最新NK细胞制备操作规程

1、1. 目的 为规范技术人员NK细胞操作，特制订本管理制度。 2. 范围 本规程适用于科贝细胞治疗。本规程适用于NK细胞制备的实验过程。 3. 职责 实验室技术人员负责本规程的实施。 4. 工作程序 4.1.抽取病人外周血60ml （红盖管1管,绿盖管6管九 4. 2.将红盖管里的血转入50ml离心管里，离心2000r, 20min（湘仪台式低速离心机L-550, 离心机升降速度均调为2）,取上层血淸，并加入3P-A-L （3P-A-L浓度10%）。 4.3. 将绿盖管中的血加入到悬浮液中（血：悬浮液二10:1）,轻轻混匀。 4.4. 将细胞分离液加入50ml离心管中,将4.4中的血沿着管壁缓慢

2、加入分离液中（血： 分离液=2： l）o 4.5. 将4. 4中的血放入离心机中离心2000r, 20min,离心结朿后将白膜层取岀，放于一个 新的50ml离心管中。 4.6. 向取出的白膜层中加入细胞洗液10ml,用吸管吹打数次，吹打匀后，放入离心机离心 1500r, 8min （离心机升降速度可调为8,离心结朿，弃上淸。依照上述步骤,加入 6ml 洗液，1500r 5min 再洗一次。 4. 7.用PBS将包被好的培养瓶洗涤两次备用。 4.8. 向离心好的细胞中加入细胞接种液，用电动助吸器吹打数次，吹打匀后，转入准备好 的培养瓶里（血:接种液二2:1）。再将4.2中处理过的血淸加入培养瓶中

3、（血淸浓度 10%）。 4.9. 将培养瓶置于37C, 5%二氧化碳培养箱培养。 4. 10.当细胞生长到第三天时，向培养瓶中加入NKB1和NKB2各1ml。 4. 11.配制培养基：每1000ml培养基中加入2-3ml修正液和2支白介素-2。 4. 12.当细胞生长到第四天时，向培养瓶中加入100ml4. 11中处理好的培养基。 4.13.以后每天观察，根据细胞悬液颜色添加培养基，每次按瓶中已有培养基等比例添加。 若一个培养瓶中培养物的量达到max线，则采取分瓶处理。 4. 14.当细胞生长到约第9-11天时，根据细胞的生长情况，转移到培养袋培养（气泡尽量排 空，以免影响细胞生长）。 4.1

4、5. 以后每天观察，根据细胞悬液颜色添加培养基，每次按袋中已有培养基等比例添加。 4.16. 约培养至第十五或十六天，进行计数，当细胞达到所需剂量时，即可离心收细胞待用， 同时对细胞进行质量鉴立。 4.17. 将完成好的细胞悬液封好，核对病人姓名、性别、年龄、医院和质量鉴泄结果等信息 无渓后，贴上标签，填好相应表格并签名后，送回进行回输。 5. 记录表格：NK细胞治疗操作流程记录表 信息计量学模拟试卷一 年级：专业：姓名：学号: 一.单项选择题 1-信息计量学的逻辑发展过程一般认为是（） A统计书目学-文献计量学-科学计量学-信息计 B统计书目学一科学计量学-文献计量学-信息计量学 C科学计量学-统计书目学-文献计量学-信息计量学 D文献计: 学-统计书目学f科学计量学f信息计量学 2. 科学文献激增的直接的主要原因是（） A信息技术的发展B图书馆增多C科学知识量急剧增长D人们对 知识的渴求 3. 一般来说，历史悠久的学科的文献要比新兴学科的半衰期（）；比 较稳定的学科的文献， 要比在内容上或技术上正在经历重大变化的学科的文献半衰期（）。 A长、长B短、短C长、短D短、长 4. 不属于信息计量学三个层次的结构的是（） A现象学层次B理论学层次C元学层次D方法学层次 5. 布拉德福定律在信息检索中的应用不包括以下哪个方面（