仿刺参耐高温抗逆品系选育研究

1、计划类别：科技支撑计划一指南代码：1011申报ID号：江苏省科技计划工程申报书（科技支撑计划）江苏省科学技术厅二。年一、立项依据1、本工程国内外科技创新发展简况和最新发展趋势仿刺参(Apostichopus japonicus Selenka),俗称刺参，属棘皮动物f J(Echinoderinata)，海 参纲(Holothuroidea),楣手目(Aspidochirotida),刺参科(Stichopodidae),仿刺参属 (Apostichopus).主要分布于我国地辽宁、河北和山东沿海，而在江苏连云港市地前三岛则 成为刺参自然分布地最南端.(1) 刺参地产业发展现状刺参作为一种珍贵

2、地海珍品被列为“八珍“之一，在我国现有常见地21种食用海参中， 刺参科有4科-分别是仿刺参、梅花参、绿刺参和花刺参.而仿刺参因英营养价值最高而成 为海参家族地主要海水养殖种类，是中国21种食用海参中质量最好地一种，已成为北方 海参地主要养殖对象近年在山东、河北、辽宁等地已进行了大面积地养殖，据不完全统 计，产业规模已达500多亿.2010年江苏省刺参养殖面积达到101公顷，产量为199吨，而辽宁高达86624万公 顷，产量为59764吨，山东也髙达59463公顷，产虽:为66300吨.江苏连云港前三岛海域作 为刺参自然分布地最南端，具备我省稀缺地近海淸洁海域资源，有着最适宜刺参生长地条 件近年

3、来，我省已陆续开展了刺参地养殖和研究工作.2010年连云港市海珍品增养殖实验 场在连云港海域进行地刺参沉箱养殖实验喜获成功，为在江苏近海海域进行刺参养殖探索 出一条切实可行地逍路连云港海域刺参养殖地成功极大地推动了我省刺参养殖地发展，民 间投资海参养殖热情激增，连云港市仅2011年度就新发展刺参沉箱500只，南通也开展了 投资规模达1.2亿地刺参养殖建设，产业发展显著提升，在江苏省“十二五”渔业发展规 划中明确将海参作为江苏渔业发展新地增长点.与如此之大地海参产业规模相比，养殖刺参地种质状况令人忧虑，目前养殖刺参大多 缺乏经过人工选育、性状稳泄、适宜当地或其它海域大而积推广地主流养殖品种与种植

4、 业、畜牧业人工冇成地品种相比，刺参养殖地主要对象仍是未经遗传改良地野生种或是野 生种累代地家养种各刺参种苗生产单位使用当地野生群体和养殖群体作为繁育亲本，在养 殖过程中由于长期使用单一种质资源和英他原因，出现生长速度缓慢，品质下降等种质退 化问题为此近年一些企业引进英他海域刺参以及国外如日本北海道海参、俄罗斯远东日本 海海域刺参等进行养殖，取得了一些成效，但是由于缺乏有效地选育手段，往往出现引种 后前几年效果良好，随着时间地推移，种质逐渐退化，养殖效果堪忧.与北方区域相比，江苏刺参地养殖规模和水平还很落后，2010年江苏省刺参养殖而积 达到101公顷，产量为199吨，仅为山东、辽宁地千分之三

5、左右.除产业发展和政策支持方 面地原因外，英主要原因是江苏有关海参方面地科研工作开展地相对较少，据不完全统计 仅连云港市海洋与水产科学研究所进行过刺参育苗、海区增殖和工厂化养殖等相关方而地 研究与应用，而有关刺参优良品种选育和配套髙效养殖技术研发方而还有显不足，亟待开 展相关研究工作.（2）刺参地种质资源与遗传育种研究现状目前，有关仿刺参地研究，国内外报道主要集中在养殖技术和人工繁殖方面，随着产 业规模地增长，种质地瓶颈问题地凸显，国内一些科研院所开展了刺参种质方而地相关研 究.国内辽宁和山东分别针对刺参地育种开展了一泄地工作，在海参地新品种选育领域，目 前仅有辽宁省选育地一个品种“水院1号”

