肾上腺皮质激素与性激素课件

1、肾上腺皮质激素与性激素1 第十章甾体激素类药第十章甾体激素类药 物的分析物的分析 The Analysis of The Analysis of Steroid Hormon DrugSteroid Hormon Drug 肾上腺皮质激素与性激素2 基本结构：基本结构：环戊烷骈多氢菲环戊烷骈多氢菲 C20 C21 AB CD1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 第一节第一节基本结构和分类基本结构和分类 一、母核一、母核 肾上腺皮质激素与性激素3 环上双键的表示方法：环上双键的表示方法： 双键位置 双键位置 4 5 4 1 4 2 5 1

2、,4 5 6 5 10 5 5(10) 肾上腺皮质激素与性激素4 二、分类：二、分类： 甾体激素甾体激素 肾上腺皮质激素肾上腺皮质激素 性激素性激素 雄性激素及蛋白雄性激素及蛋白 同化激素同化激素 孕激素孕激素 雌激素雌激素 肾上腺皮质激素与性激素5 1 1肾上腺皮质激素肾上腺皮质激素 C CH2OH O O HO 17 18 19 20 21 皮质酮的衍生物皮质酮的衍生物 4 4-3-3-酮基：酮基：UVUV、与羰基试剂反应、与羰基试剂反应 C C17 17位有 位有- -酮醇基：还原性酮醇基：还原性11 C C11 11位有 位有-OH或或=O 母核含有母核含有2121个个C C 肾上腺皮

3、质激素与性激素6 代表药物：代表药物： C CH2OH O O OOH 可的松可的松 C CH2OH O O OHHO 氢化可的松氢化可的松 C CH2OH O O HO 17 18 19 20 21 肾上腺皮质激素与性激素7 人工合成药物：人工合成药物： C CH2OH O O OHHO CH3 F 地塞米松地塞米松 氢化可的松结构的基础氢化可的松结构的基础 上上1 1，2 2位间引入一个双位间引入一个双 键，键，9 9位上引入位上引入 - -F F，1616 位上引入位上引入 - -CHCH3 3 C CH2O H O O O HHO 在氢化可的松结构的在氢化可的松结构的 基础上基础上1

4、1，2 2位间引入位间引入 一个双键一个双键 1 2 氢化泼尼松氢化泼尼松 1 2 9 16 肾上腺皮质激素与性激素8 结构特点：结构特点： 含有含有2121个个C A环：环： 4 4-3-3-酮结构（酮结构（ , , - -不饱和酮）不饱和酮） 1717位：位： - -醇酮基，有还原性。醇酮基，有还原性。 人工合成品：人工合成品：1 1、2 2位间有双键，位间有双键，6 6 位，位，9 9 位引入卤素，位引入卤素，1616 位或位或1616 位引入甲基，位引入甲基， 1616 位引入羟基等。位引入羟基等。 肾上腺皮质激素与性激素9 2 2雄性激素及蛋白同化激素雄性激素及蛋白同化激素 O OH

5、 17 18 19 睾丸素的衍生物睾丸素的衍生物 结构特点：结构特点： (1)(1)母核含有母核含有1919个个C C (2)A(2)A环的环的 4 4-3-3-酮酮 (3)17(3)17位羟基位羟基 甲基甲基 酯酯 蛋白同化激素在蛋白同化激素在C C10 10位上一般无角甲基 位上一般无角甲基 肾上腺皮质激素与性激素10 O OH CH3 代表药物：代表药物： O OCOC2H5 甲基睾丸素甲基睾丸素 丙酸睾丸素丙酸睾丸素 O OH 17 18 19 O OCOCH2CH2 苯丙酸诺龙苯丙酸诺龙 肾上腺皮质激素与性激素11 3 3孕激素孕激素 CO O CH3 17 18 19 20 21

