妇产科学专业毕业论文[精品论文]同型半胱氨酸所致大鼠仔鼠先天性心脏病与PAX-8基因表达的研究

1、妇产科学专业毕业论文 精品论文 同型半胱氨酸所致大鼠仔鼠先天性心脏病与pax-8基因表达的研究关键词：先天性心脏病 同型半胱氨酸 pax-8基因 基因表达 动物模型摘要：目的：通过同型半胱氨酸（homocysteine，hcy）干预孕鼠，建立大鼠仔鼠先天性心脏畸形模型，探讨hcy与先天性心脏病（congenital heart defect，chd）pax-8基因表达的关系及叶酸（folic acid，fa）、vitb12对hcy的干预作用，从心脏发育的分子学角度探讨chd发生的病因。 方法：40只s-d孕鼠随机分为四组：高剂量hcy建模组（a组）、低剂量hcy建模组（b组）、高剂量hcy+（

2、fa+vitb12）干预组（c组）及对照组（d组），每组各10只孕鼠。大鼠自妊娠第7天开始腹腔内注射不同剂量的hcy：a组2 hcy2mg/10g/d、b组1 hcy1mg/10g/d、c组2 hcy2mg/10g/d、d组注射生理盐水0.1ml/10g/d，c组自确定妊娠起，按fa0.05mg/10g/d+vitb121mg/10g/d给药，至孕鼠自然分娩时停药。每日观察孕鼠，待其自然分娩当日，体视显微镜下解剖仔鼠，观察仔鼠心脏畸形情况。选取a、b、c三组内vsd仔鼠心脏各5例，非chd仔鼠心脏各15例，d组非chd仔鼠心脏15例，提取rna，应用real time pcr检测pax-8 m

3、rna在仔鼠心脏的表达情况；同时选取a、b、c三组vsd仔鼠心脏各2例、非chd仔鼠心脏各5例、d组非chd仔鼠心脏5例，5甲醛固定，石蜡包埋，应用免疫组化检测pax-8蛋白在仔鼠心脏的表达情况。 结果：1、 a、b、c、d四组平均产仔数分别为：9.04只、12.1只、11.56只及13.56只，a、b、c三组平均产仔数分别与d组比较，p值均<0.01；a、b、c三组平均产仔数之间两两比较，p值均<0.01，提示外源性hcy可导致孕鼠产仔数减少，通过对孕鼠用fa+vit b12干预，可增加孕鼠产仔数。 2、a、b、c、d四组仔鼠心脏畸形率分别为：13.5、9.17、

4、8.77及0.74，a、b、c三组之间两两比较，p值均>0.05；a、b、c三组分别与d组比较，p值均<0.01，提示外源性hcy可引起仔鼠心脏畸形。 3、pax-8 mrna在a、b、c、d四组组内及组间仔鼠心脏表达的比较：pax-8 mrna在vsd仔鼠心脏细胞中的表达均低于非chd仔鼠，p值均<0.01。a、b、c三组vsd仔鼠心脏细胞中的pax-8mrna表达比较： b组>a组，a组>c组，p值均<0.01，b组与c组比较p>0.05。a、b、c、d四组非chd仔鼠心脏组织中的pax-8m

5、rna表达比较，p值均>0.05。vsd仔鼠心肌组织pax-8 mrna表达水平与孕鼠hcy注射剂量呈负相关，r=0.949，p<0.01。 4、pax-8蛋白在a、b、c、d四组组内及组间vsd仔鼠心脏细胞中表达均低于非chd仔鼠，p值均<0.01。pax-8蛋白在a、b、c三组vsd仔鼠之间心脏中的表达比较无差异，p值均>0.05。四组非chd仔鼠心脏细胞中的表达比较无差异，p值均>0.05。 结论：1、pax-8mrna在vsd胎鼠心肌中的呈低表达，且与hcy剂量呈负相关，pax-8基因的低表达可能与vsd的形成有关。

6、 2、高水平的hcy具有胚胎毒性，孕期fa与vitb12干预可增加平均胎产数，降低hcy的胚胎毒性。正文内容 目的：通过同型半胱氨酸（homocysteine，hcy）干预孕鼠，建立大鼠仔鼠先天性心脏畸形模型，探讨hcy与先天性心脏病（congenital heart defect，chd）pax-8基因表达的关系及叶酸（folic acid，fa）、vitb12对hcy的干预作用，从心脏发育的分子学角度探讨chd发生的病因。 方法：40只s-d孕鼠随机分为四组：高剂量hcy建模组（a组）、低剂量hcy建模组（b组）、高剂量hcy+（fa+vitb12）干预组（c组）及对照组（d组），每组各1

