免疫比浊法测定PCT的方法学评价

1、免疫比浊法测定PCT的方法学评价PBL教学-天天向上团队第一部分1.1查阅资料，讨论与交流通过课后交流，及建立网上交流群，使我们的讨论取得了较好的成果。1.2提出问题，分配问题在经过几次交流后，我们提出了下列十个问题：（王妍乐）（唐莉）（尤倩）PCT ?（张艳美）1、PCT定义及临床意义？2、免疫比浊法的原理及分类？3、测定PCT的方法有哪些？4、如何评价免疫比浊法测定5、 精密度的评价？（郑天宇）6、精确度的评价？（a干扰试验 宁佳宝；b回收试验 c方法比较试验 龙曙萍）7、 检测限的评价？（孟逍）8、可报告范围及参考区间的验证 ？ （括号内表示相应负责解决问题的人）1.3解决问题在分配问题

2、后，大家积极查阅文献，王彦洁;起讨论；我们也会将一些好的文献及资料进行共享。 一解决了，并制成了详细的精美PPT。（魏小雪）有不懂的或不理解的，我们会在交流群里一 大家在相互学习和帮助中将问题都一第二部分2.1实验讨论在完成第一部分后，老师在第二部分中交给了我们一些数据，让我们进行数据的分析与讨论。2.2实验分配经过一番讨论后，我们将实验具体分给了个人，如下：1、 干扰实验（Hb :宁佳宝，胆红素：郑天宇，TG:孟逍）2、 批内重复实验（魏小雪）3、 天间重复实验（王彦洁）4、 不确定度测定（张艳美）5、 回收试验（王妍乐）6、 方法对比实验（龙曙萍）7、检出限（尤倩）8可报告范围（唐莉）（括

3、号内表示负责相应实验的人）2.3实验结果与分析a.干扰实验1、Hb实验结果：基础管 PCT浓度：0.75ng/ml干扰 I PCT 浓度：0.64ng/ml 干扰 II PCT 浓度：0.55ng/ml结果分析：1) 干扰值计算：干扰值1=干扰管I测定值一基础管测定值 =0.64-0.75=-0.11 ng/ml干扰值II=干扰管II测定值一基础管测定值 =0.55-0.75=-0.2Ong/ml2).计算恒定系统误差：用干扰值的绝对值与 EA进行对比，若小于EA 则可接受，反之不可以。当 Xc为0.25、0.5时，EA为0.22 ng/ml |干扰值11 EA ,|干 扰值 II| EA，当

4、 Xc 为 2.0 时，EA 为 0.32 ng/ml |干扰值 11 EA ,|干扰值 ll| EA , 当Xc为10.0时，EA为1.25ng/ml |干扰值11 EA ,|干扰值II | EA，所以，当TG浓 度为1.0mmol/L,10.0mmol/L时，其干扰作用所产生的恒定误差小于允许分析误差，故免疫透射比浊法测定PCT的恒定误差可接受。2、TG实验结果；基础管PCT浓度：0.75 ng/ml干扰1PCT浓度：0.77 ng/ml干扰IIPCT浓度:0.74 ng/ml结果分析:1).干扰值计算：干扰值I=干扰管I测定值一基础管测定值 =0.77-0.75=0.02ng/ml干扰值

5、II=干扰管II测定值一基础管测定值 =0.74-0.75=-0.01 ng/ml2).计算恒定系统误差：用干扰值的绝对值与EA进行对比，若小于EA则可接受，反之不可以。当Xc为0.25、0.5时，EA为0.22 ng/ml |干扰值11 EA , |干扰值II | EA，当Xc为2.0时，EA为0.32 ng/ml |干扰值11 EA , |干扰值II| EA , 当Xc为10.0时，EA为1.25ng/ml |干扰值11 EA ,|干扰值II | EA，所以，当TG浓 度为1.0mmol/L,10.0mmol/L时，其干扰作用所产生的恒定误差小于允许分析误差，故免疫 透射比浊法测定PCT的

6、恒定误差可接受。3、胆红素实验结果：丨 0.02 | EA | -0.14 | EA结果分析：当胆红素的病理值达到0.2g/L , 10.0g/L时，其干扰作用产生的恒定误差小于医学决定水平，故免疫比浊法的恒定误差可接受。b、批内重复实验(魏小雪)标准品1 (浓度0.25ng/ml）:=0.25 n g/m=0.017cv = X标准品2 （浓度2.0 ng/ml）:100% = 6.8 %n = 2.02 ng/ml證（xi-X2=0.27SCV =X X 100% = 13.37 %标准品3（浓度 10.0 ng/ml）:Z XZ （Xi -X 2i 4X =n= 10.03 ng/mlS

7、 = 1n=0.02SCV =X 汉 100% = 0.19 %S为标结果分析：当1.96S Ea时（Ea为某一医学决定水平下的允许分析误差, 准差），随机误差（RE）可接受；反之随机误差（RE）不可接受。已知 PCT 测定：Xc 为 0.25； 0.5； 2.0 时 EA 为 0.22 ng/mlXc 为 2.0 时 EA 为 0.32 ng/mlXc 为 10.0 时 EA 为 1.25ng/ml所以，当 Xc 为 0.25 时，1.96S=0.033,即即 1.96SEa, RE 不可接受。当 Xc 为 10.0 时，1.96S=0.039,即即 1.96SEa，RE 可接受。C、天间重

