三种中药水煎剂的体外抗菌试验研究新进展

1、第7卷第1期总第69期 二九年元月己丑年 三种中药水飘剂的体外抗菌试验研究新进展 扬志僅I严:韦有茸“诈土恃圧刊刍人民滋环广东适拥5lK-； 4 健品)，例如药枕、元气袋等产品；化妆品是指以化妆品为载体，加入一些有活 性作用的中药有效成分制备而成的各种产品。这些产品都应是专利保护的对象， 可以申请专利。7方法发明专利的保护 前文已提到过 方法发明”这里要对其加以具体说明。无论上述何种中医药专利 (制剂、单体、药材等)，无不涉及到制作方法，因此对方法的发明必须加以重 视，其专利的保护亦非常重要。如产品具有独特的生产工艺，或对已知产品的生 产工艺加以改进，均可申请方法专利。作为药品的制备方法权利要

2、求，其特征部 分应包括原料和生产工艺，原料特征的内容与药物产品概论权利要求的内容基本 相同，生产工艺特征包括生产步骤和生产工艺条件，如温度、浓度、压力、时间 等。常见有以下几种情况：产品的新的制备方法。例如一种从珍珠母贝中提珍 珠液的方法，其发明点在于将现有技术中的砂轮、人工的磨、盐酸水解”工艺改 进为用醋酸作剥离剂、硫酸水解”并提高了产率。测定方法。例如有效成分 含量的测定方法，印度就向中国提出了使用色谱指纹图谱测定和鉴别植物或动 物、天然或合成来源的提取物成分的方法”的专利申请。中药材的种植方法。 中药材的加工、储存和保鲜方法。 以上，我们对中医药专利保护的重要性、复杂性、权力要求，以及中

3、药复方、中 药单体和有效部位、中药材及中医药相关产品、制备方法等方面的发明专利保护 问题都分别做了一些初探。希望能引起相关各方面对中医药专利保护问题的更加 重视，并对中医药专利权力要求，对中药复方、中药单体及有效部位、中药材及 中医药相关产品、制备方法的专利保护作更多的了解，以提高相关专利保护的质 量。参考文献 1 张韬.中医药知识产权保护的最佳途径世界科学技术-中医药现代 化,2001,3(5):76 2 李仕芬，等.我国药品知识产权保护的思考中国医学伦理学,2001, 76:47 3 王晓浒我国药品的知识产权问题中国新药杂志,2003,12(2):146 4陈朝晖.1976 2003年美国

4、中医药专利申请、授权情况分析中国中 医药信息杂志,2004,11(3):276 陈建南，等初探美国发明专利中的中药复方世界科学技术-中医药 现代化,2004,6(1):9 周和平.外国医药企业在中国发明专利申请动向中国新药杂志,1999, 8(1):51 作者简介：李戎，医学博士，执业中医师，教授，博士学位课程主讲教师，硕士 研究生导师。Tel: E-mail: I。 (收稿日期：2008- 09 - 28) 摘要：目的评价黄连、黄苓、五倍子三种中药水煎剂对表皮葡萄球菌的体外抗菌 作用。方法 采用M-H琼脂稀释法对黄连等3种中药进行体外抗菌活性检测。结 果五倍子对表皮

5、葡萄球菌的抗菌活性最好，其MIC为1 : 2560;其他2种中药对 表皮葡萄球菌抗菌作用亦较好，MIC分别为1 : 640和1 : 320。结论五倍子对表 皮葡萄球菌的抑菌效果好，可用于临床治疗由表皮葡萄球菌引起的感染。 关键词：表皮葡萄球菌；抗感染药；黄连；黄苓；五倍子 我国中药在保护劳动人民健康方面，在历史上发挥了巨大作用，尤其是在抗菌药 物问世前，对感染性疾病的治疗主要是靠中草药1。为了研究中药的抗微生物活 性，我们采用琼脂稀释法，用黄连等 3种中药对112株表皮葡萄球菌进行了体外 抗菌实验研究。现将结果报告如下。1材料与方法 1.1菌株来源 表皮葡萄球菌分离自我院临床患者的血液、尿液、

6、脓液、痰等标 本，共112株。1.2中药黄连、黄苓、五倍子均购自河北省药材公司。将上述 3 种中药各50g,分别用文火煎后做成200 ml煎液备用。 1.3仪器与培养基 微量多点接种仪由北京医科大学昆仑药物发展研究所生产；培 养基为M-H琼脂，由美国BD公司生产。 1.4实验方法采用M-H琼脂稀释法，对黄连等进行定量抗菌实验。 1.4.1药液稀释 排列无菌试管10支，于210支管中加无菌蒸馏水10ml，取 25%(1 : 4)黄连等水煎液20 ml，于第1管和第2管各加入10ml，第2管液混匀后 取出10ml，加入第3管，再混匀后取10ml放入第4管，如此连续稀释至第9管 取出10ml弃掉，第

7、10管只有无菌蒸馏水作对照。这样，19管中含有不同浓度 药液各10ml。 1.4.2含药平板制备 无菌操作下，将已溶化的无菌 M-H琼脂900ml分装于10个瓶 中，每瓶90ml。将 （玄植於现代远程朝育 CHINESE MEDICIME MODERN DETAfMCE EDUCATION OF CHIW 第7卷第1期总第69期二九年元月 己丑年 5 本研究为临床应用此类药物提供了可靠的科学实验依据。 表皮葡萄球菌是凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)中的主要菌种2，为医院感染的重要 病原菌，也是引起机会感染的主要致病菌。近年来3，由于滥用抗菌药物等原 因，耐甲氧西林表皮葡萄球菌(MRSE)在逐年增多

