支气管肺泡灌洗(BAL)的临床应用与实验室检查(20210501125140)

1、支气管肺泡灌洗(BAL)的临床应用与实验室检查支气管肺泡灌洗(BAL)的临床应用与实验室检査一. 定义：支气管肺泡灌洗(bronch o alv e olar lava g e, BA J )是一种经纤維支气管镜茯取并泡的 细胞与生化成份的广为实用而安全的方法。注色：BAL的操作规范BA L灌洗液的处理规范BA L的非细胞成份指标尚不能作为有用的临床参考二. 用途： 疾病诊断：特异性诊斷：重要诊断工具。 疗效与预后评价 治疗 研究A 对于某些侍殊疾病,BAL可以做出特异性的诊断 机会性肺部感染:卡氏肺靈虫性肺炎，巨细胞病毒性并灸.肺结核，肺真菌感卑 尘肺，石棉盹肺出血 镀肺(阳性淋巴细胞转换试

2、验) 支气管肺泡细胞癌,恶性淋巴瘤等(肿瘤细胞)肺泡蛋白沉着症(对氮基水扬酸-阳性小体 组织细胞培多症X (Hi s tiocyto s is X)A 对于一些间质性肺病，BAL是重要诊断手段结节病，外源性过敏性肪泡炎，闭塞性细支气管炎伴机化性肺炎(BOOP),特发性肺纤雜 化(IPF),慢性嗜酸细胞肺炎等。三-应用抱征1. 间质性渗出改变：结节病，外源性过敏性肺泡炎，药物性肺泡炎，特发性肺纤维化,胶原血管疾病，组织细胞 增多症X,尘肺，癌性淋巴管炎等。2. 肺泡滲出耀：肺炎，肺泡出血，肺泡蛋白沉着症,BOOP,嗜酸细胞肺炎等3. 免疫缺陷病人并肺渗出病变：HIV感染，化疗或放疗，兌疫抑制剂治

3、疗，器官移植四. BAL副反应：发生率为0-2. 3%,当同时进行经支气管镜肺活检(TBLBh副反应为7%,尚无因BAL 死亡报道，因TBLB死亡0. 2%,因开肺活检(0LB)死亡L 89U1. 副反应发生形式与时间肺泡溼出|V1C%,多于48小时后消失爆裂音2 4小时内，于相关肺野喘息高亀病人1-2周10-3( BAL几小时后，可能与TNF-a介导有关肺功能损害FEVI, VC, PEF, Pa 02短时降低PaCO2短时壇加(COPD)支气營痉挛少,高敏病人相对多气驹只发生在经支气管肺活检同时进行支气管反应性无变化上皮完整性支气管纤毛摆动短时降低，但BAL进行2 4小时后，上皮细胞通透性

4、无影响出血不明显2.副反应的预防:副反应随看灌注量及灌注肺段的増加而培加，仔细操作，特别注意能使并发症减少到晟巾程 度。 全面了解病史，进行肺功能试验，血气分析,血小板计数，出離血时间，心电图，胸部放射 片 E CG,氧饱和度监测并予吸氧 B如后24小时观察 限制灌洗量到最小SS1 适当的操作前用药，必要时使用B-受体澈动剂等 特殊病人严格拿握适应征3. BAL时副反应发生的危险因素 5观的肺野渗出实交P aO203m mHg Sa02 9 0%,支气管反应性PC202 u g /ml乙酰甲胆碱 FEKQ% 预计值，或 BEVIVILPrO t h r o m b inS % 血小板计数低于2

