食品中亚硝酸盐的测定

1、食品中亚硝酸盐的测定(分光光度法)上层脂 肪用滴 管吸除。结果保 留2位 有效数 字。一、实验目的1. 明确亚硝酸盐在食品中的作用以及限量标准。2. 掌握盐酸萘乙二胺法测定食品中亚硝酸盐的原理、操作步骤、注意事项二、实验原理样品经沉淀蛋白质，除去脂肪后，在弱酸条件下亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化后，再与盐酸萘乙二胺偶合形成紫红色的染料，最大吸收波长538nn下测吸光度值A,与标准系列比较定量。三、仪器1. 722分光光度计若干，提前20min打开预热2.组织绞碎机，菜刀，砧板1-2套3. 50mL烧杯2个/组500mL烧杯1个/组3L大烧杯2个4.电炉2个5.托盘天平1个/组6. 200mL容量

2、瓶1个500mL容量瓶1个/组7.恒温水浴锅1-2个8. 25mL具塞比色管11个/组9.滴管，漏斗，滤纸，吸小球，1个/组10.玻璃棒，温度计，标记笔，标签纸若干四、试剂(所用试剂，除另有规定外，均为分析纯试剂。)1.亚铁氰化钾溶液：称取106.0g亚铁氰化钾K4Fee(CN) 3HO，用水溶解后，稀释至1000mL分装，1瓶/大 组2 .乙酸锌溶液：称取 22.0g 乙酸锌Zn(CH3C00)2 2H20，加3mL冰乙酸溶于水，并稀 释至100mL分装，1瓶/大 组3、饱和硼砂溶液：称取 5.0g硼酸钠(NazBO 10H0)， 溶于100mL热水中，冷却后备用。分装，1瓶/大 组4、对氨

3、基苯磺酸溶液(4g/L):称取0.4 g对氨基苯磺 酸，溶于100mL2%的盐酸中，置棕色瓶中混匀，避光 保存。分装，1瓶/大 组5、盐酸萘乙二胺溶液(2g/L):称取0.2克盐酸萘乙分装，1瓶/大二胺，溶于100mL水中，避光保存。有致癌作用组6、亚硝酸钠标准溶液(0.2g/L ):精密称取0.1000g 于硅胶干燥器中干燥24h的亚硝酸钠，加水溶解移入500ml容量瓶中，并稀释至刻度。此溶液每ml相当于200俱亚硝酸钠。分装，1瓶/大 组7、亚硝酸钠标准使用液(yg /mL):临用前，吸取0.2 gL亚硝酸钠标准溶液，置于200mL容量瓶中，加水稀 释至刻度，此溶液每 mL相当于5yg亚硝

4、酸钠。分装，1瓶/大 组8.蒸馏水1瓶/组五、实验步骤1样品的处理：(1) 取样：准确称取5.0 g经绞碎、混匀的样品，置于50m烧杯中。(2) 沉淀蛋白质：加硼砂饱和溶液，搅拌均匀，以70C左右的水约300mL 将样品洗入500m容量瓶中，置沸水浴中加热15min,取出后冷却至室温。一面转动一面加入5m亚铁氰化钾溶液，摇匀，再加入5mL乙酸锌溶液，以沉淀蛋 白质(3) 过滤：加水定容，放置，除去上层脂肪，清液用滤纸过滤，弃去 初滤液30mL滤液备用。2标准曲线的绘制和样品的测定取10个 25ml具塞比色管，标号，按下列步骤操作：管号012345678 样标准溶液(ml)相当亚硝酸钠(卩g)对

5、氨基苯磺酸(ml)各管均加1ml (混匀，静置3-5min)盐酸萘乙二胺(ml)各管均加加水至刻度(25ml)，混匀，静置15min,以零管调节零点，于波长538nm处 测吸光度A,绘制标准曲线。同时做试剂空白。六、数据记录管号012345678样液试剂 空白A538七、数据处理按下式计算：A?X=x 1000?勁2?rx X 1000Vi式中：X试样中亚硝酸盐的含量，mg/kg ；Vi试样处理液总体积，mLV测定用样液体积，mL；m试样质量，g;A试样测定液中亚硝酸盐的质量，卩g；部分食品中亚硝酸盐的限量标准（以NaNO计）品名限量标准mg/kg食盐（精盐）、牛乳粉W2香肠（腊肠）香肚、酱腌菜、广式腊肉w 20鲜肉类、鲜鱼类、粮食W3肉制品、火腿肠、灌肠类w 30疏采w4其他肉类罐头、其他腌制罐头w 50婴儿配方乳粉、鲜蛋类W5西式蒸煮、烟熏火腿及罐头、西式火腿罐头w 70八、注意事项1、盐酸萘乙二胺有致癌作用2、显色后稳定性与室温有关，一般显色温度为1530C时，在2030min内比色 为好。3、 硼砂饱和液的作用：吸收亚硝酸盐的NO,使亚硝酸盐的总量不会因加热 而减少；蛋白质沉淀剂。4、亚铁氰化钾溶液和乙酸锌（可用硫酸锌代替）作用：蛋白质沉淀剂。原因： 亚铁