第七章_三萜及其苷类

1、1 Chemistry of Natural Products 三萜及其苷类三萜及其苷类 （Triterpenoids） 2 基本内容基本内容 u 四环三萜及五环三萜类化合物，如羊毛甾烷型、达四环三萜及五环三萜类化合物，如羊毛甾烷型、达 玛烷型、齐墩果烷型、乌苏烷型的玛烷型、齐墩果烷型、乌苏烷型的基本骨架特征基本骨架特征。 u 三萜类皂苷的三萜类皂苷的提取分离方法提取分离方法，分配色谱，如各种，分配色谱，如各种 中低压反相柱色谱、高压液相色谱（中低压反相柱色谱、高压液相色谱（HPLCHPLC）等。）等。 u 三萜皂苷类结构研究中的三萜皂苷类结构研究中的苷键裂解苷键裂解，三萜类化合物，三萜类化合

2、物 的的MSMS及及NMRNMR谱的特征谱的特征。 3 基本要求基本要求 掌握掌握 四环三萜和五环三萜的结构特征，分类；三萜四环三萜和五环三萜的结构特征，分类；三萜 类化合物类化合物MSMS及及NMRNMR谱的特征谱的特征 熟悉熟悉 三萜类化合物的提取分离方法。三萜类化合物的提取分离方法。 4 内内 容容 第一节第一节 概念概念 分类分类第二节第二节 理化性质理化性质第三节第三节 提取分离方法提取分离方法第四节第四节 结构研究方法结构研究方法第五节第五节 5 第一节第一节 概述概述 定义：定义：由由6个异戊二烯单位组成的个异戊二烯单位组成的 30个碳原子的个碳原子的 萜类化合物。可以以游离状态

3、或苷的形式存在，萜类化合物。可以以游离状态或苷的形式存在， 其苷类化合物多数可溶于水，其苷类化合物多数可溶于水，水溶液振摇后产生水溶液振摇后产生 似肥皂水溶液样泡沫，似肥皂水溶液样泡沫，故被称为三萜皂苷故被称为三萜皂苷 （triterpenoid saponins）。）。 2.生物活性：生物活性：三萜及其皂苷广泛分布于自然界，具三萜及其皂苷广泛分布于自然界，具 有广泛的生物活性，如有广泛的生物活性，如溶血、抗癌、抗炎、抗菌、溶血、抗癌、抗炎、抗菌、 杀软体动物、抗生育杀软体动物、抗生育等活性。等活性。 6 齐墩果酸齐墩果酸治疗肝炎。治疗肝炎。 甘草次酸甘草次酸琥珀酸半酯的钠盐抗溃疡药。琥珀酸半

4、酯的钠盐抗溃疡药。 具有羧基的三萜和三萜皂苷化合物多具有抗肿瘤活性具有羧基的三萜和三萜皂苷化合物多具有抗肿瘤活性 第一节第一节 概述概述 如：如： HO COOH 齐墩果酸齐墩果酸 COOH H RO H 甘草次酸甘草次酸 皂苷具有表面活性剂的作用稳定剂、洗涤剂和起皂苷具有表面活性剂的作用稳定剂、洗涤剂和起 泡剂。泡剂。 7 3、三萜类化合物的生物合成、三萜类化合物的生物合成 三萜是由三萜是由鲨烯（鲨烯（squalene）经过不同的途径环合而经过不同的途径环合而 成，鲨烯是由倍半萜金合欢醇（成，鲨烯是由倍半萜金合欢醇（farnesol）的焦磷酸）的焦磷酸 酯尾尾缩合而成。酯尾尾缩合而成。 第一

5、节第一节 概述概述 8 OPP OPP HO OH OH HOHO HO HO HO farnesol squalene squalene-hydroxyhopane lanosterol euphollupeol 9 第一节第一节 概述概述 多数三萜为多数三萜为四环三萜四环三萜和和五环三萜五环三萜，也有少数为，也有少数为 链状、单环、双环和三环三萜。近几十年还发现链状、单环、双环和三环三萜。近几十年还发现 了许多由于氧化、环裂解、甲基转位、重排及降了许多由于氧化、环裂解、甲基转位、重排及降 解等而产生的解等而产生的新骨架类型的三萜类化合物新骨架类型的三萜类化合物。 10 内内 容容 第一节第