6、黄体酮黄体酮 结构特点：结构特点： (1)含有含有2121个个C C (2)A(2)A环的环的 4 4-3-3-酮酮 (3)17(3)17位甲酮基位甲酮基 与亚硝基铁氰化钠反应与亚硝基铁氰化钠反应 肾上腺皮质激素与性激素12 4 4雌激素雌激素雌二醇、炔雌醇及衍生物雌二醇、炔雌醇及衍生物 OH HO CCH 炔雌醇炔雌醇 O H H O 17 18 雌二醇雌二醇 H O O 雌酮雌酮 (1)母核含有母核含有1818个个C (2)A环：苯环，环：苯环，3 3位位Ar-OH 1010位无甲位无甲 基基 (3)17位：羟基、乙炔基位：羟基、乙炔基 结构特点：结构特点： 肾上腺皮质激素与性激素13 口

7、服避孕药口服避孕药 O C OH CH O C OH CH 炔诺酮炔诺酮 异炔诺酮异炔诺酮 CO O CH3 OCOCH3 CH3 安宫黄体酮安宫黄体酮 肾上腺皮质激素与性激素14 小结小结 甾体激素甾体激素碳原子碳原子 数数 A环环1717位取代基位取代基 肾上腺皮质肾上腺皮质 激素激素 2121 4 4-3-3-酮酮 - -醇酮基醇酮基 雄性激素雄性激素1919 4 4-3-3-酮酮 - -OH -CH3 孕激素孕激素2121 4 4-3-3-酮酮甲酮基甲酮基 雌激素雌激素1818苯环苯环 C3-酚酚OH - -OH -CCH 肾上腺皮质激素与性激素15 第二节第二节鉴别试验鉴别试验 一、

8、化学鉴别法一、化学鉴别法 (一)母核反应母核反应 H2SO4 , H3PO4 , HClO4 , HCl甾体激素类甾体激素类 药物药物 呈色呈色 24 Con.H SO 醋酸可的松黄褐色 如：如： 肾上腺皮质激素与性激素16 (二二)官能团的反应官能团的反应 1、C17 醇酮基醇酮基强还原性强还原性 C C H 2 O H O 氧化剂 C C O O H O H H 水和醛 水和醛 氨制 肾上腺皮质激素Ag TSAgNO 3 水和醛甲臢肾上腺皮质激素 有色 BTor TTC TTC氯化三苯四氮唑氯化三苯四氮唑(又叫红四氮唑又叫红四氮唑RT) BT蓝四氮唑蓝四氮唑 水和醛 斐林试剂 肾上腺皮质激

9、素 红色 OCu 2 （碱性酒石酸酮）（碱性酒石酸酮） 沉沉 淀淀 反反 应应 呈色反应呈色反应 肾上腺皮质激素与性激素17 C3酮基和酮基和C20酮基酮基: 甾酮类激素甾酮类激素 类药物类药物 呈色呈色 羰基试剂羰基试剂 常用的羰基试剂：常用的羰基试剂： 2,4-二硝基苯肼二硝基苯肼, 异烟肼异烟肼, 硫酸苯肼硫酸苯肼, 氨基脲氨基脲, 苯肼苯肼 O OH N CONHNH2 HCl CONHN OH N 异烟腙（黄色）异烟腙（黄色） 肾上腺皮质激素与性激素18 CONHN C CH3 NHNOC N N 2 N CONHNH2 HCl O C CH3 O 黄体酮黄体酮 异烟双腙（黄色）异烟

10、双腙（黄色） 肾上腺皮质激素与性激素19 具有甲酮基具有甲酮基 或活泼亚甲或活泼亚甲 基的甾体激基的甾体激 素类药物素类药物 呈色呈色 亚硝基铁氰化钠亚硝基铁氰化钠 间二硝基酚间二硝基酚 芳香醛芳香醛 3. 甲酮基甲酮基 孕激素特征反应。孕激素特征反应。 肾上腺皮质激素与性激素20 C O CH3 O 黄体酮黄体酮 OH H2O2+ -4 Fe 5 CNNOCH C O O 2 5 Fe CNNO 黄体酮黄体酮蓝紫色蓝紫色 亚硝基铁亚硝基铁 氰化钠氰化钠 其他甾体其他甾体 淡橙色淡橙色 如：如： 肾上腺皮质激素与性激素21 OH - H O O H H C H _ O N O 2 O 2 N