7、0只孕鼠。大鼠自妊娠第7天开始腹腔内注射不同剂量的hcy：a组2 hcy2mg/10g/d、b组1 hcy1mg/10g/d、c组2 hcy2mg/10g/d、d组注射生理盐水0.1ml/10g/d，c组自确定妊娠起，按fa0.05mg/10g/d+vitb121mg/10g/d给药，至孕鼠自然分娩时停药。每日观察孕鼠，待其自然分娩当日，体视显微镜下解剖仔鼠，观察仔鼠心脏畸形情况。选取a、b、c三组内vsd仔鼠心脏各5例，非chd仔鼠心脏各15例，d组非chd仔鼠心脏15例，提取rna，应用real time pcr检测pax-8 mrna在仔鼠心脏的表达情况；同时选取a、b、c三组vsd仔鼠

8、心脏各2例、非chd仔鼠心脏各5例、d组非chd仔鼠心脏5例，5甲醛固定，石蜡包埋，应用免疫组化检测pax-8蛋白在仔鼠心脏的表达情况。 结果：1、 a、b、c、d四组平均产仔数分别为：9.04只、12.1只、11.56只及13.56只，a、b、c三组平均产仔数分别与d组比较，p值均<0.01；a、b、c三组平均产仔数之间两两比较，p值均<0.01，提示外源性hcy可导致孕鼠产仔数减少，通过对孕鼠用fa+vit b12干预，可增加孕鼠产仔数。 2、a、b、c、d四组仔鼠心脏畸形率分别为：13.5、9.17、8.77及0.74，a、b、c三组之间两两比较，p值均&am

9、p;gt;0.05；a、b、c三组分别与d组比较，p值均<0.01，提示外源性hcy可引起仔鼠心脏畸形。 3、pax-8 mrna在a、b、c、d四组组内及组间仔鼠心脏表达的比较：pax-8 mrna在vsd仔鼠心脏细胞中的表达均低于非chd仔鼠，p值均<0.01。a、b、c三组vsd仔鼠心脏细胞中的pax-8mrna表达比较： b组>a组，a组>c组，p值均<0.01，b组与c组比较p>0.05。a、b、c、d四组非chd仔鼠心脏组织中的pax-8mrna表达比较，p值均>0.05。vsd仔鼠心

10、肌组织pax-8 mrna表达水平与孕鼠hcy注射剂量呈负相关，r=0.949，p<0.01。 4、pax-8蛋白在a、b、c、d四组组内及组间vsd仔鼠心脏细胞中表达均低于非chd仔鼠，p值均<0.01。pax-8蛋白在a、b、c三组vsd仔鼠之间心脏中的表达比较无差异，p值均>0.05。四组非chd仔鼠心脏细胞中的表达比较无差异，p值均>0.05。 结论：1、pax-8mrna在vsd胎鼠心肌中的呈低表达，且与hcy剂量呈负相关，pax-8基因的低表达可能与vsd的形成有关。 2、高水平的hcy具有胚胎毒性，孕期fa与vitb12干预

11、可增加平均胎产数，降低hcy的胚胎毒性。目的：通过同型半胱氨酸（homocysteine，hcy）干预孕鼠，建立大鼠仔鼠先天性心脏畸形模型，探讨hcy与先天性心脏病（congenital heart defect，chd）pax-8基因表达的关系及叶酸（folic acid，fa）、vitb12对hcy的干预作用，从心脏发育的分子学角度探讨chd发生的病因。 方法：40只s-d孕鼠随机分为四组：高剂量hcy建模组（a组）、低剂量hcy建模组（b组）、高剂量hcy+（fa+vitb12）干预组（c组）及对照组（d组），每组各10只孕鼠。大鼠自妊娠第7天开始腹腔内注射不同剂量的hcy：a组2 hc

12、y2mg/10g/d、b组1 hcy1mg/10g/d、c组2 hcy2mg/10g/d、d组注射生理盐水0.1ml/10g/d，c组自确定妊娠起，按fa0.05mg/10g/d+vitb121mg/10g/d给药，至孕鼠自然分娩时停药。每日观察孕鼠，待其自然分娩当日，体视显微镜下解剖仔鼠，观察仔鼠心脏畸形情况。选取a、b、c三组内vsd仔鼠心脏各5例，非chd仔鼠心脏各15例，d组非chd仔鼠心脏15例，提取rna，应用real time pcr检测pax-8 mrna在仔鼠心脏的表达情况；同时选取a、b、c三组vsd仔鼠心脏各2例、非chd仔鼠心脏各5例、d组非chd仔鼠心脏5例，5甲醛固

