地区、季节等）、加工方法、运输、保藏条件、销售中的各个环节（例如有无防蝇、防污染、防蟑螂及防及销售人员的责任心和卫生认识水平等对样品可能的鼠等设备）以查明突发公共卫生事件或疾病暴发流行的原因为目的的影响。样品采集，不要求样品的代表性，强调针对性，尽可能采集病原根据疾病表现和流微生物含量最多的部位和足够检测用的样本； 行病学调查资料，指导采集正确的样品。一般原则是根据不同疾病的特点和3.注意采样时间和种类：临床表现，确定采样时间和标本种类。以分离培养细菌为目的，如果已使用则应尽量在急性发病期和使用抗生素之前采集标本

4、，（中和样品中残采样和分离培养最好加入相应的中和剂抗生素，避免抗菌药物对细菌培养的干或进行其他处理，存的抑菌物质）应在发病初期和急性期作病毒分离和病毒抗原检测的标本，扰。天内采取，此时病毒在体内大量繁殖，2采样，最好在发病1 检出率高。所4.注意避免采样引入新的污染或者对微生物的杀灭因子：有采样用具、容器需严格灭菌，并以无菌操作采样。对容器基本能承受空中或要求是选耐用材料制成，容器包装好后可防渗漏，2 / 14 应地面运送过程中可能发生的温度和压力变化。对微生物样品，如容器是避免采样时对微生物的杀灭作用和引入新的抑菌物质，并注意保否有消毒剂的残留，或使用刚烧灼未冷却的采样工具。 护目的微生物，

5、注意使用正确的采样液和加入中和剂。应标注意对样品的详细标记：用于卫生质量评价的样品， 5.明样品名称、编号、采样时间、采样量、采样者、检测项目等。 二、样品采集的方法和注意事项 主要用于用于微生物分离培养或抗原检测的生物性样品：1. 查明突发公共卫生事件或疾病暴发流行的原因。）咽拭子、洗漱液或痰液标本：咽拭子的采集：让患1（者仰头张口，用压舌板压舌，用无菌棉拭子在咽部涂抹数次后，棉拭子接触手的部分应及时折断或液的试管中，放入含2mlHank剪断去掉，然后盖紧试管。洗漱液的采集：用生理盐水或自配作为洗漱液，让患者咳嗽后，倒入灭菌生理盐水淡盐水约15ml分钟，直接将洗漱液吐1，反复洗漱咽部或自配淡

6、盐水约15ml入灭菌容器内。痰液标本：肺部感染应采取痰标本，以清晨第最迟采取标本的时间一般在发病的第一日采集，一口痰为最佳。 38以上时采集。3不得超过日，最好选择体温在）粪便标本：对黏液脓血便应挑取黏液或脓血部分，液2 （；成形粪便至状粪便采集水样便或含絮状物的液状粪便25ml3 / 14 ）放于灭菌容器内，最好加有保5g少取蚕豆大小粪便1块（约可用保存液或增菌液湿润过若无法获得粪便时，存液或增菌液。）轻轻转动一圈，3cm深处（小儿2的棉拭子插入肛门45cm为盛入运送培养基或保存液中送检，取直肠表面的黏液后取出，采样支肛拭。同一患者应至少采集2保证多个检验项目的开展，采样后尽快塞紧或旋紧时注

7、意勿将尿液或水混入粪便或容器内，小时，2所采取的粪便标本应尽快送检，运送时间不得超过容器，条件下送检；集体腹泻或食源性疾病暴发8否则应保存在4尽量在急患者粪便采集，应根据患者人数决定采取标本的数量； 性腹泻期及用药前采集。）血液标本：作血液病原培养时，严格无菌采静脉血，（3 ，放入无2ml0.55ml15ml，儿童2，婴儿一般成人采血10暗视野作血片、菌的加入抗凝剂的有螺口容器或培养瓶中送检。 检查可采耳垂血或指尖血。）尿液标本：主要采用中段尿采集法，先用肥皂水清洗（4 20ml外阴部，再以无菌水洗净，一般取首次晨尿的中段尿102于无菌容器内。结核分枝杆菌集菌检查时，以一清洁容器留取送检。注意

