电泳技术和常用电泳仪

1、 本章教学要求 了解常用的电泳仪了解常用的电泳仪 了解电泳仪临床应用了解电泳仪临床应用 熟悉常用电泳仪的基本结构、电泳方法熟悉常用电泳仪的基本结构、电泳方法 熟悉毛细管电泳仪基本原理、基本结构熟悉毛细管电泳仪基本原理、基本结构 掌握电泳基本原理掌握电泳基本原理 掌握毛细管电泳的特点、分离模式掌握毛细管电泳的特点、分离模式 掌握电泳仪的维护保养及故障排除掌握电泳仪的维护保养及故障排除 内 容 提 要 第一节第一节 电泳原理电泳原理 第二节第二节 常用电泳方法常用电泳方法 第三节第三节 常用电泳仪的基本结构及技术指标常用电泳仪的基本结构及技术指标 第四节第四节 常用电泳仪简介常用电泳仪简介 第五节

2、第五节 毛细管电泳毛细管电泳 第六节第六节 电泳仪的维护保养及故障排除电泳仪的维护保养及故障排除 第七节第七节 电泳仪的临床应用电泳仪的临床应用 电泳（electrophoresis）是指带电荷的溶质或粒子在电场 中向着与其本身所带电荷相反的电极移动的现象。 利用电泳现象将多组分物质分离、分析的技术叫做电泳 技术（electrophoresis technique）。 可以实现电泳分离技术的仪器称之为电泳仪 （electrophoresister）。 概 述 临床常用的电泳分析方法主要有醋酸纤维临床常用的电泳分析方法主要有醋酸纤维 素薄膜电泳、凝胶电泳、等电聚焦电泳、双向电素薄膜电泳、凝胶电泳

3、、等电聚焦电泳、双向电 泳和毛细管电泳等。泳和毛细管电泳等。 目前，电泳技术已广泛用于蛋白质、多肽、目前，电泳技术已广泛用于蛋白质、多肽、 氨基酸、核苷酸、无机离子等成份的分离和鉴定，氨基酸、核苷酸、无机离子等成份的分离和鉴定， 甚至还用于细胞与病毒的研究。甚至还用于细胞与病毒的研究。 概 述 第一节 电泳原理 一、电泳的基本原理一、电泳的基本原理 物质分子在正常情况下一般不带电，即所带正负物质分子在正常情况下一般不带电，即所带正负 电荷量相等，故不显示带电性。但是在一定的物理作用电荷量相等，故不显示带电性。但是在一定的物理作用 或化学反应条件下，某些物质分子会成为带电的离子或化学反应条件下，

4、某些物质分子会成为带电的离子 （或粒子），不同的物质，由于其带电性质、颗粒形状（或粒子），不同的物质，由于其带电性质、颗粒形状 和大小不同，因而在一定的电场和大小不同，因而在一定的电场 中它们的移动方向和移中它们的移动方向和移 动速度也不同，因此可动速度也不同，因此可 使它们分离。使它们分离。 电泳现象和电渗流现象 第一节 电泳原理 若将带净电荷若将带净电荷Q Q的粒子放入电场，则该粒子所受到的电荷引的粒子放入电场，则该粒子所受到的电荷引 力为：力为：F F引 引=E Q =E Q （16-116-1） 在溶液中在溶液中, ,运动粒子与溶液之间存在阻力运动粒子与溶液之间存在阻力F F阻 阻 F

5、 F阻 阻=6rV =6rV （16-216-2） 当当F F引 引=F =F阻 阻时 时 EQ= 6rVEQ= 6rV V = EQ/6r V = EQ/6r （16-316-3） 由上式可以看出由上式可以看出, ,粒子的移动速度粒子的移动速度( (泳动速度泳动速度V)V)与电场与电场 强度强度(E)(E)和粒子所带电荷量和粒子所带电荷量(Q)(Q)成正比成正比, ,而与粒子的半径而与粒子的半径(r)(r) 及溶液的粘度及溶液的粘度()()成反比。成反比。 第一节 电泳原理 二、影响电泳的外界因素二、影响电泳的外界因素 （一）电场强度（一）电场强度 （二）溶液的（二）溶液的pHpH值值 （三