13、定，石蜡包埋，应用免疫组化检测pax-8蛋白在仔鼠心脏的表达情况。 结果：1、 a、b、c、d四组平均产仔数分别为：9.04只、12.1只、11.56只及13.56只，a、b、c三组平均产仔数分别与d组比较，p值均<0.01；a、b、c三组平均产仔数之间两两比较，p值均<0.01，提示外源性hcy可导致孕鼠产仔数减少，通过对孕鼠用fa+vit b12干预，可增加孕鼠产仔数。 2、a、b、c、d四组仔鼠心脏畸形率分别为：13.5、9.17、8.77及0.74，a、b、c三组之间两两比较，p值均>0.05；a、b、c三组分别与d组比较，p值均&lt

14、;0.01，提示外源性hcy可引起仔鼠心脏畸形。 3、pax-8 mrna在a、b、c、d四组组内及组间仔鼠心脏表达的比较：pax-8 mrna在vsd仔鼠心脏细胞中的表达均低于非chd仔鼠，p值均<0.01。a、b、c三组vsd仔鼠心脏细胞中的pax-8mrna表达比较： b组>a组，a组>c组，p值均<0.01，b组与c组比较p>0.05。a、b、c、d四组非chd仔鼠心脏组织中的pax-8mrna表达比较，p值均>0.05。vsd仔鼠心肌组织pax-8 mrna表达水平与孕鼠hcy注射剂量呈负相关，r=0

15、.949，p<0.01。 4、pax-8蛋白在a、b、c、d四组组内及组间vsd仔鼠心脏细胞中表达均低于非chd仔鼠，p值均<0.01。pax-8蛋白在a、b、c三组vsd仔鼠之间心脏中的表达比较无差异，p值均>0.05。四组非chd仔鼠心脏细胞中的表达比较无差异，p值均>0.05。 结论：1、pax-8mrna在vsd胎鼠心肌中的呈低表达，且与hcy剂量呈负相关，pax-8基因的低表达可能与vsd的形成有关。 2、高水平的hcy具有胚胎毒性，孕期fa与vitb12干预可增加平均胎产数，降低hcy的胚胎毒性。目的：通过同型半胱氨酸（hom

16、ocysteine，hcy）干预孕鼠，建立大鼠仔鼠先天性心脏畸形模型，探讨hcy与先天性心脏病（congenital heart defect，chd）pax-8基因表达的关系及叶酸（folic acid，fa）、vitb12对hcy的干预作用，从心脏发育的分子学角度探讨chd发生的病因。 方法：40只s-d孕鼠随机分为四组：高剂量hcy建模组（a组）、低剂量hcy建模组（b组）、高剂量hcy+（fa+vitb12）干预组（c组）及对照组（d组），每组各10只孕鼠。大鼠自妊娠第7天开始腹腔内注射不同剂量的hcy：a组2 hcy2mg/10g/d、b组1 hcy1mg/10g/d、c组2 hcy

17、2mg/10g/d、d组注射生理盐水0.1ml/10g/d，c组自确定妊娠起，按fa0.05mg/10g/d+vitb121mg/10g/d给药，至孕鼠自然分娩时停药。每日观察孕鼠，待其自然分娩当日，体视显微镜下解剖仔鼠，观察仔鼠心脏畸形情况。选取a、b、c三组内vsd仔鼠心脏各5例，非chd仔鼠心脏各15例，d组非chd仔鼠心脏15例，提取rna，应用real time pcr检测pax-8 mrna在仔鼠心脏的表达情况；同时选取a、b、c三组vsd仔鼠心脏各2例、非chd仔鼠心脏各5例、d组非chd仔鼠心脏5例，5甲醛固定，石蜡包埋，应用免疫组化检测pax-8蛋白在仔鼠心脏的表达情况。 结

18、果：1、 a、b、c、d四组平均产仔数分别为：9.04只、12.1只、11.56只及13.56只，a、b、c三组平均产仔数分别与d组比较，p值均<0.01；a、b、c三组平均产仔数之间两两比较，p值均<0.01，提示外源性hcy可导致孕鼠产仔数减少，通过对孕鼠用fa+vit b12干预，可增加孕鼠产仔数。 2、a、b、c、d四组仔鼠心脏畸形率分别为：13.5、9.17、8.77及0.74，a、b、c三组之间两两比较，p值均>0.05；a、b、c三组分别与d组比较，p值均<0.01，提示外源性hcy可引起仔鼠心脏畸形。 3、pax-8 mr

19、na在a、b、c、d四组组内及组间仔鼠心脏表达的比较：pax-8 mrna在vsd仔鼠心脏细胞中的表达均低于非chd仔鼠，p值均<0.01。a、b、c三组vsd仔鼠心脏细胞中的pax-8mrna表达比较： b组>a组，a组>c组，p值均<0.01，b组与c组比较p>0.05。a、b、c、d四组非chd仔鼠心脏组织中的pax-8mrna表达比较，p值均>0.05。vsd仔鼠心肌组织pax-8 mrna表达水平与孕鼠hcy注射剂量呈负相关，r=0.949，p<0.01。 4、pax-8蛋白在a、b、c

