[毕业设计精品]茶多酚对心肺复苏大鼠生存时间和肾损伤的影响研究

1、英汉双解缩略词表缩略词英文全称中文全称tptea polyphenols茶多酚ofroxygen free radicals氧自由基iriischemia reperfusion injury缺血再灌注损伤sodsurfactant protein超氧化物歧化酶mdamalondialdehyde丙二醛ca cardiac arrest心跳骤停cprcardiopulmonary resuscitation心肺复苏roscrestoration of spontaneous circulation 自主循环茶多酚对心肺复苏大鼠生存时间和肾损伤的影响摘 要 目的：各种原因引起的心脏骤停（card

2、iac arrest, ca）可导致全身器官严重缺血缺氧，及时有效的心肺复苏（cardiopulmonary resuscitation, cpr）可能使部分患者恢复自主循环（return of spontaneous circulation, rosc），但与此同时也带来各器官组织的缺血再灌注损伤，严重影响复苏后生存时间和生存质量。如何降低复苏后的死亡率和病残率是目前医学界最为关注的热点之一。茶多酚（tea polyphenols，tp）具有很强的抗氧化作用，对局部缺血再灌注损伤动物心、脑、肾具有保护作用。心脏骤停与心肺复苏的过程同样可导致全脑缺血再灌注损伤，茶多酚是否能够通过其抗氧化作用改

3、善cpr预后?本文通过建立窒息性心脏骤停大鼠模型，对rosc后大鼠即刻应用tp，观察tp对血流动力学、生存时间及神经功能的影响，观察肾脏形态学改变，检测肾组织超氧化物歧化酶（superoxide dismutase, sod）活力、丙二醛（malondialdehyde，mda）含量的变化，评价tp对cpr的影响，为探索抗氧化剂用于改善cpr后器官功能的治疗提供实验依据。方法：选用健康sd大鼠，体重320-440 g，水合氯醛麻醉（3ml/kg，腹腔注射），夹闭气管插管诱导窒息性心脏骤停，8min后给予胸外心脏按压及机械通气。按压1min时给予肾上腺素（0.04mg/kg），rosc大鼠经静脉

4、即刻随机给予生理盐水（2ml/kg）或tp（10mg/kg），观察rosc后1h内收缩压、舒张压及平均动脉压的变化，rosc后大鼠的存活时间及复苏后24h、48h存活率，并进行神经功能评分。取存活到12h、24h、48h大鼠肾脏，常规切片，观察病理改变，肾组织匀浆检测sod活力、mda含量。结果：1.tp组与生理盐水组在rosc后1h收缩压、舒张压和平均压无显著性差异，tp组大鼠的生存时间明显长于生理盐水组（37.311.2h vs 24.314.1h, p0.05），tp组rosc后24h、48h生存率明显高于盐水组（p0. 01），且24、48 h神经功能评分显著高于生理盐水组（p0.05

5、）。2.形态学观察表明，tp能够减轻大鼠cpr后肾脏结构损伤。复苏后12h、24h、48h肾组织匀浆液sod活力、mda含量检测结果显示tp组和生理盐水组无显著性差异。结论：1.tp能改善窒息致心脏骤停大鼠心肺复苏预后，延长复苏后大鼠的生存时间，提高24h和48h生存率，同时改善神经功能。2.tp能减轻窒息致心脏骤停大鼠心肺复苏后肾脏结构损伤。关键词 茶多酚；窒息；心脏骤停；心肺复苏；肾保护the effect of tea polyphenols on survival time and renal injury after resuscitation in ratsabstract obj

6、ectives:cardiac arrest (ca) caused by a variety of reasons results in severe anoxia and ischemia in bodys organs. although timely and effective cardiopulmonary resuscitation (cpr) can bring return of spontaneous circulation (rosc) in some patients, ischemic reperfusion injury occurs in organs at sam

7、e time, in turn to impact badly on suvival time and suvival quality after resuscitation. it is one of the most hotspot in medicine at present how to decrease mortality and disability rate after resuscitation. tea polyphenols has strong antioxidant effect and can protect the heart, brain and kidney i

