高效液相色谱法测定阿司匹林肠溶片中阿司匹林的含量

1、高效液相色谱法测定阿司匹林肠溶片中阿司匹林的含量阿司匹林肠溶片为非甾体类抗炎药，临床可用于抗血栓，也可用于治疗不稳定性心绞痛，是国家基本药物目录列入的品种。本文采用高效液相色谱法测定阿司匹林肠溶片中阿司匹林的含量，该方法简单，快速，重现性好，回收率高，可用于该制剂的质量控制。1 仪器与试药1.1 仪器：大连依利特 P230 型高效液相色谱仪；UV230+紫外可见检测器；手动进样器；超声仪（型号 KQ5200E，功率 200W，频率 40KHz）；电子天平（赛多利斯科学仪器有限公司，0.0001g）。1.2 试药：阿司匹林对照品（中国食品药品检定研究院，批号：100113）；阿司匹林肠溶片（亚宝

2、药业太原制药有限公司，批号：131210；石家庄康力药业有限公司，批号：121037；神威药业集团有限公司，批号：1306072），甲醇为色谱纯，水为超纯水，其他试剂均为分析纯。2 方法与结果2.1 色谱条件：色谱柱为 Hypersil ODS2 柱（250mm×4.6mm，5μm）；流动相：甲醇0.5%乙酸溶液（3763）；流速：0.8ml·min-1；柱温：25；检测波长：267nm；理论板数按阿司匹林计不得少于 3000。2.2 溶液的制备：对照品溶液的制备：精密称取一定量阿司匹林对照品，置 100ml 量瓶中，加 1%醋酸甲醇溶解并定容制成100μ

3、g·ml-1的对照品溶液。供试品溶液的制备：取供试品（石家庄康力药业有限公司，批号：121037）约 0.03g，精密称定，置 100ml 量瓶中，用 1%冰醋酸甲醇溶液溶解并定容，过滤，取续滤液，作为供试品溶液。阴性样品溶液的制备：按处方比例取辅料制成空白制剂，按供试品溶液制备方法制成阴性样品溶液。2.3 专属性实验：在2.1;色谱条件下，分别吸取供试品溶液、对照品溶液、阴性样品溶液各 10μL，注入液相色谱仪，记录色谱图。结果显示阿司匹林与其他组分色谱峰可完全分离，且阴性样品无干扰，色谱图见图 1。2.4 线性范围：精密吸取对照品溶液（100μg·m

4、l-1）2.0、4.0、6.0、8.0、10.0、12.0、15.0ml，分别置于 10ml 量瓶中，用 1%醋酸甲醇稀释至刻度，摇匀。浓度分别为 20、40、60、80、100、120 和 150μg·ml-1，在上述色谱条件下分别进样 10μL，测定峰面积 A 积分值，以浓度（Cμg·ml-1）为横坐标、峰面积（A）为纵坐标，绘制标准曲线，回归方程为：A=5.0611C11.278，r2=0.9991。试验结果表明:阿司匹林在20150μg·ml-1浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系。2.5 精密度试验：分别精密吸取对照品溶

5、液（100μg·ml-1）和供试品溶液（石家庄康力药业有限公司，批号：121037）各 10μL，连续进样 6 次，分别测定其峰面积 A，结果对照品溶液 RSD 为1.4%，供试品溶液 RSD 为 1.5%。结果表明：该方法精密度良好，符合含量测定要求。2.6 稳定性试验：取供试品溶液（石家庄康力药业有限公司，批号：121037），分别于 0、2、4、6、8、10h 进样，进样量为 10μL，测定峰面积，RSD 为 1.2%。结果表明：供试品溶液在 10h 内稳定性良好，符合含量测定要求。2.7 重复性试验：取供试品（石家庄康力药业有限公司，批号：121037）

6、约 0.03g，精密称定，共 6 份，分别按供试品溶液制备方法制备，并测定含量，平均含量，RSD 为 1.1%。结果表明：该方法的重复性好，符合含量测定要求。2.8 加样回收试验：取已知含量的供试品（石家庄康力药业有限公司，批号：121037）6 份，每份约 0.015g，精密称定，置量瓶中，分别精密加入阿司匹林对照品 3.6、4.5、5.4mg 各两份，按上述供试品溶液制备方法制备，分别测定，计算回收率。结果平均加样回收率为 101.2%，RSD 为 0.94%。结果表明：该方法的准确度良好，符合含量测定要求，见表 1。2.9 供试品的测定：分别取三个不同批号供试品约 0.03g，各两份，精

7、密称定，按供试品溶液的制备方法制备溶液，分别测定，记录峰面积，计算阿司匹林的含量。供试品标示量均为 25mg/片-1，按照中国药典2010 版二部的规定，阿司匹林肠溶片含阿司匹林应为标示量的 95%105%。结果见表 2。3 讨 论3.1 提取时间的选择：实验对超声提取的时间进行了考察，比较了 30min、40min、50min 结果，实验结果显示，超声 40min 已基本提取完全，故确定超声提取时间为 40min。3.2 流动相的选择：通过参考文献，比较了不同的流动相：甲醇0.5乙酸溶液（2080）、甲醇0.2磷酸溶液（2773）、甲醇乙腈0.7磷酸溶液（26272），结果表明：用甲醇0.5乙酸溶液（3763）为流动相保留时间适合，分离效果好。参考文献1李克庆.测定阿司匹林肠溶片中阿司匹林的含量及游离水杨酸J.中国药师，2006，9（10）：925-927.2李飞玲.HPLC 与 UV 法测定阿司匹林肠溶片中阿司匹林及水杨酸含量J.长治医学院学报，2011，2