8、复实验（王彦洁）标准品1 （浓度0.25ng/ml）Z XX = n = 0.26 n g/mlSCV = X 100% = 7.69 % 标准品2 （浓度2.0 ng/ml）:S XX = n = 1.94 ng/mlCV = X 100% = 21.13 % 标准品3 （浓度10.0 ng/ml）:S XX = n = 10.02 n g/mln2（Xi-X ）i=1=0.02i -1=0.41=0.20CV = X100% = 2.00 %【结果判断】：当1.96S Ea时(Ea为某一医学决定水平下的允许分析误差，S为标准差)，随机误差(RE)可接受；反之随机误差(RE)不可接受。已知

9、PCT 测定： Xc 为 0.25 ； 0.5 ； 2.0 时 EA 为 0.22 ng/mlXc 为 2.0 时 EA 为 0.32 ng/mlXc 为 10.0 时 EA 为 1.25ng/ml所以，当 Xc 为 0.25 时，1.96S=0.04，即 1.96SEa，RE 不可接受。当 Xc 为 10.0 时，1.96S=0.39，即 1.96SEa，RE 可接受。d、 不确定度测定(张艳美)【结果与计算】30次重复测量结果为 0.55； 0.50； 0.46； 0.47； 0.59； 0.58； 0.47； 0.42； 0.49； 0.58； 1.55； 0.53； 0.56； 0.4

10、4； 0.48； 0.42； 0.58； 0.51 ； 0.52； 0.53； 0.47； 0.45； 0.46； 0.50； 0.51 ； 0.58； 0.52； 0.57； 0.55； 0.53 将数值带入计算：平均值 X=0.5457 A 类 不确定度UA=s=0.588 (由于数据中缺少a1、a2，而且查资料也未能找到，所以无法计算出B不确定度UB、合成不确定度 U以及扩展不确定度 U95)【结果报告】此样本测量的平均值是0.5457，不确定度为U95,其95%的置信区间为(0.5457-U95，0.5457+U95)。e、 回收试验(王妍乐)实验结果：平均回收率为 118.1%，比例

11、误差为-18.1%。结果判断：PCT测定的医学决定水平(XC)为0.25ng/ml、0.5ng/ml时，相应的允许分析 误差(EA)为 0.22ng/ml ; XC 为 2.0ng/ml 时,EA 为 0.32ng/ml ; XC 为 10.0 时,EA 为 1.25ng/ml。 当 XC=0.25，PE= (|R-100|)(XC/100)=0.05EA，PE 可接受 当 XC=0.5，PE=( |R-100|)(XC/100)=0.09EA，PE 不可接受 当 XC=10.0，PE=( |R-100|)(XC/100)=1.81EA，PE 不可接受(R:平均回收率；PE:比例误差)当XC=

12、0.25，XC=0.5时免疫透射比浊法测定 PCT浓度的比例误差可接受。f、 方法对比实验(龙曙萍)实验结果：线性回归方程为：Y=0.0687+1.2645x结果分析：当 Xc 为 0.25 时|( a+bXc) -Xc | =0.1348 v EA当 Xc 为 0.5 时；1( a+bXc) -Xc| =0.200v EA当 Xc 为 2.0 时；1( a+bXc) -Xc| =0.5977 EA当 Xc 为 10.0 时；1( a+bXc) -Xc| =2.7137 EA实验结论：当Xc为0.25; 0.5时都有| (a+bXc)-Xc|v EA，系统误差可以接受，免疫比浊法测定 pct可

13、以接受。恒定误差为0.0687，比例误差为1.2645。当Xc为2.0 ； 10.0时|( a+bXc) -Xc| EA，系统误差不可以接受，免 疫比浊法测定pct不可以接受。g、 检出限(尤倩)实验分析：1检测低限：97.7%可能性：0.178ng/mL;2生物检测限：97.7%可能性：祥见第二部检测象中的数表。3功能灵敏度：从结果可得样品 3重复检测变异系数 CV为24.78%，最 接近20%,此时检测限浓度为 0.561 ng/mL，因此，本法的功能灵敏度为0.561 ng/mLoh、可报告范围(唐莉)实验结果：Y=0.7996X+0.0178 ，相关系数 r=0.7996 结果分析：免

14、疫比浊法测定PCT的分析测量范围为 0.150ng/ml.第三部分结论与总结：通过以上实验的结果和数据分析，可知：1、 免疫比浊法测定 PCT的分析测量范围为 0.150ng/ml.2、检测低限：97.7%可能性：0.178 ng/mL ;功能灵敏度为 0.561 ng/mL。3、 方法比较试验：当 Xc为0.25; 0.5时都有1( a+bXc) -Xc|v Ea，系统 误差可以接受，免疫比浊法测定 pct可以接受。恒定误差为 0.0687，比例误差为1.2645。当 Xc为2.0; 10.0时|( a+bXc) -Xc| Ea，系统误差不可以接受，免疫比浊法测定pct 不可以接受。4、 回

15、收试验：当 XC=0.25，XC=0.5时免疫透射比浊法测定PCT浓度的比例误差 可接受；当XC=2.0，XC=10时免疫透射比浊法测定 PCT浓度的比例误差不可接受。5、 不确定度测定：不确定度为U95,其95%的置信区间为(0.5457-U95，0.5457+U95)。6、天间重复试验：当 Xc为0.25时，1.96S=0.04，即1.96SEa，RE 不可接受。当 Xc 为 10.0 时，1.96S=0.39，即 1.96SEa，RE 可接受。7、批内重复试验：当 Xc为0.25时，1.96S=0.033，即1.96SEa，RE 不可接受。当 Xc 为 10.0 时，1.96S=0.039，即 1.96SEa，RE 可接受。8、 干扰试验：a.胆红素：当胆红素的病理值达到0.2g/L，10.0g/L时，其干扰作用 产生的恒定误差小于医学决定水平，故免疫比浊法的恒定误差可接受。b. TG :当TG浓度为1.0