11、H H O O 2 N N O O _ N O 2 O 2 N -2H O O 2 N N O O _ O O 2 N N O 2 互变 紫红色max505nm 肾上腺皮质激素与性激素22 活泼次甲基反应（活泼次甲基反应（Zimmermann 反应）反应） C O CH2 羰基邻位的次甲基叫活泼次甲基。羰基邻位的次甲基叫活泼次甲基。 C CH2OH O O OOH 3 11 20 羰羰 基基 C3、 、C11、 C20 次甲基次甲基 C2、 、C12、C21 HO O 羰羰 基基 C17 次甲基次甲基 C16 可的松可的松 雌酮雌酮 2 12 21 17 16 肾上腺皮质激素与性激素23 雌激

12、素类药物雌激素类药物红色偶氮染料红色偶氮染料 重氮苯磺酸重氮苯磺酸 4. 酚羟基酚羟基 含炔基的含炔基的 甾体激素甾体激素 银盐沉淀银盐沉淀 AgNO3 5. 乙炔基乙炔基 OH HO CCH OH HO CCAg AgNO3 (White) 肾上腺皮质激素与性激素24 有机氟有机氟 F 有机破坏有机破坏 有机氯有机氯Cl 6. 有机卤素有机卤素 茜素氟蓝茜素氟蓝硝酸亚铈硝酸亚铈 HNO3AgNO3 AgCl 呈色呈色 肾上腺皮质激素与性激素25 O O OH OH CH2N CH2COOH CH2COOH 茜素氟蓝茜素氟蓝 O O OH O CH2N CH2COO Ce CH2COO F O

13、H F- 3 Ce 肾上腺皮质激素与性激素26 KOH OCOCHR 醇醇制制 OCOCHCHCH SO H OHHC 7. 水解产物的反应水解产物的反应 肾上腺皮质激素与性激素27 戊戊酸酸戊戊酸酸雌雌二二醇醇 醇醇制制 NaOH H 己己酸酸己己酸酸羟羟孕孕酮酮 醇醇制制 OH H 肾上腺皮质激素与性激素28 （二）制备衍生物测定熔点（二）制备衍生物测定熔点 （三）紫外分光光度法（三）紫外分光光度法 （四）红外光谱法（特征性强）（四）红外光谱法（特征性强） 中国药典上收载的甾体激素类药物中国药典上收载的甾体激素类药物 均有红外光谱图。均有红外光谱图。 （五）薄层色谱法（五）薄层色谱法 （六

14、）（六）HPLC 肾上腺皮质激素与性激素29 第三节第三节特殊杂质检查特殊杂质检查 有关物质有关物质、硒、残留溶剂、游离磷酸盐硒、残留溶剂、游离磷酸盐 （一）有关物质（一）有关物质 1 1、来源、来源: : 原料原料, ,中间体中间体, ,异构体异构体, ,降解产物降解产物 2、方法、方法:（具有一定分离能力）（具有一定分离能力） TLC法（高低浓度对比法）法（高低浓度对比法） HPLC法（类似高低浓度对比法）法（类似高低浓度对比法） 肾上腺皮质激素与性激素30 （1）TLC法（高低浓度对比法）法（高低浓度对比法） 判定方法：判定方法： v 规定杂质斑点数目规定杂质斑点数目 v 规定杂质斑点颜

15、色规定杂质斑点颜色 （2）HPLC法（高低浓度对比法）法（高低浓度对比法） 判定方法：判定方法： v 规定杂质峰数目规定杂质峰数目 v 规定杂质峰面积规定杂质峰面积 肾上腺皮质激素与性激素31 取本品加氯仿取本品加氯仿-甲醇甲醇(9 : 1)制成制成3.0mg/ml 作为供试液，精密量取适量，加氯仿作为供试液，精密量取适量，加氯仿-甲醇甲醇(9 : 1) 稀释成稀释成0.06mg/ml作为对照液；照薄层色谱法，作为对照液；照薄层色谱法， 各取各取5l，分别点于同一硅胶，分别点于同一硅胶G板上，以氯仿板上，以氯仿-甲甲 醇（醇（97 : 3）为展开剂，展开后晾干，在）为展开剂，展开后晾干，在10

