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文档简介
1、全自动血细胞分析仪 (三分群) 基础理论 一、血液生理概要 1、血液:血液是由血细胞(红细胞、白细胞、血小板)和血浆组成的 红色、粘稠、不透明、带腥味的混悬液。离体后的血液自然凝固后, 分离出来的淡黄色液体称为血清,血液加抗凝剂后分离出来的淡黄色 液体称为血浆。 2、血液的组成: 3、血液的功能: 运输功能:气体、营养物质、代谢产物等 协调功能:激素、酶类 维护机体内环境稳定:pH、温度 防御功能:止血、抗微生物、免疫反应等 4、白细胞 (1)人体外周血中的白细胞包括粒细胞、单核细胞和淋巴细胞,根据粒 细胞胞浆中所含的特殊颗粒,将粒细胞分为中性粒细胞、嗜酸性粒细 胞和嗜碱性粒细胞。白细胞的主要
2、功能是通过不同的方式和机制消灭 病原体,消除过敏原及参与免疫反应、产生抗体,是机体抵御病原微 生物等异物的主要防线。 (2)白细胞的生理 (3)参考值范围 白细胞计数:成人:(410)109/L 新生儿:(1520)109/L 白细胞分类计数: 百分率(%) 绝对值(109/L ) 淋巴细胞 2040 (0.84) 单核细胞 38 (0.120.8) 中性粒细胞 5070 (27) 嗜酸性粒细胞 0.55 (0.020.5) 嗜碱性粒细胞 01 (01) 5、红细胞: (1)红细胞检测的主要临床意义是用于贫血的诊断和治疗。正常的成熟红 细胞形态为双凹圆盘状,细胞大小一致,平均直径7.2m,厚度
3、约2m,淡 粉红色,中央1/3为生理淡染区,胞质内无异常结构。在各种贫血时,红细 胞可出现大小不一。凡直径10m者称为大红细胞, 15m者称为巨红细 胞,常见于巨幼细胞性贫血、肝脏疾病等;直径6m者称为小红细胞,多 见于缺铁性贫血等疾病。 (2)红细胞生理:红细胞是血液中数量最多的有形成分,成熟红细胞的平 均寿命约120d,衰老红细胞主要在脾破坏,分解为铁、珠蛋白和胆红素。 (3)红细胞的功能:交换和携带气体。通过胞内血红蛋白来实现。 (4)参考值范围:女性:(3.55.0)1012/L 男性:(4.05.5)1012/L 新生儿:(6.07.0)1012/L 6、血红蛋白 (1)血红蛋白是成
4、熟红细胞的主要成分,是一种微红色的胶体物质,是呼 吸载体,每克血红蛋白可携带氧1.34ml。血红蛋白约65%合成于有核红细 胞,35%合成于网织红细胞。正常血红蛋白由珠蛋白与亚铁血红素组成。 (2)参考范围:女性:110150g/L 男性:120170g/L 新生儿:170200g/L 7、血小板 (1)骨髓中的骨髓造血干细胞分化成巨核细胞后,其胞浆裂解剥落即形 成血小板。全身约有1/3的血小板滞留于脾脏细胞间,这种现象称“脾 池化”,脾池内的血小板与循环中的血小板可互换。初生成的血小板 体积较大,黏着力强,易于聚集和发生释放反应,有很强的止血和凝 血功能,在循环血液中只有出生成的血小板有止血
5、功能,且只能维持 2d。血小板一部分在发挥其生理功能时解体,另一部分血小板衰老后 在脾脏、肝脏、骨髓单核-巨噬细胞系统中破坏。 (2)参考范围:(100300)109/L 8、血液标本的采集 (1)静脉采血法 部位:主要是肘静脉。其次:手背部、手腕部等静脉,幼儿可采用颈 外静脉采血。 采血器材:一次性注射器,检验用真空定量采血装置。 采血步骤及注意事项(略) (2)毛细血管采血法 部位:左手无名指指尖内侧。婴幼儿可采拇指或足跟内侧,特殊人员 视情况而定。 采血器材:一次性采血针、微量吸管 采血步骤及注意事项(略) 9、血液标本的保存 标本若不能及时检测或需要保留以备复查时,应在室温保存。抗凝