8、n local ischemia reperfusion. cpr and ca cause also ischemic reperfusion injury. if tp can improve cpr outcome via its antioxidant effect?this study evaluates the tp effect on cpr to provide experimental basis for antioxidant treatment on organ functional improvement after resuscitation. tp was used

9、 in an asphyxia rat model as soon as posc. hemodynamics, suvival time ane nerve function were monitored, renal morphologic alterations were observation, superoxide dismutase （sod）and malondialdehyde（mda）of renal tissues were tested.methods: spraguedawley rats, weighing 200-400 g were anesthetized by

10、 chloral hydrate（3ml/kg，intraperitoneal injection）. asphyxial cardiac arrest was induced by clamping the tracheal tubes. at the end of 8 min of asphyxiation, cpr was started with chest press and mechanical ventilation. epinephrine (0.04mg/kg) was injected at 1 min of compression. the animals were tr

11、eated randomly with either saline (2ml/kg) or tp (10mg/kg) following rosc. the changes of systolic pressure, diastolic pressure, mean arterial pressure were monitored after 1h of rosc. survival time, neurological deficit score (nds) and the survival rate were recorded after 12, 24 and 48h of rosc re

12、spectively. the renal conventional sections from 12h, 24h, 48h survival rats were doned to observe pathological changes. sod, mda of renal homogenate of these rats were assayed.results:1.there was no significant difference in systolic pressure, diastolic pressure, mean arterial pressure within 1h of

13、 post-resuscitation in the tp group and the saline group. the survival time of rats in tp group was significantly longer than that of in saline group (37.311.2h vs 24.314.1h, p 0.05), 24h and 48h survival rates in tp group after rosc and nds score were also significantly higher than that of saline g

14、roup (p 0.01, p 0.05).2. the morphologic observation indicted that tp alleviated renal structural injury in post-resuscitation rats.there not were significant difference in sod and mda of renal homogenate of 24h, 48h suvival rats between tp group and saline groupconclusion:1.tp can improve cpr outco

15、me in asphyxial ca rats, presenting the enlongation of survival time, the increase survival rate of 24h and 48h with the improvement of nerve function.2. tp can alleviate renal structural injury in asphyxial ca rats.key words tea polyphenols; asphyxia; cardiac arrest; cardiopulmonary resuscitation;

16、renal protection前 言心肺复苏（cardiopulmonary resuscitation, cpr）为呼吸终止及心跳停顿时，合并使用人工呼吸及心外按摩来进行急救的一种技术。各种原因引起的心脏骤停（cardiac arrest, ca）可导致全身器官组织严重缺血缺氧，及时有效的心肺复苏（cardiopulmonary resuscitation, cpr）可能使部分患者恢复自主循环（return of spontaneous circulation, rosc），但与此同时也带来各器官组织的缺血再灌注损伤，严重影响复苏后生存时间和生存质量，约四分之三rosc者死于住院期间（死因

17、包括心力衰竭、复发心脏骤停、缺血性脑病和感染）或有持久性神经系统后遗症，轻者智力障碍，重者成为植物状态，直接影响患者的生活质量及生命延续，给家庭和社会造成极大的精神伤害和沉重的经济负担。如何降低复苏后的死亡率和病残率是目前医学界最为关注的热点之一。cpr后缺血再灌注损伤病理机制复杂，已知过量氧自由基损害是其中的一个重要因素。如果在rosc后补充抗氧化物质，消除过多的氧自由基，改善氧自由基生成/抗氧化失衡状态，就能及早地阻断自由基损伤性级联反应，将产生rosc后器官保护作用，有利于延长cpr后动物生存时间，降低死亡率。茶多酚（tea polyphenols，tp）是从茶叶中提取的多酚类成分，在氧