20、、d四组组内及组间vsd仔鼠心脏细胞中表达均低于非chd仔鼠，p值均<0.01。pax-8蛋白在a、b、c三组vsd仔鼠之间心脏中的表达比较无差异，p值均>0.05。四组非chd仔鼠心脏细胞中的表达比较无差异，p值均>0.05。 结论：1、pax-8mrna在vsd胎鼠心肌中的呈低表达，且与hcy剂量呈负相关，pax-8基因的低表达可能与vsd的形成有关。 2、高水平的hcy具有胚胎毒性，孕期fa与vitb12干预可增加平均胎产数，降低hcy的胚胎毒性。目的：通过同型半胱氨酸（homocysteine，hcy）干预孕鼠，建立大鼠仔鼠先天性心脏畸形模型，

21、探讨hcy与先天性心脏病（congenital heart defect，chd）pax-8基因表达的关系及叶酸（folic acid，fa）、vitb12对hcy的干预作用，从心脏发育的分子学角度探讨chd发生的病因。 方法：40只s-d孕鼠随机分为四组：高剂量hcy建模组（a组）、低剂量hcy建模组（b组）、高剂量hcy+（fa+vitb12）干预组（c组）及对照组（d组），每组各10只孕鼠。大鼠自妊娠第7天开始腹腔内注射不同剂量的hcy：a组2 hcy2mg/10g/d、b组1 hcy1mg/10g/d、c组2 hcy2mg/10g/d、d组注射生理盐水0.1ml/10g/d，c组自确定

22、妊娠起，按fa0.05mg/10g/d+vitb121mg/10g/d给药，至孕鼠自然分娩时停药。每日观察孕鼠，待其自然分娩当日，体视显微镜下解剖仔鼠，观察仔鼠心脏畸形情况。选取a、b、c三组内vsd仔鼠心脏各5例，非chd仔鼠心脏各15例，d组非chd仔鼠心脏15例，提取rna，应用real time pcr检测pax-8 mrna在仔鼠心脏的表达情况；同时选取a、b、c三组vsd仔鼠心脏各2例、非chd仔鼠心脏各5例、d组非chd仔鼠心脏5例，5甲醛固定，石蜡包埋，应用免疫组化检测pax-8蛋白在仔鼠心脏的表达情况。 结果：1、 a、b、c、d四组平均产仔数分别为：9.04只、12.1只、

23、11.56只及13.56只，a、b、c三组平均产仔数分别与d组比较，p值均<0.01；a、b、c三组平均产仔数之间两两比较，p值均<0.01，提示外源性hcy可导致孕鼠产仔数减少，通过对孕鼠用fa+vit b12干预，可增加孕鼠产仔数。 2、a、b、c、d四组仔鼠心脏畸形率分别为：13.5、9.17、8.77及0.74，a、b、c三组之间两两比较，p值均>0.05；a、b、c三组分别与d组比较，p值均<0.01，提示外源性hcy可引起仔鼠心脏畸形。 3、pax-8 mrna在a、b、c、d四组组内及组间仔鼠心脏表达的比较：pax-8 mr

24、na在vsd仔鼠心脏细胞中的表达均低于非chd仔鼠，p值均<0.01。a、b、c三组vsd仔鼠心脏细胞中的pax-8mrna表达比较： b组>a组，a组>c组，p值均<0.01，b组与c组比较p>0.05。a、b、c、d四组非chd仔鼠心脏组织中的pax-8mrna表达比较，p值均>0.05。vsd仔鼠心肌组织pax-8 mrna表达水平与孕鼠hcy注射剂量呈负相关，r=0.949，p<0.01。 4、pax-8蛋白在a、b、c、d四组组内及组间vsd仔鼠心脏细胞中表达均低于非chd仔鼠，p值均&

25、amp;lt;0.01。pax-8蛋白在a、b、c三组vsd仔鼠之间心脏中的表达比较无差异，p值均>0.05。四组非chd仔鼠心脏细胞中的表达比较无差异，p值均>0.05。 结论：1、pax-8mrna在vsd胎鼠心肌中的呈低表达，且与hcy剂量呈负相关，pax-8基因的低表达可能与vsd的形成有关。 2、高水平的hcy具有胚胎毒性，孕期fa与vitb12干预可增加平均胎产数，降低hcy的胚胎毒性。目的：通过同型半胱氨酸（homocysteine，hcy）干预孕鼠，建立大鼠仔鼠先天性心脏畸形模型，探讨hcy与先天性心脏病（congenital heart defec

