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文档简介
1、齐齐哈尔大学本科生毕业设计(论文)任务书及开题报告题目8个玉米自交系及杂交种的核型分析学院生命科学与农林学院专业班级生科101学生姓名徐杨红指导教师杨晓杰毕业论文开题报告一、选题的依据、意义和理论或实际应用方面的价值玉米(学名:Zea mays,亦称玉蜀黍、包谷、苞米、棒子。是一年生禾本 科草本植物,是重要的粮食作物和重要的饲料来源,也是全世界总产量最高的粮 食作物。作为世界三大主要粮食品种之一,玉米广泛应用于人类口粮,牲畜饲料以 及工业生产原料,因为玉米富含的营养价值而备受人们的青睐,如玉米中含有的 粗纤维,比精米、精面高4-10倍;此外玉米中还含有大量镁,镁可加强肠壁蠕动, 促进机体废物的
2、排泄。到目前为此,对玉米品种的分类主要还是依据形态指标, 考古学及地理分布 方面,而分子技术的的发展如同工酶分析,RFLP,RAPD,SSR,AF技术等等对玉米 遗传物质的分析分类,为传统的分类系统提供了更牢固的基础和参考 。然而, 由于玉米植物形态学和分子水平的上的分类已渐于成熟,同样作为一种重要的分 类依据,即细胞水平上的核型分析却逐渐被忽视。核型分析是提供细胞遗传学研究依据的一种手段。 通过对自交系玉米及其杂 交种的核型分析,了解控制玉米性状的染色体在亲代与子代,自交种与杂交种之间的变化,研究玉米在演化过程中染色体在形态结构,数目上的变化及与杂交优 势之间的关系,甚至为研究玉米的发病机理
3、提供可靠的遗传资料,从而为玉米的 科技种植,增加玉米产量和质量提供理论支持。二、本课题在国内外的研究现状目前,在国内外均有研究玉米自交系和杂交系的染色体形态结构,以期对玉米的演化进程有更深入的了解,在该项领域已有许多的研究报告,积累了大量玉 米品种的遗传分析资料,但由于玉米品种,亚种繁多,所以当前的研究工作基本 仍是在对不同玉米品种的核型分析。 如吕桂华的“玉米与四倍体多年生玉米杂交 后代遗传的研究”,该项研究主要目的是通过对玉米(自交系 48-2 )与3种不 同玉米野生型近缘种的核型比较研究,从而揭示玉米起源和演化及其种间关系 2。也有对玉米新品种的核型分析的,如苏子潘的“86451玉米新物
4、种种质核型分析”。另外,由于分子技术的发展,对玉米的核型分析手段也愈来愈侧重于 分子水平了。国外研究也基本上集中玉米的自交与杂交系的核型分析,如Jai-Heon Lee的“ Variability of chromosomal DNA contents in maize (Zea maysL.) in bred and hybrid lines ”主要是通过流式细胞技术来对中期细胞染色体的分析,从而完成 亲代与子代的染色体核型的比较 。另外,国外也有许多将荧光原位杂交技术(FISH)运用到玉米的核型分型中的研究,效果显著,分辨高 5。本实验所研究的3个玉米自交系A125, A132,菜318和
5、5个杂交系WM X郑 32,杂 C-5/7044 杂 C2,A71 X J11004KQL X 农 M1,南引 3135 X J1100-4k,以 前主要是集中在对其抗旱和抗寒性研究, 但此类研究报道很少,而且并未见有关 的核型分析报道,本实验通过使用传统的细胞遗传学手段对其进行研究分析, 从细胞水平上探索其亲缘关系和遗传差别三、课题研究的内容及拟采取的方法研究的内容:通过对3个玉米自交系(菜318、A132、A125)和5 个玉米杂交系(WM x 郑 32、DL X 农 M1、A71 X J11004K、杂 C-5/7044 杂 C2、 南引3135 X J1100-4k)根尖细胞有丝分裂观
