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文档简介
1、食用菌栽培与利用实习报告学 校:学 院:专 业:班 级:应用生物科学 2012 级学 号:姓 名:指导教师: 实习时间:2015 年 6月 2日7月22日前言1. 实习目的食用菌是现代生态农业和循环农业的重要组成部分,食用菌的种植和发展受到越来越多的人重视。作为应用生物科学专业学会种植食用菌对于就业有很大帮助。通过本次实习,将食用菌栽培相关技术更好地与实践相结合,亲力亲为,切实提高理论技术的实际应用能力。同时,在实践中巩固专业知识,加深专业知识的 理解,让知识掌握更彻底,技术应用更熟练。2. 实习单位西南林业大学3. 实习地点西南林业大学生命科学学院生科楼4. 实习时间2015年 6月 2日
2、2015年 7 月 22日一、实习内容实训一食用菌形态结构观察本次实验以茶树菇、金顶侧耳、香菇、平菇、双孢蘑菇、金针菇作为实验材料进行观察。通过对食用菌子实体形态特征的观察, 了解和熟悉各种食用菌子实体的类型和特征, 并能根据子实体的外形进行分类。 茶树菇茶 树菇 : 真菌 界真菌门 担子 菌亚门 担子菌纲 伞菌目 粪锈伞科 田头菇属 茶树菇子实体长度: 11.00cm测量统计 菌盖大小(长度): 1.51cm菌柄直径: 0.50cm表皮:半球形,棕褐色,布满细密皱纹,较光滑无黏液,湿润, 无绒毛或鳞片边缘略向内卷曲、平滑菌盖 菌肉:白色,肉质,松软菌褶:白色,圆形,多而细密,与菌柄连接方式为
3、弯生 菌柄:白色至浅褐色,圆柱状,细长,表面光滑,在菌盖上着生方式为中生 菌环:无菌托:无菌幕:无 金顶侧耳金顶侧耳:真菌界真菌门担子菌亚门层菌纲 伞菌目 侧耳科 侧耳属 榆黄蘑 金顶侧耳子实体长度: 8.10cm测量统计 菌盖大小: 3.510cm菌柄直径: 0.60cm表皮:漏斗形,黄色,表面较光滑无黏液,干燥,无绒毛或鳞 片边缘略向内卷曲、平滑菌盖 菌肉:白色,肉质,紧密菌褶:白色,圆形,多而稀疏,与菌柄连接方式为延生菌柄:白色,圆柱状,细短,表面粗糙有绒毛,在菌盖上着生方式为中生 菌环:无菌托:无菌幕:无 金针菇金针菇:真菌界担子菌门 伞菌亚门 伞菌纲伞菌目小皮伞科 小火 焰菌属 金针
4、菇子实体长度: 13.10cm测量统计 菌盖大小(长度): 0.81cm菌柄直径: 0.50cm表皮:半球形,白色,较光滑无黏液,湿润,无绒毛或 鳞片,边缘略向内卷曲、平滑 菌盖 菌肉:白色,肉质,紧密菌褶:白色,圆形,多而细密,与菌柄连接方式为直生菌柄:白色,圆柱状,细长,表面光滑,在菌盖上着生方式为中生 菌环:无 菌托:无菌幕:无 平菇平菇:真菌界担子菌门 伞菌亚门 伞菌纲伞菌目 侧耳科 侧耳属 平菇测量统计子实体长度: 9.00cm 菌盖大小(长度): 7.21cm 菌柄直径: 1.20cm表皮:扇形,灰白色,较光滑无黏液,干燥,无绒毛或鳞片 边缘向内卷曲、平滑菌盖 菌肉:白色,肉质,紧
5、密菌褶:白色,漏斗形,多而稀疏,与菌柄连接方式为延生 菌柄:白色至浅灰色,圆柱状,粗短,表面布满菌褶,在菌盖上着生方式为 侧生菌环:无菌托:无菌幕:无 双孢蘑菇 双孢蘑菇:真菌界真菌门担子菌亚门层菌纲 伞菌目 蘑菇科 蘑菇属 双孢蘑菇子实体长度: 6.40cm测量统计 菌盖大小(长度): 4.71cm菌柄直径: 1.82cm表皮:半球形,白色至灰白色或黄色,光滑无黏液,干燥,无 绒毛或鳞片边缘略向内卷曲、波浪状菌盖 菌肉:白色,肉质,松软菌褶:白色,圆形,多而细密,与菌柄连接方式为弯生菌柄:白色至灰白色,圆柱状,粗短,表面光滑,在菌盖上着生方式为离生 菌环:无菌托:无菌幕:子实体发育早期存在内