18、化还原反应中可以贡献出数个电子，使其它物质被还原，因而产生较强的抗氧化作用，抗氧化作用远强于vitc、vite1,2，tp能够阻止过氧化过程中脂质过氧化自由基的产生，而生成活性较低的多酚自由基。tp的邻位二酚羟基具有较强的络合金属离子性能，能够络合游离铁而减轻自由基的级联反应3。tp还可通过络合细胞内钙而降低钙浓度，防止钙超载及其所带来的一系列继发性的病理损害4。此外，tp还能够激活细胞内抗氧化防御系统。虽然局部脑缺血再灌注损伤模型研究表明tp能够通过其抗氧化作用对神经损伤起保护作用5-9，但tp是否对cpr的生存时间和器官损伤产生影响仍未知。本研究建立窒息性ca大鼠模型，复苏成功后注射tp，

19、观察血流动力学、生存时间、神经功能、肾组织结构、肾氧化与抗氧化等指标，评价tp对cpr的影响，为探索抗氧化剂用于改善cpr后器官功能的治疗提供实验依据。1.材料与方法1.1 实验动物健康sd大鼠84只，雌雄不拘，体重200400g（由广西医科大学实验中心提供）。1.2 主要仪器与药品alc-v9动物呼吸机 上海奥尔科特生物科技有限公司bl-420f生物机能实验系统 成都泰盟科技有限公司小动物胸外按压器 广西医科大学 空气压缩机 上海捷德机械电器有限公司高速冷冻离心机：2k-16 德国 sigma 颗粒制冰机：lqp-b-4 上海安亭科学仪器厂电子天平：bs2245 北京赛多利斯仪器系统有限公司

20、电热恒温干燥箱：dh 500-s-ii 上海跃进医疗器械厂三用电热恒温水箱：shhwz1cr600 北京长源实验一起厂生产分光光度器:721 上海第三分析仪器厂：高压灭菌消毒锅：ss-325 日本 tomy奥林巴斯生物显微镜：cx41 日本olympus10%水合氯醛注射液 广西医科大学第一附属医院5%葡萄糖氯化钠注射液 武汉滨湖双鹤药业有限责任公司0.9%氯化钠注射液 武汉滨湖双鹤药业有限责任公司肝素钠注射液 上海第一生化药业有限公司盐酸肾上腺素注射液 广州白云山明兴制药有限公司茶多酚干粉 金绿源（中国）生物科技有限公司mda检测试剂盒:201010201 南京建成生物工程所sod检测试剂盒

21、:201010201 南京建成生物工程所考马室亮兰蛋白检测试剂盒:201010201 南京建成生物工程所1. 3实验方法采用腹腔注射10%水合氯醛（3ml/kg）进行大鼠麻醉，经口把14g插管插入气管以备接呼吸机用。行左侧股动脉插管以测动脉压，同侧股静脉插管以便用药，经四肢连线常规记录标准ii导联心电图，用bl - 420f生物机能实验系统连续同步记录动脉血压和心电图。采用气管夹闭法建立窒息性ca模型。ca定义为动脉搏动波消失且伴有平均动脉压20mmhg，持续5min以上26；cpr5min内未能恢复rosc为复苏失败，退出实验（n=4）。复苏5min内恢复rosc的大鼠被分成两组，生理盐水组

22、（股静脉注射生理盐水，2ml/kg, n=40），tp组（股静脉注射0.05%tp溶液, 10mg/kg, n=40），连续60min记录动脉血压和心电图变化。60min后拔除动静脉导管并缝合伤口。待大鼠出现自主呼吸40次/min，停用呼吸机1min后血压、心率和呼吸状况稳定或持续好转时拔除气管插管，撤离呼吸机。将大鼠放入笼中，观察48h内存活时间（自主循环恢复到自主呼吸消失），24h、48h的存活率，并在24h、48h进行神经功能评分。参照jia等28 的神经功能评分方法，从意识、基本反射、运动、感觉、行为学等方面对存活大鼠在rosc后24h、48h进行神经功能评分，标准如下：神经功能评分系

