PCR实验室基本设置要求张琼

1、PCR实验室基本设置要求张琼 PCR实验室基本设置要求张琼 主要内容 PCR实验室基本设置要求张琼 PCR实验室基本设置要求张琼 PCR实验室基本设置要求张琼 PCR实验室基本设置要求张琼 PCR实验室基本设置要求张琼 PCR实验室基本设置要求张琼 PCR实验室基本设置要求张琼 PCR实验室基本设置要求张琼 PCR实验室基本设置要求张琼 实验室生物安全防护分级实验室生物安全防护分级 一级最低，四级最高一级最低，四级最高 PCR实验室基本设置要求张琼 典型的一级生物安全典型的一级生物安全 水平实验室水平实验室 （图片由（图片由CUH2A ， Princeton ，NJ ， USA 提供）提供）

2、PCR实验室基本设置要求张琼 典型的二级生物安全水典型的二级生物安全水 平实验室（图片由平实验室（图片由 CUH2A ，Princeton ， NJ ，USA 提供）。提供）。 在生物安全柜中进行可在生物安全柜中进行可 能发生气溶胶的操作程能发生气溶胶的操作程 序。门保持关闭并贴上序。门保持关闭并贴上 适当的危险标志。潜在适当的危险标志。潜在 被污染的废弃物同普通被污染的废弃物同普通 废弃物隔开。废弃物隔开。 PCR实验室基本设置要求张琼 PCR实验室基本设置要求张琼 PCR实验室基本设置要求张琼 典型的三级生物安全水平实验室（图片由典型的三级生物安全水平实验室（图片由CUH2A ，Princ

3、eton ，NJ ， USA 提供）。提供）。 实验室与公共通道分开并通过缓冲间（双门入口或二级生物安全水平的实验室与公共通道分开并通过缓冲间（双门入口或二级生物安全水平的 基础实验室）或气锁室进入。处理废弃物前，在实验室内先进行高压灭基础实验室）或气锁室进入。处理废弃物前，在实验室内先进行高压灭 菌以清除污染。应有非手控的水槽。形成向内气流而且涉及感染性材料菌以清除污染。应有非手控的水槽。形成向内气流而且涉及感染性材料 的全部工作应在生物安全柜中进行。的全部工作应在生物安全柜中进行。 PCR实验室基本设置要求张琼 四级生物安全水平实验室四级生物安全水平实验室 在加拿大仅有一个4级实验室(Ca

4、nadian Centre for Human and Animal Health in Winnipeg, Man.) 设计要求非常苛刻，要把工作人员完全与感染物 质隔离开 PCR实验室基本设置要求张琼 3.生物安全柜生物安全柜 PCR实验室基本设置要求张琼 （biosafety cabinet） 是处理危险性微生物时所用的箱是处理危险性微生物时所用的箱 型空气净化安全装置型空气净化安全装置 PCR实验室基本设置要求张琼 PCR实验室基本设置要求张琼 I级生物安全柜级生物安全柜 （class I biosafety cabinet） 至少装置一个高效空气过滤器对排气进至少装置一个高效空气过滤

5、器对排气进 行净化，外部空气由操作窗吸进，而不行净化，外部空气由操作窗吸进，而不 可能由操作窗口逸出；可能由操作窗口逸出；100%由密接排气由密接排气 导管排到室外导管排到室外 （类似于通风厨）（类似于通风厨） 工作状态时保证工作人员不受侵害，但工作状态时保证工作人员不受侵害，但 不保证实验对象不受污染。不保证实验对象不受污染。 现已很少使用现已很少使用 PCR实验室基本设置要求张琼 I II III PCR实验室基本设置要求张琼 至少装置一个高效空气过滤器对排气进行净化，工至少装置一个高效空气过滤器对排气进行净化，工 作空间为经高效过滤器净化的无涡流的单向流空作空间为经高效过滤器净化的无涡流

6、的单向流空 气。工作时柜正面玻璃推拉窗打开一半，上部为气。工作时柜正面玻璃推拉窗打开一半，上部为 观察窗，下部为操作窗口。外部空气由操作窗吸观察窗，下部为操作窗口。外部空气由操作窗吸 进，而不可能由操作窗口逸出进，而不可能由操作窗口逸出 工作状态下遵守操作规程时既保证工作状态下遵守操作规程时既保证不受不受 侵害，又保证侵害，又保证及及不受污染不受污染 级生物安全柜级生物安全柜 （class biosafety cabinet） PCR实验室基本设置要求张琼 I II III PCR实验室基本设置要求张琼 PCR实验室基本设置要求张琼 级生物安全柜级生物安全柜 （class biosafety