5、0, 000/m 1明显异常的ECG 对镇静剂敏感或不能耐受严重的伴发症PC20： FEV 1降低2 0%所需的最低乙酰甲胆碱浓度五. BAL操作绝大多数在局麻下使用纤维支气骨镜进行。BAL是在其它纤支镜操作之前，以免造成 BAL的不纯。1. 操作前用药： 镇静剂，以便病人合作； 胆睑能受体抑制剂：减低迷走反射，支气管分泌，可壇加BAL回吸收。2. 局部麻醉：必须彻底，防止咳嗽，因咳嗽致损伤，出血及灌洗液丢失。但进行顒匚前应将利窑卡因吸走 以免影响细胞回收，活性及功能。3. 濯洗部位，常规为右中叶，左舌叶。中叶易于操作及嵌顿，回收的BAL较灌洗下叶多2靦； 对于大多数弥漫性间质性肺病病人，一个

6、部位灌洗应该能代表全肺并能提供足够的临床资料； 局部病变如肿瘤，炎性渗出等需行局部病变部位灌洗.4. 灌洗液:无菌生渥盐水，3 70C或室温。5. 灌注和回收方法：20-5 0 ml /次，总屋：1003 0氐1 /肺段。临床上较实用而宝全的灌洗島5x 2 0ml。6. 回收方法：每次灌注后立刻经朔料注射器手动回抽或吸引器f氐压轻轻吸引(25-10CnmHg);通常回吸收40-7(M, 25%时，BAL不可靠：回收的液体必须收集在朔料或硅化的注射器或容器内，防止巨噬细胞附着；可借肋于导管进行灌注，嵌顿后将导管从活检孔送至支气管镜尖端，再行灌注有利于注射器 的变化，同时降低死腔7- ML操作关键

7、:局麻充分；防止病人咳啾；无总性支气管炎，支气管镜嵌顿。六. BAL液的丈验室处理1细胞计数与活性1) 所有回收液经两层纱部过滤，移去粘液，充分混匀若使用20ml/次，因第一管回收的液体及细胞占总虽比例很小，计入总星内，对结果影 响不大。2) 观测性状，测定液体量如B A L液呈混浊奶白色，提示肺泡蛋白沉看症，需逬行PA 染色，电镜检査。如B AL液呈橘 黄色，提示出血，需行铁染色。3) 离心 1 5 OOrpm x 1 Omin 上清液保存在-8CC冰箱，以作生化成份分析。至目前为止，尚无一个可靠的参考定量标唯. 故尚无法用于临床。 细胞沉淀用2iu1MBE%分混匀后，铮分装在两于e p P

8、已ndoi詹内管用作细胞分类计数， 另1管用修细胞免疫分析。木如果是血性BAU需先进行梯度高心分蛊淋巴细胞，加lid Fi coll液于前述留作细胞 免疫 分析用的1 ml细胞悬液的底部，梯度禽心30 0 0 r p mv3min+2 00 Orpm x 5hll n, 让离心机慢慢减速而停止.小心吸取细胞环，用悬浮，洗涤。*如怀疑石棉肺：则先混匀所有回收液(过滤离心前)，从中取出1 Qul+3 0ml蒸馋水混匀，室温静董约一 小时，破坏细胞，有利于被巨噬细胞吞噬的石棉小体释放。轻轻摇晃，经石棉小体过滤装置(Mill i pore)真空过滤，过滤后，0. 45um微孔膜空气 干燥，注意避免打折

9、小心转移滤膜至圆形玻片上用H I stokitt封片因用His t oki 11封片氐 亮度足够镜下观观故没有必要用丙酮溶解谑膜。光镜(1 D x或4 Ox)下计数整张滤膜上的所有石棉小体.彼过滤的BAL毫升数(如10)除 得结果：石棉小体WmlBAL4) 细胞总数与活性测定 细胞总数:1 Oul述细胞混悬液+200ml Tu r c k溶液.充分混匀，取适量填充于血细 胞计数板内计数或采用自动计数仪计数。血细胞计数檢(N eu L a u er cel 1 chamber)数四角大方格(16 x 4 个小方格)内细 胞数.计寡公式为：细胞总数=细胞数X 5 2.5(计数板辂积2000ul C