6、）溶液的离子强度（三）溶液的离子强度 （四）电渗作用（四）电渗作用 （五）粒子的迁移率（五）粒子的迁移率 （六）吸附作用（六）吸附作用 V = EQ/6r 第二节 常用电泳方法 一、纸电泳一、纸电泳 指用滤纸作为支持载体的电泳方法。是最指用滤纸作为支持载体的电泳方法。是最 早使用的区带电泳。早使用的区带电泳。 将滤纸条水平地架设在 两个装有缓冲溶液的容器之 间，样品点于滤纸中央。当 滤纸条被缓冲液润湿后，再 盖上绝缘密封罩，即可由电 泳电源输入直流电压 （100V1000V）进行电泳。 平卧式电泳槽装置示意图 第二节 常用电泳方法 二、醋酸纤维素薄膜电泳二、醋酸纤维素薄膜电泳 电泳时经过膜的预

7、处理、加样、电泳、染电泳时经过膜的预处理、加样、电泳、染 色、脱色与透明即可得到满意的分离效果。此色、脱色与透明即可得到满意的分离效果。此 电泳的特点是分离速度快、电泳的特点是分离速度快、 电泳时间短、样品电泳时间短、样品 用量少。因此特别用量少。因此特别 适合于病理情况下适合于病理情况下 微量异常蛋白的检测。微量异常蛋白的检测。 血清蛋白的电泳图谱 第二节 常用电泳方法 三、凝胶电泳三、凝胶电泳 由区带电泳中派生出的一种用凝胶物质作支持由区带电泳中派生出的一种用凝胶物质作支持 物进行电泳的方式。物进行电泳的方式。 凝胶电泳中的琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝凝胶电泳中的琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺

8、凝 胶电泳是普通电泳中应用最多胶电泳是普通电泳中应用最多 的两种形式。的两种形式。 目前，这种办法被广泛目前，这种办法被广泛 用来分析蛋白质和核酸。用来分析蛋白质和核酸。 凝胶电泳图 第二节 常用电泳方法 四、等电聚焦电泳四、等电聚焦电泳 1 1等电聚焦电泳过程等电聚焦电泳过程 一种利用有一种利用有pHpH值梯度的介值梯度的介 质，分离等电点不同的蛋白质的电泳技术。质，分离等电点不同的蛋白质的电泳技术。 在一个稳定连续的线性在一个稳定连续的线性pHpH梯度的溶液（两性载梯度的溶液（两性载 体电解质）中进行分离，每一种被体电解质）中进行分离，每一种被 分离的两性物质都移向与它的等分离的两性物质都

9、移向与它的等 电点相一致的电点相一致的pHpH位置，在那里不位置，在那里不 再移动（称为聚焦）。再移动（称为聚焦）。 净电荷与PH的关系曲线 第二节 常用电泳方法 2 2等电聚焦电泳的特点等电聚焦电泳的特点 使用两性载体电解质，在电极之间形成稳定、使用两性载体电解质，在电极之间形成稳定、 连续、线性的连续、线性的pHpH梯度；由于梯度；由于“聚焦效应聚焦效应”，即使，即使 很小的样品也能获得清晰、鲜明的区带界面；电很小的样品也能获得清晰、鲜明的区带界面；电 泳速度快泳速度快; ;分辨率高分辨率高; ;加入样品的位置可任意选加入样品的位置可任意选 择；可用于测定蛋白质类物质的等电点择；可用于测定

10、蛋白质类物质的等电点; ;适用适用 于中、大分子量（如蛋白质、肽类、同工酶等）生于中、大分子量（如蛋白质、肽类、同工酶等）生 物组分的分离分析。物组分的分离分析。 第二节 常用电泳方法 五、等速电泳五、等速电泳 采用两种不同浓度的电解质，一种为前导电解采用两种不同浓度的电解质，一种为前导电解 质，充满整个毛细管柱；另一种为尾随电解质，置质，充满整个毛细管柱；另一种为尾随电解质，置 于一端的电泳槽中。前导电解质的迁移率高于任何于一端的电泳槽中。前导电解质的迁移率高于任何 样品组分，尾随电解质则低于任何样品组分，被分样品组分，尾随电解质则低于任何样品组分，被分 离的组分按其不同的迁移率夹在中离的组

