ATN300型全自动定氮仪操作手册

1、文档来源为：从网络收集整理.word版本可编辑.欢迎下载支持3文档收集于互联网，如有不妥请联系删除ATN-300型全自动定氮仪（蛋白质测定仪）操作说明手册一、概述蛋白质的测定方法，目前仍以1883年凯达尔氏（Kiedahl）发明的定氮法为基础，它根据各种蛋白质都具有固定比数的氮这一事实，通过对氮的测定而推算出蛋白质含量，此法所得的含氮量除了确定属于蛋白质组成成分的氮以外，还包括非蛋白质组成的其他有机及无机态氮，所以换算所得的蛋白质含量称作为粗蛋白含量，一般蛋白质中的含量为18%，换算后即每6.25克蛋白质中含有1克氮，因此6.25成为换算系数 K，但是不同的农产品及其制品 的实际含氮量有区别，

2、所以不同农产品必须采用不同的换算系数，如花生、大豆、蚕豆、大 麦、小麦、燕麦、黑麦等含氮为17.6%，求得K=5.7，养麦、葵花籽、亚麻籽、大麻籽、棉花籽、蓖麻籽等换算系数则为K=5.50,玉米、菜籽为6.00，水稻为5.95，上述以外的其他农产品的换算系数均适用6.25。尽管如此，目前世界上还没有直接分离测定含蛋白质的可行方法。因此，迄今为止在国内外凯氏定氮法仍然是测定蛋白质含量的经典方法。所得结果准确、稳定。我公司研制生产的 ATN-300型全自动定氮仪（蛋白质测定仪），是引进消化吸收国内外 检测新技术，结合我国国情，应用凯氏定氮法原理， 采用化学与物理学相结合完成的成套蛋 白质含量快速测

3、定装置。为粮食、食品、饲料、农业、商检等检测部门提供了理想的检测设 备。二、工作原理ATN-300型全自动定氮仪检测原理为：整套装置，由电加热消化器、全自动蒸馏器两部分组成。 要提高蛋白质含量测定的检测 间馏是要加速样品消速度，其关样键加热炉，增大了消化管受热面，使消化管连同管内所注入的10ml H2SO4及试样置入消化管插入井式炉内加热取得更佳的热效应，在消化前置入硒片作为催化剂进一步加速消化煮解，化煮解的时间ATN-30全自动定氮仪化装置采用井式电大大缩短消化时间。消化管内溢出的SO2等有害气体，通过消化管上的排污管经抽吸泵由水 带入下水道，有效的抑制有害气体的外逸，由省略了实验室中安装毒

4、气通风橱，试样经40分钟左右消化煮解，即可完全消化。消化的过程主要反应如下:R C H NH2 COOH + H 2SO4 宀 CO2 + SO2 + NH 3 + H2O2NH3 + H2SO4 t (NH 4)2SO4蒸馏与吸收过程的主要反应如下：（NH4）2SO4 + 2NaOH t Na2SO4 + 2NH 3 + 2H2ONH3 + 4H3BO3 t NH4HB3O7 + 5H2O然后经滴定，计算蛋白质含量，滴定的过程是盐酸和硼酸氢铵反映的过程。NH4HB3O7 + HCl + 5H 2O t NH4CI + 4 H 3BO3三、技术参数1. 测定品种：粮食、食品、饲料、酿造、土壤、

5、制糖、乳制品、药物等物质2. 测定样品量：固体v 5g/个，液体v 15ml/个3. 测定范围：含氮量 0.1200mg （0.02%95%）4. 测定数量：消化：一次同时消化个数按炉孔数定；单个蒸馏5. 测定时间：消化每批 45min ;蒸馏每个6min6. 测定重现性：平行试验结果符合GB/T 6423-947. 电源：220V, 50Hz四、使用说明1 其他仪器和用具11 分析天平：感量 0.0001g1 2 实验室用粉碎机或研钵1 3 酸式滴定管： 25ml 或 10ml14 锥形瓶：容积 250ml1 5 分样筛：孔径 0.45mm（40 目 ）2试剂2. 1盐酸（HCI）:分析纯（

