基因工程基础知识填空

1、专题一基因工程1. 1 DNA重组技术的基本工具生物选修三专题一基因工程高三复习-第5页共6页一、基因工程的基本概念1概念：基因工程是指按照人们的愿望，进 行严格的设计，并通过 和 等技术，赋予生物以新的 ，从而创造出更符合人们需要的 新的禾廿 。由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工 的，因此又叫做 。2. 基本原理：3. 理论基础(1) 不同生物的基因可以拼接的结构基础一细胞生物的遗传物质都是 ，都是以为基本单位构成的双链大分子。(2) 目的基因转入后可以表达的基础一一所有生物共用一套 。(3) 生物遗传信息的表达都遵循 4. 优点(1) 目的性强，能 的改造生物的性状。(2) 克

2、服的障碍。二、限制性核酸内切酶-一分子手术刀1.简称：。2.来源：主要是从中分离纯化而来。3. 功能特点：特异性，即识别双链DNA分子某种特定 ，并且使每一条链中 的两个核苷酸之间的断开。4. 酶切结果： 末端和 末端。画出EcoR I酶切后的结果：GAATTCCTTAAG三、DNA连接酶一一“分子缝合针”1. 作用实质：将双链 DNA片段“缝合”起来，恢复被限制酶切开了的两个核苷酸之间的。2. 作用前提：两个DNA分子必须含有3. 种类(1) E coli DNA 连接酶 来源： 功能：只能连接 T 4DNA连接酶 来源： 功能：既可以连接 ,又可以连接，但连接时效率比较低。【拓展】 比较D

3、NA连接酶与DNA聚合酶DNA 连接酶| DNA 聚合酶作用 实质都是催化两个核苷酸之间形成是否 需模板连接DNA链链链作用 过程在两个DNA 片段之间形成将加到已存在的核苷 酸链上，形成作用 结果将两个DNA片段连接成合成四、基因进入受体细胞的载体一一“分子运 输车”1. 基因工程中最常用的载体一一 (1) 来源：等微生物(2) 结构：裸露的、结构简单、独立于 之外，并具有 的分子。2. 基因的载体必须具备的条件 有 个限制酶切割位点，供外源DNA片段（基因）插入其中。能在宿主细胞内 ，或整合到染色体DNA上，随染色体DNA进行（3）有特殊的 ，如四环素抗性基因等，供重组 DNA的鉴定和选择

4、。（4）必须是的，不会对受体细胞有害。（5）适合，以便提取和在体外进行操作。3. 载体的种类：除质粒外，还有4. 在进行基因工程操作中，真正被用作载体的质粒，都是在天然质粒的基础上进行过的。1. 2基因工程的基本操作程序一、基因工程的基本操作程序1. 的获取。2. 的构建。3. 将目的基因 。4. 目的基因的 。二、目的基因的获取1. 目的基因主要是的结构基因。2 .获取目的基因的方法（1）从基因文库中获取目的基因基因文库概念：将含有某种生物不同基因 的许多 ,导入的群体中储存，各个 分别含有这种生物的不同的基因，称为基因文库。基因文库分类：可分为 文库和 文库（如cDNA文库）。 利用PCR

5、技术扩增目的基因PCR技术是的缩写。PCR是一项在生物体外 的核酸合成技术。PCR技术的原理：DNA 的。 PCR扩增的前提：要有一段已知目的基 因的 ,以便根据这一序列合成引物。 PCR扩增的条件：、（目的基因）,原料 （ 即dCTP、dATP、dGTP、dTTP），耐高温的 酶（Taq 酶）。 PCR扩增的过程a. 变性：加热到90-95 C, DNA受热变性后b. 复性（退火）：冷却到55-60 C, 与结合c. 延伸：加热到70-75 C ,在热稳定的 （Taq 酶）的作用下进行延伸 结果：目的基因以 _ 的方式成指数形式 扩增。人工合成法：如果基因比较,且 ,可以通过用化学方 法直接

6、人工合成。【拓展】PCR技术和DNA复制的比较PCR技术DNA复制相 同 占 八、原理原料条件、 、不 同 占 八、解旋解旋催化场所复制酶热稳定的DNA聚合酶细胞内含有的DNA聚合酶结果在短时间内形 成形成三、基因表达载体的构建基因表达载体的构建是实施基因工程的第二步，也是基因工程的 1. 基因表达载体构建目的：使目的基因在受体细胞中 ,并且可以给下一代，同时，使目的基因能够。2. 基因表达载体的组成：除了目的基因外，还必须有等。启动子：位于目的基因的,是一段有特殊结构的 DNA 序列，是 识别和结合的部位，有了它 才能驱动基因转录出 mRNA ，最终获得所需 的蛋白质，即转录开始的部位。(2

7、) 终止子：位于目的基因的 ，也是一段有特殊结构的 DNA序列，使转录在所需 的地方停止下来，即转录停止的部位。(3) 标记基因：用于鉴别受体细胞中是否 ，从而将含有目的基因的细胞 出来，常为 ，如氨 苄青霉素抗性基因、四环素抗性基因。10戰工伍3 表达载体构建过程中，获取目的基因与切割质粒时一般用限制性核酸内切酶，目的是产生相同的 ，以便于连接。四、将目的基因导入受体细胞 的概念：目的基因进入受体细胞内, 并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程， 称为。1. 将目的基因导入植物细胞分泌大量的 ，吸引农杆菌移向这些细胞，这时农杆菌中的 上的(可转移的 DNA)可转移到受体细 胞染色体的DNA上。