11、分按其不同的迁移率夹在中 间，在强电场的作用下，各被间，在强电场的作用下，各被 分离组分在前导电解质与尾随分离组分在前导电解质与尾随 电解质之间的空隙中移动，实电解质之间的空隙中移动，实 现分离。现分离。 等速电泳示意图 第二节 常用电泳方法 六、双向凝胶电泳（二维电泳）六、双向凝胶电泳（二维电泳） 第一向采用等电聚焦第一向采用等电聚焦 根据复杂的蛋白质成分中根据复杂的蛋白质成分中 各个蛋白质的各个蛋白质的PIPI的不同，将蛋白质进行分离。的不同，将蛋白质进行分离。 第二向采用了十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺凝胶第二向采用了十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺凝胶 电泳电泳 （SDS-PAGESDS-PAG

12、E）就是按蛋）就是按蛋 白质分子量的大小使其在垂直白质分子量的大小使其在垂直 方向进行分离。其结果不再是方向进行分离。其结果不再是 条带状，而是呈现为斑点状。条带状，而是呈现为斑点状。等电聚焦仪 双向凝胶电泳示意图 第二节 常用电泳方法 第一向IEF第二向SDS-PAGE 18cm玻璃板 MarkerIPG胶条 等电聚焦电泳 槽 六、双向凝胶电泳（二维电泳） 第二节 常用电泳方法 六、双向凝胶电泳仪器结构 制胶板、电泳槽、电源、计算机、扫描仪等 第二节 常用电泳方法 七、免疫电泳七、免疫电泳 免疫电泳是琼脂平板电泳和双相免疫扩散两免疫电泳是琼脂平板电泳和双相免疫扩散两 种方法的结合。将抗原样品

13、在琼脂平板上先进行电种方法的结合。将抗原样品在琼脂平板上先进行电 泳，使其中的各种成分因电泳迁移率的不同而彼此泳，使其中的各种成分因电泳迁移率的不同而彼此 分开；然后加入抗体做双相免疫扩散，把已分离的分开；然后加入抗体做双相免疫扩散，把已分离的 各抗原成分与抗体在琼脂中扩散而相遇，在二者比各抗原成分与抗体在琼脂中扩散而相遇，在二者比 例适当的地方，形成肉眼可见的沉淀弧。例适当的地方，形成肉眼可见的沉淀弧。 第三节 常用电泳仪的基本结构及技术 指标 一、常用电泳设备的基本结构一、常用电泳设备的基本结构 （一）电源（一）电源 （二）电泳槽（二）电泳槽 （三）附加装置（三）附加装置 垂直电泳仪器装置

14、示意图 实验室常用电泳槽和电泳 第三节 常用电泳仪的基本结构及技术指标 垂直板电泳槽和电源垂直板电泳槽和电源 水平电泳槽、电泳仪 第三节 常用电泳仪的基本结构及技术指 标 二、电泳仪的主要技术指标二、电泳仪的主要技术指标 1 1输出电压输出电压 6 6功率稳定度功率稳定度 2 2输出电流输出电流 7 7连续工作时间连续工作时间 3 3输出功率输出功率 8 8显示方式显示方式 4 4电压稳定度电压稳定度 9 9定时方式定时方式 5 5电流稳定度电流稳定度 第四节 常用电泳仪简介 一、稳压稳流电泳仪一、稳压稳流电泳仪 稳压稳流电泳仪是稳压稳流电泳仪是目前国内稳压稳流电泳仪是稳压稳流电泳仪是目前国内

15、 中、低压电泳实验中应用最广泛的电泳仪之一。其中、低压电泳实验中应用最广泛的电泳仪之一。其 输出电压的调节范围为输出电压的调节范围为0V0V600V600V、输出电流为、输出电流为0 0 mAmA100mA100mA。这种电泳仪工作稳定性好、调节范围宽，。这种电泳仪工作稳定性好、调节范围宽， 并设有完善的短路保护电路和过流保护电路。并设有完善的短路保护电路和过流保护电路。 稳压稳流电泳仪 第四节 常用电泳仪简介 二、全自动醋纤膜电泳仪二、全自动醋纤膜电泳仪 全自动醋纤膜电泳仪为全自动电泳仪，有可全自动醋纤膜电泳仪为全自动电泳仪，有可 见光单系统，使用醋酸纤维薄膜电泳片，优点为自见光单系统，使用

