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文档简介
1、生姜多酚的超声波提取及其对大肠杆菌的抑制摘 要:采用超声波法从生姜中提取多酚类物质,利用酒石酸亚铁分光光度法表征提取物中多酚的含量,通过正交试验对提取条件进行优化。结果表明,生姜中多酚的最佳提取条件为:提取温度为60 ,料液比为115(g/mL),乙醇体积分数为70%,提取时间为20min,生姜中多酚的提取率为18.50mg/g.抑菌实验表明,生姜多酚对大肠杆菌有一定的抑制作用。关键词:生姜;多酚;超声波法;酒石酸亚铁法;正交试验法;抑菌作用。0引言抗氧化剂是常用的食品添加剂,可以防止食品在贮藏中被氧化而使营养损坏、褐变、褪色等1,2.但合成的抗氧化剂具有一定的毒性,对人体有害。因此研发具有高
2、效、安全、低毒的天然抗氧化剂,日益受到人们重视,成为食品添加剂研究领域中的热点之一3,4.生姜是一种重要的香辛调味料,也是传统中医常用的药材。其主要有效成分如姜辣素和黄酮等属于多酚类化合物,在调味品、食品、药品、化妆品和保健品等行业具有广泛的应用5.因此,生姜多酚的开发利用具有较大的研究价值和应用前景。目前提取生姜中多酚的方法主要有水蒸气蒸馏法、溶剂浸提法、压榨法等多种方法6,7.超声波提取法因其操作简单、时间短、产率高、能耗低、产物易分离提纯等优点而得到广泛应用8.本实验采用超声波提取法,以乙醇作溶剂提取生姜中的多酚,采用正交试验法探讨提取工艺条件,选用没食子酸为标准对照品,用酒石酸亚铁法在
3、优化工艺条件下测定提取物中多酚的含量9,并进行抑菌实验测试,考察生姜多酚对大肠杆菌的抑制作用,为生姜的广泛开发利用提供必要的理论和实验参考。1实验部分1.1材料与试剂材料:新鲜的生姜,市售;牛肉膏,北京化工厂;蛋白胨,北京奥博星生物有限公司;琼脂氯化钠,国药集团化学试剂有限公司。主要试剂:95%乙醇 、硫酸亚铁、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠,中国湘中地质实验研究所;没食子酸,成都市科龙化工试剂厂;酒石酸钾钠,武汉市第四十四中学化工厂。以上所有试剂均为分析纯。1.2仪器与设备KM快速研磨机,湘潭湘仪仪器有限 公司;pHS-3C型精密酸度计,上海大普仪器有限公司;KQ2200E型超声波清洗器,昆山市超声
4、仪器有限公司;UV-754型分光光度计,上海精密科学仪器有限公司;Cintra10(GBC)紫外分光光度计,美国VARIAN公司。1.3生姜干粉的制备选无腐烂、无霉变、无损伤生姜适量,洗净,削去表皮,切成薄片,自然风干,风干后至60 烘箱烘10h,粉碎过40目筛,避光密封保存。1.4抗氧化性的测定本实验采用羟自由基清除体系评价提取物抗氧化活性,通过测定吸光度利用Fenton反应比较羟自由基的清除效果10.1.5生姜提取物中抗氧化物质含量的测定在相同条件下测定不同浓度没食子酸标准溶液的吸光度值,以浓度为横坐标,吸光度为纵坐标制作标准曲线。称取一定量的生姜干粉,在545nm处,测定提取液的吸光度值,对照标准曲线,计算生姜中多酚含量。1.6牛肉膏蛋白胨培养基的配制11实验菌 种 为 大 肠 杆 菌EscherichiaColi(E.Coli).培养基配方见表1.在1条件下灭菌20min;培养温度为25;培养时间为5d.2实验结果与分析2.1单因素实验选取影响生姜中多酚提取率的乙醇体积分数、提取温度、料液比、提取时间分别进行单因素实验,通过测定提取液的吸光度,比较对提取率的影响。2.1.1乙醇浓度对提取率的影响称取2.000g生姜干粉,分别加入体积分数为50%,60%,70%,80%,90%的乙醇,料液比均为120(g/mL),在 室 温 下
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