6、，系2000年常亚青等利用引进地俄罗斯远东日本海 海域刺参与中国大连本地刺参进行地杂交品种.该成果表明杂交刺参在生长率、成活以及品 质上均显示了较大地优势.但该品种地最大缺点是不适合在南方推广，在耐高温方而不具有 优势栾生等人对刺参耳状幼体体长遗传力进行了估计，但对后期地生长性状未见有连续地 跟踪研究因而，当前刺参地选育研究仍然处于摸索阶段，对刺参系统选冇工作还没有真正 展开.江苏沿海大部处于南黄海区域，水温偏高是刺参在我省沿海进行大规模高效养殖地主 要影响因素温度是刺参生长地重要限制因子，过高或过低均会导致刺参休眠，乃至死亡.研 究表明刺参适宜地生长温度为10-20aC之间，并与个体规格有关

7、，规格越大适宜地生长温度相 对越低，稚参培育期间适宜水温为15-25Co 2cm幼参生长最佳温度为19-20C； 5-15cm刺 参生长最适温度为10-154C, 20C开始夏眠据新闻报道，山东省2009年农业良种工程重大课 题“速生抗病耐高温刺参良种选冇“开展了刺参地耐高温选育研究，结果显示经选冇岀地耐 高温刺参苗种具有良好地耐高温性能，选育地耐髙温刺参与常温刺参相比可提前17天解除 夏眠，耐温性提高约1C.据国家海洋局资料显示，从1976年至2000年这25年当中，黄海地 温度以每年0.068摄氏度地上升速度，在不停增加着拯气候变化国家评估报告预测，未 来50年-80年，气候变暧将使中国平

8、均气温升高2C-3C.中国是全球变暧特征最显著地国家 之一，近百年地增温幅度已达0.5C-0.8C,略髙于全球平均江苏所处地南黄海比北黃海年 平均温度髙2-3C,比渤海髙45C.从海域适应和应对全球气候变暧地趋势来看，1 C地耐温 性难以满足实际需要，因而该品系刺参苗也不太适合江苏等海域较髙水温地养殖使用.经典冇种技术如杂交冇种和定向选育是水产动物冇种地重要手段大多数水产养殖新品 种均是通过传统地选育手段获得地，如团头鲂“浦江”系列品种，罗非鱼不同品系、中国对 虾“黄海1号”等水产新品种.但传统选冇技术地主要缺点是选育周期长，选择地群体数量 大，工作量大，要求地人力物力较大，而且选择地效率低下

9、随着现代生物学技术地发展， 水产动物遗传冇种技术也得到了进一步发展，其中分子标记辅助冇种(MAS)因英针对性 强，速度快，选育周期短，选择效率高，亲本地遗传力髙，从岀现起就显示岀了旺盛地生 命力目前新开发地水产品种多是通过传统选育结合分子标记辅助ff种而进行地综合冇种技 术.在亲本选择与性状遗传力评估方而，BLUP (最佳线性无偏预测模型)技术因英可更好 地对环境影响因素进行校正、充分有效地利用所有亲属地信息、校正由于选择交配所造成 地偏差、能同时对来自不同群体、不同世代地个体进行育种值估计和比较以及能进行大规 模地遗传评泄等一系列优点而成为育种学上最近几年地新宠，特别是在挪威对虹鱒、大西 洋

10、鮭等选冇上，取得了理想地效果国内应用该冇种策略开发地新品种则并不多.因此在传统选育地基础上，以选择为基础，以耐髙温性状和分子标记建立连锁关系， 经过杂交和BLUP评估，最终选育出耐高温仿刺参抗逆品系，具有极高地可行性和先进性. 本课题地立项研究，充分发挥江苏沿海丄著品种地优势，建立剌参选冇技术平台，培育出 具有显著地理特性、生产性能优良、耐高温能力强，适合全省推广地刺参新品系，对于推 动江苏刺参产业链可持续性发展，保障刺参养殖业地健康稳定发展具有重要地科学和应用 价值工程完成后大面积推广将会使江苏刺参地良种养殖率与养殖规模得到根本性地改变. 参考文献：1 DONG Yunwei, JI Tin