10、含所有细胞)1併=细胞数X 0. 105 = ? (x J 0&细胞) 细胞活性：50ul上述细胞混悬液+ 10ul台盼蓝(Ty p an blue)溶液，充分混匀，取 适量填充于血细胞计数板内,5- 1 D分钟内计数1 0 0个细胞内存活细胞的百分率沧 死细胞 染成直色。通常于3 20倍族大下计数。通常活性在80 95%, 50曙细胞活性细胞形态及功能明显受影响。2. 细胞分类检查:1) 细胞涂片方法： 常规手推片:简单，能适用于犬多数需要，尤其适应于要进行肿瘤细胞整定的BAJ及血性 BAL将上述留作细胞学检查的细胞混悬液离心后逬行涂片，空气干燥。合格涂片细胞密 度 适当，细胞分布均匀。 细

11、胞离心涂片：每张片5-20x10 4细胞。细胞保存液，离心速度，时间均可影响细胞分类。细胞离心涂片降低淋巴细屜分类。当细胞总数 1 x J 06时,通常釆用细胞离心涂片， 当细胞总数1时，经验稀释法如下：细胞总数(81 09细胞恳液+MBE 0. 50.65 00 ul+250ul0.74 0 0ul+3 00ul0.8350ul+3 5Dul0.9350u 1+400 u I1.0300ul+450ul将细胞充分混合后，每笛2 0 0 u 1于细胞离心机离心3 50rp】nx2min 微孔过滤：每张过滤纸2 0 0, G00细胞，让其进行至力引流 r avLty d raining)涂 片。

12、保持样本湿化是关键，干燥将产生严重的细胞变性适合于改良的H嗣日to灯lin-eo sin, Papanicolaou染色，后者较好地显示细胞核与细胞浆，有利于瘤细胞，病尋包含 体的鉴别，与细胞离心涂片比较，淋巴细胞比例增加，嗜中性粒细腕比例降低 点吸涂片:将上述留作细胞学检查的细胞混悬液离心后，调节细胞数不要106细胞/ul进行 点吸涂片取一滴(约151)细胞液済于玻片，即刻回吸，形成一细胞圈,重复上述操作，做 成四个细胞圈排列于玻片一端，空气干燥。*每份BAL样本通常做3张涂片，一张做普通染色，另二张备做待殊染色。当怀疑机会性肺 部感染需做抗酸染色，甲苯腹蓝染色时，应加做点吸垛片二张.2)

13、细胞染色： 常规染色(供做细胞分类九May-Gru nl d G I emsa(MG G )染色 特殊染色辰染色(B e r 1 in blue stain)PAS乘色，过谯酸雪弗染色(P& r i o d i c acid Scbi f f J s s tain)甲苯胺蓝染色(Toluid I n e s t ain)4/16支气管肺泡灌洗（BAL）的临床应用与实验室检查苏丹染色.脂肪染色CSudarj I II st a in）抗酸染色（Z J e hlNeel s e n st a i n for ac id- f act b a cilli stain）3）细胞分类计数： MG G染色

14、涂片于光学显微镜下观察，计数至少6 0 0个白细胞求分类百分比。 半定量估计上皮细胞，红细胞，如上皮细胞5%提示支气管成份的混入。 另外观察细胞形态，巨噬细胞内吞噬偽 尘粒，石棉小体，红细胞片段，CMV包含体，卡氏 肺龛虫（P C P）,细氤霉直异形上皮及肿瘤细胞.3. 免疫细胞学分析 免疫细胞化学法，如过氧化酶抗过氧化酶反应 免疫荧光或流式细胞仪分析C Immunoflu o r esce n ce o r C lew匚yto metr y ）免疫荧光优点:流式细胞仪自动测定，取标计有利于研充两种不同表面抗原的平行表达免疫荧光缺点：非参数计录，非细胞形态显示，巨噬细胞的自动荧光干扰兔疫化学方

