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文档简介

1、热休克蛋白20(HSP-20)ELISA试剂盒说明书本试剂仅供研究使用标本:体液热休克蛋白20(HSP-20)ELISA试剂盒说明书试验原理:BFGF试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验( ELISA).已知BFGF浓度的标准品、未知浓度的样品 加入微孔酶标板内进行检测。先将BFGF和生物素标记的抗体同时温育。人碱性成纤维细胞生长因子ELISA检测试剂盒洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物, 然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中BFGF的浓度呈比例关系。热休克蛋白20(HSP-20)ELISA试剂盒说明书自备材料1 蒸馏水。2

2、加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。3 振荡器及磁力搅拌器等。安全性1 .避免直接接触终止液和底物 A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。2 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。3 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。热休克蛋白20(HSP-20)ELISA试剂盒说明书 操作注意事项1 试剂应按标签储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。2实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。3 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。4 使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使

3、用带金属部分的加样器。5 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。6 洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。7.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触, 有毒。实验完成后应立即读取 OD值 8 加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。9按照中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。热休克蛋白20(HSP-20)ELISA试剂盒说明书样品收集、处理及保存方法1、 血清-操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000 离g 心10分钟将血清和红细胞迅速小

4、心地分离。2、 血浆-EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000 离心30分钟去除颗粒。3、细胞上清液-1000 离丿心10分钟去除颗粒和聚合物。4、保存-如果样品不立即使用,应将其分成小部分 -70 C保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37C或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。试剂的准备标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。2 洗涤缓冲液(50 )的稀释:蒸馏水50倍稀释。热休克蛋白20(HSP-20)ELISA试剂盒说明书操作步骤1 使用前,将所有试剂充分混匀

5、。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生 加样上的误差。2 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个 样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。3 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37C温育1小时。4 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。5每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37C温育30分钟6 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡3

6、0秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。7 每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37C温育10分钟。避免光照。8 取岀酶标板,迅速加入 50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。9 在450nm波长处测定各孔的 0D值。局限6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到精确的结果。热休克蛋白20(HSP-20)ELISA试剂盒说明书性能1. 灵敏度:最小的检测浓度小于 1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2. 特异性:不与其它细胞因子反应。3. 重复性:板内、板间变异系数均小于10%。热休克蛋白

7、20(HSP-20)ELISA试剂盒说明书结果判断与分析1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的 OD值2、以吸光度OD值为纵坐标(丫),相应的BFGF标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线, 样品的BFGF含量可根据其OD值由标准曲线换算岀相应的浓度。3、检测值范围:0-800pg/ml4、 敏感度:1.0 pg/mlPLC人磷酯酶C 规格: 48T/96TPI Ab-IgG/IgM人磷脂酰肌醇抗体IgG/IgM 规格: 48T/96TGPC-3人磷脂酰肌醇蛋白聚糖3 规格: 48T/96TPL-A2人磷脂酶A2 规格: 48T/96TPCK 人磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶规格:48T/

8、96TPGM 人磷酸葡萄糖变位酶 规格: 48T/96TPI3K 人磷酸肌醇3激酶规格:48T/96TPaCoA 人磷酸化乙酰辅酶A规格:48T/96TpERK人磷酸化细胞外信号调节激酶规格:48T/96TP-PKC人磷酸化蛋白激酶C 规格:48T/96TPGAM2人磷酸甘油酸变位酶2 规格: 48T/96T人淋巴细胞因子 ELISA Kit,48T/96T人淋巴细胞因子 ELISA Kit,48T/96T 规格:48T/96TLpt n/LTN/XCL1人淋巴细胞趋化因子规格:48T/96TLFA-3/CD58人淋巴细胞功能相关抗原3规格:48T/96TLFA-2/CD2人淋巴细胞功能相关抗

9、原2规格:48T/96TLFA-1/CD11a+CD18人淋巴细胞功能相关抗原 1规格:48T/96TLTB人淋巴毒素3规格:48T/96TLTA人淋巴毒素a规格:48T/96TLAP人亮氨酰氨基肽酶规格:48T/96TSK人链激酶规格: 48T/96TGCP-2/CXCL6人粒细胞趋化蛋白-2规格: 48T/96TGM-CSF Ab人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子抗体规格: 48T/96T人痢疾内阿米巴抗原ELISA Kit,48T/96T 人痢疾内阿米巴抗原ELISA Kit,48T/96T格:48T/96TGS-ANA人粒细胞特异性抗核抗体规格: 48T/96TGM-CSF人粒细胞巨噬细胞集

10、落刺激因子规格: 48T/96TKP人利钾尿肽规格:48T/96TCG人冷球蛋白规格:48T/96TORM人类粘蛋白规格:48T/96THTLV-1人类嗜T淋巴细胞I型病毒规格:48T/96TRF人类风湿因子规格:48T/96THLA-G人类白细胞抗原G规格:48T/96THLA-E人类白细胞抗原E规格:48T/96THLA-C人类白细胞抗原C规格:48T/96THLA-B27人类白细胞抗原B27规格:48T/96THLA-A人类白细胞抗原A规格:48T/96TmTOR人雷帕霉素靶蛋白规格:48T/96TTH人酪氨酸羟化酶规格:48T/96TTyk-2人酪氨酸激酶2规格:48T/96TLAC/

11、LA人狼疮抗凝抗体规格:48T/96TLyme-IgG 人莱姆 IgG规格:48T/96TVacA人空泡毒素相关蛋白A 规格:48T/96TPEB1人空肠弯曲菌黏附蛋曰规格:48T/96TCC16人克拉拉细胞蛋白规格:48T/96TENA人可提取核抗原规格:48T/96TG-CSF人粒细胞集落刺激因子规格:48T/96TsTfR人可溶性转铁蛋白受体规格: 48T/96TSTRAIL人可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体规格:48T/96TSTNF-R2人可溶性肿瘤坏死因子受体2规格:48T/96TSTNF-R1人可溶性肿瘤坏死因子受体1规格:48T/96TsTNFa R人可溶性肿瘤坏死因子 a受

12、体规格:48T/96TSam人可溶性粘附分子规格:48T/96TsPECAM-1 人可溶性血小板内皮细胞粘附分子1 规格: 48T/96TSFMC人可溶性血纤蛋白单体复合物规格: 48T/96TsVCAM-1人可溶性血管细胞粘附分子 1 规格: 48T/96TsEPCR人可溶性血管内皮细胞蛋白 C受体 规格: 48T/96TVEGFR-2/SFLK-1人可溶性血管内皮生长因子受体 2规格: 48T/96TSAC人可溶性腺苷酸环化酶规格:48T/96TsCKR人可溶性细胞因子受体规格:48T/96TsICAM-1I人可溶性细胞间粘附分子1规格:48T/96TSTREM-1人可溶性髓系细胞触发受体

13、-1 规格: 48T/96TSLR人可溶性瘦素受体规格: 48T/96TSPL-A2人可溶性磷脂酶A2 规格: 48T/96TSRANKL人可溶性核因子k B受体活化因子配基规格: 48T/96TsFASL人可溶性凋亡相关因子配体规格:48T/96TsFAS/Apo-1人可溶性凋亡相关因子规格:48T/96Tsp185/HER-2人可溶性蛋白185规格:48T/96TB7-2/SCD86人可溶性白细胞分化抗原86规格:48T/96TSCD40L人可溶性白细胞分化抗原40配体规格:48T/96TSCD30L人可溶性白细胞分化抗原30配体规格:48T/96TSCD28人可溶性白细胞分化抗原28规格:48T/96TsP-selecti n

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