一种降糖复方中药提取液中总多糖含量的测定

1、DOC格式论文，方便您的复制修改删减 种降糖复方中药提取液中总多糖含量 的测定 （作者：单位：邮编：） 作者：高伟，王晓娟，刘翊，杜连祥 【摘要】目的建立分光光度法测定降糖复方中药提取液中总多 糖的含量。方法紫外分光光度法，苯酚-硫酸法。结果该方法的线性范围 为 5-40 旳/ml, r=0.999 3,平均回收率为 99.36%,RSD=3.15%O 结 论该方法简便易行，重现性良好。 【关键词】复方降糖中药提取液；总多糖；紫外分光光度法；含 量测定 由黄葩 荔枝核、山楂叶、银合欢种子按一定的比例混合，经一 定的提取工艺加工得到的提取液，经药理实验表明，具有很好的降低血 糖、调节血脂的作用。

2、多糖为其主要有效成分之一。本文采用紫外分光 为其质量标 光度法、苯酚-硫酸法对该提取液中的总多糖进行含量测定， 准的研究与指标的制定提供实验依据。 结果表明本法简便 灵敏快速易行，可用于控制该产品的质量。 1仪器与试药 1-1仪器核酸蛋白分析仪由广州雷得生物技术有限公司生产。 1.2试药 降糖复方中药提取液由本院自行制作；葡萄糖标准 品：中国药品生物制品检验所出品；浓硫酸 苯酚 乙酉孚均为分析纯。 2方法与结果 2.1葡萄糖标准品溶液的制备 精密称取105C干燥至恒重的无水 葡萄糖标准品5 mg,置100 ml容量瓶中，加蒸f留水溶解并稀释 至刻 度，摇匀，即得每毫升中含无水葡萄糖0.05 m

3、g的溶液作为标准品溶 液。 22供试品溶液的制备降糖复方中药提取液的浓度为生药50 g/100 ml,精密移取降糖复方中药提取液2.5 ml至离心管中，3 500 r/min离心 5 min，收集上清液至离心管中，加入10ml无水乙醇，3 500 r/min离心10 min,倾去上清液，所得沉淀水浴蒸干，加蒸f留水10 ml,水浴30 min, 转移至25 ml容量瓶中，定容，备用。 2.3最大吸收波长的确定1 分别精密移取葡萄糖标准品溶液 30 “及供试品溶液30山置于10 ml具塞试管中，各加入蒸f留水至1ml, 然后各加入5%的苯酚溶液0.6 ml,摇匀，迅速加入浓硫酸3.6 ml,振摇

4、 5min，沸水浴中加15 min,冰水浴中冷却30 min,取 出。以蒸f留水 同上操作制备空白溶液。用核酸蛋白分析仪在200-700 nm范围内扫 描，由扫描结果可知，葡萄糖标准品和供试品的最大吸收波长均为485 nm。 2.4标准曲线的制备精密移取标准品溶液0.0, 0.1, 0.2, 0.4, 0.6, 0.8 ml分别置于10 ml具塞试管中，加水至1 ml，分别加入5%的 苯酚溶液0.6 ml,迅速加入浓硫酸3.6 ml,振摇5 min,沸水浴15 min, 冰水浴30 min,取出，以第1份为空白，于核酸蛋白分析仪系统中，在 485 nm处测定吸光度，结果见表1。 表1标准曲线的

5、制备（略） 上述实验数据经过计算得回归方程：A=11.861C+0.000 8, r =0.999 3,结果表明葡萄糖浓度在540（4）/ml范围内线性关系良好。 25稳定性实验按“2.3”项方法操作，每隔30 min对同一供试品 溶液测定吸光度一次，结果表明，供试液在3 h内显色稳定，见表2。 表2稳定性实验结果（略） 26重现性实验同一批样品，各精密吸取2.5 ml共5份，制 备供 试品溶液，各精密吸取供试品溶液30山照标准曲线的制备项 下方法测定吸光度分别为0.453, 0.479, 0.472, 0.468, 0.486, RSD 为2.65% （n=5） o说明本方法重现性良好。 2

6、7精密度实验 精密吸取同一供试品溶液30山共5份，照标 准曲 线的制备项下方法测定吸光度分别为0.466, 0.452, 0.463, 0.459, 0.471, RSD 为 1.56%（ n=5 ）。 2.8加样回收率实验在已知含量的同一批样品中，吸取样品溶液 约1 ml共5份，分别精密加入一定量的葡萄糖标准品，制备供试品溶 液，照标准曲线的制备项下方法显色并测定吸光度，计算回收率， 回收率（）二（实验测值一样品所含被测成分量）/加入纯品量X100% ：2,结果测得平均回收率为99.36%, RSD=3.15%（n=5）o结果 见表3。 表3多糖加样回收率测定(略) 29样品含量测定 精密移

7、取3批样品溶液2.5 ml,制备供试品 溶 液，精密移取30山置具塞试管中，加蒸f留水补充至1ml,同标准曲线 的制备项下操作，在485 nm处测定吸光度，分别为0.447, 0.483, 0.469,根据回归方程计算，以从提取液中所含的生药中提取的 总多糖百分比计即为2.52%, 2.72%, 2.60%o结果表明浓度为生药50 g/100 ml的样品，总多糖含量为1.305 g/100 mlo 3讨论 本文采用苯酚-硫酸显色法，以葡萄糖计算测定复方中药 提取 液中总多糖的含量。苯酚-硫酸比色法是由于糖类与苯酚-硫酸反应生成 橙黄色产物，与糖含量成正比，适用于单糖、寡糖 多糖等多种糖类的 测定3 。多糖在硫酸作用下水解成单糖，并迅速脱水生成糖醛衍生 物，与苯酚缩合成有色化合物，然后用分光光度法测定其 含量4, 5。通过线性关系考察、稳定性、重现性、精密度和加样回收率实验及 样品含量测定结果，表明本方法简便快捷，灵敏度高，可作为该产品质 量的检测与控制方法。 【参考文献】 :1 张家富，孟楣紫外分光光度法测定糖肾康颗粒中 总多糖的含量J 安徽中医学院学报,2005,24 (4) : 48. ：2丰朝霞，张鸿分光光度法测定茯苓中多糖总糖含量 :J 时珍国医国药，2000,11 (2):109 ：3周文兰，童列波苯酚-硫酸法测定康克胶