15、法优点：光学显微镜，永久保存，形态学观糜，敏感性高免疫化学方搖缺点；虽双标记可能，但耗时间4. 过氧化酶抗过氧化酶方袪（p e r 1 ox id a se-antiperi o x ida s e method）是ffiTBA L细胞免疫分析常使用的方法。优焦 所需细犯少,20, 0 0。细胞/反应区，所需用抗体少细胞形态保存好（因为避免了干燥，离心，丙酮固定，因此优于经空气干燥的细 胞离心涂片所进行的免疫化学染色1）细胞的准备： 将前述留作免疫细胞分析的细胞用MBE洗3次,离心15 0 0 rpmx3m i n 再用MEM洗3次，离心15 0 0 r p mxSm J n 稀释至适当的细胞

16、浓度，一般：10x 1 OVm 1,若巨噬细胞多，使用二倍MEM稀释，若淋巴细胞 细胞多，使用1/2倍MEM稀释2）细胞附看： 吸附玻片用温才、洗去绿色保护层，再用NKH溶液冲洗（注意不要损坏反应区帯正电的簿唳，因 其吸附带负电的细胞）。 将混匀旳细胞悬液10ul （2 0,卫0细胞加于每个反应区，显微镜下监控细胞密度如细 胞层过厚，需进一歩稀释，如太隧需加更多细胞细胞于湿合内室温下静室0分钟，防止细 胞干燥。3）细胞固定： 真空吸去MEM,加10ul 0. 05%戊二醛于每个反应区，让其反应5分钟,吸走固定液，用 NKH洗三次。（固罡有利于细胞形态保存，细胞附着，阻止细胞表面的Fc受体）。4

17、）加10ul准备好的MAG-Sweine于每反应区，震荡浮化1 5分钟，吸走MAG-S阳ie。（以避 免免疫球蛋白连接于玻片衣面）5）加特异的单克隆抗体10ul,震荡浮化15分钟。*到jkL反应可以斩停，细胞片放于4 0C冰箱保存。6）过氧化酶抗过氣化醵反应：*用NKH喷雾清洗多于抗体，相继先后在三个盛有NKH的玻璃器皿内係洗3次，仔细从侧边 吸走过剩的NKH.加10ul唯备好的RAM到每个反应区，于喪荡器上震荡浮化5分钟，用NKH清洗玻片同上述。 加10u 1准备好的SA晞液于反应区，于處荡器上虔荡浮化5分钟，用NEH清洸玻片同上述，加10u 1准备好的PAP溶液于每反应区，虎荡浮化5分钟，

18、同前用NKH清洗后，再让玻片留于 第三瓶N K H内震荡淸洗5分钟。7）DA皈应： 移去过度的MU 加DAB 10ul于每反应区，反应1盼钟，用NKH喷雾洗去DAB,再将玻 片放于新鲜的NKH洛液钟爲荡清洗5分钟。（注总:DAB是致癌物,需保护性操作，一定要在排风装置下，薮口罩，手套操作,DA B废物特 殊存放，待殊处理）8）Osmium 反应： 移走多余的NKH八加0 ulO s m I um于毋反应区，直于湿合内于冰上反应10分钟进行后固 定，用蒸礙水清除过剩的0$ miiini,玻片短时宜于蒸馄水的器皿中.（注意:0sidum是有毒物，需保护性操作，一定要在排风装置下，載罩.手套操作，O

19、s mium废物特殊存放，特殊处理）9）封盖玻片： 移走过量的蒸馅丸滴玻片複盖液适量.加盖玻片，婭姪挤压移去多量複盖鴻不要留气泡, 不要挤压细胞，淸洗表面，轻轻试干，用无色指甲油封片。10）光学显微镜下计数至少2 0 0个淋巴细胞或巨噬细胞（包掖阳性和阴性细胞），求出阳性反应 细胞的百分率。5. 细胞染色方法1）N a 7Gruirwal d Gi e m s a （MGG）染色: 空气中凉干的细胞涂片于沫缩的May-Gru n 液中染色35分钟 蒸馅水短时冲洗 1： 100 G I eiu s a蒸诸水混合液中染色15分钟 自来水短时冲洗，空气中凉干，加Histokit t封片2）Fo染色（