6、血在室温下,WBC、RBC、PLT可稳定24h,白细胞分类可稳定6-8h,血 红蛋白可稳定数日,但2h后粒细胞形态即可发生变化,故需做镜下分 类者应及早推制血片。虽然4条件下可延长血液贮存期,但会影响 PLT和MPV值。 二、血液分析仪二、血液分析仪 1、现代血液分析仪特点:自动化程度增高、检测参数增多、精度增高、 速度增快、指控功能强大、智能化程度增高。 2、血液分析仪检测原理: 电阻抗法(库尔特原理)设计基础 光散射法 3、血液分析仪主要功能: 血细胞计数功能 血细胞分类功能 电阻抗法原理(库尔特原理) 1、20世纪50年代初,美国库尔特(Coulter WH)发明并申请了粒子计数 技的设
7、计专利,其原理是根据血细胞非传导性的性质,对电解质溶液 中悬浮颗粒在通过计数小孔时引起的电阻变化进行检测作为基础,来 进行血细胞计数和体积测定。 2、库尔特原理图 细胞计数池中,小孔内外两个电极和稀释液(等渗电解质溶液)构成 一个电流回路,在负压作用下,血细胞通过小孔,电极能感应到一个 瞬间的电压变化,并将其转换成脉冲信号。脉冲大小反映细胞体积, 脉冲的数量代表细胞计数的结果。 3、电阻抗法仪器的主要组成 信号发生器(脉冲检测器) 放大器(把微伏放大为伏级的脉冲信号) 阀值调节(计数不同细胞有不同的阀值) 甄别器(去除假脉冲信号) 整形器(把波形调整为标准一致的平顶波) 计数系统(把不同的脉冲
8、区分成不同细胞并计数) 4、白细胞检测原理 根据电阻抗的原理,经溶血剂处理脱水的不同体积的白细胞(35- 450fL)通过小孔时产生脉冲的大小的明显差异而区分相应的三群细胞 5、红细胞检测原理(注意白细胞增高干扰) (1)稀释血液中含有白细胞,当血液进入红细胞检测通道时,红细胞检 测的各项参数中均含有白细胞因素。正常时,血液红细胞与白细胞的 比列约为(500-750):1,因此,白细胞因素可忽略不计。 (2)当病理情况下,如白血病时,白细胞数明显增高,同时又伴有贫血 时,使所得红细胞参数可产生明显误差。 (3)红细胞其他参数的检测:MCV、MCH、MCHC、HCT、RDW等 6、血红蛋白检测原
9、理(比色原理) 7、血小板检测原理 根据电阻抗法,血小板随红细胞在一个系统中进行检测,在红细胞/血小 板计数池中计数2fL30fL的颗粒为血小板。为了增加血小板准确性,设置了血 小板直方图(浮动界标计数、拟合曲线技术等)。 8、血液分析仪检测参数英文缩写词和中文名称及单位。 英文缩写 中文名称 单位 英文缩写 中文名称 单位 WBC 白细胞计数 109/L MCV 红细胞平均体积 fL Lymph# 淋巴细胞绝对值 109/L MCH 红细胞平均血红蛋白量 pg Mid# 中间细胞绝对值 109/L HCT 血细胞比容/红细胞压积 % Gran# 中性粒细胞绝对值 109/L RDW-SD 红
10、细胞体积分布宽度标准差 fL Lymph% 淋巴细胞百分率 % RDW-CV 红细胞体积分布宽度变异系数 % Mid% 中间细胞百分率 % PLT 血小板计数 109/L Gran% 中性粒细胞百分率 % MPV 血小板平均体积 fL RBC 红细胞计数 1012/L PCT 血小板比容/血小板压积 HGB 血红蛋白 g/L PDW 血小板体积分布宽度 % MCHC 红细胞平均血红蛋白浓度 g/L P-LCR 大血小板比率 % 三、血液分析仪的临床应用 1、细胞直方图:细胞体积分布图形,横坐标为细胞体积大小,纵坐标 为不同体积细胞的相对频率(数量)。 (1)白细胞直方图 正常白细胞直方图,在3