16、5 干燥干燥10分钟，放冷，喷以碱性四氮唑蓝试液，立分钟，放冷，喷以碱性四氮唑蓝试液，立 即检视，供试品溶液如显杂质斑点，不得多于即检视，供试品溶液如显杂质斑点，不得多于2 个，其颜色与对照液的主斑点比较，不得更深。个，其颜色与对照液的主斑点比较，不得更深。 1 2 % . % 限限量量 肾上腺皮质激素与性激素32 取本品适量，精密称定，以无水乙醇取本品适量，精密称定，以无水乙醇 为溶剂，配制成每为溶剂，配制成每1ml含含2mg的溶液（的溶液（1）与）与 每每1ml含含0.04mg的溶液（的溶液（2），用含量测定项），用含量测定项 下的方法和溶液下的方法和溶液(0.16mg/ml)，取，取10

17、l注入液注入液 相色谱仪，调整仪器灵敏度，使主成分峰高度相色谱仪，调整仪器灵敏度，使主成分峰高度 达记录仪的满量程。再分别取溶液（达记录仪的满量程。再分别取溶液（1）和溶）和溶 液（液（2）各）各10l，进样。记录至主成分峰保留，进样。记录至主成分峰保留 时间的时间的2倍。溶液（倍。溶液（1）显示的杂质峰数不得超）显示的杂质峰数不得超 过过4个，各杂质峰面积及其总和分别不得大于个，各杂质峰面积及其总和分别不得大于 溶液（溶液（2）主峰面积的）主峰面积的1/2和和3/4。 肾上腺皮质激素与性激素33 二、硒二、硒 1、来源：、来源：合成中用二氧化硒合成中用二氧化硒(SeO2)脱氢脱氢 剧毒剧毒

18、2、原理、原理 nm A 环环己己烷烷 SeSe 盐盐酸酸羟羟胺胺氧氧瓶瓶燃燃烧烧 3、方法、方法 2,34 Se4,5 二氨基萘 苯并苯硒二唑 肾上腺皮质激素与性激素34 对照品溶液的制备：对照品溶液的制备：精密量取标准砷溶液（每精密量取标准砷溶液（每1mL相当相当 于于1g的的Se）5mL, 置置100mL烧杯中，加硝酸溶液烧杯中，加硝酸溶液 (130) 25mL和水和水10mL,即得。即得。 供试品溶液的制备：供试品溶液的制备：取本品取本品50mg，照氧瓶燃烧法进行，照氧瓶燃烧法进行 破坏后，将吸收液转移至破坏后，将吸收液转移至100ml烧杯中，用水烧杯中，用水15ml冲冲 洗燃烧瓶及铂

19、丝，并入吸收液中，即得。洗燃烧瓶及铂丝，并入吸收液中，即得。 检查法：检查法：将上述硒对照品溶液和供试品溶液分别用氨试将上述硒对照品溶液和供试品溶液分别用氨试 液调节液调节pH值至值至2.00.2后，转移至分液漏斗中，用水后，转移至分液漏斗中，用水 少量分次洗涤烧杯，洗液并入分液漏斗中，使成少量分次洗涤烧杯，洗液并入分液漏斗中，使成 60ml，各加盐酸羟胺溶液（，各加盐酸羟胺溶液（12）1ml，摇匀后，立，摇匀后，立 即精密加二氨基奈试液即精密加二氨基奈试液5ml，摇匀，在室温下放置，摇匀，在室温下放置 100分钟，精密加环己烷分钟，精密加环己烷5ml，强烈振摇，强烈振摇2，静置分层，静置分层