23、统a 一般行为缺陷总分：19分意识，知觉正常10；昏迷5；无反应0； 觉醒 自动睁眼3；刺激睁眼1；无睁眼0； 呼吸 正常6；异常（过缓或过快）3；无呼吸0；b脑干功能总分：21分 嗅觉（对食物的反应）存在3；不存在0 视觉（光刺激的头部运动）存在3；不存在0 瞳孔对光反应存在3；不存在0 角膜反应存在3；不存在0 惊跳反应存在3；不存在0 胡须刺激反应存在3；不存在0 吞咽：吞咽液体或固体存在3；不存在0c运动评估：强度（总分：6分，左右各3分）正常3；僵硬或软弱1；无运动或瘫痪0；（左右两边单独评分，）d感觉评估：疼痛刺激反应（总分6分，左右各3分）反应灵敏3；反应弱或异常（延展或屈曲姿势

24、）1；无反应0；（左右两边单独评分）e自主行为待添加的隐藏文字内容1总分：6分； 步态协调正常3分；异常1；不存在0； 平衡木行走正常3分；异常1；不存在0；f反射 总分：12分； 正位反射，直反射正常3分；异常1；不存在0； 拒绝趋地反射正常3分；异常1；不存在0； 视觉配合正常3分；异常1；不存在0； 转向试验正常3分；异常1；不存在0；g癫痫发作（痉挛性或非痉挛性）：（总分10；）无癫痫10；部分癫痫5；完全癫痫；注：平衡木试验：在一离地面0.5m,宽2cm长1m的木棍上行走。走完1m者为正常；未能走完1m,并停留在木棍上或者跌落者为异常；放在木棍上立即跌落者为不存在。正位反射：即反正反

25、射，强迫鼠背接触地面，大鼠能自己翻身。转向试验：在一长0.5m的胡同里行走，走到离尽头15cm时自动转向。视觉配合：鼠尾被吊起，大鼠能够通过视觉调整并适应自身的位置。拒绝趋地反射：背靠一倾斜45度斜面的大鼠能纠正过来并向上移动。评分范围为0-80分，0分为死亡，80分为完全正常，评分由两人分别测定后取平均分值。分别取rosc后存活到12h、24h、48h时间点的大鼠肾脏，置于4%多聚甲醛中再固定、脱水、石蜡包埋、常规切片（厚度为4 um），在光镜下观察形态变化。另取肾组织，匀浆，按试剂盒说明操作，采用分光光度计测定匀浆液超氧化物歧化酶（sod）活力和丙二醛（mda）含量。1.4统计学处理 采用

26、spss13.0软件进行统计分析，计量资料用均数标准差(s)表示，比较用t检验，计数资料用2检验或秩和检验，p0.05为差异有显著的统计学意义。2. 结果2. 1窒息前两组大鼠基础参数比较 窒息前两组大鼠的体重、心率、血压、体温参数比较无明显差异，见表1。表1 两组大鼠基础参数比较( s)组 别茶多酚组（n=40）盐水组（n=40）体重（g）330.189.6331.5.695.9心率（次/分）418.425.6426.831.2收缩压（mmhg）136.124.1134.821.9舒张压（mmhg）103.718.894.420.0平均动脉压（mmhg）118.020.5111.020.1体

27、温（。c）35.81.036.30.92.2 rosc后血压的比较2.2.1 rosc后，两组大鼠的收缩压比较无显著性差异，见图1。图1 自主循环恢复60分钟后两组大鼠收缩压比较（p0.05）（bl=baseline,基础状态，pr=post resuscitation, 复苏后）2.2.2 rosc后，两组大鼠的舒张压比较无显著性差异，见图2。图2自主循环恢复60分钟后两组大鼠舒张压比较（p0.05）（bl=baseline,基础状态；pr=post resuscitation, 复苏后）2.2.3 rosc后，两组大鼠的平均压比较无显著性差异，见图3。图3 自主循环恢复60分钟后两组大鼠平