6、菌幕 香菇真菌界担子菌门伞菌亚门 伞菌纲 伞菌目 光茸菌科 香菇属 香菇测量统计有鳞片菌盖子实体长度: 5.80cm 菌盖大小(长度): 6.00cm菌柄直径: 1.20cm表皮:半球形,灰褐色,布满细密皱纹,粗糙无黏液,干燥,边缘略向内卷曲、锯齿状菌肉:白色,肉质,松软菌褶:白色,圆形,多而细密,与菌柄连接方式为弯生菌柄:白色至灰白色,圆柱状,粗短,表面粗糙有绒毛,在菌盖上着生方式为偏生菌环:无 菌托:无 菌幕:无实训二 食用菌母种培养基的配制一、实训目的及要求了解高压蒸汽灭菌锅的构造,了解食用菌母种培养基的配方,熟悉高压灭菌锅的使用方法,掌握母种培养基( PDA或 PSA)的配制方法。二、
7、实训器材及准备1. 配制培养基材料 马铃薯、葡萄糖(或蔗糖)、琼脂、水等。2. 仪器用具 高压蒸汽灭菌锅(手提式或立式)、可调式电炉、铝锅(20cm)、刀、量杯、纱布、漏斗(带胶管和玻璃管) 、铁夹、漏斗架、 试管( 18mm 180mm或 20mm 200mm)、 1cm厚的长形木条、棉花(未脱脂)、捆扎绳、标签、天平等。三、内容和方法步骤(一)母种培养基( PDA 或 PSA)配方马铃薯 200g,葡萄糖(或蔗糖) 20g,琼脂 1520g,水 1 000ml ,pH 自然。(二)母种培养基配制1. 熬制。先将马铃薯洗净,挖芽去皮,准确称取200g ,然后将马铃薯切成玉米大小的颗粒或薄片。
8、用量杯量取 1 0001 200ml 水于铝锅内煮马铃薯,待水沸后及时2025min,当25马铃薯酥而不烂时, 用双层纱布进行过滤于量杯中, 洗净铝锅滤渣, 将滤液倒回锅中继续以 文火加热,加入葡萄糖(或蔗糖)和琼脂,待琼脂溶化,不断搅拌,以免糊锅,注意补足水 量。2. 分装。将熬制的培养基保持文火,趁热分装。用勺将培养基加入漏斗中,左手握只试管, 右手保持漏斗下面的玻璃管入试管内, 同时放开止水夹, 让培养基逐个流入试管内, 培养基高度约试管长度的 1/61/5 ,约 1015ml 。注意避免培养基沾于试管口内外。分装后 的试管,在培养基凝固前必须立放。3. 制棉塞。用叠放式将未脱脂棉做成棉
9、球,塞入试管口,管口内棉塞底部要求光滑,棉 塞侧面要求无褶皱,棉塞长度的 2/3 在管口内, 1/3 在管口外。棉塞的松紧以手提棉塞轻晃 试管不滑出为度。4. 捆把。以 10 只试管为一捆,用捆扎绳扎紧。贴上标签,准备灭菌。三)培养基的灭菌1. 手提式高压灭菌锅的构造。锅体、提把、压力阀、排气阀、灭菌锅腔、筛架、锅盖、胶垫圈、紧固螺栓等。2. 高压灭菌锅的实用方法。加水灭菌物入锅对称、均匀地扭紧螺栓加热升温压力至 0.5kg/cm 2时, 打开排气阀排除锅内冷空气, 压力降至 0,排气阀有大量热蒸汽冲出时,关闭排气阀继续升温,压力升至1kg/cm2,温度升到 121C 时,开始调火稳压 253
