解毒利尿颗粒水提工艺的正交实验法优选

1、文档收集于互联网，已重新整理排版.word版本可编借，有帮助欢迎下载支持.解毒利尿颗粒水提工艺的正交实验法优选作者：杜树山，张铮，沈圣民，张海鸣，曹杰，关铭【摘要】目的优选解毒利尿颗粒的最佳水提取工艺。方法以干膏 量、甘草酸提取量为评价指标，选择加水量、提取时间、提取次数为 考察因素，利用L9C34）正交实验确定解毒利尿颗粒的水提取工艺。结 果最佳提取工艺为加水10倍量，提取3次，2h/次。结论优选出的提 取工艺简单、可行，可作为该制剂合理开发的依据。【关键词】解毒利尿颗粒;提取工艺;正交实验解毒利尿颗粒由生甘草、白茅根、赤芍、紫苏叶、生姜、猪苓 等6味药材组成，具有清热解毒、利尿等功效。临床

2、上主要用于不明 原因的中毒。因木品具有减轻中毒症状的作用，可为临床诊断确定中 毒原因提供时间。根据处方中药材的主要有效成分的性质、处方的功 能主治、临床用药经验、预实验结果、工厂生产实际和参考有关文献 广3,本实验采用正交实验设计对方中甘草等药材的水煎煮工艺，进 行了考察，以甘草中甘草酸的含量和出膏量为指标，优选提取工艺。1仪器与试药1. 1仪器Watersl525高效液相色谱仪（配Waters2487紫外可 见检测器）;MeLLennium32 色谱工作站;METTER Toledo AG135 1/10 万 电子分析天平（瑞士 METTER公司）;KQ-250DB数控型超声波清洗器（昆 山

3、市超声仪器公司）；电热恒温水浴锅（北京市长风仪器仪表公 司）;98-l-B型电子调温电热套（天津市泰斯特仪器有限公 司）;101A-3E型电热鼓风干燥箱（上海实验仪器厂有限公司）。1. 2试药与试剂甘草酸彼对照品(中国药品生物制品检定所， 批号为：110731-200511);所用药材购于同仁堂药店，经鉴定4甘草 为豆科植物甘草Glycyrrhiza uralensis Fisch的干燥根，白茅根为 禾本科植物白茅Imperata cylindrica ,赤芍为毛罠科植物芍药 Paeonia Iact辻lota Pall.的T燥根，紫苏叶为唇形科植物紫苏 Perilla frutescens

4、(L. ) Britt.的干燥叶，生姜为姜科植物姜 Zingiber officinale Rose.的新鲜根茎,猪苓为多孔菌科真菌猪苓 Polyporus umbellatus (Pers. ) Fries的干燥根；甲醇为色谱纯,水为 纯净水，其他试剂均为分析纯。2方法与结果2. 1正交实验设计经过预试验，多方考察影响水煎煮的因素, 选择加水量、提取时间、提取次数为影响水煎煮的主因素，以甘草酸 含量及岀膏量为评价指标，用L9(34)正交表安排实验，因素水平表与 正交实验设计见表广2。2.2提取液的制备称取生甘草、口茅根、赤芍、紫苏叶、生 姜、猪苓共9份，加入水，按表2进行实验，得水提取液，分

5、别浓缩 并定容至100 ml,摇匀，即得。表1因素水平表2正交实验表2. 3甘草酸的含量测定4色谱条件:色谱柱为DiamonsilCIS (250 mmX4. 6 mm , 5 Um);流动相为甲醇-0. 2 mol L1醋酸钱水溶 液-冰醋酸(67 : 33 : 1);检测波长250 nm;柱温30 C;流速1.0 mlmin-1;理论板数按甘草酸峰计算应不低于2 000。对照品溶液的 制备：取甘草酸钱对照品适量，精密称定，加流动相制成每毫升含0. 2 mg（折合甘草酸为0. 1959 mg）的溶液。供试品溶液的制备：精密吸取 提取液10 ml,转移至100 ml量瓶内，加乙醇稀释至刻度，超

6、声处理 （功率：250 W,频率：40 kHz） 30 min,静置，取上清液，滤过，取续 滤液，即得。测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 H b注入液相色谱仪，测定，即得。2.4出膏量的测定精密吸取50 ml提取液并转移至己称重的 干燥蒸发皿中，水浴蒸至近干，置70C的烘箱进行减压干燥至恒重， 计算岀膏量。 2. 5数据分析对表2数据进行直观分析，以甘草酸 含量及出膏量为评价指标，均可得出影响水煎煮因素的主次顺序为C、 A、B,最佳提取工艺为C3A3B2o对二者的方差分析结果见表旷4,因 素A、C对岀膏量均有极显著影响，因素B对出膏量有显著影响，因素 C对甘草酸提取量有极显著影

7、响。根据以上结果，得出最佳提取工艺 为C3A3B2,即加水煎煮3次，10倍量，提取2 h。表3甘草酸方差分 析表4出膏量方差分析2.6验证实验与结果称取生甘草、白茅根、赤芍、紫苏叶、 生姜、猪苓等6味药共3份，按上述制备工艺进行验证，结果与正交 实验结果相符，说明木提取工艺稳定可行。结果见表5。3讨论3.1煎煮方法的确定方中生甘草、白茅根、赤芍、紫苏叶、 生姜、猪苓等药材在临床上以汤剂应用。预试验结果表明，采用水煎 煮法可使所含成分得到较完全提取，从而保证制剂的疗效。表5验证 实验结果3.2评价指标的选择甘草为木品方中的君药，甘草酸是甘草 的主要有效成分，具有抗炎、解毒、保肝和增强免疫等作用5,这与 木颗粒剂的功能主治一致;而浸膏得率是评价水提取效率的传统手段, 故评价指标确定为上述两项亦是合理可行的。3.3最佳工艺的确定根据以上结果，结合临床用药与生产实 际，确定木品药材的最佳提取工艺为：水煎煮3次，每次加水10倍量, 提取2 h/次。【参考文献】1 张娟，杨中林，李萍.甘草中甘草酸的制备工艺研究J 中成药，2007, 29(5)： 686.2 周斌，高文远，张铁军.甘草配方颗粒制备工艺和质量标 准研究J.中成药,2007, 29(9): 1405.3 王艳平，夏新华，王杰英.正交试验法优选紫蒲颗粒提取 工艺的研究J