6、GB622） 0.05mol/L标准液，（4.2ml盐酸，注入1000ml蒸馏水） 碳酸钠法标定盐酸。2. 2氢氧化钠（NaOH）:化学纯或工业纯（GB629）、40g溶于蒸馏水中溶成 100ml，配成 40%水溶液 （m/v）。2. 3硼酸（H3BO3）:分析纯（GB628）2g，溶于蒸馏水中配成 100ml2%水溶液（m/v）.2. 4混合指示剂：甲基红（G5H15N3O2）（HG3-958）溶于乙醇配成0.1%乙醇溶液，溴甲酚绿 （HG3-1220）溶于乙醇配成 0.5%乙醇溶液，二种溶液等体积混合，阴凉处保存（保存期三个月以内 ）。2. 5 硫酸铜（CuSO4 5H2O）分析纯（GB6

7、55）10g ;硫酸钾（K2SO4） （HG3-920）分析纯 150g, 在研钵中研磨，仔细混匀后过40 目筛（加速剂 ）。2. 6浓硫酸（H2SO4）化学纯（GB625）（含量98%、无氮）。3 操作方法31 样品消化称取经粉碎通过40-60目/寸试样0.5-1g（视含量而定）无损的置入已洗涤烘干的试管中加 催化剂 5g 左右和 10ml 左右硫酸。将消化管分别放入消化架各个孔内， 然后置于消化炉上， 开启抽气三通上连接的自来水 龙头， 使抽气三通处于吸气状态。接通电源， 在加热初始阶段需注意观测， 防止试样因急沸 而飞溅。 （初化时，选用电压型控温消化炉起初控制在150V 左右， 1 5

8、分钟左右后可满电压工作;选用数显型消化炉起初控制在 200 度左右， 20 分钟左右后再设定所需温度。 ） 消化结束后（消化液呈澄清透明状） ，将消化管架移至冷却架冷却至 40-50 度左右。然 后进行下一步的蒸馏。32 蒸馏1 、 用配套橡胶管根据结构图和仪器侧面标签提示连好管路。2、（各参数数值设定）必须按住启动键打开侧面电源开关，按启动键，测定酸泵、水 泵、碱泵的流量参数，按下一项键，在右边托盘上接收瓶，接着按加酸按键，液晶 屏上显示 4 秒左右时，再按此键就关闭了酸泵，此时取下接收瓶倒掉液体（主要是 防止管路中空气导致加液不准） ，接着重复上面加液工作，停止后，取下接收瓶用 量筒量出数

9、值，计算出每秒加酸的量，在自动加液时只要输入时间就可知道加了多 少液体量（根据实验需要量设定） ，加碱、加蒸馏水在左边放上消化管，加量及计 算的方法同上。液晶屏提示:设定加酸时间（毫秒为单位） ，根据实验需要量而设 定好，加碱、加蒸馏水方法同上（秒为单位） 。（一般加碱量是消化时浓硫酸用量的5倍以上，蒸馏水是15ml，硼酸50ml）,按下一项键同时按住启动键恢复正常画面 （各泵流量已知） ，此过程只要操作一次就可以，以后都不用再操作此过程。3、正常工作之一（设定过程）画面液晶屏提示，有 1 、 2、 3、 4，四个存储编号（代表可存储 4 个操作程序） 选好存储样品编号，液晶屏提示检查、设定用

10、下一项键（上一项键）可选择所需程序如选设定可设定各个参数（注意：每次开机只能设定一个存储程序编号参数）A、 根据提示设定开启电磁阀的时间值，请用上升或下降和下一项键和（上一项键）调（出厂时设定 48秒以上，请不要小于 40秒以免烧保险丝），接着根据提示设 定蒸汽稳定的时间数值，方法同上（出厂时设定60秒以上，请不要小于 50秒以免烧保险丝）；根据提示设定各个泵参数（泵流量前面已经测算过），根据提示设定报警定时器时间方法同上，（出厂时设定420秒）。B、如选检查可以检查设定参数，再按下一项键，进入正常画面，按启动键，开始工作，直到显示请选择工作模式画面时。液晶屏显示自动还是手动在选用自动工作模式