28、均动脉压比较（p0.05） （bl=baseline,基础状态；pr=post resuscitation, 复苏后）2.3 rosc时间和存活时间比较 两组大鼠rosc时间无显著性差异。但tp组大鼠的存活时间明显长于生理盐水组（p0.05），见表2。表2 自主循环恢复时间和存活时间的比较(s)组 别自主循环恢复 (s)存活时间(h)tp组（n=40）99.636.437.311.2*生理盐水组（n=40）116.349.524.314.1 与盐水组比较，*，p0.05 2.4不同时间点存活率比较rosc后，tp组大鼠24h、48h 存活率明显高于盐水组(p0.01)，见表3。表3 两组大鼠不

29、同时间点存活率比较组 别24h48htp组（n=40）85.0%*（n=34） 40.0%*（n=16）生理盐水组(n=40)假复苏组(n=5)52.5%（n=21）100%(n=5)15.0%（n=6）100%(n=5) 与盐水组比较，*，p0.012.5神经功能评分比较 tp组大鼠24h、48h 神经功能评分明显高于生理盐水组（p0.05），见表4。表4 两组大鼠神经功能评分比较m(p25，p75)组 别24h评分48h评分tp组57(47,62) * 0(0,68) *生理盐水组假复苏组35(0,54)800(0,0)80 与盐水组比较， *，p0.052.6肾组织形态学观察2.6.1肉

30、眼观察（1）假复苏组：外观无异常，表面光滑、饱满，质软，弹性好，呈暗红色。（2）tp组：表面光滑、饱满，质稍软，弹性较好，呈暗红色；（3）生理盐水组：肿胀，呈暗红色，部分可见明显散在瘀斑。3.6.2 光镜观察假复苏组肾小球结构完好，肾小管上皮细胞大多无明显肿胀，亦无变性、坏死，间质改变不明显(见附图1)。生理盐水组光镜可见肾小球萎缩，肾小管上皮细胞变性坏死、脱落，肾间质水肿(见附图2)。tp组以肾小管肿胀为主，上皮细胞坏死、脱落较少，肾小球也有一定程度的萎缩(见附图1)。2.7肾组织sod、mda测定表5 三组大鼠肾脏sod活性、mda值比较指标组别茶多酚组盐水组假复苏组mda(nmol/ml

31、)12h1.8020.38 1.840.361.460.31 24h1.7120.241.680.351.560.2848h2.010.281.540.141.510.46sod(u/ml)12h25.366.2728.116.8326.066.8824h27.256.4228.844.5628.676.7248h23.946.6125.654.8128.066.163.讨论ca和cpr后机体重要器官心脏和大脑在结构和功能上遭受的损伤是由两个病理阶段造成的。第一阶段是在ca期间，全身血液循环停止，各器官严重缺血缺氧，启动了一系列病理变化过程：缺血缺氧后，组织葡萄糖、atp快速耗竭，糖酵解产物生

32、成和脂肪酸类物质堆积使细胞内酸中毒；能量耗竭后，离子泵失活，细胞内钠滞留，膜内电位去极化，na/ca交换异常或膜阳离子通道开放，钙进入细胞增多和胞内钙库摄、贮功能阻碍，使胞浆钙大量增加；胞内钙超载又引起线粒体损伤，而线粒体损伤继而引起氧自由基生成。神经细胞钙超载还可促进兴奋性氨基酸大量释放，产生毒性反应10。第二阶段发生在cpr停止和rosc后，源于缺血再灌注损伤。多种损害因素，如氧自由基、钙超载、炎症因子、血液高凝性、血栓形成与微循环障碍等（神经损害还涉及到兴奋性氨基酸的毒性作用）导致心肺复苏成功者在心脏方面发生心肌顿抑、心脏收缩和舒张功能减退；在中枢神经方面发生坏死、凋亡，从而导致早期复苏

33、成功者最终死亡或持久性神经系统后遗症。氧自由基，如超氧化物、羟氧自由基是引起ca/cpr心、脑首次和二次损伤的主要因素之一。心跳停博患者经抢救，恢复自主循环后，虽然心脑供血、供氧有所恢复，但线粒体正常功能尚未恢复，氧供应水平超过了线粒体能够利用的水平，以至氧自由基通过多个途径爆发式生成：（1）缺血使线粒体dna受损，呼吸链复合物电子传递受破坏，黄素腺嘌呤二核苷酸依赖性复合物途径被过度利用，次黄嘌呤转化为黄嘌呤，黄嘌呤分解为尿素反应中都伴随超氧阴离子（o2-）释放。（2）细胞钙内流增加，触发花生四烯酸代谢，花生四烯酸转化为pgh2中释放o2-。（3）神经型一氧化氮合酶激活，使过亚硝酸盐（onoo