16、醋酸纤维薄膜电泳片，优点为自 动化程度高。只需将样品、试剂、电泳片放好，人动化程度高。只需将样品、试剂、电泳片放好，人 员可离机完成实验并得到结果。员可离机完成实验并得到结果。 第四节 常用电泳仪简介 三、全自动荧光三、全自动荧光/ /可见光双系统电泳仪可见光双系统电泳仪 全自动荧光全自动荧光/ /可见光双系统电泳仪只需将样品、可见光双系统电泳仪只需将样品、 试剂和琼脂糖凝胶电泳胶片放好后，其最大优点是试剂和琼脂糖凝胶电泳胶片放好后，其最大优点是 荧光系统全自动，只需要荧光系统全自动，只需要20min20min即可完成电泳分析，即可完成电泳分析， 速度非常快。操作人员可离机完成实验并得到结果。

17、速度非常快。操作人员可离机完成实验并得到结果。 第四节 常用电泳仪简介 四、全自动琼脂糖电泳仪四、全自动琼脂糖电泳仪 全自动琼脂糖电泳仪，有可见光单系统，全自动琼脂糖电泳仪，有可见光单系统， 使用琼脂糖凝胶电泳胶片。灵敏度高，可适用使用琼脂糖凝胶电泳胶片。灵敏度高，可适用 于低浓度蛋白检验，如尿蛋白、脑脊液蛋白、于低浓度蛋白检验，如尿蛋白、脑脊液蛋白、 同工酶的分离。但其自动化程度较差。同工酶的分离。但其自动化程度较差。 由于这类电泳仪所能做的项目较多，且灵由于这类电泳仪所能做的项目较多，且灵 敏度较高，仍为许多实验室所接受。敏度较高，仍为许多实验室所接受。 第四节 常用电泳仪简介 五、全自动

18、电泳分析系统五、全自动电泳分析系统 全自动电泳分析系统，将上述仪器的优点集全自动电泳分析系统，将上述仪器的优点集 于一身，仪器自动点样、电泳、呈色（或染色、脱于一身，仪器自动点样、电泳、呈色（或染色、脱 色）、烘干，自动化程度非常高。可用各种电泳片，色）、烘干，自动化程度非常高。可用各种电泳片， 包括琼脂片、醋酸片、聚丙烯酰胺等，采用可见光包括琼脂片、醋酸片、聚丙烯酰胺等，采用可见光 及荧光呈色双系统，是一种较理想的电泳仪。及荧光呈色双系统，是一种较理想的电泳仪。 全自动电泳仪 第五节 毛细管电泳 一、毛细管电泳的基本工作原理一、毛细管电泳的基本工作原理 溶液中的带电粒子以高压电场为驱动力，沿

19、溶液中的带电粒子以高压电场为驱动力，沿 毛细管通道，以不同速度向与其所带电荷相反的电毛细管通道，以不同速度向与其所带电荷相反的电 极方向迁移，并依据样品中各极方向迁移，并依据样品中各 组分之间淌度和分配行为组分之间淌度和分配行为 上的差异而实现分离。上的差异而实现分离。 高效毛细管电泳仪 第五节 毛细管电泳 毛细管电泳仪装置示意图 第五节 毛细管电泳 三、毛细管电泳的特点 1. 高灵敏度 2. 高速度 3. 高分 辨率 4. 样品少 5. 自动化程度高 6. 应用范围广 TriSepTM-2010GV pCEC System 第五节 毛细管电泳 三、毛细管电泳的分离模式三、毛细管电泳的分离模式

20、 （一）毛细管区带电泳（一）毛细管区带电泳 它是通过在充满电解质溶液的毛细管中，不它是通过在充满电解质溶液的毛细管中，不 同质荷比大小的组分，在电场的作用下，依迁移速同质荷比大小的组分，在电场的作用下，依迁移速 度的不同而进行分离。度的不同而进行分离。 根据组分的迁移时间进行根据组分的迁移时间进行 定性，根据电泳峰的峰面定性，根据电泳峰的峰面 积或峰高进行定量分析。积或峰高进行定量分析。 毛细血管区带电泳原理图 第五节 毛细管电泳 （二）毛细管凝胶电泳（二）毛细管凝胶电泳 毛细管凝胶电泳毛细管凝胶电泳(CGE) (CGE) 常用聚丙烯酰胺在常用聚丙烯酰胺在 毛细管内交联制成凝胶柱，依据分离支撑