8、转化过程：将插入到 上，通过农杆菌的转化作用， 可以使目的基因进入植物细胞，并将其插入 到植物细胞中染色体的 DNA，使目的基因的 遗传特性得以 。SI I!2. 将目的基因导入动物细胞(1) 常用受体细胞：。(2) 常用方法： 。(3) 基本操作程序： 含有目的基因的表达载体t (受精卵)tt胚胎移植t新性状动物3. 将目的基因导入微生物细胞(1)常用受体细胞： 细胞，其中最为广泛。(2) 原核生物的特点： ;多为单细胞；遗传物质相对 (3) 转化方法： 法。(4) 转化过程 用 处理受体细胞(如大肠杆菌)，使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA 分子的生理状态，这种细胞称为(1)常用受体细胞

9、：植物的 或。(2)方法：法、法、法，其中，法是导入植物细胞最常用的方法。农杆菌特点：易感染双子叶植物和裸子植 物。当植物体受到伤害是，伤口处的细胞会将重组表达载体 DNA分子溶于中与 混合，在一定 下促进 吸收DNA分子，完成转化过程。五、目的基因的检测与鉴定目的基因导入受体细胞是否可以 ,只有通过检测与鉴定才能知道，这是基因工程的第四步，也是检查基因工程是否成功的一步。类型步骤检测内容方法结果显示检测第一步检测转基因生物的染 色体上是否插入了目 的基因（DNA探针+转基因生物 DNA ）是否第二步检测目的基因是否转 录（DNA探针+转基因生物 mRNA ）是否第三步检测目的基因是否翻 译成

10、蛋白质是否水平的检测包括抗虫、抗病的接种实验，以确定是否具有抗性的及抗性程度；基 产品需要与天然产品的功能进行活性比较等?因工程1. 3基因工程的应用一、植物基因工程硕果累累植物基因工程技术主要用于提高农作物的（如抗除草剂、抗虫、抗病、抗干旱和抗盐碱等），以及改良农作物的和利用植物生产 等方面。或设法除去 ， 再结合 ， 培育出没有 的转基因克隆动物器 官。二、动物基因工程前景广阔动物基因工程主要应用于动物品种 、建立、器官移植等多方面。（1）用于提高动物生长速度：将 导入动物体内，以提高动 物生长速率。（2）用于改良畜产品的品质。（3）用转基因动物生产药物：将药用蛋白基因与 的启动子等调控组

11、件重组在一起，通过 等方法，导入哺乳动物的 中，然后，将受精卵送入母体内，使其生长发育成 。转基因动物进人泌乳期后，可以通过分泌的 来生产所需要的药品，称为乳腺（房）生物反应 器。（4）用转基因动物作器官移植的供体： 将器官 供体基因组导入某种调节因子，抑制 三、基因工程在医学、药学上的应用1 基因工程药物：利用“工程菌”生产基因工程药品包括、 工程菌：用基因工程的方法，使外源基因得 到高效率表达的菌类细胞株系一般称为“工 程菌”。2 基因治疗：是把 导入病人体内，使该基因的 发挥功能，从而达到治疗疾病的目的，这是治疗遗传病的最有效的 手段,包括和。补1:用于基因治疗的基因有三种类型:； .补

12、2 :基因诊断。原理：；工具1.4蛋白质工程1. 实质：根据的关系，通过，对现有蛋白质进行改造或创造自然界不存在的蛋白质。2. 基本原理：预期 T设计 T推测 T找到T合成3. 蛋白质工程与基因工程区别蛋白质工程基因工程实 质通过，以定向改造或生产人来需要的蛋白质，甚至是自 然界不存在的蛋白质定向改造生物的遗传特性， 以获得符合人 类需要的生物类型会生物产品结果可以合成自然界的蛋白质只能生产自然界的蛋白质联系蛋白质工程是在基因工程基础上，延伸出的工程办公室卫生管理制度一、主要内容与适用范围1 本制度规定了办公室卫生管理的工作内容和要求及检查与考核。2 此管理制度适用于本公司所有办公室卫生的管理

13、二、定义1 公共区域：包括办公室走道、会议室、卫生间，每天由行政文员进行清扫；2个人区域：包括个人办公桌及办公区域由各部门工作人员每天自行清扫。1. 公共区域环境卫生应做到以下几点：1) 保持公共区域及个人区域地面干净清洁、无污物、污水、浮土，无死角。2) 保持门窗干净、无尘土、玻璃清洁、透明 -3) 保持墙壁清洁，表面无灰尘、污迹。4)保持挂件、画框及其他装饰品表面干净整洁。5) 保持卫生间、洗手池内无污垢，经常保持清洁，毛巾放在固定(或隐蔽)的地方。6) 保持卫生工具用后及时清洁整理，保持清洁、摆放整齐。7)垃圾篓摆放紧靠卫生间并及时清理，无溢满现象。2. 办公用品的卫生管理应做到以下几点

14、：1) 办公桌面：办公桌面只能摆放必需物品，其它物品应放在个人抽屉，暂不需要的物品就摆回柜子里，不用的物品要及时清理掉。2) 办公文件、票据：办公文件、票据等应分类放进文件夹、文件盒中，并整齐的摆放至办公桌左上角上。3)办公小用品如笔、尺、橡皮檫、订书机、启丁器等，应放在办公桌一侧，要从哪取使用完后放到原位。4)电脑：电脑键盘要保持干净，下班或是离开公司前电脑要关机。5)报刊：报刊应摆放到报刊架上，要定时清理过期报刊。第5页共6页8)饮食水机、灯具、打印机、传真机、文具柜等摆放要整齐，保持表面无污垢，无灰尘，蜘蛛网等，办公室内电器线走向要美观，规范，并用护钉固定不可乱搭接临时线。7)新 进设备的包装和报废设备以及不用的杂物应按规定的程序及时予以清除。 3. 个人卫生应注意以下几点：1) 不随地吐痰，不随地乱扔垃圾。2) 下班后要整理办公桌上的用品，放罢整齐。3