8、无菌操作并在用药前采15ml104小时尿，取沉渣条件8小时内送到实验室检测，否则应在集，最好在234 下保存运送样品。4 / 14 ，放于5ml3 （5）脑脊液：在无菌条件下由腰椎穿刺抽取 无菌试管或厌氧瓶内（需厌氧培养时）。用于细菌培养时标本采小时，最多可维持48用于病毒培养时在48集后应立即送检；保存；本操作最好在医院内由有经验的医生按腰否则需在-70 椎穿刺术进行。）皮肤标本：有时需要采集皮疹或皮肤病变标本帮助诊6 （焦痂和腹股如怀疑皮肤炭疽或淋巴腺鼠疫时可从病变皮肤断。出现囊疱疹或脓疱疹时可直接从取样做细菌学培养。沟淋巴结）采集疱疹标本时要注意无囊疱或脓疱采集液体用于镜检或培养。 菌操

9、作，刺破疱囊后用无菌拭子尽量拭抹足够量的疱疹内液体。）尸体标本：进行解剖和取样。解剖前观察并记录外观（7 状态，如新鲜程度、皮肤粘膜、淋巴结、尸僵程度和自然孔有无淋巴结、胶样水肿，剖开后应观察皮下有无出血，血性渗出物等。肝、脾是否大和有无其他病变，肺部有无充血，肝样实变、化脓采脑组织样本如需要采血则需进行心脏穿刺。和结节性病灶等。时，如不开颅，可用穿刺长针由鼻孔插入，一直刺到脑干和间脑可采取丘脑和小脑部位吸出脑组织少许。剖检森林脑炎尸体时，如取脏器组织，部分，其他型别脑炎可采海马回部位的脑组织块。清除瞬时烙焦表面，先用灼热的金属压舌板接触一下采样部位，小5用剪刀剪取深部组织块。杂菌，供分离病毒

10、的组织要在死后时内取样。尸体如已腐烂，可锯一段带骨髓的股骨送检。至少取5 / 14 感染部位标本，放入单独的装有相应液体或培养基的无菌2g1容器中（注意贴牢标签和拧紧螺口），这些液体如：用于组织病用于制备免疫荧光显微技术所需的冷冻切片理学切片的固定液，装用于分离细菌或病毒所需的各种转运培养基。的无菌盐溶液，为了避免尸体表面用碘酒涂擦消毒后送检。样本的容器封口后，不能火化解剖后尸体最好火化；和解剖时的污染物成为传染源，以上土坑，坑内和尸2m则应离村庄和交通要道1Km以外，深挖体周围撒生石灰，先填入可能被污染的土，后用净土填平；所用分钟，橡胶和塑料制品40器材和隔离衣，凡耐热者均煮沸消毒 小时以上

11、。含氯消毒剂浸泡6用15采用于病原体抗体检测的标本：通常包括血液和脑脊液。 2.静脉血移入无抗凝剂的无菌螺口管，室温集血清样本可将1Oml小时（在此温28至少1静置30分钟使之凝集，然后置4小时），离心收集血清。如能立即检测，采72度下可存放48可用三如用于微量法试验，集的血液应在室温下尽快分离血清。用0.3ml.棱针刺手指或耳垂部，再用毛细管采集，一般不少于的血液用于检测IgG的血清一般采于发病于检测IgM1个月内；周）各4天）和恢复期（第一次采血后3应于发病初期（13一般于出现神经症状时采次。脑脊液采集方法同前所述，1采集次，采集时2则需收集份脑脊液，而查、需采集，查IgM1IgG 间如前

12、所述。6 / 14 并对其进行卫可用于检测环境被污染的状况，3.环境样品： 突发公共卫生事件的原因样本。也可作为食源性疾病、生学评价， 这里主要介绍空气、水、土壤样品的采集方法。）空气样品：一般需要用空气采样器采集，用于检测微（1 空气中细菌和真菌还可使用平板沉生物或化学因子，包括毒物。降法。空气采样器有不同的分类方法，种类繁多，如按流量的不49min为大流量，同，采样器可分为大、中、小三类：500L根据采样器所用为小流量；为中流量，10Lmin911Lmin根据采样器的工作原介质性质可分为固体采样器和液体采样器；理可分为撞击式、沉降式、过滤式、静电吸附式、旋风式和离心撞击式六种。平板沉降法由