20、， 取环己烷脱水后，测取环己烷脱水后，测A378nm。规定。规定 A供 供 A对。 对。 醋酸氟轻松醋酸氟轻松 检查检查 硒硒 肾上腺皮质激素与性激素35 %. 1 5/1000 100% 50 L 肾上腺皮质激素与性激素36 三、有机溶剂残留（甲醇和丙酮）三、有机溶剂残留（甲醇和丙酮） 甲醇：甲醇：0.3% 丙酮：丙酮：0.5%（g/g) GC法法 肾上腺皮质激素与性激素37 地塞米松磷酸钠地塞米松磷酸钠检查检查 甲醇和丙酮甲醇和丙酮 精密称取本品精密称取本品0.16g，置，置10 ml量瓶中，精量瓶中，精 密加内标溶液密加内标溶液2ml，加水稀释至刻度，作为供，加水稀释至刻度，作为供 试液

21、；另精密量取甲醇试液；另精密量取甲醇10l(7.9mg)与丙酮与丙酮 100l (79mg)置置10ml量瓶中，加水稀释至刻量瓶中，加水稀释至刻 度，精密量取度，精密量取1mL，置，置10mL量瓶中，精密加量瓶中，精密加 内标溶液内标溶液2ml, 加水至刻度，作为对照液。取加水至刻度，作为对照液。取 对照品溶液和供试品溶液，照残留溶剂测定法对照品溶液和供试品溶液，照残留溶剂测定法 测定，应符合规定。测定，应符合规定。 肾上腺皮质激素与性激素38 四、游离磷酸四、游离磷酸对照品法对照品法 1、原理：、原理： 地塞米松磷酸钠地塞米松磷酸钠 氢化可的松磷酸钠氢化可的松磷酸钠 倍他米松磷酸钠倍他米松磷

22、酸钠 氢化泼尼松磷酸钠氢化泼尼松磷酸钠 NHP(MoO) nH O 4 310 42 1-2-4-3 4 max PO H A(=730nm) （） 磷钼酸铵 氨基萘酚磺酸 磷酸盐 钼蓝 与对照品比较 肾上腺皮质激素与性激素39 检查检查 游离磷酸游离磷酸地塞米松磷酸钠地塞米松磷酸钠 精密称取本品精密称取本品20mg，置，置25ml量瓶中，加水量瓶中，加水 15ml溶解，精密加钼酸铵硫酸试液溶解，精密加钼酸铵硫酸试液2.5ml与与1-氨氨 基基-2-萘酚萘酚-4-磺酸溶液磺酸溶液1ml，加水至刻度，摇匀，加水至刻度，摇匀， 在在20放置放置3050分钟，照分光光度法，在分钟，照分光光度法，在

23、740nm处测定吸收度，与对照液处测定吸收度，与对照液4.0ml同法同法 处理的吸收度比较，不得更大。处理的吸收度比较，不得更大。 （对照液对照液 0.0035%KH2PO4） 肾上腺皮质激素与性激素40 （对照液对照液 0.0035%KH2PO4） POKH POH % . %. L %. 肾上腺皮质激素与性激素41 第四节第四节含量测定含量测定 一、一、HPLC, USP、BP、JP均采用均采用, RP HPLC（大多内标法）（大多内标法） （甾体激素类药物常含有结构相似的其他（甾体激素类药物常含有结构相似的其他 甾体杂质，对利用结构特征设计的比色法甾体杂质，对利用结构特征设计的比色法 有

24、干扰）有干扰） 特点特点: :用样量少，灵敏度高，分离效果好用样量少，灵敏度高，分离效果好 肾上腺皮质激素与性激素42 黄体酮注射液的含量测定黄体酮注射液的含量测定 取本品适量取本品适量 乙醚乙醚 50mL量瓶量瓶 精密量取精密量取 5.0mL 挥散乙醚挥散乙醚 残渣残渣 甲醇甲醇 振荡提取振荡提取10 min/次次/4 次次离心离心 上清液上清液 内标溶液内标溶液 5.0 mL 甲醇甲醇25mL 量瓶量瓶 供试品溶液的制备供试品溶液的制备 对照品溶液的制备对照品溶液的制备 15 min 黄体酮约黄体酮约25mg 甲醇甲醇 25mL量瓶量瓶 精密量取精密量取 5.0mL 内标溶液内标溶液 5.

