DNA的粗提取和鉴定共25张

1、课题,DNA,的提取和鉴定,人教版高二年级,选修,1,生物体内的,DNA,犹如“雾中花”，神秘莫,测，真实的,DNA,是什么模样,学习任务一,原理探析,探究,DNA,的提取与鉴定的原理和方法,问题思考,1,提取生物大分子的基本思路是什么,2,细胞中有哪些生物大分子,3,提取,DNA,分子的方法是什么,4,DNA,与蛋白质的物理化学性质有哪些主要差异,5,怎样鉴定,DNA,分子,RNA,蛋白质,脂质,物理,化学,提取,DNA,的方法,利,用,DNA,与,和,等在,和,性质方面的差异，提取,DNA,去除其他成分,DNA,与蛋白质的溶解性,DNA,蛋白质,溶解特性,在,NaCl,溶液中，质量浓度为,

2、0.14,mol/L,时溶解度最小,NaCl,的,质,量,浓,度,从,2mol/L,降低过程中,溶解度逐渐增大,DNA,不溶于,95,酒精,某,些,蛋,白,质,溶,于,酒,精,质量浓度为,2mol/LNaCl,溶液,溶解,部分发生盐析,质量浓度为,0.14mol/LNaC,l,溶液,析出,溶解,酒精,体积分数为,95,的冷酒精,不溶,某些蛋白质可溶,DNA,在,0.14 mol,L NaCl,溶液中溶解度,最低,蛋白质的溶解度最高,DNA,形成沉淀析出,DNA,不溶于,95,酒精,某些蛋白质溶于酒精,将,DNA,与蛋白质进一步分离,DNA,溶解性,一,DNA,的提取与鉴定,一,DNA,的提取,

3、1.DNA,的溶解性,DNA,和蛋白质等其他成分在不同浓度的,NaCl,溶液中和酒精中的溶解度不同,2.DNA,对酶、高温和洗涤剂的耐受性,DNA,蛋白质,蛋白酶,无影响,酶的专一性,水解,高,温,80,以上变性,DNA,稳定性,60,80,变性,洗涤剂,无影响,瓦解细胞膜,洗涤剂瓦解细胞膜示意图,2.DNA,对酶、高温和洗涤剂的耐受性,蛋白酶,水解蛋白质,对,DNA,没有影响,60,80,C,的高温中,蛋白质变性,后溶解度降,低而产生沉淀,DNA,在,80,C,以上才会变性,洗涤剂,瓦解细胞膜,脂质），对,DNA,没有影,响（在植物材料中提取,DNA,使用,DNA,耐受性,二）、鉴定提取物,

4、DNA,的方法,DNA,遇二苯胺（沸水浴）呈蓝色,甲基绿与,DNA,结合，呈绿色,学习任务二,学以致用,设计实验方案，从细胞中提取并鉴定,DNA,问题思考,1,哪些材料适合提取,DNA,为什么,2,针对不同材料，怎样破碎细胞？利用了哪些原理,3,怎样将,DNA,与其他生物大分子分离？利用了哪些原理,4,怎样设计对照实验对提取物,DNA,进行鉴定,原则上只要含,DNA,的生物材料都可以，但选取,DNA,含量相对较高的生物组织，成功率更大,问题,1,哪些材料适合提取,DNA,为什么,下列哪些材料适合提取,DNA,为什么,鸡血、猪血、鱼卵、猪肝,洋葱、花菜、香蕉、豌豆,大肠杆菌培养液,哺乳动物成熟的

5、红细胞、原核细胞无细胞核,猪血、大肠杆菌不适宜提取,DNA,新鲜的鸡血适合提取,DNA,新鲜的鸡血,鸡血细胞核的,DNA,含量丰富，材料易得,鸡血细胞极易吸水胀破,从鸡血中获取鸡血细胞,注意,血浆中蛋白质含量丰富，需要从鸡血中获取鸡血细胞液,问题,2,怎样破碎细胞，获取含,DNA,的滤液？利用了哪些原理,1,破碎动物细胞的方法,2,破碎植物细胞的方法,洗涤剂,离子去污剂，能溶解细胞膜，利于,DNA,释放,渗透吸水胀破,洗涤剂,食盐,搅拌研磨,食,盐,NaCl,利于,DNA,的溶解于研磨液中,研磨不充分,使细胞核内的,DNA,释放不完全，提取的,DNA,量变少,思考,获取含细胞核的滤液中的可能有

6、哪些细胞成分,可能有,DNA,核蛋白、多糖、脂质和,RNA,等杂质,破碎鸡血细胞，获取细胞核物质,问题,3,怎样将,DNA,与细胞中其他生物大分子分离,怎样去除滤液中的杂质,方法,原理,方案一,方案二,方案三,通过控制,NaCl,溶液的浓度，去,除杂质,直接在滤液中加入嫩肉粉，反,应,10,15min,嫩肉粉中的木瓜,蛋白酶能够分解蛋白质,将滤液放在,60,75,的恒温水,浴箱中保温,10,15min,使蛋白,质变性,DNA,在,0.14 mol/L,的,NaCl,中溶,解度最小，在高盐溶液中溶解,度高，蛋白质则相反,蛋白酶分解蛋白质，不能分解,DNA,DNA,耐高温，蛋白质,60,80,会变

