霉菌毒素检测方法综述

1、霉菌毒素检测方法综述| 丁产生藩素的霉菌无处不在，以及我们对大多数有利丁霉菌生长和霉菌湃素产生的条件控制不 力，造成食品和饲料的霉菌毒索污染问题越来越成为现代农业生产中不可忽视的重大难题。在各种农产 品上生长着的备种各样的霉菌，这些霉菌都能产生霉菌毒索，霉菌离素是有毒的化合物，有些甚至是致 癌的。霉菌毒素有很多种(CAST, 2003),包括黄曲霉無素,主要是黄曲霉無素B1和Ml (Aflatoxins. FBI、 FM1):赭(棕)曲霉毒素A (OchratoxinA, OA)；杂色(柄)曲霉藩素(Terigmatocystin):展青霉素 (Patulin, PTL):玉米赤霉烯丽(Zea

2、ralenone, ZEN(F_2);串珠镰刀菌索(Moniliformin, MF) 三硝基丙 酸以及屈丁单端砲霉烯族化合物(Trichothecenes)的T2蒋索(T-2toxin, T2)；脱氧雪腐镰刀菌烯醇 (呕吐毒索)(Deoxynivalenol, DOX):二乙酰镶草镰刀菌烯醇(Diacetoxyscirpenol. DAS)等。联合国粮农组织在近期的报道中指出，全世界至少99个国家，占世界人口的87%,针对粮 食和饲料的霉菌毒索污染问题都有相关的规定。任未来的几年里，与不断变化的全球气候有关的气-象突 发事件的增多将进一步向我们提出挑战。霉菌离索污染给伶品企业、粮汕加工企业、

3、畜禽养殖场以及饲 料的加工企业造成了巨大的经济损失。口前霉菌毒素检测常用的方法如卜几种：一、薄层层析法：TLC法是针对不同的样品，用适宜的提取溶剂将霉菌奇素从样品中提取出來，经柱层析净化，再在薄 层板上层析展开、分离，利用霉菌毒索的荧光性，根据荧光斑点的强弱与标准比较测定其最低含虽。TLC 法样品前处理繁琐，且提取和净化效果不够理想，提取液中杂质较多，在展开时购响斑点的荧光强度。二、色谱法：色谱法，包括薄层色谱、气相色谱、液相色谱等，一直是最重要的霉菌离素的化学分析方法。现在 比较普遍的霉菌湃素的分析方法还是液相色谱法，包括液相色谱-质谱联用技术。该法快速而准确，但需 耍昂贵的仪器设备，仅限丁

4、专业检测机构获得科研和调査分析、监测使用，未能在企业及基层广泛推广 使用，而且其结果的滞后效应大大降低了对生产实际的指导效果。三、免疫化学检测法：(胶体金免疫层析法，酸联免疫吸附法)免疫学检测方法是基于抗体与抗原或半抗原之间的选择性反应而建立起來的一种生物化学分析法。 通常具有高的选择性和很低的检出限，广泛用丁各种抗原、半抗或抗体的测定，一般可分为荧光免疫法、 发光免疫法、免疫法及电化学免疫法等非放射免疫法和放射免疫法，其中在饲料霉菌毒素检测中应用较 广的上要是酶联免疫吸附法(ELISA)和胶体金免疫层析法。免疫学检测方法山于其快速、灵敏、准确、可定虽、操作简便、无需贵重仪器设备，且对样品纯度

5、 要求不高等特性，特别适用于饲料厂、粮油/食品加工厂、养殖场等企业进疔原料或成品的检测以及工商 质监部门现场检测C 该类方法有以卜特点：1）灵敏度高2）干扰小：抗体抗原的免疫反应特异性很强，结构类似物、荧光物质、有色物质对检测的干扰很小。3）操作简便快捷：山丁特异性强，简化了样品的预处理和提取纯化过程，同时操作步骤也非常简便，测 定时间也短。4）安全性高，污染少，成本低廉：不需要昂贵的测定仪器，所用试剂也相对较少，特别是因为灵敏度高, 毒索标准品的浓度可以很低，减少了对检测人员和坏境的潜在危害和污染。几种检测霉菌毒素方法特点对比表常用方法薄层层析法色谱法胶体金免疫层析法酶联免疫吸附法检测操作繁

6、琐繁琐简单简单是否定量口测半定盘定量定性疋SL敏感性差高高高提取效率仪器设备mt I-设备昂贵简单设备简单设备样本前处理几种霉菌毒素快速检测方法对比方法名称优点局限性适用单位胶体金快 捷型一直 接法1、简便快速，5分钟出结果2、样品处理时间非常短3、携带方便，适用基层4、可以单个样品逐一检测，不需 耍做曲线5、无需复杂设备和专业知识，操 作人员5分钟即可学会，即学即用6、室温保存，保存期长1、定性检测，只判断超不超标，不 给具体数据2、检测样品范围较窄,不能测含油 较多的样品3、用丁提取的溶剂为甲醇，有一定 的毒性4、检测高灵敏度时稳定性弱于胶体 金精准型a. 饲料生产加工企业b. 粮食谷物粗

7、加工企业C.工商质监部门用丁快速筛查 d畜禽养殖户自査胶体金精 准型一萃 取复溶法1、与HPLC法对照，准确性非常好, 有权威检测中心验证报告2、检测样品范围非常广，凡是町 能污染霉菌再素的样品（包括油 类），均可用于检测3、整个操作过程所使用的试剂均 无藩无害4、样木中毒素提取回收率高且稳 定5、样品木身颜色对检测结果影响 小6、可以通过调整稀释倍数准确地 检测多个浓度梯度，可实现半定虽 检测7、操作较简单，一般操作人员半 小时即可学会，即学即用8、室温保存，保存期长1、定性检测，只判断超不超标，不 给具体数据2、操作时间比快捷型长3、操作步骤多丁快捷型4、一张试纸只能测一份样品a. 粮油制

8、品生产加工企业b. 食品加工贸易企业C.吞料调味品生产加工企业d. 食用油生产企业e. 国家/省市县级粮汕监督检测 中心（站）f. 工商质监部门用丁市场快速 筛査g. 饲料生产加工企业h. 其他需检测霉菌毒素的行业酶联免疫 试剂盒 Elisa1、准确定虽:，有权威机构验证报 告2、批虽样品，一次检测3、采用直接竞争法，步骤简单4、灵敏度高于胶体金法，检测范 围广5、检测值基本不受样品底色干扰1、操作较复杂，需要专业人员操作2、保存溫度有限制，保存期一年3、不适合基层现场检测4、检测样品范围较窄，对于含汕较 多的样品，需另行设计样木处理方 法a. 食品相关分析实验室b. 粮油监测检测中心C.有条件的粮油饲料生产加工 企业以上两表对比了各种方法的优缺点以及各种单位最实用的检测方法分析，希望能对关注霉菌潺索的 企业和单位有所帮助，但是同行业也可以从经济成本和样品不同要求出发也有可以找到最适台门L1企业 适用的检测方法。卜表中针对食品和饲料行业中不同的原料推荐了相应的初筛方法：食品行业黄曲霉毒素初筛方法饲料行业黄曲霉毒索初筛方法品名推荐检测方法品名推荐检测方法胶体金快 捷型一-直接检测法胶体金精准型一萃取复溶法酶