11、5450fL范围内将白细胞分为3群,左侧峰 又高又陡为淋巴细胞峰,最右侧又低又宽为中性粒细胞峰,左右两峰 间的谷区较平坦为单核细胞区。 白细胞直方图变化的部分原因 淋巴细胞峰左侧异常:提有核红细胞、血小板聚集、巨大血小板、未溶 解红细胞、疟原虫、冷凝集蛋白、脂类颗粒、异形淋巴细胞 淋巴细胞峰右移,与单核细胞谷左侧相连并抬高:急性淋巴细胞白血病、 慢性淋巴细胞白血病、异形淋巴细胞 单核细胞谷抬高、增宽:原始或幼稚细胞、浆细胞、嗜酸性粒细胞增多、 嗜碱性粒细胞增多、单核细胞增多 单核细胞谷与中性粒细胞峰之间异常:未成熟的中性粒细胞、异常细胞 亚群、嗜酸性粒细胞增多 中性粒细胞峰右移、抬高、增宽:中
12、性粒细胞绝对值增多 直方图多区出现异常:以上多种原因引起 (2)红细胞直方图 正常红细胞直方图,在36360fL范围内分布两个细胞群体,从50 125fL区域有一个两侧对称、较狭窄的曲线,为正常大小的红细胞,从 125200fL区域有另一个低而宽的曲线,为大红细胞、网织红细胞。 当红细胞体积大小发生变化时,峰可左移或右移,或出现双峰。 (3)血小板直方图 正常血小板直方图,在230fL范围内分布,呈左偏态分布,集中分布 于215fL内。当血小板体积增大时,有明显的拖尾现象。小红细胞或 红细胞碎片干扰会出现尾部抬高。 2、检测参数临床意义 (1)白细胞参数 中性粒细胞:病理性增多:急性感染或炎症
13、、广泛组织损伤或坏死、急 性溶血、急性失血、急性中毒、恶性肿瘤等。减少:中性粒细胞绝对 值低于1.5 109/L,称为粒细胞减少症; 低于0.5 109/L时称为粒细 胞缺乏症。病因:病毒感染性疾病、血液系统疾病(再障、某些急性 白血病)、物理化学因素(放射线等)、单核-巨噬细胞系统功能亢进 (门脉性肝硬化)、系统性红斑狼苍、某些自身免疫性疾病、过敏性 休克等 。 淋巴细胞:病理性增多:病毒感染性疾病、再障(相对增多)、淋巴细 胞性白血病、淋巴瘤、组织移植后排斥反应等。减少:主要见于应用 肾上腺皮质激素、烷化剂、抗淋巴细胞球蛋白、接触放射线、免疫缺 陷性疾病、丙种球蛋白缺乏症等。 单核细胞:病
14、理性增多:某些感染(疟疾、黑热病、结核病等)、血液 病(单核细胞白血病、骨髓增生异常综合征等)、急性传染病或急性 感染的恢复期。减少:临床意义不大。 (2)红细胞参数 MCV(fL) MCH(pg) MCHC(g/L) 举 例 正常细胞性贫血 82-95 27-31 320-360 再障、急性失血性贫血、急 性溶血性贫血、白血病等 大细胞性贫血 巨幼红细胞性贫血 单纯小细胞性贫血 慢性感染、炎症、肝病、尿 毒症、恶性肿瘤、风湿性疾 病等所致的贫血 小细胞低色素性贫血 缺铁性贫血、地中海贫血、 铁粒幼细胞性贫血等 MCV RDW 常 见 疾 病 大细胞均一性贫血 增高 正常 部分再障 大细胞非均一性贫血 增高 增高 巨幼红细胞性贫血、免疫溶血性贫血、镰状细胞性贫血 正细胞均一性贫血 正常 正常 急性失血性贫血、慢性病、脾切除 正细胞非均一性贫血 正常 增高 再障、PHN、骨髓纤维化、骨髓发育不良 小细胞均一性贫血 减低 正常 珠蛋白生成障碍性贫血、球形细胞增多症 小细胞非均一性贫血 减低 增高 缺铁性贫血 (3)血小板参数 PLT减少:通常50 109/L ,患者即有自动出血症状。见于:血小板生 成障碍、血小板破坏过多、血小板消耗增多、血小板自身异常、血小板 分布异常(脾大、肝硬化等) PLT增多:慢性粒细胞性白血病、真性红细胞增多症、原发性血小板
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