11、gting, and DONG Shuanglin. Stress Responses to Rapid Temperature Changes of the Juvenile Sea Cucumber (Apostichopus japonicus Sclenka).Journal of Ocean University of China, 2007.6 (3) :275-2802 董云伟，董双林.刺参对温度适应地生理生态学研究进展.中国海洋大学学报, 2009,39(5):908-912孔祥青，丁天宝浅海吊笼养殖刺参技术齐鲁渔业,2010,27(3):29-304 董云伟，董双林，田相利，

12、等.不同水温对刺参幼参生长、呼吸及体组成地影响.中国水 产科学,2005, 12( 1):33-375 于东祥，宋本祥.池塘养殖刺参幼参地成活率变化和生长特点中国水产科学，1999. 6( 3): 109-110.6 于明志，常.亚青.低温对不同群体仿刺参幼参某些生理现象地影响.大连水产学院院报, 2008, 23( 1):31 -36.(7| Yang H S, Yuan X T. Zhou Y. et al. Effects of body size and water temperature on food consunipt ion and grow th in the sea cuc

13、umber Apostichopus japonicus (Selenka) with special reference to a estivation. Aquaculture Research, 2005, 36: 1085 - 10928聂鸿涛，李琪，于瑞海刺参雌核发育二倍体地诱导及其早期生长发冇.中国海洋大学学报,41(9):31-359 Dong Y W, Dong S L. Tian X L, et al. Ef feet s of diel t emperature fluctuation on growth, oxygen consumpt ion and proximat

14、e body composition in the sea cucumber Apostichop usj aponicus Selcnka.Aquaculture. 2006.255: 514 -521.101韩承义，林培华谢，河中.南方海区刺参养殖关键技术研究现代渔业信息,2011,26 (9):32- 3311 孙国华，杨建敏,宋志乐刺参(Apostichopus japonicus)EST序列中微卫星分布分析及苴标 记地筛选海洋与湖沼,2010,41(10):134-13912 李宝泉，杨红生，张涛，等.温度和体重对刺参呼吸和排泄地影响.海洋与湖沼,2002. 33( 2): 182

15、-1872、本工程研究地目地、意义本工程主要利用杂交疗种、BLUP选择育种和分子标记辅助育种等现代生物技术相结 合地方式，对天然刺参品系立向选冇与改良，改良其对不良环境地适应能力，培弃抗髙 温，适宜江苏大规模推广地优良刺参养殖品系.该工程地成功立项有着重要地意义：（1）提升海洋经济地发展海水养殖业是我省海洋经济发展地重要支柱产业之一，而 刺参是优质海珍品，大力发展刺参养殖，开发出适合在江苏推广地优良刺参品种，提升江 苏水产养殖业地发展质量，均具有重要地经济效益和社会效益江苏省“十二五”漁业发展规 划明确将海参作为江苏渔业发展新地增长点，大力发展以海参为代表地海珍品养殖，提升 海洋经济发展.（2

16、）提升人民地生活水平和幸福指数随着科学技术地进步和人们生活水平地不断提 高，海参在营养保健和医疗功效等方而地作用逐渐为世人矚目，海参等髙端水产品地逐步 丰富，对提高江苏人民地生活质量和幸福指数、优化水产品品种结构，丰富居民菜篮子工 程，均具有重要地作用因此大力开展以刺参为代表地海珍品养殖已成为江苏沿海水产养殖 业地重要发展方向.3）提高江苏省地水产科研水平.在髙尼点上，立足江苏优势，将经典育种技术和现 代育种手段相结合，选弃出适合在江苏及其以南沿海地区养殖地耐高温快速生长刺参新品 种，是当前刺参研究领域地重要方向，这对于推动江苏刺参产业链可持续性发展，保障刺 参养殖业地健康稳定发展具有重要地科

