八氯苯乙烯、多溴联苯醚等多卤代有机污染物的半抗原合成及免疫分析

1、八氯苯乙烯、 多溴联苯醚等多卤代有机污染物的半抗原合成及免疫分析随着环境污染的日益严重 , 许多新型的多卤代有机污染物不断被报道和检测 出来。八氯苯乙烯（OCS）多溴联苯醚（PBDEs和三（2,3-二溴丙基）异氰酸酯（TBC） 都是具有持久性、耐光耐热、生物累积性的多卤代有机污染物 , 并能对周边环境 和人体健康构成危害。由于缺乏相应的半抗原和抗体 , 目前对这三种有机污染物 的检测分析仍依赖于常规的仪器分析方法。因此本论文针对这三种多卤代有机污染物的结构特点 , 设计与合成了多种半 抗原化合物 , 为后续的免疫分析奠定了物质基础；同时本文还通过动物免疫实验 获取了八氯苯乙烯的多克隆抗体 ,

2、并建立了能选择性识别八氯苯乙烯的酶联免疫 分析方法。本论文的主要内容如下： 1. 通过对八氯苯乙烯进行结构分析 , 设计了 两条合成路线来合成保留不同特征结构的八氯苯乙烯半抗原。 第一条合成路线是 以五氯硝基苯为原料 , 通过还原、重氮化、 Sonogashira 等多步反应 , 制备了含醇 羟基和烯丙基溴的前驱体化合物 4 和 5, 继而通过对这两个化合物进行衍生 , 得到 了保留多氯代苯乙烯基结构的八氯苯乙烯半抗原Os1Os6:而第二条合成路线是以间硝基苯甲醛为原料 ,利用亲电加成、消除、硝基还原等反应 ,获得了保留三 氯代乙烯基结构的八氯苯乙烯半抗原 Os7和Os8所有的八氯苯乙烯半抗原

3、前驱体和目标化合物 ,均进行了 1 HNM、R 1 3C NMR 和MS表征,并得到了结构确认2.第三章的主要研究内容是建立八氯苯乙烯的酶 联免疫分析方法。作者首先筛选出了三种八氯苯乙烯半抗原 , 并通过活性酯法制 备了人工抗原 , 然后对新西兰大白兔进行免疫实验以获取相应的多克隆抗体；继 而经过对抗体和包被原的筛选以及免疫方法的条件优化 , 最终建立了能选择性检 测八氯苯乙烯的间接竞争ELISA分析方法。在此基础上，再利用所建立的酶联免 疫分析方法 , 不仅对不同浓度的八氯苯乙烯标准液和多种干扰物进行了检测分析 而且对不同样品体系的加标回收率进行了考察 ,同时还将回收率结果与气相分析 进行了

4、比较。3. 第四章中主要讨论了多溴联苯醚半抗原的设计与合成。 作者首先利用亲电 取代反应和重氮化反应合成了多种多溴代酚化合物,然后通过Chan-Lam偶联反 应,将多溴代酚与化合物 26进行偶联, 得到了相应的二苯基醚化合物； 再进-步通 过脱保护和溴素的亲电取代反应 , 制备了含酚羟基的半抗原前驱体；最后通过 Williamson 成醚反应、 水解或氧化等反应 , 获得了多种含脂肪羧基和不同连接臂 的PBDEs半抗原分子。这些PBDEs半抗原都通过了结构表征，而且都很好的保留 了多溴联苯醚的结构特点。4. 第五章阐述了 TBC半抗原的设计与合成。本项研究是通过以2,4,6-三（烯 丙氧基）-1,3,5-三嗪为原料，利用Claisen重排反应及与NaOH勺成盐反应制得了 重要中间体化合物 33。再通过以 2-溴乙酸乙酯 （4- 溴丁酸乙酯或 6-溴己酸乙酯 ） 为原料, 经过亲核取代反应、溴化加成及盐酸的酸性水解反应 ,成功合成了含有脂 肪羧基功能基及不同连接臂的TBC半抗原化合物；而含有脂肪氨基的TBC半抗原 是通过 Gabriel 氨基合成法来获得的。含芳香羧基和芳香胺基的TBC半抗原则是分别以对羟基苯甲醛、对羟基苯甲 酸叔丁基酯或对硝基苯酚为原料 , 经过多步反应后 , 最终利用了醛基的氧化反应、 叔丁基酯的脱保护反应或硝基