6、察选取染色体最为清晰并 可数的图像,对染色体进行测量和计数,最后比较不同自交系及杂交 系与自交系间染色体形态结构的差别6-8 o拟采取的方法:取玉米根尖,即有丝分裂最旺盛处,秋水仙素预处理玉米,然后 杀死并固定细胞,接着染色制片观察中期分散的染色体,记录并拍照, 然后使用photoshop软件对照片上的染色体体进行计数并测量染色体 长短臂的长度和相对长度,最后根据李懋学和陈瑞阳的方法计算平均 值,Stebb ins提出的标准进行核型分类9.10。四、课题研究中的主要难点以及解决的方法难点一:根尖取材时间不定,可能是上午,也可能是下午,另外,细胞有丝 分裂期只有30min左右,故很难得到准确的取
7、材时间。解决的方法:先在24h中每隔1h进行取材,确定大概的有丝分裂最旺盛时期, 依次类推,再将取材时间细化精确。难点二:解离时间不好把握,解离时间过长,染色体会被破坏, 对染色造成影响,解离时间过短,根尖太硬,无法压片。解决的方法:通过不断试验探索,找到一个临界点,即既能对根 尖进行压片,亦不破坏染色,或将根尖浸泡在长时间蒸馏水中软化。难点三:对照片中的染色体进行剪切分析时, 染色体不清晰时,难以对照 片准确进行处理。解决的方法:熟练photoshop软件的操作应用。毕业设计(论文)工作进度计划第一周:确立实验课题,查阅相关资料文献。第二周:准备实验所需仪器及材料药品,做实验的前期准备。完成
8、开题报告。 第三周:开始培养3种玉米,配制实验所需药品。第四周:取根尖,将预处理的根尖放入固定液中。第五周:查阅校图书馆、电子阅览室、数据库内相关文献。第六周:对已固定的根尖(菜 318 )进行解离,染色,制片,观察,拍照, 记录。第七周:对已固定的根尖(WM X郑32)进行解离,染色,制片,观察, 拍照,记录。第七周:对已固定的根尖(A132)进行解离,染色,制片,观察,拍照,记 录。第八周:文献翻译。第九周:开始培养另外5种玉米,配制实验所需药品。第十周:取根尖,将预处理的根尖放入固定液中。第一周:对已固定的根尖(A125南引3135 X J1100-4k )进行解离,染 色,制片,观察,
9、拍照,记录。第十二周:对已固定的根尖(DL X农M1杂C-5/7044杂C2)进行解离,染 色,制片,观察,拍照,记录。第十三周:对已固定的根尖(A71X J11004K)进行解离,染色,制片,观察, 拍照,记录。第十四周:整理、分析实验图像和数据,撰写论文。第十五周:修改论文。第十六周:完成论文,准备答辩。主要参考文献(或资料)1 黄益勤,李建生利用FRL标记划分45份玉米自交系杂种优势群体的研究J.中国农业科学,2001,34(3):224-250.2 吕桂华.玉米与四倍体多年生玉米杂交后代遗传的研究D.四川农业大学:四川农业大学,2007.3 苏子潘.86451玉米新物种种质核型分析J.
10、河南职技师院学报,2001,29(4):14-16.4 M. del C. Moli na,C. A. Naranjo, Cytoge netic studies in the genus Zea. Theoretical and Applied Gen etics February 1987. Volume 735 Mt Sadder, G Weber. Karyotype of maize (Zea mays L.) mitotic metaphase chromosomes as revealed by fluorescencein situ hybridization (FISH) with cytogenetic DNA markers: Plant Molecular Biology Reporter June. 2001, Volume 19.6.9李懋学,陈瑞阳.关于植物核型分析标准化问题J .武汉植物学研究,1985,3(4):297-302.7 刘永安,冯海生,陈志国.植物染色体核型分析常用方法概述J.贵州农业科学,2006,34(1):98-1
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