6、一节 概述概述 分类分类第二节第二节 理化性质理化性质第三节第三节 提取分离方法提取分离方法第四节第四节 结构研究方法结构研究方法第五节第五节 11 第二节第二节 分类分类 四环和五环三萜四环和五环三萜 三萜三萜 无环三萜无环三萜 单环三萜单环三萜 双环和三环三萜双环和三环三萜 12 四环三萜四环三萜 达玛烷型（达玛烷型（dammarane ） 羊毛脂烷型（羊毛脂烷型（Lanostane） 环阿屯烷（环阿屯烷（cycloartane） 甘遂烷（甘遂烷（tirucallane） 葫芦烷（葫芦烷（cucurbitane） 楝烷型（楝烷型（meliacane） 13 a、达玛烷型（、达玛烷型（dam

7、marane ） 结构特点结构特点: 环互为反式稠合，环互为反式稠合， 8、10位为位为-CH3， 13位位-H，17位位-侧链，侧链，C-20构型构型R或或S，3位多有位多有 羟基，或糖苷化。羟基，或糖苷化。 dammarane 第二节第二节 分类分类 1) 四环三萜四环三萜 H H 1 2 3 4 2928 25 24 23 22 20 21 12 14 17 15 9 18 7 11 10 8 13 27 19 30 26 A B C D H 14 如：五加科植物人参中的皂苷如：五加科植物人参中的皂苷 2 glc glc O 6 ginsenoside R 2 6 6 6 46 Ra1

8、-glc ara(p) xyl Ra2 -glc ara(f) xyl Rb1 -glc glc Rb2 -glc ara(p) Rc -glc ara(f) Rd -glc Rg1 -H (20R)20(S)-Protopanaxadiol 3 RO HO 12 20 第二节第二节 分类分类 1) 四环三萜四环三萜 a、达玛烷型（、达玛烷型（dammarane ） 原人参二醇型原人参二醇型 15 ginsenoside R1 R 2 Re glc Rha glc Rf glc glc H (20S) 20(S)-protopanaxatriol 1 3 R2O HO HO OR 12 20

9、五加科植物人参中的皂苷五加科植物人参中的皂苷 第二节第二节 分类分类 原人参三醇型原人参三醇型 16 神农本草经神农本草经列为上品，主列为上品，主 补五脏，安精神，定魂魄，止补五脏，安精神，定魂魄，止 惊悸，明目，开心益智，久服惊悸，明目，开心益智，久服 有轻身延年之功效。有轻身延年之功效。 17 人参皂苷，用缓和条件水解人参皂苷，用缓和条件水解, 如如50%HOAc于于70 加热加热4小时，小时，20位位苷键能断裂，进一步再水解，可使苷键能断裂，进一步再水解，可使3 位苷键裂解。位苷键裂解。 采用采用HCl溶液水解，溶液水解，水解产物中得不到原生的皂苷水解产物中得不到原生的皂苷 元。元。结构

10、发生改变，即结构发生改变，即20（S）-原人参二醇或原人参二醇或20（S） -原人参三醇的原人参三醇的20位上甲基和羟基发生差向异构化，转位上甲基和羟基发生差向异构化，转 变为变为20（R）-原人参二醇或原人参二醇或20（R）-原人参三醇，然原人参三醇，然 后环合生成人参二醇（后环合生成人参二醇（panaxadiol）或人参三醇）或人参三醇 （panaxatriol） 第二节第二节 分类分类 人参皂苷的水解：人参皂苷的水解： 18 OHO 糖 O + H HO HO H+ O 20(s)-protopanaxadiol 20(s)-protopanaxatriol H + 20(R)-prot