7、性,问题,4,怎样设计实验鉴定提取的,DNA,白色丝状物,2mol/L NaCl,4ml,二苯胺,实验组,水浴加热,蓝色,2mol/LNaCl,4ml,二苯胺,水浴加热,对照组,无蓝色,二、实验方案,实验步骤,选择合适材料,破碎细胞，获取含,DNA,的滤液,去除滤液中的杂质,DNA,的析出与鉴定,步骤,操作,原理,DNA,蛋白质,破碎,细胞,释,放和溶解,DNA,去除,杂质,将,DNA,与其他大,分子分离,DNA,的鉴定,案例一,花菜细胞中的,DNA,的提取与鉴定,滤液中,滤渣中,DNA,析出,溶液中,DNA,不溶于酒精，某些,蛋白质杂质可溶,洗涤剂可瓦解细胞膜,DNA,对洗涤剂有耐受性,食盐

8、可溶解,DNA,花菜中,加入洗涤剂和食,盐,充分研磨,过滤,滤液中,加入,95,冷却,酒精,玻璃棒卷起丝状物,A,2mol/L,的,NaCl,提,取丝状物,二苯胺,B,2mol/L,的,NaCl,二,苯胺,DNA,溶,解,于,2mol/L,的,NaCl,中,沸水浴中,DNA,遇二苯,胺呈蓝色,溶解,不溶解,案例二,鸡血细胞中的,DNA,的提取与鉴定,步骤,操作,目的,原理,DNA,存,在部位,破碎细胞,提取细胞,核物质,鸡血中,加入柠檬酸钠,离心分层,鸡血细胞液中,加入蒸馏水,快速搅拌,过滤,获取含,DNA,的滤液,滤液中,加入,2mol/L,的,NaCl,溶液,一个,方向搅拌,去除杂质,使,

9、DNA,与,其他大分,子分离,溶液中,加入蒸馏水,过滤,DNA,粘稠物中加入,2mol/L,的,NaCl,溶液,一个方向搅拌,过滤,纯化,DNA,滤液中,加入,95,冷却的酒精,一个方向,搅拌,玻璃棒卷起白色丝状物,DNA,的鉴定,A,2mol/L,的,NaCl,提取丝状物,二苯胺,B,2mol/L,的,NaCl,二苯胺,制备鸡血细胞液,血细胞吸水涨破,DNA,溶解,2mol/L,的,NaCl,溶解细胞核物质,DNA,析出含,DNA,的粘稠物,DNA,的粘稠物再溶解,DNA,溶解,2mol/L,的,NaCl,DNA,在,0,1,4,mol/L,的,NaCl,溶液中,溶解度最低,DNA,不溶于酒

10、精，蛋白质,杂质可溶,DNA,遇二苯胺变蓝色（沸水浴,加速血细胞破裂,DNA,析出，杂质溶解,进一步纯化,DNA,滤液,纱布上的粘稠物,滤液,析出的丝状物,DNA,析出,血细胞中,液体中,溶液中,溶液中,柠檬酸钠防止血液凝固,思考,为什么反复地溶解与析出,DNA,能够去除杂质,用高浓度的盐溶液溶解,DNA,能除去在,高盐中不能溶解的杂质,用低盐溶液使,DNA,析出，能除去,溶解在低盐溶液中的杂质,因此，通过反复溶解与析出,DNA,就能够除去与,DNA,溶解度不,同的多种杂质,含核物质的滤液,学习任务三,效果反思,1,影响,DNA,提取量的因素主要有哪些,2,如何设计实验，探究不同实验材料（不同

11、洗涤剂,对提取,DNA,含量的影响,例,1,下列有关,DNA,的粗提取与鉴定”实验相关操作中所,选取的试剂，错误的是,B,例,2,下图为,DNA,的粗提取与鉴定”的实验装置，请回答,下列相关的问题,1,实验材料选用鸡血细胞液，而不用鸡全血，主要原因是鸡,血细胞液中有较高含量的,_,2,在图,A,所示的实验步骤中加蒸馏水的目的是,通过图,B,所示的步骤取得滤液，再在滤液中加入质量浓度为,2,mol/L,的,NaCl,溶液的目的是,_,3,图,C,所示实验步骤中加蒸馏水的目的,_,DNA,使血细胞吸水涨破,使滤液中的,DNA,溶于,NaCl,溶液,使,DNA,析出,1,在,DNA,的粗提取与鉴定”

12、实验中，实验原理是利用,DNA,在不同浓度的,NaCl,溶液中,的溶解度不同来提取的,DNA,的溶解度与图示曲线的对应点相符合的是,A,a,点浓度最适合析出,DNA,B,b,点浓度最适合析出,DNA,C,c,点浓度最适合析出,DNA,D,d,点浓度最适合析出,DNA,2,下列关于,DNA,的粗提取与鉴定”实验的原理的叙述，正确的是,A,利用“所有蛋白质不能忍受,60,80,的高温，而,DNA,在,80,以上才会变性”的特,性提纯,DNA,B,利用,DNA,在,2 mol/L,的,NaCl,溶液中溶解度最低，易析出”的特性提取,DNA,C,利用,DNA,不溶于酒精，而细胞中的某些蛋白质可溶于酒精”的特性提纯,DNA,D,利用,DNA,与二苯胺作用而显现紫色”的特性鉴定,DNA,学习巩固,3,如图所示为,DNA,的粗提取和鉴定”实验的相关操作。请回答下列问题,1,图中实验材料,A,可以是,答出两