25、0 mL 25mL 量瓶量瓶 肾上腺皮质激素与性激素43 测定与计算测定与计算 供试品溶液供试品溶液 5 L 对照品溶液对照品溶液 5 L HPLC Ai供，供，As供供 Ai对，对，As对对 Ci Cs Ci Cs Aifi Asfs Aifi Asfs 骣 骣 鼢 桫桫 = 骣骣 鼢珑 鼢 珑 桫 桫 供供 对 对 ( ) ( ) Ci Ci Ai As Ai As 骣 桫 = 骣 桫 供供 对 对 肾上腺皮质激素与性激素44 （1）专属性）专属性 “干扰干扰” 方法学验证方法学验证 对照品色谱图对照品色谱图 阴性对照溶液色谱图阴性对照溶液色谱图 缺黄体酮的模拟注射液缺黄体酮的模拟注射液

26、供试品溶液的制备供试品溶液的制备(不加内标不加内标) 阴性对照溶液阴性对照溶液 供试品溶液色谱图供试品溶液色谱图 肾上腺皮质激素与性激素45 （2）仪器精密度）仪器精密度 （3）方法重复性）方法重复性 仪器稳定性（同一溶液仪器稳定性（同一溶液6次测定的次测定的RSD） 供试品制备工艺的稳定性供试品制备工艺的稳定性 （同一工艺下平行制备（同一工艺下平行制备6份供试液测定值的份供试液测定值的RSD） （4）标准曲线及线性范围）标准曲线及线性范围 X：Ci（黄体酮）（黄体酮） y：Ai/As（待测物与内标物的峰面积比值）（待测物与内标物的峰面积比值） （5）回收率试验）回收率试验 方法的准确度方法的

27、准确度 发现量与加入量的接近程度发现量与加入量的接近程度 R = 发现量发现量/加入量加入量1 1 （6）耐受性）耐受性 肾上腺皮质激素与性激素46 二、二、UV法法 -3-酮 酮 240nm () 肾上腺皮质激素肾上腺皮质激素 雄性激素和蛋白同化激素雄性激素和蛋白同化激素 孕激素孕激素 苯环苯环 280nm () 雌激素雌激素 适用于原料药。适用于原料药。 样品中样品中“其它甾体其它甾体”不合格时，不适用。不合格时，不适用。 肾上腺皮质激素与性激素47 三、三、 比色法比色法 （一）异烟肼比色法（一）异烟肼比色法 （二）四氮唑比色法（二）四氮唑比色法 （三）（三）koberkober反应比色

28、法反应比色法 对照品比较法对照品比较法 肾上腺皮质激素与性激素48 （一）异烟肼比色法（一）异烟肼比色法 O OH CH3 N CONHN H2 OH CH3 CONHN N + _H 2O 1 1原理原理 C3酮基及某些其他位置上的酮基及某些其他位置上的酮基酮基能能与羰与羰 基试剂异烟肼基试剂异烟肼在在酸性酸性条件下形成条件下形成黄色异烟腙黄色异烟腙， 在一定波长下具有最大吸收，可用于定量在一定波长下具有最大吸收，可用于定量 肾上腺皮质激素与性激素49 2、反应条件反应条件 （1 1）溶剂：）溶剂：无水乙醇，无水甲醇无水乙醇，无水甲醇 （2）酸的种类、浓度及异烟肼的浓度）酸的种类、浓度及异烟

29、肼的浓度 常用常用HCl HCl：异烟肼：异烟肼 = 2M:1M时，获最大吸收度。时，获最大吸收度。 肾上腺皮质激素与性激素50 （3）水分、）水分、O2、光线的影响、光线的影响 含水量含水量腙水解腙水解A% O2与光线无影响与光线无影响 （4）反应的专属性）反应的专属性 反应条件下，反应条件下，4-3-酮具有一定专属性酮具有一定专属性 C20酮基反应慢，酮基反应慢， C17酮基反应慢；酮基反应慢； C11酮基不反应酮基不反应 4-3-酮酮室温下，不到室温下，不到1h反应完全反应完全 肾上腺皮质激素与性激素51 倍他米松磷酸钠的含量测定倍他米松磷酸钠的含量测定 取本品适量取本品适量 = 420