21、物的分毛细管内交联制成凝胶柱，依据分离支撑物的分 离作用不同，离作用不同，CGECGE又分为非变性又分为非变性CGECGE和变性和变性CGECGE， 前者以分子筛、电荷质量比的作用进行分离；前者以分子筛、电荷质量比的作用进行分离； 后者则以质量、分子筛的作用进行分离。后者则以质量、分子筛的作用进行分离。 适用于分离、测定肽类、蛋白质、适用于分离、测定肽类、蛋白质、DNADNA类物类物 质的分离。质的分离。 第五节 毛细管电泳 （三）毛细管胶束电动色谱（三）毛细管胶束电动色谱(MECC)(MECC) MECC MECC系统中存在两个相：流动的水相和起到固系统中存在两个相：流动的水相和起到固 定相

22、作用的胶束相。定相作用的胶束相。 在含有胶束的流动相中，溶质在在含有胶束的流动相中，溶质在“水相水相”和和 “胶束相胶束相”( (准固定相准固定相) )之间进行分配，即使是中性之间进行分配，即使是中性 溶质，因其本身疏水性不同，在二者之间的分配也溶质，因其本身疏水性不同，在二者之间的分配也 会有差异，疏水性强的溶质在会有差异，疏水性强的溶质在“胶束相胶束相”中停留时中停留时 间长，迁移速度就慢。反之，亲水性强的溶质迁移间长，迁移速度就慢。反之，亲水性强的溶质迁移 速度就快，最终中性溶质将依其疏水性不同而得以速度就快，最终中性溶质将依其疏水性不同而得以 分离。分离。 第五节 毛细管电泳 毛细管胶

23、束电动色谱原理图 第五节 毛细管电泳 （四）毛细管等电聚焦电泳（四）毛细管等电聚焦电泳 不同等电点的分子分别聚集在不同的位置上，不同等电点的分子分别聚集在不同的位置上， 不作迁移而彼此分离，这就是等电聚焦分离过程。不作迁移而彼此分离，这就是等电聚焦分离过程。 毛细管的等电聚焦是在毛细管内实现的等电聚焦过毛细管的等电聚焦是在毛细管内实现的等电聚焦过 程，具有极高的分辨率，通常可以分离等电点差异程，具有极高的分辨率，通常可以分离等电点差异 小于小于 0.01pH0.01pH单位的两种蛋白质，例如肽类、蛋白单位的两种蛋白质，例如肽类、蛋白 质的分离。质的分离。 第五节 毛细管电泳 （五）毛细管等速电

24、泳（五）毛细管等速电泳 毛细管内首先导入具有比被分离各组分高电毛细管内首先导入具有比被分离各组分高电 泳淌度的前导电解质，然后进样，随后再导入比各泳淌度的前导电解质，然后进样，随后再导入比各 分离组份低电泳淌度的尾随电解质，在强电场的作分离组份低电泳淌度的尾随电解质，在强电场的作 用下，各被分离组分在前导电解质与尾随电解质之用下，各被分离组分在前导电解质与尾随电解质之 间的空隙中发生分离。间的空隙中发生分离。 第五节 毛细管电泳 （六）毛细管电色谱（六）毛细管电色谱 它包含了电泳和色谱两种机制，是在毛细管中它包含了电泳和色谱两种机制，是在毛细管中 填充填充 或在毛细管壁或在毛细管壁 上键合（或

25、涂壁）固上键合（或涂壁）固 定相，从而构成毛细定相，从而构成毛细 管色谱柱，依靠电渗管色谱柱，依靠电渗 流推动流动相，携带流推动流动相，携带 样品迁移，根据样品样品迁移，根据样品 分子的质荷比、分子分子的质荷比、分子 尺寸及分配系数的差尺寸及分配系数的差 别而分离。别而分离。 CEC-加压毛细管电色谱仪 第五节 毛细管电泳 （七）毛细管电泳芯片（七）毛细管电泳芯片 毛细管电泳芯片是在常规毛细管电泳的原理毛细管电泳芯片是在常规毛细管电泳的原理 和技术基础上，利用微加工技术在平方厘米级大小和技术基础上，利用微加工技术在平方厘米级大小 的芯片上加工出各种微细结构，如通道和其它功能的芯片上加工出各种微