11、时（手动模式同样），按一下启动按键，再打开自来水龙头，这时夹紧侧面排水夹子，下方有机玻璃窗口里玻璃瓶内有水进入即可，过一段时 间后，下方有机玻璃瓶窗口里玻璃瓶有水进入，液晶屏提示电磁阀关闭，同时时 间减少显示为0，显示电磁阀开，液晶屏显示蒸汽稳定的时间数，同时时间减少 显示到0,并发出蜂鸣声，显示蒸汽稳定。这时关闭右侧蒸汽开关，提起左侧红 色手柄把消化管固定在左边的托架上，在右边托盘放上250ml的接收瓶，（手动模式时，根据顺序按各个按键加入各种液体后）再按启动按键，按顺序自动加入 各种液体（按照程序设定值），完成好后，打开右侧蒸汽开关，再按启动按键， 液晶屏显示报警定时器时间，数值减为0时发

12、出蜂鸣声。可观察接收液数量是否达到（一般接收瓶内液体要达到150ml以上），接着移下接收瓶，这时关闭右侧蒸汽开关，取下样品待滴定用。第二个样品同上方法。4、关机关闭电源，关水龙头，打开侧面排水夹子，关闭右侧蒸汽开关，把连碱泵的胶管放 入蒸馏水容器内，前面放入消化管，等排完水。关一次开关，再按住启动键打开侧 面电源开关用手动模式按加碱键抽蒸馏水清洗碱泵，酸泵同样清洗，关电结束。3. 3滴定用标定后的盐酸溶液进行滴定接收瓶内的溶液，滴定溶液由绿色变为淡紫色为终点，记下消耗盐酸溶液的毫升数，按下式计算蛋白含量：F亠人曰(V2-V1) X C X 0.014X K蛋白含量(%)=-式中：WV-滴定试样

13、时消耗酸标准溶液的体积（ml）Vi滴定空白时消耗酸标准溶液的体积（ml）c标准酸溶液的摩尔浓度0.014氮的毫克当量数K氮换算成粗蛋白质的系数W 试样重量 （g）（空白测定：用0.1克糖代替样品或不加样品做空白测定）平行测定的结果用算术平均值表示，保留小数后二位。3. 4换算系数结果报告中必须注明氮换算成粗蛋白质的系数，换算系数见下表。样品名称换算系数数据来源小麦5.70GB2905大麦5.70GB2905酿酒大麦6.25TOCT10846文档来源为：从网络收集整理.word版本可编辑.欢迎下载支持面粉5.70GB5009.5面包5.70AOAC14.103大豆6.25GB29055.71GB

14、5009.5玉米6.25食品常用数据手册6.24GB5009.5饲料6.25GB6432肉制品6.25GB5009.5孚L制品6.38GB5009.5牛奶6.38ACAC16.036芝麻5.30GB5009.5油菜5.53油菜籽综合利用3. 5注意事项1.消化时若有气体外溢，加大抽气三通连接的自来头的压力。消化密圭寸圈每次试验结 束后清洗一遍延长使用寿命。2每天工作完，把 NaOH溶液外接的皮管移入蒸馏水瓶内，前面套好消化管抽洗几次， 防止碱液残留在碱泵内而影响使用寿命，也可防止单向阀粘连，待下次使用时，在蒸馏 样品前需先排出lOOmlNaOH，以防稀释NaOH，造成第一个样品加入的碱液浓度不够。3 每次试样蒸馏结束，必须迅速取下消化管，防止消化管液体倒吸至蒸发炉内腐蚀电 热管