17、学和应用价值.3、本工程研究现有起点科技水平及已存在地知识产权情况课题组人员多年来一直从事过三疣梭子蟹、锯缘青蟹、对虾等甲壳类多个经济品种地遗 传冇种技术地研究，对蟹、虾、贝类等微卫星技术地开发和应用工作以及微卫星富集文库 地构建和微卫星引物地筛选方而积累了丰富地经验上世纪80年代末就开展刺参地人工弃 苗研究，并进行刺参地人工增殖实验，2004年承担市级科研工程“刺参工厂化育苗技术研 究”（NY0411） , 2008年承担连云港市科研工程“刺参工厂化高效养殖技术研究“ （CN0829）,积累了一左地刺参增养殖相关技术和经验，取得了较好地成绩.课题组人员参与了国家“863“、农业部、教育部和省

18、市方面地相关课题，已经在刺 参、栉孔扇贝、虾夷扇贝、海胆和皱纹盘鲍等品种地杂交育种方面取得良好进展，积累了 极其丰富地成功经验，并拥有多项科技成果此外，工程组人员承担地国家自然科学基金工 程“刺参耐盐度调控基因地筛选与功能验证研究”（41106128）也已积累了相关地研究材 料，可在耐髙温性状选弃方而提供实验方法上地借鉴目前，已收集到刺参地不同地理群体 （包括大连土著刺参群体、低盐群体、俄罗斯群体等）并进行了群体遗传结构分析，为上 著刺参引入外血地杂交冇种工作提供实验材料和分子水平地数据支持.综上所述，本工程地完成将处于国内领先水平，目前还未见国家原良种委员会审迫推 广地刺参耐高温抗逆新品种因

19、此，工程成果将具有很强地推广应用前景.4、本工程研究国内外竞争情况及产业化前景目前国内外开展刺参弃种研究地仅有两家单位，但开展耐髙温抗逆品种选育地还未有 成果，工程完成后开发地刺参耐高温抗逆新品种，具有极强地竞争力，可在江苏及以南沿 海地区进行大而积推广养殖，具有广阔地市场空间，预讣每年刺参地养殖规模和产值将以 至少20%地规模和产值递增，使因此，在江苏省开展刺参耐髙温抗逆品系选冇有着良好地 经济前景，能够带来巨大地经济效益和社会效益.二、研究内容1、具体研究开发内容和要重点解决地关键技术问题（-）研究内容（1）刺参耐髙温天然种质资源地发掘a对福建、浙江、江苏3个养殖群体与山东、辽宁2个野生群

20、体进行耐高温能力评价。b结合1龄群体地生长性能、遗传结构和遗传多样性状况，综合评价这5个群体地种质 资源状况。c初步筛选岀耐高温选冇基础群体，为群体杂交选育提供基础.（2）耐高温F1家系地建立a通过生长性能、高温抗逆性和遗传资源等多方而因素进行评价，筛选出地选育基础群 体，并进行群体间杂交：b建立正反杂交群体，用于杂交地亲本，每个群体至少30个：c建立家系30-50个，开展多组合杂交家系研究.（3）耐高温性状连锁地分子标记开发a建立刺参基因组文库。b开发刺参卫星标记80-100个。c对耐髙温家系内地个体及其亲本应用微卫星标记进行基因扫描，建立耐髙温性状联锁 地分子标记.（4）耐高温性状及其家系

21、地评估筛选a沱期测左刺参亲本在养殖期内（即1龄起）（1-2个月）其生长性状，体长、体宽、 体髙、体重、刺长、刺数等数据：b左期测左F1群体和家系相关表型数据：c应用BLUP模型中地精细模型（半同胞家系）评估各家系内个体地遗传力，群体选育 采用群组冇种模式进行，计算个体地遗传力，筛选岀真正地耐髙温家系.5）杂交F2代耐髙温刺参地选育与评估a结合分子标记对从F1家系及群体中筛选出地，性状良好地耐髙温个体，进行验证：b建立F2代家系和群体，同步骤（4）泄期测沱各项指标：c对F2代地遗传力进行计算，最终选泄表型优良、耐高温地刺参F2,作为新品种推广 地亲本，进行大规模育苗和推广.（二）解决地关键问题（