8、。据报道在表皮葡萄球菌 中，几乎有66%是MRSE。MRSE除对万古霉素敏感，对头抱哌酮耐药率为 4% 外，对其他抗菌药的耐药率均在10%100%之间。表皮葡萄球菌在临床标本中 的分离率已占32.5%，由于其对大多数抗菌药耐药，对严重感染者，只能选择万 古霉素、替考拉宁等进行治疗4。但目前又出现了耐万古霉素的表皮葡萄球菌 (VRSE)，同时万古霉素和替考拉宁有肾毒性，有肾功能损害者不宜应用。 本研究表明，黄连等中草药对表皮葡萄球菌有很好的抗菌作用。尤其是五倍子具 有敛肺降火、涩肠止泻、收敛止汗、止血等功效，五倍子汤可用于胃和十二指肠 溃疡，止痢方可用于治疗泻痢不止等。上述研究为表皮葡萄球菌引起

9、的感染提供 了中药治疗药效实验室依据，可望在不久的将来会开发出新的抗感染中药剂型。 参考文献 1唐中德中药抗生力研究的综合报道J中医杂志,2003,(7):30 2邓文龙.清热解 毒药药理作用研究的进展J.中草药通讯,2002,(8):42 3陈奇.中药药理研究方法学 M.北京:人民卫生出版社,2001:259 4李仲兴，王秀华，边占水，等.48株耐甲氧 西林表皮葡萄球菌对7种 头抱菌素的敏感性测定J.中国抗生素杂志,2000,18(3):192 刘振声，金大鹏，陈增辉医院感染管理学M.北京:军事科学出版 社,2000:162 (收稿日期：20081030) 第1管(含10ml25%的黄连等)

10、水煎液倾注于含90ml培养基的瓶中，混匀后倾注4 个平板，每个平板含25ml含药琼脂；第2管以后的平板制备同第1管，凝固后 备用。第1组的琼脂平板实际含黄连等水煎液 2.5%(1 : 40)，第2组为 1.25%(1 : 80)，第3组为0.625%(1 ： 160),以此类推计算含药培养基的药物浓 度。因各药水煎剂干重不一，不好比较，故暂仍按生药与水之比计算。 1.4.3菌液制备 将112株表皮葡萄球菌新鲜培养菌落分别制成菌悬液，浓度相当 于0.5麦氏单位。1.4.4培养与观察 用多点接种仪分别吸取各种菌液点种于含不 同药物浓度的琼脂平板上，于 35E培养1824h,如果对照菌全部生长，则观

11、察最 低抑菌浓度(MIC)，并统计出MIC 50和MIC 90的药物浓度和累积抑菌百分率。 2结果 黄连等对表皮葡萄球菌的抑菌作用见表1。对112株表皮葡萄球菌的累积抑菌率 见表2。 表1黄连等3种中药对112株表皮葡萄球菌的抑菌作用 中草药MIC范围MIC50 MIC90 MIC 众数 黄连黄苓 五倍子 1: 51201: 40 1: 2560 1: 320 1: 2560 1: 51201: 40 1: 320 1: 160 1: 320 1: 51201: 2560 1: 5120 1: 2560 1: 2560 表2黄连等3种中药对112株表皮葡萄球菌累积抑菌率比较（%）中草药1:40

12、 1:80 1:160 1:320 1:640 1:1280 1:2560 1:5120黄连 100.00 100.00 100.00 99.11 83.93 62.50 59.89 34.82 黄苓 96.43 94.64 94.64 65.18 34.82 21.43 19.96 10.7五倍子 100.00 100.00 100.00 100.00 100.00 100.00 100.00 73.21 3讨论 黄连等中药对表皮葡萄球菌的抑菌实验，无论是定性，还是定量测定，其MIC值 以前均未见报道。 红安县中医院积极推进中医药适宜技术推广工作 中医药适宜技术是中医药理论同临床实践相结合的

13、经验总结和结晶，具有简便易 学、取材方便、安全可靠、疗效确切和价格低廉的优势，深受群众欢迎。在农村 大力推广应用中医药适宜技术，对于进一步完善城乡中医药服务体系，加快培养 基层中医药人才，提高中医药服务能力，充分发挥中医药特色优势，解决人民群 众看病难、看病贵等问题具有十分重要意义。 为贯彻落实省卫生厅关于中医药适宜技术推广精神，红安县中医院作为全县中医 药适宜技术推广应用的培训基地，制定了红安县中医药适宜技术推广实施方 案，成立了领导小组和专家指导小组，积极组织专家编印了中医药适宜技术 推广手册和培训教材700余份，已于2008年5月19日正式开班，至目前为 止，分期分批共十一次组织了全县中医人员、村卫生室及乡村医生近600人进行 培训学习。 红安县中医院坚持以中医为主，中西医结合，积极加强内涵建设，大力发展中医 专科，争创三名”即名医、名科、名院”加快中医三进”即进农村、进社区、 进家庭”工作，在中医药适宜技术推广应用中发挥龙头”作用，加快了县、乡、村 中医药服务体系建设，积极构建中医药适宜技术推广应用网络。该院非常重视中 医药技术应用工作，将