34、-）产生。（4）神经系统小胶质细胞、血液白细胞激活也可产生氧自由基。另一方面，内源性抗氧化物质大量消耗，使自由基生成/清除严重失衡，引发自由基损伤性级联反应，表现为：（1）使膜脂质过氧化，细胞结构、膜离子转运和屏障功能被破坏。（2）诱导dna、rna、多糖和氨基酸等大分子物质交联变性或断裂，继而引起细胞死亡和（或）凋亡。（3）激活白细胞和血管内皮细胞的烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸盐氧化酶，引起一系列血管性病理反应：白三烯和血小板激活因子生成，内皮粘附因子（p-选择素、细胞间粘附分子-1）表达增多，抗粘附因子失活，促进微血栓形成，微循环障碍11。因此，抗氧化、阻断氧自由基级联反应是cpr治疗的一条思

35、路。tp是茶叶中多羟基酚类化合物的总称，主要成分为儿茶素类、黄酮类、黄酮醇类、花青素类、酚酸、缩酚酸类及聚合酚类等, 其中儿茶素类约占总量的65% 80%。儿茶素类主要包括表儿茶素 ( ec) 、表没食子儿茶素( egc) 、表儿茶素没食子酸酯( ecg)和表没食子儿茶素没食子酸酯( egcg) 4 种物质, 其中egcg约占儿茶素的50 %左右12。tp能够通过多种途径产生抗氧化作用13：（1）直接清除氧自由基，tp分子中带有多个活性羟基（oh），易氧化成醌类而提供质子，有效地清除超氧阴离子( o- 2 ) 、羟自由基(：oh ) 、单线态氧( 1o2 ) 及过氧化氢( h2o2 )及中间产

36、物脂过氧自由基和烷氧自由基而终止链式反应。（2）螯合金属离子，在中性或酸性条件下, tp的邻位二酚羟基对过渡态金属离子有一定的络合作用, 从而阻止金属离子对活性氧等自由基的生成。（3）激活细胞内抗氧化防御系统。我们在rosc后即刻静脉注射tp，与生理盐水组比较，tp对复苏后大鼠动脉血压影响不大，但能够显著地延长复苏后大鼠生存时间和提高24h、48h生存率，并且能够提高生存大鼠的神经功能。本研究结果表明了tp对cpr的抗氧化治疗效果，提示tp通过清除cpr后过量生成的氧自由基和/或阻断氧自由基级联反应及增强机体抗氧化系统功能多方面的作用，减轻cpr后机体器官的缺血再灌注损伤，有效地提高cpr救治

37、效果。这一结果也支持了其他cpr后抗氧化研究所提示的意义：xu y等14发现转基因过氧化物岐化酶高表达大鼠ca/cpr后脑血流量恢复到正常水平的时间短于野生大鼠，而且生存状态也优于野生大鼠。cerchiari el等15对窒息诱发ca的实验狗实施cpr时，静脉注射过氧化物歧化酶配合治疗，能够减小复苏后脑血流量的波动和提高肢体感觉唤起能力。dezfulian c等16观察到硝酸盐能够调节再灌注早期线粒体活性氧的产生，阻滞急性心功能衰竭和减轻存活者神经损伤程度，提高ca小鼠cpr后存活率。比较吸入不同含氧量气体对ca/cpr后神经损伤的影响的实验也表明了氧化与抗氧化的相互关系：高氧组（fio2 =