20、Berl I n blue染色）:注意，禁止使用含Fe的银子和容器 空气中凉干的细胞涂片于纯甲醉Cm ethanol）中固定5分钟 配制Fota. s sium Hexa c ya.n oferroie 1 I 溶液：1 g Potass i u jn hexacya n oferrate 1 I 3H20+ 10 0 ml 蒸馆7K+lml 37% HCL盐酸加入使之易氧化，由无色清売变为绿色特殊陵品处理） 玻片于新鲜的Potassium He x a c y a nofe r rate II溶液中作用8分钟 于N a yer氏苏木楕明矶（Mayerz 5 h aema 1 au D D染液

21、中染色2-5分钟（染核） 蒸馅水中清洗最多10分钟呈蓝色 空气干燥,谪玻片遥孟液如Hi 5 to k lib加盂玻片。6/16支气管肺泡灌洗(BAL)的临床应用与实验室检查3) 甲苯胺蓝(Tolu idine blue)染色： 点吸细胞涂片空气干燥至少半小时 准备酷酸硫酸混合液：30m 1 浓醋酸(cone e nt r* ate d acetic acid) +lCml 浓硫酸(concent r atedsulph Ic oz I d) 使用前冷却10分钟 细胞涂片放于准备好的醋酸硫酸混合液中浮化5分钟，轻轻搖晃至少3次，以促进细胞更好 溶解。 自来水流幼清洗5分钟 甲苯胺蓝瓶中封盖染色5

22、分钟自来水流动清洗3分钟 玻片先后在9 6 %和10 0%乙醇(ethanol)中浸蘸约1 0秒 空气千燥,滴玻片覆盖液如Histoki 11,加盖玻片PAS染色 涂片空气千燥至少2小时 蒸憎水短暂冲洗 玻片于过W (periodic acid)诰液中浸泡5分钟 蒸馅水短暂沖洗 放玻片于S c hiff 试剂中10分钟蒸馅水短暂冲洗 放玻片于S02水中5分钟 蒸馅水短暂冲洗 Mayers h aemal a u n染液中30对照染色自来水中清洗5分钟至显蓝色蒸馅水短暂冲洗 玻片先后于96粥和1 0 %乙6?各5秒钟脱水 空气中凉干,AqHls t okitt封片S02水配制：0. 6 g Na

23、-disulphite+1 Q 0 ml自来水+5ml IN HCL4) Sudan 1 I I染色(脂肪染色) 细胞涂片空气千燥至少半小时 蒸馅水中短暂浸醸.5 0%乙醇(ethanol)中固定5分钟 Sudan III溶液中封盖染色3盼钟 5 C%乙醉(e t h anol)中固定1 G秒，蒸馅水短暂冲洗 Ma y er s ha m & 1 a u n染液中5分钟对照染色 蒸馅水中清洗5分钟至显蓝色，空气中凉干，加Hi st o ldt t封片5) 抗酸染色：手推细胞涂片或点吸涂片空气中干燥至少半小时，加热固走 玻片用浓缩的石炭酸品红液(C arbn 1 fuchs i n).覆盖，加热

24、蒸发过多染料至少5分中自来水冲洗，玻片用盐酸酒精(H CL-al c ohol)彻底脱色 用自来水冲洗，美蓝(Methy 1 ene blue)对照乘色至多45秒 自来水冲洗，空气中凉干，加Histok I tt封片6) 肥大细胞染色： 细胞涂片空气中干燥至少1小时，1 0分钟固定 固定液组成：5Cm 1纯酒精(100% e t hanol)+ 4 Oml 氯仿(ch lor o f orm)十 J Oml 酷腹(a cet ic acid)自来水流动冲洗5分钟 甲苯胺蓝(Toluidine blue)洛液中染色20分中自来水流动冲洗5分钟 在9硯乙醇(ethanol)中浸韻2次，空气中凉T,

