附子理中丸中乌头碱的检查

1、For personal use only in study and research; not forcommercial use莅实训十九 附子理中丸中乌头碱的检查虿一、实训目的莈1. 掌握中药制剂中乌头碱限量检查的一般操作步骤和技能。蚇2. 理解乌头碱限量检查的原理。螃二、检验依据蚂附子理中丸药品标准 中国药典 2005 年版（一部）正文部分 484页蒈【处方】附子（制） 100g 党参 200g 白术（炒） 150g 干姜 100g 甘 草 100g螄【检查】乌头碱限量 取本品水蜜丸适量，研碎，取25g,或取大蜜丸适量， 剪碎，取36g,加氨试液4ml，拌匀，放置2小时，加乙醚60ml

2、，振摇1小时， 放置24小时，滤过，滤液蒸干，残渣用无水乙醇溶解使成1ml，作为供试品溶液。取乌头碱对照品适量，精密称定，加无水乙醇制成每 1ml含1mg的溶液，作 为对照品溶液。照薄层色谱法试验，精密吸取供试品溶液12ul、对照品溶液5ul， 分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-乙酸乙酯-二乙胺（14:4:1 ）为展开剂，展 开，取出，晾干，喷以稀碘化铋钾试液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应位 置上出现的斑点应小于对照品的斑点，或不出现斑点。蒅三、检验原理蒁本品处方五味药中有附子，附子中含有多种生物碱，其中乌头碱型生物碱中 C14、C8 的羟基分别与乙酸、苯甲酸成双酯型（乌头碱型）生物碱存在

3、，如乌 头碱、美沙乌头碱等。这种双酯型生物碱亲酯性强，毒性大，因此附子需要经过 炮制加工降低其毒性。为保证用药安全， 中国药典采用薄层色谱法对乌头碱 进行限量检查。薈四、仪器与试剂膅硅胶G薄层板、展开槽、微升毛细管或微量注射器、分析天平、水浴锅、震荡 器、量瓶等。羃乌头碱对照品 （中国药品生物制品检定所） 、附子理中丸、 乙醚、无水乙醇、 苯、乙酸乙酯、二乙胺、氨试液、稀碘化铋钾试液等。芀五、实验步骤和内容蚈1.供试品溶液制备 取水蜜丸适量，研碎，取 25g,加氨试液4ml，拌匀， 放置2小时，加乙醚60ml，振摇1小时，放置24小时，滤过，滤液蒸干，残渣 用无水乙醇溶解使成1ml，作为供试品

4、溶液。薆2. 对照品溶液制备 取乌头碱对照品适量， 精密称定，加无水乙醇制成每 1ml 含1mg的溶液，作为对照品溶液。蚄3点样 精密吸取供试品溶液12ul、对照品溶液5ul，分别点于同一硅胶 G 薄层板上。芃4. 展开 在层析槽中放置展开剂苯 -乙酸乙酯 -二乙胺（ 14:4:1 ）适量，预饱 和2030分钟，放置已点样的薄层板，展开 815cm,取出，晾干螈5. 显色 向已晾干的薄层板上喷以稀碘化铋钾试液显色，对比供试品色谱与对照品色谱相应位置上出现的斑点大小。羆【操作要点】膂(1本品取样25g，要遵循“随机、均匀”的原则，应从整批药品中抽取一 定数量的样本，破碎、混合均匀后，再从中称取试

5、验所需数量的样品。肁( 2)供试品、乌头碱对照品的称取要用分析天平精密称定。袈(3)供试品溶液制备的过程中需要蒸干滤液，必须在通风橱中 水浴加热回流浓缩，回收乙醚，不能接触明火。莇( 4)供试品溶液与对照品溶液的制备时，要用适当容量的容量瓶定容。袄(5)需使用市售薄层G板，用前需要在110E，活化30分钟。螀( 6)使供试品与对照品的点样点大小一致或相近。羈(7)展开时，需要预饱和2030分钟，并在层析缸口涂凡士林以密闭，以克 服边缘效应。薄( 8) 显色剂喷洒时要均匀。节六、检验结论 蕿根据试验记录和结果，填写检验报告，对本品检查做出结论。羇七、实训思考羅1.制备供试品溶液时，样品中为什么先

6、加氨试液搅拌放置？肄2.在薄层展开前，在层析缸口涂凡士林的目的是什么？蚂3.通过比较供试品色谱与对照品色谱相应位置上出现的斑点大小的依据是什么？肇八、实训测试莆附子理中丸中乌头碱限量检查实训测试表（百分计）蒂测试莁指标腿测试内容及观测点螇分值膄评价等级蚁A膃B莇C芅D莃E肅1.0螀0.7薇0.5肆0.3薃0葿着装薇蒇2芅薂蚆蚄蚃芁检验肅写出检验依据的出处：肀3膀蒆袃肃膀螆依据蒅袇芈1.为什么要对药品中的乌头碱进行限量检查？薅肂荿9袂相关芀知识蚀2.本法采用哪种色谱方法？( A.HPLC B.TLC C.GC )莀莄3.写岀本法的检验原理。螄操作 步骤 及实 验先在以下括号内填写操作步骤的序号和

7、名称，然后进行实验。( )60( )( )( )( )( )( )( )结果描述2清场1填写检验报告10检品名称厂家检品规格批号送检单位检验项目检验方法检验结论：检验人：复核人：检验单位盖章年 月曰回答问题1. 制备供试品溶液为什么设置了加氨试液这步操作？2. 为什么要在展开剂中加入少量二乙胺？3. 通过比较供试品色谱与对照品色谱相应位置上出现的斑点大小的依据是什么？9讨论酌情 给 分以下无正文仅供个人用于学习、研究；不得用于商业用途to员bkogA.nrogeHKO TOpMenob3ygmflCH6yHeHuac egoB u HHuefigoHMucno 员 B3OBaTbCEb KOMMepqeckuxqe 员 ex.For personal use only in study and research; not for commercial use.Nur f u r den pers?nlichen f u r Studien, Forschung, zu kommerziellen Zwecken erwendet werden.Pour l e tude et la recherche uniqueme