10、0min灭火,自然降压力为 0.5kg/cm 2时,可以慢慢打开排气阀徐徐降压至0(若降压太快,试管中的培养基易沸腾浸湿棉塞) 锅盖半开, 让锅内多余蒸汽逸出,锅内的余热烘干棉塞开盖,取物摆斜面斜面试管上应覆盖洁净的厚毛巾或几层纱布,防止试管内产生过多的冷凝水。实训三 食用菌菌种分离技术、实训目的及要求了解纯菌种性状的优劣对食用菌产量高低和品质好坏影响的重要性,掌握食用菌母种制作技术,学会母种的分离方法。、实训器材及准备斜面培养基,三角瓶培养基,平菇种菇,接种箱,酒精灯,接种针,接种铲,镊子,剪刀或刀片,金属丝等。三、内容和方法步骤食用菌菌种分离及鲍鱼菇母种扩大培养本次实验从市场上选取香菇、平
11、菇、茶树菇、金顶侧耳作为食用菌菌种分离 材料,以鲍鱼菇菌种作为栽培菌种 种菇的选择 从产量高、涨势好、适应性强、无杂菌、无病虫害的群体中选择菇形正、 朵大、菌盖厚实、生长健壮、八成熟的子实体作为分离材料。种菇应该 保持固体洁净,备用。 接种前准备 接种前,用 75酒精擦拭超净工作台台面, 将培养基、 接种环、酒精灯、 镊子等放入超净工作台内,放下玻璃挡板,打开工作台紫外灯及接种间 紫外灯,杀菌 30min,完成后关闭紫外灯,打开超净工作台风扇及微开 超净工作台的玻璃挡板,通风 20min 后,即可进行无菌操作,无菌操作 前先用酒精棉球擦拭双手至肘部,点燃酒精灯。 菌种分离方法a. 组织分离法
12、操作前先用 75%的酒精棉球擦菇体表面进行消毒,在接种箱内将菇 体撕开,在酒精灯前用消毒镊子、剪刀或刀片在菌盖与菌柄交界处 的组织上取一小块(绿豆大小)移至试管斜面培养基或平板培养基 的适当位置,迅速盖上棉塞或微开的培养皿皿盖,贴好标签。每组 接种 4 支斜面培养基和 3个平板(香菇、茶树菇、金顶侧耳)。b. 孢子分离法操作前先用 75%的酒精棉球擦菇体表面进行消毒,在接种箱内将菇 体撕开,在酒精灯前用消毒镊子撕取一片菌褶总长 1/3 长度的菌褶以 侧面贴于培养名皿盖水珠上,迅速盖上盖子,贴上标签。每组准备 一个平板(平菇)。c. 培养 试管捆扎后用保鲜袋装好,培养皿直接用保鲜袋装好即可,将接
13、种 的培养基置于 25恒温培养箱内培养 7-8 天,即可转管扩大繁殖成 母种或进行菌丝体形态特征观察。 鲍鱼菇母种扩大培养超净工作台内,右手持洁净接种环, 蘸取少量 75酒精于酒精灯火焰上灼烧, 冷却后,挑取少量菌体。 左手持待接种试管, 将管口于酒精灯火焰上迅速旋转灼 烧片刻,用小拇指打开塞子并迅速旋转灼烧后离开, 右手迅速将挑取的菌体放入 试管底部培养基表面轻轻涂抹 5s 左右,从底部至试管口画一条波浪线,盖紧塞 子实训四 食用菌菌丝的观察一、实训目的及要求观察食用菌菌丝体的生长状况, 利用显微镜认识食用菌的营养体和繁殖体的微观结构, 利 用徒手切片观察食用菌子实体的微观结构。二、实训准备
14、1. 材料 平菇,香菇,双孢蘑菇,草菇,金针菇,金顶侧耳等食用菌子实体活标。2.仪器工具光学显微镜( 100600 倍),接种针,无菌水,石碳酸复红,美蓝,酒精灯,75%酒精,火柴,载玻片,盖玻片,刀片,培养皿,绘图纸,铅笔等。三、内容和方法步骤(一)菌丝体形态特征观察1、菌丝体宏观形态观察观察平菇,香菇,双包蘑菇,金针菇等食用菌的试管斜面菌种或PDA平板上生长的菌落,比较其气生菌丝体的生长状态,并观察菌落表面是否产生无性孢子。观察菌丝体的特殊分化组织,蘑菇柄基部的菌丝束。2、菌丝体微观形态的观察菌丝水浸片的制作, 取一载玻片, 滴一滴无菌水在载玻片中央, 用接种针挑取少量的平菇 菌丝于盖玻片