13、于方法简单，不需要特殊设备，虽然采样方法是将琼脂平板置但仍被广泛应用，准确性低于仪器法，于各采样点，打开平皿盖，扣放于平皿旁，暴皿于规定时间后立3即盖好盖送检；注意根据房间面积确定采样布点，室内面积；1.5ml1m3点，距墙壁，距地面高0m2时，设内、中、外对角线，采样高度距地面高点，距墙壁1m角及中央30m2者，设45 处。1.5m）水样：水样来源主要是河水、湖水、地下水和自来水，（2在疫区还包括稻田、塘水、井水和邻近畜舍、厕所的积水点。采手工采样是将水样器具有用于手工采样的采样瓶和自动采样器。样瓶用铁架固定，塞住瓶口，待瓶沉入到一定深度时拉开瓶塞，7 / 14 自动采样是用自动采样器在一定

14、间隔时间中或连续让水样进入。采集样品，分别放入样品瓶或合并于一个样品瓶中成为混合样。采集时最好采非日光直射处的疫区传染病病原污染的上述水体，表层水。采集自来水样品时，先用酒精灯将水龙头烧灼消毒，然分钟，再采集水样。采样量因工作条10后将龙头打开，放水5250件和样品处理方法不同而不同，如直接用于增菌可采1001000ml；先作絮凝或离心浓缩处理时，以每个采样点取为宜。生活饮用水样微生物检验的采集和盛装容器均须无200ml在容器灭菌前应向内加入硫代硫酸钠以还原如水中有余氯，菌，但应彻底用于化学因子检测的水样盛装容器可以不灭菌，余氯。 清洗干净。）土壤样本：根据检测目的选择有代表性的土壤，确定（3

15、 采样地点。按对角交叉（五点法）取样；用灭菌工具先除去地表以避免地面微生物与土样混左右表层土，枯枝落叶，再铲除1cm，装于灭菌容器内，300g200杂；用烧灼过的勺或铲取土样约并注意保留适当空间，混合后，标明采样地点、深度、日期后送 检。综上可见，样品类型很多，而不同微生物，需要采集的样品 为主要法定报告传染病检验标2-6、表和采样要求各异，表2-5 本采集的相关要求，供参考。8 / 14 产品样本：包括食品、化妆品、涉水产品、消毒及卫生用 4. 对其进行卫生品等，主要用于卫生理化和卫生微生物指标检测， 学评价及产品效果评价。应注意包装的完整性和抽样的随机性。生物性中毒的因子可分为化学性、 5

16、.用于调查中毒的样品： 而中毒的表中毒的途径主要有消化道和呼吸道，和物理性三类，现也各种各样，如急性胃肠炎、呼吸道症状、神经系统症状或者全身多器官损坏等，因此调查中毒的样品既包括食品、水、空气排泄物、又包括中毒者的呕吐物、和食品接触的相关人员的样品，分述而中毒的原因样品往往只能一次性提供。血液等临床标本， 如下：）胃内容物：是确定中毒的最好样本之一。可以通过收（1 集患者呕吐物、洗胃液、胃内抽取液和尸体解剖获得。在采集时用高锰酸钾洗胃洗胃液最好采集最初抽出的，要注意避免污染，要注意在收集尸检材料中的胃内容物时，后的胃液意义要小些。溶解度低的物质往往沉淀于因为比重大、胃的底部胃液的收集，底部，如

17、毒鼠强。采集的胃内容物量较大时，可取出后倾倒入一混杂在胃内容物中的结较大的玻璃漏斗内，漏斗的出口先塞住，然后将上层液体和下层固体分别收晶和粉末将沉淀在漏斗底部，对中毒迁延一段时间后才死亡的患者或生前已经集。在尸检中，胃内容物的收集时效性要注意收集肠内容物。进行洗胃的患者，强，错过了时机不能弥补。所采集的样本可用玻璃、聚乙烯或聚9 / 14 1OOg四氟乙烯器皿盛装，避免使用金属器皿。采集量最好达到 ml）以上。（）血液：是确诊中毒最主要的样本，因为某些经常可能（2 服用的药物，如镇静催眠药剂，胃内容物中查到不能确诊，只有血液采集方法从血中检测到超过中毒量及死亡量时才能够确定。根据不同毒物在血液

18、中的半减期决定采样时机；应注意：同前，如疑为百草枯中毒患者的血液不选择恰当的盛装血样的容器，钝化后的百草枯实因为玻璃可以使百草枯钝化，能用玻璃试管，如疑为一氧化碳中毒者应尽早抽血注意密封，验室不能检出；装满玻璃试管，必须用密封玻璃塞塞紧，避免瓶中残留15ml5对于其他易从样本空气，血液是分析一氧化碳中毒的惟一检材；中逸出的毒物也要密封保存，尽快检测，如氰化物；尽量不加 防腐剂和抗凝剂。）尿液：毒物常以原形或其代谢物的形式排泄，因此尿3 （导出或注射器抽尿液可直接收集、液也是毒物检测的重要样品。，用玻取，无尿者也可取膀胱冲洗液。尿液一般每次采集100ml璃或塑料瓶盛装，不加防腐剂；注意采集时间，