26、t，chd）pax-8基因表达的关系及叶酸（folic acid，fa）、vitb12对hcy的干预作用，从心脏发育的分子学角度探讨chd发生的病因。 方法：40只s-d孕鼠随机分为四组：高剂量hcy建模组（a组）、低剂量hcy建模组（b组）、高剂量hcy+（fa+vitb12）干预组（c组）及对照组（d组），每组各10只孕鼠。大鼠自妊娠第7天开始腹腔内注射不同剂量的hcy：a组2 hcy2mg/10g/d、b组1 hcy1mg/10g/d、c组2 hcy2mg/10g/d、d组注射生理盐水0.1ml/10g/d，c组自确定妊娠起，按fa0.05mg/10g/d+vitb121mg/10g/d

27、给药，至孕鼠自然分娩时停药。每日观察孕鼠，待其自然分娩当日，体视显微镜下解剖仔鼠，观察仔鼠心脏畸形情况。选取a、b、c三组内vsd仔鼠心脏各5例，非chd仔鼠心脏各15例，d组非chd仔鼠心脏15例，提取rna，应用real time pcr检测pax-8 mrna在仔鼠心脏的表达情况；同时选取a、b、c三组vsd仔鼠心脏各2例、非chd仔鼠心脏各5例、d组非chd仔鼠心脏5例，5甲醛固定，石蜡包埋，应用免疫组化检测pax-8蛋白在仔鼠心脏的表达情况。 结果：1、 a、b、c、d四组平均产仔数分别为：9.04只、12.1只、11.56只及13.56只，a、b、c三组平均产仔数分别与d组比较，p

28、值均<0.01；a、b、c三组平均产仔数之间两两比较，p值均<0.01，提示外源性hcy可导致孕鼠产仔数减少，通过对孕鼠用fa+vit b12干预，可增加孕鼠产仔数。 2、a、b、c、d四组仔鼠心脏畸形率分别为：13.5、9.17、8.77及0.74，a、b、c三组之间两两比较，p值均>0.05；a、b、c三组分别与d组比较，p值均<0.01，提示外源性hcy可引起仔鼠心脏畸形。 3、pax-8 mrna在a、b、c、d四组组内及组间仔鼠心脏表达的比较：pax-8 mrna在vsd仔鼠心脏细胞中的表达均低于非chd仔鼠，p值均&l

29、t;0.01。a、b、c三组vsd仔鼠心脏细胞中的pax-8mrna表达比较： b组>a组，a组>c组，p值均<0.01，b组与c组比较p>0.05。a、b、c、d四组非chd仔鼠心脏组织中的pax-8mrna表达比较，p值均>0.05。vsd仔鼠心肌组织pax-8 mrna表达水平与孕鼠hcy注射剂量呈负相关，r=0.949，p<0.01。 4、pax-8蛋白在a、b、c、d四组组内及组间vsd仔鼠心脏细胞中表达均低于非chd仔鼠，p值均<0.01。pax-8蛋白在a、b、c三组vsd仔鼠之间心

30、脏中的表达比较无差异，p值均>0.05。四组非chd仔鼠心脏细胞中的表达比较无差异，p值均>0.05。 结论：1、pax-8mrna在vsd胎鼠心肌中的呈低表达，且与hcy剂量呈负相关，pax-8基因的低表达可能与vsd的形成有关。 2、高水平的hcy具有胚胎毒性，孕期fa与vitb12干预可增加平均胎产数，降低hcy的胚胎毒性。目的：通过同型半胱氨酸（homocysteine，hcy）干预孕鼠，建立大鼠仔鼠先天性心脏畸形模型，探讨hcy与先天性心脏病（congenital heart defect，chd）pax-8基因表达的关系及叶酸（folic acid，fa

31、）、vitb12对hcy的干预作用，从心脏发育的分子学角度探讨chd发生的病因。 方法：40只s-d孕鼠随机分为四组：高剂量hcy建模组（a组）、低剂量hcy建模组（b组）、高剂量hcy+（fa+vitb12）干预组（c组）及对照组（d组），每组各10只孕鼠。大鼠自妊娠第7天开始腹腔内注射不同剂量的hcy：a组2 hcy2mg/10g/d、b组1 hcy1mg/10g/d、c组2 hcy2mg/10g/d、d组注射生理盐水0.1ml/10g/d，c组自确定妊娠起，按fa0.05mg/10g/d+vitb121mg/10g/d给药，至孕鼠自然分娩时停药。每日观察孕鼠，待其自然分娩当日，体视显微镜

