植物生理学试验报告

1、提高性实验报告实验课题：叶绿素 a、叶绿素 b 含量测定实验类型：综合性 设计性 应用性）专业名称：植物科学与技术实验课程：植物生理学实验时间：201610.21姓名：XXX 班级： XXXX 学号： XXXXXXXX生物学实验教学示范中心实验课题名称实验报告正文叶绿素 a、叶绿素 b 含量测定文献综述（列出参考文献）植物 95%以上的干物质是由光合作用提供的 , 而叶片则是光合作用的主要器官 , 叶片中的叶绿体是光合作用最主要的细胞器。 高等植物在光合反应中吸收光能的主要 色素为叶绿素 , 其含有的叶绿素 a 和叶绿素 b 能将光能转化为化学能 , 形成有机物质。 因此 , 叶片中叶绿素含量

2、的高低是反映植物叶片光合能力的一个重要指标。 1 测定叶绿素含量的方法有离体法 （如分光光度 法）和活体法 （如叶绿素仪法 ） 。分光光度 法具有准确度高的特点 , 是叶绿素含量测定过程中应用最广泛的方法。叶绿素的含量变 化与植物生长发育状况以及 环境变化密切相关。 2 据查，水稻比玉米叶绿素含量高，而水稻 和玉米又比喜荫植物吉祥草高。 2 而不同发育期的植物叶绿素的含量也会有所不同。 3 1 牟晓玲 . 对不同植物叶绿素 a和叶绿素 b 含量比的测定 .J.甘肃农业科技 .2004（11）:55-562 袁方 ,李鑫 ,余君萍 ,王学奎 ,徐久玮 ,张立新 . 分光光度法测定叶绿素含量及其比

3、值问题的探讨.J. 植物生理学通讯.2009,45（1）:63-663 陈小龙 陈 灿,周 莉. 水稻不同生育期叶绿素含量的测定及其相关性分析 .J.现代农业科技 .2010（17） :42-44实验目的和要求熟悉在未经分离的叶绿素溶液中测定叶绿素 a和叶绿素 b 的方法及其计算实验条件（包括实验材料、药品、仪器设备等）1、实验仪器 : 分光光度计、离心机、天平、剪刀、研钵、漏斗、移液管2、实验药品：丙酮、碳酸钙3、实验材料：植物叶片：陆生花生：水生花生小叶黄杨新叶：小叶黄杨老叶实验原理与方法? 叶绿素提取液中同时含有叶绿素 a 和叶绿素 b ，二者的吸收光谱虽有不同，但又 存在着明显的重叠，

4、在不分离叶绿素 a 和叶绿素 b 的情况下同时测定叶绿素 a 和 叶绿素 b 的浓度，可分别测定在 663nm和 645nm（分别是叶绿素 a和叶绿素 b 在 红光区的吸收峰）的光吸收，然后根据 Lambert-Beer 定律，计算出提取液中叶 绿素 a 和叶绿素 b 的浓度。? A663=82.04a+9.27 b （1）? A645=16.75 a+45.60b （2）? 公式中 a为叶绿素 a的浓度，b为叶绿素 b浓度（单位为 g/L ），82.04 和 9.27 分别是叶绿素 a 和叶绿素 b 在 663nm下的比吸收系数 （浓度为 1g/L ，光路宽度为 1cm时的吸光度值）； 16

5、.75 和 45.60 分别是叶绿素 a 和叶绿素 b 在 645nm下的 比吸收系数。即混合液在某一波长下的光吸收等于各组分在此波长下的光吸收之 和。将上式整理，可以得到下式：? a=0.0127A663-0.00269A 645 （3）? b=0.0229A645-0.00468A 663 （4） 将叶绿素的浓度改为 mg/L，则上式变为：? a=12.7A663-2.69A 645 （ 5）? b=22.9A645-4.68A 663 （ 6）? T= a+b=8.02A663+20.21A645 （7）?T 为叶绿素的总浓度实验方案或实验步骤设计结果与分析1、色素的提取取新鲜叶片，剪去

6、粗大的叶脉并剪成碎块，称取 0.5g 放入研钵中加纯丙酮 5ml，少 许 CaCO3 和石英砂，研磨成匀浆，再加 80%丙酮 5ml，将匀浆转入离心管，并用适量 80% 丙酮洗涤研钵，一并转入离心管，离心 5min 后弃沉淀，上清液用 80%丙酮定容至 20ml。2、测定 OD值取上述色素提取液 1ml，加 80%丙酮 4ml 稀释后转入比色杯中，以 80%丙酮为对照， 分别测定 663nm、645nm处的 OD值。4、计算按式（ 5）、（6）、（ 7）分别计算色素提取液中叶绿素、叶绿素及叶绿素的浓度。再 根据稀释倍数分别计算每克鲜重叶片中色素的含量。实验数据及数据处理水花生（陆生）水花生（水

7、生）663nm0.2450.377645nm0.0980.132珊瑚树（新叶）珊瑚树 （成熟叶）663nm0.3450.490645nm0.1320.201实验结果与分析水花生（陆生）水花生（水生）a(mg/L)2.8484.433b(mg/L)1.0981.258T(mg/L)3.9465.691叶绿素 a 含量（mg/g 鲜重 ）0.14240.22165叶绿素 b 含量（mg/g 鲜重 ）0.05490.0629叶绿素总含量 （mg/g 鲜重 ）0.19730.85065珊瑚树（新叶）珊瑚树（成熟叶）a(mg/L)4.0265.682b(mg/L)1.4082.310T(mg/L)5.4347.992叶绿素 a 含量（mg/g 鲜重 ）0.20130.2841叶绿素 b 含量（mg/g 鲜重 ）0.07040.1155叶绿素总含量 （mg/g 鲜重 ）0.27170.3996分析水生植物比陆生植物叶绿素含量高 成熟的叶子比幼嫩的叶子叶绿素含量高 植物叶绿素 a 比叶