22、1）提高成体刺参地耐高温能力，使夏眠温度由自然状态20C提高到22C,从而使刺 参生长期延长40天以上，生长速度提高15%以上，适宜养殖地区扩展到浙江南部沿海；（2）建立刺参耐高温品地分子标记，从而大大提髙冇种效率，缩短育种周期.（3）建立刺参耐髙温选育地技术体系及髙温品系地养殖技术标准，为工程地推广和应用 提供科学依据.2、工程地特色和创新之处:工程地特色：（1）将MAS. BLUP与传统地选择育种、杂交冇种技术结合起来，开展仿刺参品种 选弃，大大提髙育种效率，是工程地主要技术特色分子标记辅助冇种技术具有显著地弃种有效性，将目标性状与基因标记联锁，选育地 针对性强而在亲本性状选择与性状遗传力

23、评估方面，BLUP技术能够更好地对环境地影响 进行校正，最充分有效地利用所有亲属地信息，校正由于选择交配所造成地偏差，同时对 来自不同群体、不同世代地个体进行弃种值估计和比较，能进行大规模地遗传评左，使得 育种地有效性得到了保证.而传统选冇在冇种实践中已被证明是使经济性状得到纯化和提高 地最主要手段，因此，本工程将几种育种方法集合起来，用其各自地优点，使育种地效率 更髙，目标性更强.（2）开展仿刺参地多性状复合育种，在冇种策略上是工程地又一大特色由于养殖业中面临地问题是多方面，需要整体考虑解决这些问题，因此近年来冇种学 家们提出了多性状复合育种地思路该多性状复合育种技术地实践内容目前主要集中在

24、生长 快、成活率和抗逆等三个内容上，对于仿刺参来说，如何延长生长时间成为提髙貝养殖效 果地重要目标，而耐髙温能力地提髙，一是延长其适宜生长时段，二是提髙其抗逆性.因此 耐高温为选冇目标，同时兼顾生长性能地复合性状冇种成为仿刺参育种地重要目标，是本 工程研究地另一大特色.工程地创新点：（1）首次在刺参育种中开发岀耐高温性状联锁地分子标记，从而指导立向选育，这 是工程地创新点之一.工程开发刺参地微卫星标记，将其进行联锁分析，从中找到与耐髙温性状联锁地标 记，以达到利用分子标记辅助育种之目地，在刺参冇种中具有首创性，将会形成具有自主 知识产权地育种技术和新品种.（2）首次使刺参地夏眠温度较自然群体提

25、高2*C,大大拓展和提升养殖品种地适应性 和经济性状及英养殖区域，这是工程地重要创新点.使夏眠温度由自然状态20C提高到22C,从而使刺参生长期延长40天以上，生长速度 提髙15%以上，适宜养殖地区可以扩展到浙江南部沿海，对于海参产业地发展有着重要意 义，同时也是工程地重要创新点.3、要达到地主要技术、经济指标及社会、经济效益.要达到地主要技术指标：（1）实现刺参品种地遗传改良，培育岀适合江苏大而积推广地耐髙温优良品种（系）1-2 个：（2）突破刺参地夏眠温度不超过20C地难题，使选弃地品系夏眠温度较自然群体提髙到 22C；(3) 选冇地新品系其生长速度较未选冇品系提髙15%；(4) 刺参耐高

26、温联锁地分子标记地开发：经济、社会效益：(1) 建立具有显著耐高温抗逆仿刺参家系1-2个，工程成果转化后，使良种年均覆盖率达 20%以，推广而积年增加15%以上，刺参地年产值增加20%以上.(2) 在连云港初步建立刺参人工育种基地与产业化繁ff基地1个.三、研究实验方法、技术路线以及工艺流程本工程地实施方案及实验方法如下：(1) 实验基地建设本工程将在连云港市海洋与水产科学研究所地研究基地内建设标准化地小囤格 (2mx2m) 60个，开展刺参地引种、人工繁殖与家系选育研究.(2) 基础群体构建通过对福建、浙江、江苏养殖群体与山东、辽宁野生群体共5个群体地一龄刺参各 200头，进行耐髙温能力评价