32、下解剖仔鼠，观察仔鼠心脏畸形情况。选取a、b、c三组内vsd仔鼠心脏各5例，非chd仔鼠心脏各15例，d组非chd仔鼠心脏15例，提取rna，应用real time pcr检测pax-8 mrna在仔鼠心脏的表达情况；同时选取a、b、c三组vsd仔鼠心脏各2例、非chd仔鼠心脏各5例、d组非chd仔鼠心脏5例，5甲醛固定，石蜡包埋，应用免疫组化检测pax-8蛋白在仔鼠心脏的表达情况。 结果：1、 a、b、c、d四组平均产仔数分别为：9.04只、12.1只、11.56只及13.56只，a、b、c三组平均产仔数分别与d组比较，p值均<0.01；a、b、c三组平均产仔数之间两两比较，p

33、值均<0.01，提示外源性hcy可导致孕鼠产仔数减少，通过对孕鼠用fa+vit b12干预，可增加孕鼠产仔数。 2、a、b、c、d四组仔鼠心脏畸形率分别为：13.5、9.17、8.77及0.74，a、b、c三组之间两两比较，p值均>0.05；a、b、c三组分别与d组比较，p值均<0.01，提示外源性hcy可引起仔鼠心脏畸形。 3、pax-8 mrna在a、b、c、d四组组内及组间仔鼠心脏表达的比较：pax-8 mrna在vsd仔鼠心脏细胞中的表达均低于非chd仔鼠，p值均<0.01。a、b、c三组vsd仔鼠心脏细胞中的pax-8mrna表

34、达比较： b组>a组，a组>c组，p值均<0.01，b组与c组比较p>0.05。a、b、c、d四组非chd仔鼠心脏组织中的pax-8mrna表达比较，p值均>0.05。vsd仔鼠心肌组织pax-8 mrna表达水平与孕鼠hcy注射剂量呈负相关，r=0.949，p<0.01。 4、pax-8蛋白在a、b、c、d四组组内及组间vsd仔鼠心脏细胞中表达均低于非chd仔鼠，p值均<0.01。pax-8蛋白在a、b、c三组vsd仔鼠之间心脏中的表达比较无差异，p值均>0.05。四组非chd仔鼠

35、心脏细胞中的表达比较无差异，p值均>0.05。 结论：1、pax-8mrna在vsd胎鼠心肌中的呈低表达，且与hcy剂量呈负相关，pax-8基因的低表达可能与vsd的形成有关。 2、高水平的hcy具有胚胎毒性，孕期fa与vitb12干预可增加平均胎产数，降低hcy的胚胎毒性。目的：通过同型半胱氨酸（homocysteine，hcy）干预孕鼠，建立大鼠仔鼠先天性心脏畸形模型，探讨hcy与先天性心脏病（congenital heart defect，chd）pax-8基因表达的关系及叶酸（folic acid，fa）、vitb12对hcy的干预作用，从心脏发育的分子学角度探讨chd发

36、生的病因。 方法：40只s-d孕鼠随机分为四组：高剂量hcy建模组（a组）、低剂量hcy建模组（b组）、高剂量hcy+（fa+vitb12）干预组（c组）及对照组（d组），每组各10只孕鼠。大鼠自妊娠第7天开始腹腔内注射不同剂量的hcy：a组2 hcy2mg/10g/d、b组1 hcy1mg/10g/d、c组2 hcy2mg/10g/d、d组注射生理盐水0.1ml/10g/d，c组自确定妊娠起，按fa0.05mg/10g/d+vitb121mg/10g/d给药，至孕鼠自然分娩时停药。每日观察孕鼠，待其自然分娩当日，体视显微镜下解剖仔鼠，观察仔鼠心脏畸形情况。选取a、b、c三组内vsd仔鼠心脏各

37、5例，非chd仔鼠心脏各15例，d组非chd仔鼠心脏15例，提取rna，应用real time pcr检测pax-8 mrna在仔鼠心脏的表达情况；同时选取a、b、c三组vsd仔鼠心脏各2例、非chd仔鼠心脏各5例、d组非chd仔鼠心脏5例，5甲醛固定，石蜡包埋，应用免疫组化检测pax-8蛋白在仔鼠心脏的表达情况。 结果：1、 a、b、c、d四组平均产仔数分别为：9.04只、12.1只、11.56只及13.56只，a、b、c三组平均产仔数分别与d组比较，p值均<0.01；a、b、c三组平均产仔数之间两两比较，p值均<0.01，提示外源性hcy可导致孕鼠产仔数减少，通

