微生物-实验二-细菌的生理分布消毒灭菌

1、细菌的生理、分布、消毒与灭菌,一、细菌的人工培养 二、细菌的分布 空气中细菌的检测 咽拭培养 三、消毒与灭菌,细菌的人工培养,一、常用培养基的制备原则 1、培养基的制备原则： 适当的营养成分。 合适的酸碱度。 配制后经灭菌后方可使用。 2、培养基配制的基本程序 按一定配方称了各种物质溶解测定及调整PH滤过分装灭菌、备用,常用培养基的种类 1,按用途可分为 （1）基础培养基： （2）营养培养基： （3）鉴别培养基： （4）选择培养基： （5）厌氧培养基,常用培养基的种类 2,按物理性状可分为： 1）液体培养基 2）固体培养基，在液体培养基中加入23%琼脂，固体培养基倾倒平皿上即成“平板”倾入试管

2、内即可制成“斜面培养基3）半固体培养基：当液体培养基内加入0.20.5%琼脂时即成之,二、细菌人工培养的接种方法,一）细菌分离培养接种法平板划线分离培养法 目的：使混杂在一起的细菌分散生长,平板区划线法 培养后菌落的散布情况,一个细菌在固体培养基上，经过一定时间的生长繁殖之后，所形成的肉眼可见的细菌集团，称为菌落。 很多菌落连在一起，融成一片，称为菌苔,描述菌落： 大小：以直径（mm）表示之，1mm左右为小菌落，23mm为中等大菌落，3mm以上为大菌落。 形成：圆形、卵圆形及不规则形。 边缘：整齐或不整齐、锯齿状、毛发状等。 表面：光滑、湿润、皱纹、干燥等。 隆起度：扁平、凸起、中心凹陷等。

3、透明度：透明、半透明、不透明。 颜色：无色、白色、黄色等。 溶血性：在血平板上产生溶血毒素的细菌，可以使培养基中的红细胞破坏溶解，可分为完全溶血、草绿色溶血及不溶血,二）细菌纯培养接种法,目的：测试其生物学性状、保种等。 方法： 斜面培养基接种 液体培养基接种 穿刺接种法,斜面培养基接种法,斜面上生长状态观察：可见有均匀一致的菌苔，如有不同的菌落出现，则表明污染了杂菌,液体培养基接种法,液体培养基中生长状态观察：示培养前的液体培养基多为清彻透明的。接种细菌后，由于细菌种类不同，可有以下三种生长形式。 混浊：液体变为混浊。 菌膜：液体澄清，表面有一薄膜。 沉淀：管底有沉淀物,半固体培养基接种方法

4、,半固体中生长状态观察：无鞭毛（无运动）的细菌，经培养后仅沿穿刺线生长，培养基清亮。有运动的细菌，沿穿刺线向外扩散，穿刺线摸糊不清，培养基混浊,空气中细菌的检测,一、实验目的与原理 二、实验材料 三、实验方法,咽拭培养实验,一、实验目的与原理 二、实验材料 血平板、棉签 三、实验方法,紫外线的杀菌作用,一、实验目的与原理 了解紫外线对不同种细菌的杀菌作用及紫外线的穿透力。 紫外线的杀菌波长范围为240280nm，265266nm的作用最强。 其主要是使DNA上相邻的嘧啶通过共价键结合形成二聚体，影响DNA的正常硷基配对。 紫外线的穿透力很弱，其杀菌只限于表面的照射,二、实验材料 1、菌种： 2

5、、培养基：琼脂平板 3 、纸片、镊子及紫外线灯等 三、实验方法 1、涂平板。 2、打开皿盖，盖纸片。 3、紫外线照射30分钟。 4、取掉纸片，盖好皿盖，37孵育24小时，观察生长情况,皮肤消毒前后的细菌学检查,一、实验目的与原理 观察消毒剂的消毒效果 二、实验材料 1、2%碘酒，75%酒精 2、琼脂平板 三、实验方法,细菌对抗生素的敏感性测定,一、实验目的与原理 了解药物敏感性试验方法及实践中的重要意义 二、实验材料 1、菌种：金黄色葡萄球菌68小时肉汤培养物。 2、培养基：普遍琼脂平板。 3、抗生素：含各种抗生素干燥滤纸片、小镊子、 米尺等。 三、实验方法,细菌对抗生素的敏感试验（纸片法,四、实验结果,抑菌圈,细菌对药物敏感时，在该药纸