38、 1.0）狗复苏后12和24h小时的神经损伤明显大于常氧组（fio2 = 0.21）和高氧+抗氧化剂组，提示抗氧化剂在一定程度上可以减轻高氧造成的神经损害17。甲磺酸酯是一种膜脂质过氧化抑制剂，能够减轻实验动物的缺血再灌注损伤，促进器官功能、包括神经功能的恢复18。对电刺激诱发室颤致ca的狗模型，行常温、常规cpr，rosc后静脉给予脂质过氧化抑制剂（氨基类固醇u74006f），与柠檬酸对照组比较，显示复苏后24h存活率提高，平均生存时间延长，复苏后1，2，24h呈现更好的神经功能指标，复苏后12h更低的血浆脂肪酸过氧化物浓度，复苏后2，3，6h更高的血浆维生素e浓度19。研究tp对不同器官c

39、pr后缺血再灌注损伤的影响是探明其提高生存效果机制的重要工作，tp对心脏、神经系统的保护作用由课题组其他成员进行，本文从显微结构和sod、mda方面探讨了tp对cpr后肾脏的保护作用。实验结果表明，tp对crp大鼠肾脏结构具有保护作用，主要表现为减轻肾小管上皮细胞坏死、脱落，减轻间质水肿。此作用有助于机体重要器官心脏和大脑的恢复，提高cpr大鼠的生存时间和24h、48h的生存率。虽然肾组织sod活性、mda含量在tp组、假复苏组和生理盐水组之间没有明显差异，但不能否定tp抵抗cpr后肾脏结构的病理改变与其抗氧化活性有关。在缺血再灌注损伤病理作用中，氧自由基的损害是多方面的，除了削弱体内抗氧化系

40、统功能（sod是其中的一个还原酶）、氧化不饱和脂肪酸（mda是其中的一个氧化产物）外，还通过其它途径产生损害作用。氧自由基使内皮细胞和黏膜细胞通透性增加，炎性细胞渗出、浸润；激活中性粒细胞产生一系列毒性因子, 使组织损伤；直接损伤肾小球毛细血管内皮细胞,使肾小球系膜细胞和肾小管上皮细胞变性、坏死20；通过细胞信号转导通路引发细胞凋亡21。因此，要探明tp对crp大鼠肾脏结构保护作用的机制，还有大量的工作需要去作。动物实验呈现了抗氧化剂对cpr后心、脑的保护作用的治疗价值，但却未得到临床应用的肯定，主要原因：一是动物实验研究用的抗氧化剂多是化学品而非临床用药，故无临床报道；二是抗氧化剂治疗的时间

41、窗短暂。大量氧自由基于ca和rosc后瞬间产生和瞬间发生损害作用，抗氧化剂须在cpr期间或rosc后及时使用才会有明显效应，而临床实施cpr时不可能作实验性观察，一些抗氧化剂对cpr后心、脑的保护作用观察也是延迟性，故疗效不确定。因此，从现用的疾病防治品中寻找能够改善复苏预后的有效抗氧化物应更具有实际应用价值。tp能够改善常规cpr动物的救治效果，取决于其高效的抗氧化活性、较高的安全性（为天然物质）、给药的及时性（我们在rosc后即刻使用）。我们的工作丰富了cpr研究内容，为抗氧化剂应用于cpr提供了实验研究依据。 参考文献1方芳, 崔志清, 韩永晶 茶儿茶素抗大鼠脑缺血再灌注损伤与对脑细胞内

42、ca2的作用，中国药学杂志，2003，38(12): 917-919.2wei ih, wu yc, wen cy,ect. green tea polyphenol (-)-epigallocatechin gallate attenuates the neuronal nadph-d/nnos expression in the nodose ganglion of acute hypoxic rats, brain res, 2004, 999(1):73-80.3zhou x, fan gc, ren x,ect. overexpression of histidine-rich ca

43、-binding protein protects against ischemia/reperfusion-induced cardiac injury, cardiovascular research, 2007, 75(3): 4874mccord jm. oxygen-derived free radicals in postischemic tissue injury,. n engl j med, 1985, 312(3): 159-163.5feng y,leblanc mh,leblanc eb,ect desmethyl tirilazad improves neurolog

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