15、上,用两根接种针将菌丝体播散,盖上盖玻片,避免气泡产生。显微观察,将水玻片置于显微镜下,先用十倍的物镜观察菌丝体的分支状态,然后转到40 倍的物镜下仔细观察菌丝体的细胞结构等特征,并确认有无锁状联合出现。1、菌丝体形态特征观察本次实验选取香菇、茶树菇、平菇、鲍鱼菇作为观察材料 菌丝体宏观形态观察a.接种后第四天香菇正面白色、反面灰白色, 绒毛状,无病变,稀疏, 由中心向四周不规则辐射 生长,初期生长较慢,培 养基内无污染、无色素茶树菇正面白色、反面灰白色至 浅黄色,绒毛状,无病变, 稀疏,由中心向四周不规 则辐射生长,初期生长较 慢,培养基内无污染、无 色素b.接种后第七天鲍鱼菇 正面白色,绒
16、毛状,无病 变,部分稀疏或致密,分 布不均匀,由中心向四周 不规则辐射生长,初期生 长较慢,培养基内无污染、 无色素平菇正面白色、反面白色,绒 毛状,无病变,稀疏,由 中心向四周不规则辐射生 长,初期生长较慢,培养 基内无孢子弹射且无菌丝 分布、无污染、无色素b.接种后第七天第七天,平菇斜面出现污染,舍弃。 茶树菇与香菇长势良好,菌丝正面白 色,绒毛状,无病变,致密,分布较 为均匀,菌丝布满斜面,出现爬壁现 象,生长较快,培养基内无污染、无 色素鲍鱼菇 长势良好,菌丝正面白 色,反面颜色变深, 绒毛 状,无病变,致密,分布 较为均匀,菌丝布满斜 面,出现爬壁现象, 菌丝 顶端生长较快, 出现黑
17、色 颗粒状的担孢子, 培养基 内无污染、无色素 菌丝体微观形态观察a.菌丝水浸片的制作取一载玻片,第一滴无菌水与载玻片中央, 用接种针挑取少量菌丝于水滴中, 用两根接种针将菌丝拨散 (或是剪一小块透明胶布于粘胶端轻轻接触菌丝顶 端,用洁净镊子放入水滴中)。盖上盖玻片,避免产生气泡。b.显微观察将水浸片置于显微镜的载物台上,先用 10 倍的物镜观察菌丝的分支状态, 然后转到 40 倍的物镜下面仔细观察菌丝的细胞结构等特征,并辨认有无菌 丝锁状联合的痕迹。菌丝较密,细长,出现多细胞分支,管状,不规则,无色透明,细胞核双核不 明显,有横隔膜将菌丝隔成多个细胞。 菌丝尖端出现锁状联合独有的喙状突起,突
18、起处有明显的细胞核。实训五 食用菌原种和栽培种制作一、实训目的及要求了解原种及栽培种常用培养基的种类, 掌握食用菌原种及栽培种培养基的配制方法及消 毒灭菌方法,学会菌种的接种技术。二、实训器材及准备1. 材料 :棉籽壳,杂木屑,酒精,麦麸,蔗糖,石膏粉,过磷酸钙。2. 器具 :菌种瓶,棉塞,打孔棒,标签,立式高压蒸汽灭菌锅,接种箱,接 种用具。三、内容和方法步骤原种的生产是由母种移接入原种培养基, 经培养而成, 原种也称二级种。 栽 培种是由原种移接入栽培种培养基, 经培养而成, 故称三级种。 两者生产程序是 相同的,即培养基的配制装瓶灭菌接种适温培养。(一)培养基 的配制1. 常用培养基有以
19、下几种配方(1)谷粒培养基。 谷粒 98,石膏粉 1,过磷酸钙 1,制作时先将谷 粒洗净,浸泡 48h,放入锅内水煮 20min,使谷粒吸足水分,但不煮开花为度。 然后捞出,稍冷后加入 1石膏粉和 1过磷酸钙,即可装瓶。(2)棉籽壳 80,杂木屑 17,蔗糖 1,石膏粉 1,过磷酸钙 2按比 例称取原料,将棉籽壳用 2石灰水浸泡 26h,捞起虑水后, 将各种原料混匀; 边加水边检查培养料的含水量直至用手捏培养料时,指缝略有水渗出不滴为度, 培养料不宜过湿或过干。(3)木屑 77,麦麸 20,蔗糖 1,石膏粉 1%,过磷酸钙 1%。(4)酒糟 63%,麸皮 15%,木屑 20%,石膏粉 1%,过
