药理学试验朱伟.ppt

1、药 理 学 实 验,实验课程简介,1）实验基本技能,2）阿司匹林镇痛实验,5）链霉素的毒性反应及对抗,4）地塞米松抗炎实验,3）心得安对氯仿引起的心室纤 颤预防作用,实验课程学习要求,实验课程学习目的,实验一、基本实验操作,不同给药途径的药物对小鼠睡眠时间的影响,实验目的： 1）掌握小鼠给药的基本方法。 2）比较不同给药途径药物起效的时间快慢。 实验原理：不同的给药途径的药物起效时间不相同,1,实验目的及原理,实验动物：小鼠 实验药物：1%戊巴比妥钠,2,主要实验材料,称重、分组,腹 腔 给 药,皮下给药,灌 胃 给 药,0.1ml/10g,小鼠翻正反射消失时 翻正反射再次恢复时间,主要实验过

2、程,实验基本技能,右手提起鼠尾, 左手拇指和食指捏住双耳及头部皮肤，无名指、小指和掌心夹其背部皮肤及尾部,便可将小鼠完全固定。 单手捉持，用拇指和食指抓住小鼠尾巴，用小指、无名指和手掌压住尾根部，再用腾出的拇指、食指及中指抓住鼠耳及头部皮肤而固定,注意事项,小鼠捉拿与固定方法,注意事项： 1. 取背部及后腿皮下，注射时用左手拇指及食指轻轻捏起皮肤，右手持注射器将针头刺入，固定后即进行注射,皮下注射,注意事项： 1、针头刺入部位不宜太接近上腹部或太深，以免刺破内脏。针头与腹腔的角度不宜太小，避免刺入皮下。 2、使用针头不宜太粗，避免药液注射后从注射孔流出。注射后可用棉球按一下注射部位,腹腔注射,

3、给药途径,注意事项： 1.用左手拇指和食指抓住鼠两耳和头部皮肤，其他三指抓住背部皮肤，将鼠抓持在手掌内，固定好动物，头部和颈部保持很平,右手取注射器进行灌胃。 2.灌时针头沿鼠口角通过食管进入胃内。灌时如很通畅，则表示针头已进入胃内；如动物有呕吐动物或强烈挣扎，必须拔出后按上述方法重新操作。决不可进针不顺硬向里插,灌胃给药,给药途径,1）注意基本给药途径的正确操作。 （2）注意小鼠翻正反射消失时间判定 （1min） （3）客观真实的记录实验数据,4,实验注意事项,仔细观察记录实验 结果，结合药理学 总论知识思考，何 种给药途径起效最 快。为什么,问题与思考,实验二、阿司匹林的镇痛作用,实验目的

4、： 掌握镇痛药的实验方法。（热板法、扭体法） 观察药物的镇痛作用。 实验原理：热刺激或者化学刺激物使小鼠 产生疼痛反应，观察给药前后小鼠疼痛反应的变化。（痛阈值、扭体次数,1,实验目的及原理,实验动物：小鼠 实验药物：阿司匹林 主要仪器：热板测痛仪,2,主要实验材料,设定仪器温度（55,动物初筛,给药组： 60mg/ml阿司匹林 0.1ml/10g,对照组：引用水 0.1ml/10g,灌胃给药,给药后30min、45min、60min再次测定各组小鼠痛阈值,主要实验过程（热板法,筛选指标：小鼠的痛阈值即小鼠出现疼痛反应的时间。 以小鼠添后足作为出现疼痛观察指标。 测定2次痛阈值，以痛阈值大于5

5、秒，小于30秒，做为筛选合格动物,小鼠筛选方法,动物随机分组,给药组： 60mg/ml阿司匹林 0.1ml/10g,灌胃给药,30min后各组小鼠均注射0.6%冰醋酸（0.2ml/只）；记录15min内各组小鼠的扭体次数,对照组： 饮用水 0.1ml/10g,小鼠扭体反应,主要实验过程（扭体法,热板仪温度设定：550.5 。 室温 :以15 20C为宜 。 热板法中动物性别的选择：雌性。 痛阈值判定指标：添后足。 痛阈值时间：初筛（5s、30s）。 超过60s动物未添足，将动物取出，痛阈值以60s计算。 实验中保持小鼠足底及热板内干燥。 冰醋酸现用现配,4,实验注意事项,问题与思考,实验三、心

6、得安对氯仿引起的心室纤颤预防作用,实验目的： 观察受体阻断药对氯仿诱导室颤的预防作用。 实验原理：氯仿诱导的室颤可能与其诱发体内儿茶酚胺含量升高和对心脏的直接作用有关。心得安有受体阻断作用，可对抗氯仿对心脏的作用,1,实验目的及原理,实验动物：小鼠 实验药物：心得安、氯仿,2,主要实验材料,动物随机分组,给药组： 10mg/ml心得安 0.1ml/10g,灌胃给药,30min后各取1只，同时扣入含有0.5ml氯仿棉球的烧杯内，待呼吸停止后，解剖观察心脏跳动情况，判断有无室颤出现,对照组： 饮用水 0.1ml/10g,主要实验过程,1）室颤的发生与体重有关，25-35克室颤率较高 （2）小鼠呼吸

7、停止后不能在烧杯内停留过久 （3）解剖时不要将心脏剪破,4,实验注意事项,问题与思考,实验四、地塞米松对小鼠耳毛细血管通透性的作用,1.1 实验目的： 学习急性炎症动物模型方法 观察糖皮质激素的抗炎作用 1.2 实验原理： 二甲苯为致炎物质，可促进炎症介质释放，导致动物急性炎症。比较给药组与对照组局部肿胀程度的变化判断药物的抗炎作用,1,实验目的及原理,实验动物：小鼠 实验药物：地塞米松 二甲苯,主要实验材料,小鼠称重、标记、分组,给药组：地塞米松 0.1ml/10g,腹腔注射,30min后用二甲苯50l均匀涂抹每只鼠的右耳,对照组： 生理盐水 0.1ml/10g,90mim后小鼠脱臼处死，分

8、别用打孔器取相同部位左右耳片，电子天平称重,主要实验步骤,抗炎实验中动物性别的选择：雄性 小鼠耳廓滴加二甲苯时，正反面均匀涂抹。避免滴入耳廓内。 小鼠左右耳打耳片位置统一（耳廓中间部位,4,实验注意事项,本实验中选择雄性动物的原因,问题与思考,常见炎症模型介绍,实验五、链霉素的毒性反应及对抗,1.1 实验目的： 观察链霉素引起的肌肉麻痹作用及氯化钙的对抗作用 1.2 实验原理： 氨基甙类抗生素用量过大对神经肌肉接头有阻断作用，可与突触前膜“钙结合部位”结合，使乙酰胆碱释放减少，引起肌肉麻痹，钙离子可对抗此毒性反应,1,实验目的及原理,实验动物：小鼠 实验药物：链霉素 氯化钙,主要实验材料,动物随机分组,给药组： 62.5mg/ml链霉素 30mg/ml氯化钙 0.1ml