27、，初步筛选岀耐高温选育基础群体.(3 )髙温胁迫与种质资源评估 设豊温度梯度，进行高温胁迫设置两种髙温胁迫模式：A模式：由常温16-18C骤升到22C,统计成活率，并随时保存部分存活和死亡个体 地组织于液妃中.B模式：由常温16-18C缓慢上升到22C,以每天0SC地梯度升温，每个温度稳泄 3d,统计成活率，并随时保存部分存活和死亡个体地组织于液氨中. 生长性能：生长、存活率、生化等性状测迫，通过比较生长性能、经济性能、成 活率和个体大小，应用综合评分法确定最优地选育亲本. 遗传资源评价：应用15个微卫星标记对5个群体，每群体30个体进行遗传结构 分析和遗传多样性评价，最终找到遗传距离大、遗传

28、多样性高地群体，作为育种 地群体.(4 )不同群体地杂交F1耐高温家系地建立对步骤(3)中存活地耐高温群体，设计不同地理群体地家系杂交组合，建立正反杂 交群体3-6个，用于杂交地亲本，每个群体至少30个.同时，建立父系半同胞家系20个 (全同胞家系40个).家系制作过程，严格隔离各个养殖池，防止家系间群体间个体产生 混杂.(5 )耐髙温分子标记地开发利用磁珠富集法构建刺参地基因组微卫星富集文库，从中鉴左出至少100个具有多态 性地微卫星分子标记将这100个标记在F1家系中与其亲本一起进行扫描和基因分型，最 终应用SPSS软件中地一般线性模型(GLM)过程对刺参耐髙温性状与微卫星位点地关联性 进

29、行最小二乘分析，对不同标记基因型之间性状指标差异显著性进行检验并进行多重比较 (LSD),进而分析等位基因地效应，最终筛选岀耐髙温联锁地分子标记.(6 ) BLUP评估后代地耐高温性状并筛选出耐高温家系亲本养殖期内1龄起，每2个月左期记录其生长性状，测疑刺参地体长、体宽、体 髙、体重、刺长、刺数等性状F1群体和家系也要同亲本性状一样进行左期测量表型数据. 将实验数拯应用BLUP模型中地精细模型(半同胞家系)评估各家系内个体地遗传力，群 体选育采用群组冇种模式进行，计算个体地遗传力，筛选出真正地耐高温家系.(7 )耐高温刺参杂交F2代地选疗与评估从F1家系及群体中筛选出遗传力髙，性状良好地耐高温

30、个体，活体取样，提取 DNA,应用开发地与高温联锁地微卫星分子标记进行PCR验证，对阳性个体留种，取遗传 力高地个体200头留种.同步骤(4)左期测左各项指标，对F2代地地遗传力进行计算，最 终选泄表型优良、耐高温地刺参F2,作为新品系推广地亲本，进行规模育苗和中试养殖验 证.本工程地技术路线以及工艺流程如下图:人工繁殖建立耐髙温人工繁殖建立耐高温F1家系20个I正反交群体3-6个四、工作基础和条件 1、承担单位简况，拥有知识产权状况,是江苏省省级水产良种繁冇场，省级渔业科技成果转化基地多年来，始终承担着江 苏省渔业科技成果转化和连云港市水产科技成果转化地重任.承担、参与过江苏省科技厅、 省三

31、项工程、连云港市科技厅等多项科研和工程推广任务，有着过硬地技术力量和和水产 专业人才队伍，先后出色地完成科研工程多项，荣获多个科技成果奖项.工程承担单位现有科技技术計干若干需，英中髙级职称3名，中级职称3冬，省333 人才1名,省“六大人才高峰培养对象1名,市“521”第一层次专家1名,市政府特贴专家 1劣，市青年学科带头人1需，市优秀农业工程技术人员2名，水产专业人才济济，一线 养殖生产经验丰富科研仪器、生产设备齐全，条件完备.拥有生态综合育苗室2000多平方 M,海水、淡水增养殖示范区近500多亩，常年与连云港市海洋与水产科学研究所、淮海 工学院、中科院海洋所、上海海洋大学等科研院所展开合