7、cabinet） PCR实验室基本设置要求张琼 I II III PCR实验室基本设置要求张琼 隔离器隔离器 PCR实验室基本设置要求张琼 美国国美国国 立卫生立卫生 研究所研究所 美国疾美国疾 病控制病控制 中心中心 病病 源源操操 作作一级屏障一级屏障二级屏障二级屏障 P1P1 BSL-1 不会经常引发健康成人不会经常引发健康成人 疾病疾病 标准的微生物操作标准的微生物操作不要求不要求 开放实验台、洗开放实验台、洗 手池手池 P2P2 BSL-2 人类病源菌，因皮肤伤人类病源菌，因皮肤伤 口、吸入、黏膜曝露而口、吸入、黏膜曝露而 发生危险发生危险 BSLBSL1 1操作外加：操作外加：1

8、1、 限制进入限制进入2 2、有生物、有生物 危险警告标志危险警告标志3 3、 “锐器锐器”安全措施安全措施4 4、 生物安全手册，其中生物安全手册，其中 规定废物消毒和医疗规定废物消毒和医疗 观察观察 1 1级、级、2 2级生物级生物 安全柜实验安全柜实验 服、手套、若服、手套、若 需要则采取面需要则采取面 部保护措施部保护措施 BSL-1BSL-1外加：高外加：高 压灭菌锅压灭菌锅 P3P3 BSL-3 内源性和外源性病源，内源性和外源性病源， 可通过气溶胶传播，能可通过气溶胶传播，能 导致严重后果或生命危导致严重后果或生命危 险险 BSL-3 BSL-2BSL-3 BSL-2操作外操作外

9、 加：加：1 1、控制进入、控制进入2 2、 所有废物消毒所有废物消毒3 3、洗、洗 涤前，实验服消毒涤前，实验服消毒4 4、 有基础血清有基础血清 1 1级、级、2 2级生物级生物 安全柜保护性安全柜保护性 实验服、手套、实验服、手套、 若需要则采取若需要则采取 呼吸保护措施呼吸保护措施 BSL-2BSL-2外加：外加：1 1、 和进入走廊隔开和进入走廊隔开 2 2、双门进入，、双门进入， 门自动关闭门自动关闭3 3、 排出的空气不循排出的空气不循 环环4 4、实验室内、实验室内 负压负压 P4P4 BSL-4 对生命有高度危险的危对生命有高度危险的危 险性病源或外源性病源：险性病源或外源性

10、病源： 致命、通过气溶胶而致致命、通过气溶胶而致 实验室感染：或未知传实验室感染：或未知传 播风险的有关病源播风险的有关病源 BSL3BSL3操作外加：操作外加：1 1、 进入前换衣服进入前换衣服2 2、出、出 实验室前淋浴实验室前淋浴3 3、带、带 出设施的所有材料消出设施的所有材料消 毒毒 3 3级生物安全柜级生物安全柜 或或1 1级、级、2 2级生级生 物安全柜加全物安全柜加全 身的、供应空身的、供应空 气的正压防护气的正压防护 服服 BSL3BSL3外加：外加：1 1、 单独建筑或隔离单独建筑或隔离 区域区域2 2、有供气、有供气 系统、排气系统、系统、排气系统、 真空系统、消毒真空系

11、统、消毒 系统系统3 3、其他有、其他有 关要关要 PCR实验室基本设置要求张琼 生物安全二级实验室 PCR实验室基本设置要求张琼 目的 保护操作人员 保护环境 保护样品 PCR实验室基本设置要求张琼 PCR实验室平面设计 在入口处设缓冲间缓冲间比专用走廊更有意义。 PCR实验室基本设置要求张琼 PCR实验室基本设置要求张琼 有问题！ PCR实验室基本设置要求张琼 临床临床PCRPCR实验室工作流程实验室工作流程 试剂储存和准备试剂储存和准备 标本制备区标本制备区 扩增区扩增区 产物分析区产物分析区 PCR实验室基本设置要求张琼 PCR实验室基本设置要求张琼 PCR实验室基本设置要求张琼 PCR实验室基本设置要求张琼 PCR实验室基本设置要求张琼 PCR实验室基本设置要求张琼 PCR实验室基本设置要求张琼 PCRPCR实验室各区的设备配置表实验室各区的设备配置表 分区分区 器材选配器材选配 PCR 试剂区 PCR 制备区 PCR 扩