25、 t)OH I stokit t封片6. 试剂配制1) 正常人血清(AB serum)分离非抗就血于5&C浮育30分钟4吒冰箱静置2小时,禽心500 0rpnx20mi n分离的血清按200ul分装，直于0。C冰冻保存2) 兔抗歆免疫球蛋口原液 Cr a bb I t a nt J m O use, RAM stock solu t I on) 1! 505 Oul兔抗鼠免疫球蛋白(RAM) +200ul正常人血清CAB s er u m) +20 0 u 1 猪血清(swine s e rum) +2500 u 1 MAG 40c冰箱储存可用二周3) 猪抗兔免疫球蛋白(swine ant i

26、 -r a b bit, SAR)50ul猪抗兔免疫球蛋白(SAQ+ 1 0 0 ul 人血清 CAB s e r m)4七冰箱脾化至少一天后待用，可存放4周4) DAB(排凤装宣下，裁口酉，手套操作)D5 g DAB+ 5 Qin 1 NKH (无Hep e s,无酚红)+ 5 ml He p e s (pH S . 0)十2ml明胶Cgelantine) 3 7 OC加热浴化混合后，按2 ml分装，置于-20吒保存DA诚用液？ 2ml DAB+ 20u 1 32O2DAB-PAP探针试验：5ul PAP + 5 Dul DAB反应显棕色，4 0C冰箱保存可使用二 天。5) 0血5(排甌装置

27、F啟罩，手套操作)250mg Osmiuiri+10 0 ml Soren s en-PES CO. 1M/L, pH 7.4) 避光封装，4 C冰箱保存6) Latex1 000 u I MEM (应用液)+50ul2 2?oBSA+5ul Latex溶液于37C水浴预热15分钟7) BAL细胞转送液5 0 ml MEM (应用液)+2. 5m I 22%BS A8) 抗体各种冻干抗体按说明潜解分装 20抗体液十IDul液体石蜡，- 2CPC冰冻保存应用时，抗体室温解冻后，用MAG逬行稀释,稀释倍数因抗体而异，如1:5 0或1： 11)09) 盐酸酒精溶液(HCL-alc h ol)27Ch

28、 I 蒸憎水+了 OQd 酒精 + 3 0ml 37%HCL10) 过碘酸洛液(Fe r iodic a c id solu L ion)3. 75 g过碘酸(H5lO6“5COm 1蒸憎水11) 甲苯胺蓝(T。1 u idine blue)溶液0. 15 g甲苯胺蓝0(Toluid I ne b 1 ue 0)+3IW1蒸馆水+70m 1 纯乙醇仃 D D% e than ol)+linl 3 7%HC LSudan 1 II洛液1 g Sudan I I 1+ J 0 On J 7 乙醉(e t hand)于350C水浴震荡溶解，冷却后过谑,避光保存13) NAG(M=MEM, A=Alb

29、ijmi n , G=Gela t im)50ird 浓缩 MEM+ 2m 1 Hope s (pH 8.0)+5 0 Oul 22 %BS A (牛血清白蛋白)+ 2 ml 5%Ge J atine(明胶)需水浴溶化)+5 0 Oul lOaN 3 (叠氮幼)(有害物,注意保护性操作)配制好的MAG于妙C冰箱保存可用一周左右14) 5% EDTA5 g Tit r I plex III先用7 0TOml F1KH C无Hopes,无酚红，pH4 -5)溶解，用 NaOH调节pH为74,用同上MKHSdlCOml. 4。C冰笹保存可达4-8周。15) 05?&戊二醛(g I utaral d