19、一些毒物在中毒 小时采集。初期尿检阴性，如百草枯一般要在口服后2）食物中毒的标本：中毒人员临床标本采集方法同微生4（ 物分离培养部分。其他食物中毒标本有：可疑食品和水样，采样时将残余食物或水样用灭菌镊子或匙采取后置于灭菌容器中；10 / 14 体积较大的鱼、肉应在表面消毒后取内部检样；要注意取样量，从业人员相关标本可采集从业人员以及直接或200g.通常50方法同间接接触食品有关人员的肛拭子，或化脓性疾病的病灶，前，相关人员的手用棉拭涂擦采样。食物中毒环境的标本：炊抹布剪小片放入稀释液，碗、刀等用棉拭涂擦采样，事用具如锅、菜墩用刀刮取表面后，将刮取物放入灭菌容器中送检。其他：最好能够收集到完整的

20、个体或可疑有毒动植物样本要保持完整，整株植物，可疑有毒的部位（如种子、花等）采集的量要充分；尽量保可疑的蘑菇在采集时要注意不要碰掉容易脱落的菌环等， 持其完整形态，以利种类鉴定。 三、样品的保存和运输（包保存和运输用于检测病原体的样品与用于检测化学物质 括化学毒物）的样品各有其特点。原则是尽量保护待检微生物和注检测病原体样品的保存： 1. 和意生物安全。保护待检微生物可以从温度、湿度、营养、pH加入保护剂和去除其他抑制杂菌等方面考虑，可通过温度调节、一般低温可增加微生物的不利于待测微生物生存的因素来实现。但某些微生物如淋病奈瑟菌等检验存活和抑制杂菌的过度生长，有的样品要使用运送应放置在适宜的温

21、度条件下运送。的样品，）pH8.0分离病毒的组织块可放于培养基。50甘油缓冲液中（小牛血清，水解蛋白，也可用由5在条件下保存数周，0.5211 / 14 组成的溶液保存。ml50U青、链霉素各500Uml，制霉菌素布半固体培养基运送，用分离鼠疫菌等革兰染色阴性菌多用卡-磷酸盐缓冲液处理过的棉棒采样后，插入LpH8.1经115mol周，培养基的底部，拧紧管口螺旋盖运送；在此培养基中保存1怀疑厌氧菌感染或需要进行厌氧菌检验的检不影响细菌的检出。样，必要时应使用运送培养基，保持在厌氧条件下运送。分离培；若在4养细菌或病毒的标本，若在48小时内检测，保存于，但原则是尽快检测，分离病毒的-7048小时后

22、检测，保存于组织块冻存，应该加入防冻剂如甘油。寄生虫样本的保存，每份 。存于4粪便中加入10福尔马林和PVA各类样本要分别盛装于容器2.化学因子或毒物样品的保存： 中，包装固定，及时冷藏保存。多数毒物检验样本对保存的条件需要特殊条件保存的样本要在标签上和清单中标不是特别严格，明，同时将保存条件要求告知具体承办人员，并注意防止外泄。样本不要加防腐剂，若为防止腐败必须加用时，可加乙醇（化学纯），并附一瓶所用乙醇样品作对照。福尔马林是用于固定样本 以便病理检查，不能用于毒物鉴定分析的样本中。除了按照上述条件注意保护待检微3.含病原体样品的运送： 对传染性WH0生物外，样品运送应符合生物安全要求。必须遵循）。标准的包装1997WH0物质和诊断性标本的安全运送指南（，方法和材料应能确保即使在运送中包装意外受损时也能保护人12 / 14 因此运送标本时最安全的方式是用由三员的安全及标本的完整。可盛个包装层对包装物进行三层包装。原始的容器要求能防漏，在原始容器与第二层包装之间应放置足以吸容量不大于500ml.如果在一个并辅以第二层防漏包装。附可能的漏液的吸附材料，这些容器应该那么，第二层包装中安放了几个易碎的原始容器，进行独立包装或分开以防互相碰撞。第三层外包装必须符合标一个完整的包装其整个外部最小尺寸不能小于如果要空运，准，（每个原始容器最大4L4kg或10cm，每个包装中标本量不超过