26、细结构，如通道和其它功能 单元，通过不同的通道、反应器、检测单元等的设单元，通过不同的通道、反应器、检测单元等的设 计和布局，实现样品的进样、反应、分离和检测，计和布局，实现样品的进样、反应、分离和检测， 是一种多功能化的快速、高效和低耗的微型实验装是一种多功能化的快速、高效和低耗的微型实验装 置。置。 第五节 毛细管电泳 四、毛细管电泳仪的基本结构四、毛细管电泳仪的基本结构 毛细管电泳仪的结构并不复杂，主要有高压毛毛细管电泳仪的结构并不复杂，主要有高压毛 细管柱、检测器，以及两个细管柱、检测器，以及两个 供毛细管两端插入而又可和电供毛细管两端插入而又可和电 源相连的缓冲液槽。源相连的缓冲液槽

27、。 （一）毛细管柱（一）毛细管柱 （二）检测器（二）检测器 （三）毛细管电泳（三）毛细管电泳 法的进样技术法的进样技术 毛细管电泳仪 第六节 电泳仪的维护保养及故障排除 一、电泳仪的维护保养一、电泳仪的维护保养 （一）每日维护（一）每日维护 （二）每周维护（二）每周维护 （三）每月维护（三）每月维护 （四）按需进行的维护（四）按需进行的维护 TriSep 毛细管电泳仪 第六节 电泳仪的维护保养及故障排 除 二、电泳仪的故障排除二、电泳仪的故障排除 电泳仪是精密仪器，在操作过程中要严格电泳仪是精密仪器，在操作过程中要严格 遵守操作规程，但不可避免会出现各种各样的遵守操作规程，但不可避免会出现各种

28、各样的 故障，当仪器提示有故障时，应立即处理。故障，当仪器提示有故障时，应立即处理。 BECKMAN COULTER毛细管电泳仪 第六节 电泳仪的维护保养及故障排除 故障信息故障信息引起故障可能原因引起故障可能原因解决方法解决方法 转盘识别错误转盘识别错误细微灰尘吸附在灯上细微灰尘吸附在灯上 仪器关机，用洁净棉签轻轻拭去灯上面的仪器关机，用洁净棉签轻轻拭去灯上面的 灰尘。仪器开机后再进行测定。灰尘。仪器开机后再进行测定。 样品识别错误样品识别错误血清分离不好或者有灰尘吸附血清分离不好或者有灰尘吸附 关机状态，拆开仪器内透明有机玻璃，关机状态，拆开仪器内透明有机玻璃， 用无水乙醇擦拭加样针外壁，

29、然后安用无水乙醇擦拭加样针外壁，然后安 装好，再用仪器内程序进行加样针清装好，再用仪器内程序进行加样针清 洗，洗完洗，洗完 12 次后，进行加样针加样次后，进行加样针加样 感应定位。感应定位。 仪器报警出现缺少稀仪器报警出现缺少稀 释杯或稀释杯感应释杯或稀释杯感应 错误错误 仪器稀释杯位置错误仪器稀释杯位置错误 观察稀释杯位置，如果没有处于正常位置，观察稀释杯位置，如果没有处于正常位置， 可手动将其移动到其原来位置，可手动将其移动到其原来位置， 然后然后 进行稀释杯感应定标。进行稀释杯感应定标。 曲线不理想，显示不稳曲线不理想，显示不稳 定定 毛细管的长期使用出现不清洁毛细管的长期使用出现不清

30、洁 毛细管清洗程序进行清洗，然后按激活程毛细管清洗程序进行清洗，然后按激活程 序进行激活既可序进行激活既可 电泳时出现峰丢失电泳时出现峰丢失 未接入检测器，或检测器不起作用未接入检测器，或检测器不起作用， 进样温度太低进样温度太低，柱箱温度太低，无柱箱温度太低，无 载气流载气流 检查设定值。检查设定值。 检 查 温 度 ， 并 根 据 需 要 调 整 。检 查 温 度 ， 并 根 据 需 要 调 整 。 检 查 温 度 ， 并 根 据 需 要 调 整 。检 查 温 度 ， 并 根 据 需 要 调 整 。 检查压力调节器，并检查泄漏，验证检查压力调节器，并检查泄漏，验证 柱进品流速。柱进品流速。