20、磷酸钙 1%。以上培养料拌料时,应掌握“均匀,湿透”的原则,其含水量调至 60%65% 为宜。手测方法如前。配方(1)多用于原种制作, 谷粒是指麦粒, 稻谷粒,玉米粒等总称 ; 配方(2) ( 3)( 4)多用于栽培种制作2. 培养基 的配制:(1)称料:先称主料后称辅料。(2)拌料:先将难溶于水的辅料与主料拌匀再讲易容于水的辅料溶于水中制 成母液每次加水均从母液中取水边加水边搅拌, 直至将培养料含水量调至 65%为 宜。(3)调节 pH 值.( 4)装瓶:培养料搅拌好后就可装瓶边装边震荡料装瓶肩处,再用手指或工 具将料面压实压平,用打孔棒从中间由上至下打一通气孔。然后清洁瓶口内外。 塞上棉塞
21、。3. 灭菌若采用高压蒸汽灭菌则标准为 1.5kg/cm2,120 , 12h。如果采用高压蒸汽 灭菌,其标准为 100下 810h。(二)接种将已灭菌的培养料瓶移入事先消毒过的接种箱内 . 母种管 , 用具及手套进行 消毒. 等培养料温降至 25左右时 ,按无菌操作方法进行接种 ,用接种铲取菌种 一块放入种瓶内培养料的孔隙边 .并使菌丝粘连在培养料上 ,塞上棉塞 ,贴上标签 , 注明菌种名称和接种日期 .(三)适温培养接种后,将种瓶置于适温下培养 , 菌种并行除放时 ,应直放于床架上 , 当菌丝 吃料后可将其横放 .经常检查 ,淘汰污染种瓶 .一般 2535h 左右菌丝可长满菌种 瓶。培养成
22、的原种和栽培种,菌丝浓白健壮,菌丝紧贴瓶壁不干缩。生命力强,具有一定清香味。无任何杂菌污染实训六 平菇生料栽培技术、实训目的及要求学会生料栽培食用菌的基本技术及管理方法。、实训器材及准备1原料稻草麸皮、木屑、石膏粉、过磷酸钙、石灰粉。2.用具菇床或竹筐、钢刀、铁锹、农用薄膜等。3.菌种平菇栽培种。三、方法步骤3、平菇(鲍鱼菇)熟料栽培木屑90%麸皮5%玉米芯3%石膏粉1%糖1%水65%培养基配方:25kg拌料剔除木屑中混杂的木块,按配方称取 25kg 培养料所需成分:木屑 22.5kg、麸皮 1.25kg、玉米芯 0.75kg、石膏粉 0.25kg、糖 0.25kg、水 16.25kg。 取少
23、量已称量好的水,将石膏粉及糖加入溶解。木屑、麸皮、玉米芯拌 匀后泼洒溶有石膏粉及糖的水溶液(或将料堆围城一水塘加入石膏粉及 糖的水溶液),拌匀,之后加入剩余的水,再次拌匀 3 次以上。装料 拌料完成后,用洁净的培养瓶装料,培养料装入瓶中不宜有空隙,不宜 太疏松或是太紧,不可超过培养瓶螺纹瓶口。之后用锥形木棒于培养料 中央捣一孔,封口膜封口,棉线系紧。 灭菌所有培养基放入高压蒸汽灭菌锅里, 0.147MPa(1.5kgf/cm2)条件下灭菌 2h。灭菌完成,取出,自然冷却后即可接种。 播种 两人或三人配合,左手持菌种试管,右手持洁净接种针,接种针蘸取少 量 75酒精于酒精灯火焰上灼烧。冷却后,左手所持菌种试管迅速靠近 酒精灯火焰,将管口于酒精灯火焰上迅速旋转灼烧片刻,用小拇指打开 塞子并迅速旋转灼烧后离开, 右手接种针迅速挖取一块约 1cm3 菌体放入 另一同学酒精灯火焰前已经打开的培养瓶内,并迅速覆上封口膜,棉线 系紧,贴好标签。每组播种四瓶。 发菌期管理 播种后的
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