38、过对孕鼠用fa+vit b12干预，可增加孕鼠产仔数。 2、a、b、c、d四组仔鼠心脏畸形率分别为：13.5、9.17、8.77及0.74，a、b、c三组之间两两比较，p值均>0.05；a、b、c三组分别与d组比较，p值均<0.01，提示外源性hcy可引起仔鼠心脏畸形。 3、pax-8 mrna在a、b、c、d四组组内及组间仔鼠心脏表达的比较：pax-8 mrna在vsd仔鼠心脏细胞中的表达均低于非chd仔鼠，p值均<0.01。a、b、c三组vsd仔鼠心脏细胞中的pax-8mrna表达比较： b组>a组，a组>c组，p值均&

39、amp;lt;0.01，b组与c组比较p>0.05。a、b、c、d四组非chd仔鼠心脏组织中的pax-8mrna表达比较，p值均>0.05。vsd仔鼠心肌组织pax-8 mrna表达水平与孕鼠hcy注射剂量呈负相关，r=0.949，p<0.01。 4、pax-8蛋白在a、b、c、d四组组内及组间vsd仔鼠心脏细胞中表达均低于非chd仔鼠，p值均<0.01。pax-8蛋白在a、b、c三组vsd仔鼠之间心脏中的表达比较无差异，p值均>0.05。四组非chd仔鼠心脏细胞中的表达比较无差异，p值均>0.05。 结论：1

40、、pax-8mrna在vsd胎鼠心肌中的呈低表达，且与hcy剂量呈负相关，pax-8基因的低表达可能与vsd的形成有关。 2、高水平的hcy具有胚胎毒性，孕期fa与vitb12干预可增加平均胎产数，降低hcy的胚胎毒性。目的：通过同型半胱氨酸（homocysteine，hcy）干预孕鼠，建立大鼠仔鼠先天性心脏畸形模型，探讨hcy与先天性心脏病（congenital heart defect，chd）pax-8基因表达的关系及叶酸（folic acid，fa）、vitb12对hcy的干预作用，从心脏发育的分子学角度探讨chd发生的病因。 方法：40只s-d孕鼠随机分为四组：高剂量hcy建模组（a

41、组）、低剂量hcy建模组（b组）、高剂量hcy+（fa+vitb12）干预组（c组）及对照组（d组），每组各10只孕鼠。大鼠自妊娠第7天开始腹腔内注射不同剂量的hcy：a组2 hcy2mg/10g/d、b组1 hcy1mg/10g/d、c组2 hcy2mg/10g/d、d组注射生理盐水0.1ml/10g/d，c组自确定妊娠起，按fa0.05mg/10g/d+vitb121mg/10g/d给药，至孕鼠自然分娩时停药。每日观察孕鼠，待其自然分娩当日，体视显微镜下解剖仔鼠，观察仔鼠心脏畸形情况。选取a、b、c三组内vsd仔鼠心脏各5例，非chd仔鼠心脏各15例，d组非chd仔鼠心脏15例，提取rna

42、，应用real time pcr检测pax-8 mrna在仔鼠心脏的表达情况；同时选取a、b、c三组vsd仔鼠心脏各2例、非chd仔鼠心脏各5例、d组非chd仔鼠心脏5例，5甲醛固定，石蜡包埋，应用免疫组化检测pax-8蛋白在仔鼠心脏的表达情况。 结果：1、 a、b、c、d四组平均产仔数分别为：9.04只、12.1只、11.56只及13.56只，a、b、c三组平均产仔数分别与d组比较，p值均<0.01；a、b、c三组平均产仔数之间两两比较，p值均<0.01，提示外源性hcy可导致孕鼠产仔数减少，通过对孕鼠用fa+vit b12干预，可增加孕鼠产仔数。 2、a、b、c

43、、d四组仔鼠心脏畸形率分别为：13.5、9.17、8.77及0.74，a、b、c三组之间两两比较，p值均>0.05；a、b、c三组分别与d组比较，p值均<0.01，提示外源性hcy可引起仔鼠心脏畸形。 3、pax-8 mrna在a、b、c、d四组组内及组间仔鼠心脏表达的比较：pax-8 mrna在vsd仔鼠心脏细胞中的表达均低于非chd仔鼠，p值均<0.01。a、b、c三组vsd仔鼠心脏细胞中的pax-8mrna表达比较： b组>a组，a组>c组，p值均<0.01，b组与c组比较p>0.05。a、

44、b、c、d四组非chd仔鼠心脏组织中的pax-8mrna表达比较，p值均>0.05。vsd仔鼠心肌组织pax-8 mrna表达水平与孕鼠hcy注射剂量呈负相关，r=0.949，p<0.01。 4、pax-8蛋白在a、b、c、d四组组内及组间vsd仔鼠心脏细胞中表达均低于非chd仔鼠，p值均<0.01。pax-8蛋白在a、b、c三组vsd仔鼠之间心脏中的表达比较无差异，p值均>0.05。四组非chd仔鼠心脏细胞中的表达比较无差异，p值均>0.05。 结论：1、pax-8mrna在vsd胎鼠心肌中的呈低表达，且与hcy剂量呈负相