32、作与联系，具有较髙地渔业科研 与生产地能力.具有独立开展海水虾、蟹、海参工厂化冇苗和大规格海水鱼种培育地必要设施和技 术，有与连岛镇合作养殖海参、鲍鱼地多年经验近年来，连云港市海珍品增养殖实验场在 海州湾人工鱼确区（水深15-17M）连续开展了 100只深水网箱开展刺参沉箱养殖并喜获成 功为在江苏近海海域进行刺参养殖探索出一条切实可行地道路因此本实验场地技术储备 可以胜任本工程地实施.2、本工程现有地研究工作基础工程承担单位，早在上世纪九十年代就在连云港市虾、蟹等水产养殖品种生产恢复和 发展过程中，从冇苗到养成，都做出重要贡献，曾多次承担省、市级水产动物冇种相关课 题研究并取得较好成果.199

33、0年率先在省内进行了三疣梭子蟹育苗实验.1999年又进行了三 疣梭子蟹大规格苗种培育技术研究近年来还进行了中国对虾、日本对虾、刀额新对虾、脊 尾白虾、锯缘青蟹、河蟹等众多甲壳类地遗传育种、工厂化人工育苗或养成技术研究，积 累了丰富地经验，打下了良好地基础.上世纪80年代末就开展刺参地人工冇苗研究，并进 行刺参地人工增殖实验，2004年承担市级科研工程“刺参工厂化育苗技术研究” （NY0411） , 2008年承担连云港市科研工程“刺参工厂化高效养殖技术研究” （CN0829） 也取得了较好地成绩.合作单位淮海工学院，江苏省海洋生物技术实验室，具有良好地研究条件，具有一批 先进地研究仪器，在养殖

34、实验方而，有闭合循环水养殖实验室，多功能水质分析仪、藻类 培养系统等大型设备仪器；在分子生物学方而，实验室内建有PCR仪，超低温离心机、凝 胶成像系统、磁珠富集设备和电泳系统等分子生物学常用设备，有着良好地实验硬件支撑. 实验室研究人员长期从事水产动物种质资源与遗传冇种工作，先后完成了“十一五国家科 技支撑计划，现主持国家自然科学基金和“十二五“国家科技支撑计划多项，具有开展本工 程地硬件与软件环境.大连海洋大学是北方一所以水产为特色地高等院校，建校以来，在教案、科研等方而 都取得了丰硕地成果，并对大连及其周边地区水产养殖业地发展起到带头促进作用农业部 海洋水产增养殖学与生物技术重点开放实验室

35、多年来一直从事棘皮动物以及贝类地人工育 苗及增养殖研究重点开放实验室研究场地约31OOm2,其中拥有500余亩养殖海面和 1000m2现代化冇苗设施，生态实验室和活体培养室约400m2,具备水质处理、消毒、循 环、控温等条件，可满足海水经济动物选育技术及遗传育种研究和工程中试课题组成员曾 多次参加棘皮动物、贝类和对虾遗传育种工作，并在品种培育和养殖技术开发、分子生物 技术等方而积累了丰富地经验.课题参加单位承担了国家“863”、农业部、教育部和省市方而地相关课题，已经在刺 参、栉孔扇贝、虾夷扇贝、海胆和皱纹盘鲍等品种地杂交育种方而取得良好进展此外，工 程组人员承担地国家自然科学基金工程“刺参耐

36、盐度调控基因地筛选与功能验证研究“ （41106128）也已积累了相关地研究材料，可在耐髙温性状选育方而提供实验方法上地借 鉴.目前，已收集到刺参地不同地理群体（包括大连土著刺参群体、低盐群体、俄罗斯群 体等）并进行了群体遗传结构分析，为上著刺参引入外血地杂交育种工作提供实验材料和 分子水平地数拯支持课题组已培冇出大连獐子岛上著刺参群体与俄罗斯群体杂交后代，弃 出苗种10万头左右，为大连上著刺参地杂交育种工作奠左了基础.选择优良性状地獐子岛土著刺参个体进行了强化培冇，并建立了 52个全同胞家系，获 得了部分生长性状地遗传参数，为律子岛上著刺参地BLUP选择弃种技术研究工作提供了 重要地育种数据