30、e h y d e )20 Oul 25%戊二醛(有毒性)+ 1 0 0ml S oerens e n PBS (p H 7.8)十2. 5m I 40葡萄糖4吒冰箱保存16) 5%明胶(Gela tine)5 g明胶先用和ml蒸谨水于SBC溶解,加1 ml财用IN NOH调节pH至7. 4,用蒸谱 水配成1 OOtd,按2 M分装.4七冰箱保存17) IM / L So e r e nsen缓冲液. Scerense n PBS ( S o e r ensen phosp hate buffer )3. 4 g KH2P0a+27.7 g Na2HP04+500m 1 蒸谐水加磷酸二氢甲溶液

31、(d 1M / L)到磷酸氢二钠潜液至所需要的p H值(如pH人8,加约87ml)*P H 7. 4为配制Osmium和玻片覆希液准寡* P H7. 8为配制戊二醛唯备分装厂22C冰冻保存18) Hope s 缓沖液 1M/L23 S3 gHepes先用8 On 1蒸谱水溶解用1M/L NaOH调节pH至7. 4或8D,用蒸窮水配成WOml* Hepes pH74为配制NKH洛液准备，HWs pH80为配制M EM使用液唯备19) 免疫细胞片覆盖液(c over solut】on)8 0 ml甘油(G ly c er i n)+15ml S o e rarisen PBS 9 5%1 0 Du

32、 1 细胞悬液(1x13细胞)和适量的fluorescein- i so t h ioc y ana t e, FI T C, 録色丿p h ytorycerin, PE,红色连接的抗体孵化3 0分钟对照:不加抗体孵化后用2ml冷血n k 匸液洗3次离心3 00gx 1 0m i n间接方法:加免疫标记的抗鼠免疫球蛋白(包括对照)，殍化30分钟，用2泌冷Hank s液洗3 次高心 3 0 OgxL 0 min直接方法:对照：同型非特异单克隆抗体悬浮细胞荧光显徴镜下计数阳性细胞百分率注：巨噬细胞可以有自身免疫荧光尤其在吸烟着取标记免疫分析流式细胞仪(F J o w cyt o m e t ry)

33、BAL的正常细胞学检查结果健康非吸烟者健康吸烟者细胞总数x 1 067+323 +12巨噬细胞% 8096 土 3淋巴细胞W15W 7嗜中性细胞%W 3 BAL中淋巴细胞亚类正常范H健康非吸烟者健康吸烟者T 细胞(CD3+%63 8 363 - 8 3ThT细胞（C D4+）%40 -7020 - 50Ts-T细胞CD8+%2 D - 403 0 - 70CD4/CD81. 1 - 3. 50. 5 - 1. 5Nk细胞（CD 5 7+）%2-141-11HLA-DR+% 55IL2RCD 2 5+）% 6 6B细胞（CD20+）% 4 4朗罕细胞(CDL+)% 3 BAL的细胞分类异常与疾病

34、关系淋巴细胞增多嗜中性细胞增多嗜酸性细胞增多过敏性肺泡炎IPF嗜酸细胞肺炎结节病ARDSChurg-Str a u ss 综合 症BOOPWegn err s肉芽肿I PF彼肺胶原Itl管病AB PA结核石棉肺药物性肺泡炎HW染尘肺支气管哮喘病毒性肺炎支气管肺部感染药物性肺泡炎肺泡蛋白沉着症淋巴瘤癌性淋巴管炎石棉肺，尘肺 胶原血管病Cr o hn s 病原发性胆汁性肝硬变淋巴细胞t +中性粒细胞/酸性粒细胞t:空泡样巨噬细胞BO 0PBOOPIPF过敏性肺泡炎结节病纤维化胺械酮胶原病* 正常EAL分析結果可以除外下列疾病：活动性结节病，外源性过敏性肺泡炎，银肺，嗜酸细胞肺炎，肺泡蛋白沉着症，肺泡岀血综合症淋巴细胞正常一除外活动性结节病.过敏性肺泡炎 酸性粒细胞正常f除外嗜酸细胞性肺炎BAL中T4/T8比率与疾病关系T4/T8增高T4 / T8降低T4/T8正當结节病过敏性肺泡炎正常铁肺BOOF