31、 运行过程中突然断电运行过程中突然断电电流量不稳定或仪器内有短路现象电流量不稳定或仪器内有短路现象 采用稳压措施，咨询工程师更换保险采用稳压措施，咨询工程师更换保险 毛细管电泳仪常见故障及故障排除方法 第七节 电泳仪的临床应用 一、 血清蛋白电泳 新鲜血清经醋酸纤维薄膜或琼脂糖 电泳、染色后，通常可见5 5条带，即清蛋白、 1 1、 2 2、 和 球蛋白。许多疾病总血清蛋白浓度和 各蛋白组分的比例有所改变，通过血清蛋白电 泳图谱能帮助我们对某些疾病进行诊断及鉴别 诊断。 血清蛋白电泳图谱 第七节 电泳仪的临床应用 二、尿蛋白电泳二、尿蛋白电泳 临床进行尿蛋白电泳的主要目的是：确定尿蛋白的来源；

32、临床进行尿蛋白电泳的主要目的是：确定尿蛋白的来源； 了解肾脏病变的严重程度（选择性蛋白尿与非选择性蛋白了解肾脏病变的严重程度（选择性蛋白尿与非选择性蛋白 尿），从而有助于诊断和预后的判断。尿），从而有助于诊断和预后的判断。 当不能进行肾活检时当不能进行肾活检时 ，尿蛋白电泳结果能，尿蛋白电泳结果能 很好地协助临床判断很好地协助临床判断 肾脏的主要损害。肾脏的主要损害。 尿蛋白电泳图谱 第七节 电泳仪的临床应用 三、血红蛋白及糖化血红蛋白电泳三、血红蛋白及糖化血红蛋白电泳 应用电泳法鉴别患者血液中应用电泳法鉴别患者血液中HbHb的类型及含的类型及含 量，对于贫血类型的临床诊断及治疗具有重大量，对

33、于贫血类型的临床诊断及治疗具有重大 意义。意义。HbHb电泳结果应根据不同年龄人群进行分电泳结果应根据不同年龄人群进行分 析。析。 血红蛋白电泳图谱 第七节 电泳仪的临床应用 四、免疫固定电泳四、免疫固定电泳 可对各类Ig及其轻链进行分型，最常用于 临床常规M蛋白的分型与鉴定。一般用于单克隆 Ig增殖病、单克隆Ig病、本周氏蛋白和游离轻 链病、多组分单克隆Ig病、重链病、 CSF寡克隆蛋白鉴 别、多克隆Ig病的 诊断和鉴别诊断 免疫固定电泳图谱 第七节 电泳仪的临床应用 五、五、 同工酶电泳同工酶电泳 同工酶电泳用于临床上常见的同工酶或同同工酶电泳用于临床上常见的同工酶或同 工酶亚型分析。工酶

34、亚型分析。 1 1乳酸脱氢酶乳酸脱氢酶(LD/LDH)(LD/LDH)同工酶同工酶 2 2肌酸激酶（肌酸激酶（CKCK）同工酶）同工酶 3 3CKCK同工酶亚型同工酶亚型 同工酶电泳图谱 第七节 电泳仪的临床应用 六、脂蛋白电泳六、脂蛋白电泳 脂蛋白电泳检测各种脂蛋白（包括胆固醇和甘脂蛋白电泳检测各种脂蛋白（包括胆固醇和甘 油三酯）主要用于高脂血症的分型、冠心病危险性油三酯）主要用于高脂血症的分型、冠心病危险性 估计，以及动脉粥样硬化性及相关疾病的发生、发估计，以及动脉粥样硬化性及相关疾病的发生、发 展、诊断和治疗（包括治疗性生活方式改变、饮食展、诊断和治疗（包括治疗性生活方式改变、饮食 及调

35、脂药物冶疗）效果观察的研究等。及调脂药物冶疗）效果观察的研究等。 脂蛋白电泳图谱 谢 谢 第二节 常用电泳方法 六、双向凝胶电泳（二维电泳）六、双向凝胶电泳（二维电泳） 第一向采用等电聚焦第一向采用等电聚焦 根据复杂的蛋白质成分中根据复杂的蛋白质成分中 各个蛋白质的各个蛋白质的PIPI的不同，将蛋白质进行分离。的不同，将蛋白质进行分离。 第二向采用了十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺凝胶第二向采用了十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺凝胶 电泳电泳 （SDS-PAGESDS-PAGE）就是按蛋）就是按蛋 白质分子量的大小使其在垂直白质分子量的大小使其在垂直 方向进行分离。其结果不再是方向进行分离。其结果不再是 条带状，而是呈现为斑点状。条带状，而是呈现为斑点状。等电聚焦仪 第三节 常用电泳仪的基本结构及技术 指标 一