45、关，pax-8基因的低表达可能与vsd的形成有关。 2、高水平的hcy具有胚胎毒性，孕期fa与vitb12干预可增加平均胎产数，降低hcy的胚胎毒性。目的：通过同型半胱氨酸（homocysteine，hcy）干预孕鼠，建立大鼠仔鼠先天性心脏畸形模型，探讨hcy与先天性心脏病（congenital heart defect，chd）pax-8基因表达的关系及叶酸（folic acid，fa）、vitb12对hcy的干预作用，从心脏发育的分子学角度探讨chd发生的病因。 方法：40只s-d孕鼠随机分为四组：高剂量hcy建模组（a组）、低剂量hcy建模组（b组）、高剂量hcy+（fa+vitb12）

46、干预组（c组）及对照组（d组），每组各10只孕鼠。大鼠自妊娠第7天开始腹腔内注射不同剂量的hcy：a组2 hcy2mg/10g/d、b组1 hcy1mg/10g/d、c组2 hcy2mg/10g/d、d组注射生理盐水0.1ml/10g/d，c组自确定妊娠起，按fa0.05mg/10g/d+vitb121mg/10g/d给药，至孕鼠自然分娩时停药。每日观察孕鼠，待其自然分娩当日，体视显微镜下解剖仔鼠，观察仔鼠心脏畸形情况。选取a、b、c三组内vsd仔鼠心脏各5例，非chd仔鼠心脏各15例，d组非chd仔鼠心脏15例，提取rna，应用real time pcr检测pax-8 mrna在仔鼠心脏的表

47、达情况；同时选取a、b、c三组vsd仔鼠心脏各2例、非chd仔鼠心脏各5例、d组非chd仔鼠心脏5例，5甲醛固定，石蜡包埋，应用免疫组化检测pax-8蛋白在仔鼠心脏的表达情况。 结果：1、 a、b、c、d四组平均产仔数分别为：9.04只、12.1只、11.56只及13.56只，a、b、c三组平均产仔数分别与d组比较，p值均<0.01；a、b、c三组平均产仔数之间两两比较，p值均<0.01，提示外源性hcy可导致孕鼠产仔数减少，通过对孕鼠用fa+vit b12干预，可增加孕鼠产仔数。 2、a、b、c、d四组仔鼠心脏畸形率分别为：13.5、9.17、8.77及0.74，

48、a、b、c三组之间两两比较，p值均>0.05；a、b、c三组分别与d组比较，p值均<0.01，提示外源性hcy可引起仔鼠心脏畸形。 3、pax-8 mrna在a、b、c、d四组组内及组间仔鼠心脏表达的比较：pax-8 mrna在vsd仔鼠心脏细胞中的表达均低于非chd仔鼠，p值均<0.01。a、b、c三组vsd仔鼠心脏细胞中的pax-8mrna表达比较： b组>a组，a组>c组，p值均<0.01，b组与c组比较p>0.05。a、b、c、d四组非chd仔鼠心脏组织中的pax-8mrna表达比较，p值

49、均>0.05。vsd仔鼠心肌组织pax-8 mrna表达水平与孕鼠hcy注射剂量呈负相关，r=0.949，p<0.01。 4、pax-8蛋白在a、b、c、d四组组内及组间vsd仔鼠心脏细胞中表达均低于非chd仔鼠，p值均<0.01。pax-8蛋白在a、b、c三组vsd仔鼠之间心脏中的表达比较无差异，p值均>0.05。四组非chd仔鼠心脏细胞中的表达比较无差异，p值均>0.05。 结论：1、pax-8mrna在vsd胎鼠心肌中的呈低表达，且与hcy剂量呈负相关，pax-8基因的低表达可能与vsd的形成有关。 2、高水平的hcy

50、具有胚胎毒性，孕期fa与vitb12干预可增加平均胎产数，降低hcy的胚胎毒性。目的：通过同型半胱氨酸（homocysteine，hcy）干预孕鼠，建立大鼠仔鼠先天性心脏畸形模型，探讨hcy与先天性心脏病（congenital heart defect，chd）pax-8基因表达的关系及叶酸（folic acid，fa）、vitb12对hcy的干预作用，从心脏发育的分子学角度探讨chd发生的病因。 方法：40只s-d孕鼠随机分为四组：高剂量hcy建模组（a组）、低剂量hcy建模组（b组）、高剂量hcy+（fa+vitb12）干预组（c组）及对照组（d组），每组各10只孕鼠。大鼠自妊娠第7天开始腹腔内注射不同剂量的hcy：a组2 hcy2mg/10g/d、b组1 hcy1mg/10