30、 nm 50mL量瓶量瓶 精密量取精密量取 1.0mL 异烟肼溶液异烟肼溶液20 mL20 mL 60水浴水浴, 1 h 甲醇甲醇 25 mL量瓶量瓶 供试液：供试液： 对照液：对照液： 取倍他米松磷酸钠适量取倍他米松磷酸钠适量 摇匀摇匀冷却冷却 甲醇甲醇 Ai 肾上腺皮质激素与性激素52 肾上腺皮质激素类肾上腺皮质激素类 C17-醇酮基醇酮基 强还原性强还原性 1 1、原理、原理 （二）四氮唑比色法（二）四氮唑比色法 - OH C17- -+ 氧化-还原反应 醇酮基 四氮唑盐有色甲瓒 （1）红四氮唑（缩写）红四氮唑（缩写TTC 或或RT） 2 2、四氮唑盐的种类：、四氮唑盐的种类： （2）蓝

31、四氮唑：）蓝四氮唑： BP； ChP USP 肾上腺皮质激素与性激素53 C NN NN H 不溶于水的不溶于水的 三苯甲瓒三苯甲瓒深红深红 C NN NN + Cl- 氯化三苯四氮唑氯化三苯四氮唑 （TTC） 红四氮唑（红四氮唑（RT） nmmax490480 OH e2 肾上腺皮质激素与性激素54 C l - + C NN NN O C H 3 + - C l C NN NN O C H 3 蓝四氮唑蓝四氮唑 （BT） OHe4 H C NN NN O C H 3 H C NN NN O C H 3 双甲瓒（暗蓝）双甲瓒（暗蓝） nmmax525 肾上腺皮质激素与性激素55 4、讨论讨论

32、结构、反应温度和时间、水分、碱浓结构、反应温度和时间、水分、碱浓 度、空气中氧、试剂类别和浓度等，对反应速度、空气中氧、试剂类别和浓度等，对反应速 度，呈色强度和稳定性有影响度，呈色强度和稳定性有影响。 （1 1）官能团位置的影响）官能团位置的影响 C CH2OH O O OHHO C CH2OH O O OOH C11: V11C=O V11C-OH 可的松可的松 氢化可的松氢化可的松 肾上腺皮质激素与性激素56 B：V简单酯 简单酯V复杂酯复杂酯 醋酸酯醋酸酯 磷酸酯磷酸酯 琥珀酸酯琥珀酸酯 三甲基醋酸酯三甲基醋酸酯 （1 1）官能团位置的影响）官能团位置的影响 C21：-羟基（羟基（C2

33、1-OH） ） A: 21-OH酯化后较母体羟基反应速度慢酯化后较母体羟基反应速度慢 即：即：V游离体 游离体V酯类酯类 如：可的松如：可的松醋酸可的松醋酸可的松 肾上腺皮质激素与性激素57 （2 2）溶剂、水分的影响）溶剂、水分的影响 含水量含水量5% 含水含水10%10%A10% 含水含水30%几无反应几无反应 无醛无水乙醇无醛无水乙醇醛醛 A 无水乙醇无水乙醇 肾上腺皮质激素与性激素58 采用氢氧化四甲基铵能得到满意结果。采用氢氧化四甲基铵能得到满意结果。 （3 3）碱的种类及加入顺序的影响）碱的种类及加入顺序的影响 碱碱试试液液四四氮氮唑唑盐盐皮皮质质激激素素溶溶液液 加入顺序：加入顺序：先加先加TTC或或BT，后加，后加 (CH3)4N+OH- 原因：原因： 皮质激素与皮质激素与(CH3)4N+OH-长时间接触，长时间接触， 有部分分解。有部分分解。 肾上腺皮质激素与性激素59 （4） O2与光线的影响与光线的影响 反应过程反应过程 反应产物反应产物 怕光怕光 避光、快速避光、快速 O2影响颜色强度和稳定性影响颜色强度和稳定性 隔绝空气隔绝空气充充N2 快速快速 肾上腺皮质激素与性激素60 （5） 温度与时间温度与时间 t甲瓒分解甲瓒分解% ChP 25 4045 BP 30 1h 肾上腺皮质激素与性激素61 1.