抗原抗体反应的特点2PPT课件

1、1,第二节 抗原抗体反应,抗原抗体反应的化学本质 抗原抗体反应的特点 影响抗原抗体反应的因素,2,抗原抗体反应的化学本质,结构基础 抗原抗体的结合力 反应过程,3,4,5,抗原和抗体的结合是互补性的特异性结合 不形成牢固的共价键，通过非共价键结合 这种弱的结合力涉及几种分子间的作用力,一、抗原抗体结合力,一、抗原抗体结合力,1静电引力 *2范德华引力 *3氢键结合力 *4疏水作用力,6,静电引力（库伦引力,electrostatic forces） （coulombic forces,概念：抗原和抗体分子带有相反电荷的 氨基和羧基基团之间相互的引力,引力的大小与两个相互作用基团间的距 离的平方

2、成反比；平均键能约为 20.9kJ/mo1,7,范德华引力（Van der Waals forces,概念：抗原和抗体相互接近时，由于分子的 极化作用而出现的引力,结合力的大小与两个相互作用基团的极化程 度的乘积成正比、与它们之间距离的7次方 成反比，键能约为4.212.5kJmol,这种引力的能量小于静电引力,具有特异性,8,概念：供氢体上的氢原子与受氢体原子 间的引力,氢键结合力(hydregen bond forces,供氢体：羧基、氨基和羟基,受氢体：羧基氧、羧基碳和肽键氧等,能的大小取决于氢键的方向：氢键具有高度 的方向性,氢键结合力与供氢体和受氢体之间距离的6次 方成反比，键能约2

3、0.9kJ/mol,9,疏水作用力（疏水键,概念：两个疏水基团在水溶液中相互接触时， 由于对水分子排斥而趋向聚集的力,抗原决定簇与抗体上的结合点靠近，互相间 正、负极性消失，亲水层立即失去,此力在抗原抗体反应中的结合是很重要的,提供的作用力最大，约占总结合力的50,10,抗原抗体结合力示意图,抗原,抗体,氢键结合力,O N,O N,H H,静电引力,范得华力,疏水作用力,排斥的水,11,二、抗原抗体亲和性（affinity,亲和性 是抗体分子上一个抗原结合点与对 应的抗原决定簇之间的相适应性而存在着的 引力，这是抗原与抗体之间固有的结合力,亲和力（avidity) 是指反应系统中复杂抗 原与相

4、应抗体之间的结合能力。 亲和力与亲和性、抗体的结合价和抗原的有 效决定簇数目相关。 亲和力越大，抗原抗体结合越牢固,12,亲和常数,亲和常数K= K值大的抗体与抗原牢固结合，不易 解离，说明该抗体有高亲和力,抗体与抗原结合是可逆的反应，在平衡时其,13,血清学反应条件下，抗原抗体均带负电荷， 使极化的水分子在其周围形成水化层，成为 亲水胶体,三、亲水胶体转化为疏水胶体,当抗原与抗体结合后，表面电荷减少，水化 层变薄；而且由于抗原抗体复合物形成后， 与水接触的表面积减少，由亲水胶体转化为 疏水胶体,在电解质作用下，各疏水胶体之间靠拢，形 成可见的抗原抗体复合物,14,亲水胶体转化为疏水胶体示意图

5、,亲水胶体,疏水胶体,转化,NaCl,可见反应,15,抗原抗体反应的特点,1.特异性 *2.比例性 *3.可逆性,16,一、 特异性（specificity,概念：抗原分子，只能与由它刺激所产生的抗 体结合而起反应的专一性能,一、 特异性,决定因素：由抗原决定簇和抗体分子超变区之 间空间结构的互补性决定的。 抗体分子N端可变区形成3nm1.5nm0.7nm的槽沟，只有与其空间结构互补的抗原决定簇才能如楔状嵌入,交叉反应(cross reaction) 两种不同的抗原 物质具有部分相同或类似结构的抗原决定簇， 则可与彼此相应的抗体反应,17,特异性示意图,18,最适比(optimal ratio

6、)或等价点(equivzlence point) 最迅速出现沉淀时的抗原抗体的浓度 比或量比,二、比例性（proportionality,等价带(equivalencezone)抗原与抗体分子比 例合适的范围,带现象：Ag与Ab比例不适而不出现可见反应。 * 前带(prozone) 抗体过量时。 * 后带 (postzone) 抗原过量时,19,比例性示意图,抗体过量,比例合适,抗原的量,抗原过量,抗体沉淀的量,前带,等价带,后带,20,三、可逆性（reversibility,概念：是指抗原与抗体结合成复合物后，在 一定条件下可解离为游离抗原与抗体的特性,解离后抗原抗体仍保持原有特性。 一定条

7、件：低pH、高浓度盐等。 常用于解离抗原抗体复合物的物质有： 3mol/L硫氰化钾、pH2.4 0.1mol/L甘氨酸、 7mol/L尿素等,21,抗体,混有SPAg,抗体-SPAg,抗体-SPAg,分离剂,一、抗原抗体结合,二、分离抗体,可逆性示意图,抗体,22,抗原抗体反应影响因素,一、反应物自身因素 *抗原：1.理化特性 2.Ag决定簇数量 3.Ag决定簇种类 *抗体：1.来源 2.特异性与亲和力 3.浓度,23,二、环境条件： *电解质：0.85%NaCl *酸碱度：pH69 *温度：1540,24,第三节 抗原抗体反应类型,1.沉淀反应 2.凝集反应 3.补体参与的反应 4.中和反应 5.免疫标记,25,表,抗原抗体反应的基本类 型 表 反应类型 实验技术 检测方法 敏感度,沉淀反应 液相沉淀试验 观察沉淀、检测浊度 +，+ 琼脂凝胶扩散 观察扫描沉淀线或环 + 凝胶电泳技术 或峰或弧,补体参与反应 补体溶血试验 以裸眼或光电比色仪 + 补体结合试验 观察测定溶血现象,免疫标记技术 荧光免疫技术 检测荧光现象 + 放射免疫技术 检测放射性 + 酶标免疫技术 检测酶底物显色 + 发光免疫技术 测定发光强度 + 生物素-亲合素技术 结合其它标记技术 + 金标免疫技术 检测金颗粒