37、课题组还开展了刺参、鲍、扇贝和牡蛎地多诱导技术研究，“刺参养殖技 术产业化开发获得辽宁省科技进步二等奖课题组还开展了刺参养殖池塘食物组成及供饵 力、北方刺参池塘养殖模式地研究：刺参养殖池塘地养殖容量、低温对不同群体刺参幼参 影响地研究：养殖池塘水质地周年变化、刺参疾病地快速诊断等多方而地相关研究工作.这些基础工作为刺参耐高温品种选冇技术研究奠左了重要地基础，为课题地按时完成 提供了重要地保障.3、工程负责人以往承担国家、省级等各类科技讣划工程完成情况工程负责人：伏光辉，髙级工程师，研究方向水产种苗培育.工作至今共参研省（部）市级 科研工程48项（部级工程3项，省“九五“农业重点攻关、国际合作等

38、省级工程19项，市 级农业攻关计划等工程26项），英中主持25项，主研、参加23项，现已完成38项.近10 年研究工程如下：1999年，市级科技兴海工程，锯缘青艷地引种及人工繁殖技术研究，编号KH99009, 2000 年通过市级成果鉴肚.2005年获市科技进步三等奖.2002年，市青年学科带头人计划工程，香鱼人工繁殖及网箱养殖技术研究，编号 QN200204, 2005年通过市级成果鉴左.2002年，省级科技示范推广工程，青沙蚕集约化人工冇苗和生态修复型养殖技术开发，编 号BC2002367, 2006年通过省科技厅验收，2008年获市科技进步三等奖.2003年，省级海洋渔业开发工程，海乘人

39、工繁育及规模化养殖，编号苏财农(2003) 198 号，2005年通过省级验收和市级成果鉴定.2006年获市科技进步三等奖.2003年，市级科技发展工程，大弹涂鱼驯化养殖技术研究，编号NY0322, 2005年通过市 级成果鉴定.2007年获市科技进步三等奖.2003年，省级水产三项工程工程，脊尾白虾人工繁育及规模化养殖，编号PJ2003-24,2005年通过省级验收.2004年，市级农业攻关工程，刺参工厂化育苗技术研究“，编号NY0411, 2006年通过市级 鉴定.2005年，市级农业攻关工程，马粪海胆人工冇苗技术研究，编号CNO536, 2007年通过市 级成果鉴定.2007年，省国际合

40、作工程，江Gracilaria gracilis引种及苴栽培技术研究，编号 BZ2007043, 2010年通过省级验收.2008年，市级农业攻关工程，刺参工厂化高效养殖技术研究，编号CN0829, 2010年通过 市级验收.2009年，省科技支撑汁划，三疣梭子蟹抗逆家系选育及人繁技术研究，编号BE2009339, 工程已完成，准备验收.4、工程实施具备地人才队伍、经费配套投入能力及科技服务管理能力：工程承担单位连云港市海珍品增养殖实验场，工程合作单位淮海工学院海洋学院、江 苏省海洋生物技术实验室、大连海洋大学，具有雄厚地研究实力，研究团队中人员结构合 理，专业互补性强，且均长期从事海洋动物地

41、繁育、冇种和养殖研究工作，部分人员从事 科研、科技服务与管理地工作，具有相当完成本工程地良好基础.工程组所在地连云港市海珍品增养殖实验场、淮海工学院江苏省海洋生物技术实验 室、大连海洋大学具有良好地研究条件，具有一批先进地研究仪器，如多功能水质分析 仪、藻类培养系统等科研仪器设备，有着良好地实验硬件支撑，工程组具有良好地研究基 础，已承担工程与本工程有着良好地继承性和研究地连续性，从而可以保证经费地合理分 配和使用本工程组已开展过刺参地种质评价研究，取得了一左地研究成果多年来长期从事 虾、蟹、棘皮动物类地育苗和生产工作，具有丰富地冇种经验和种质改良技术在生物学技 术方而，课题组成员对几种分子标记技术都非常熟悉且一直从事相关地研究工作，并已经 在开展三疣梭子蟹中地SSR、AFLP技术地开发等相关条件地探索工作，同时在甲壳类基因组中进行了 SINEs序列地分析工作研究本工程将依托江苏省海洋生物技术重点建设实验室进行.江苏省 海洋生物技术重点建设实验室具备完成本课题地基础碾件条件，包括DNA提取，琼脂糖 凝胶电泳，非放射性杂交等所需地超净工作台、