11、opanaxadiol 20(R)-protopanaxatriol panaxadiol panaxatriol 20 19 获得原人参皂苷元，须采用缓和酸水解法。获得原人参皂苷元，须采用缓和酸水解法。 人参皂苷人参皂苷 过碘酸钠氧化过碘酸钠氧化 水解水解 四氢硼钠还原四氢硼钠还原 室温下用室温下用2N H2SO4水解；水解； 人参皂苷人参皂苷 室温室温 HCl水解水解 叔丁醇钠叔丁醇钠 消除消除 第二节第二节 分类分类 获得次生人参皂苷元获得次生人参皂苷元 氧化碱解法氧化碱解法：在通氧高温条件下，以醇钠进：在通氧高温条件下，以醇钠进 行碱解反应，可以高收率得到原人参皂苷元。行碱解反应，可以

12、高收率得到原人参皂苷元。 20 IO4- BH4- H+ O O OH glcglc 6 glc glc 2 HO HO OH O OH OH glc glc 2 HO OH O HOAc HCl t -BuO- H+ 20(S)原人参二醇原人参二醇 20(R)次皂苷次皂苷 20(S) 20(R)人参二醇人参二醇 第二节第二节 分类分类 21 b.羊毛脂烷（羊毛脂烷（Lanostane ） A/B、B/C、C/D环均为反式，环均为反式， 10、13 位位 -CH3, 14位位-CH3, C-20为为R构型构型 第二节第二节 分类分类 H H 1 2 3 4 2928 25 24 23 22 2

13、0 21 12 14 17 15 9 18 7 11 10 8 13 27 19 30 26 A B C D H lanostane 22 存在于海洋生物如海参、海星等分离得到的毒鱼存在于海洋生物如海参、海星等分离得到的毒鱼 成分，从名贵药材灵芝当中分离得到成分，从名贵药材灵芝当中分离得到100余个。余个。 O O OH COOH O O O O OH COOH O ganoderic acid C lucidenic acid A 第二节第二节 分类分类 23 野生无柄赤芝野生无柄赤芝 野生平盖灵芝野生平盖灵芝 野生云芝野生云芝 野生紫芝野生紫芝 灵灵 芝芝 24 c.甘遂烷（甘遂烷（tir

14、ucallane） A/B、B/C、C/D环均为反式，环均为反式，13 -CH3 、14位位- CH3， ，C-20为 为-侧链（侧链（20S）。）。 tirucallane 第二节第二节 分类分类 H H 1 2 3 4 2928 25 24 23 22 20 21 12 14 17 15 9 18 7 11 10 8 13 27 19 30 26 A B C D H 25 从藤桔属植物从藤桔属植物 Paramignya monophylla 分得的分得的 成分如下：成分如下： 第二节第二节 分类分类 R1 R2 OH R1=O R2=CH3 R1=-OH R2=CH3 R1=O R2=CH

15、2OH R1=-OH R2=CH2OH 26 d 环阿屯烷（环阿尔廷，环阿屯烷（环阿尔廷，cycloartane） 基本骨架与羊毛脂烷相似，差别：环阿屯基本骨架与羊毛脂烷相似，差别：环阿屯 烷烷19位甲基与位甲基与9位脱氢形成三元环。位脱氢形成三元环。 cycloartane 第二节第二节 分类分类 H 1 2 3 4 2928 25 24 23 22 20 21 12 14 17 15 9 18 7 11 10 8 13 27 19 30 26 A B C D H 27 从中药黄芪当中分离得到的四环三萜多为环阿屯烷型 R1O OR2 OH O OR3 20 24 R1 R2 R3 cyclo

16、astragenol H H H astragaloside I xyl(2,3-diAc) glc H astragaloside V glc-xyl H glc 第二节第二节 分类分类 黄芪（黄芪（Astragalus membranaceus） 补气诸药之最补气诸药之最 28 e、葫芦烷（、葫芦烷（cucurbitane ） 特点特点：5-H、8-H、10-H,9位连有位连有-CH3,其其 余与羊毛甾烷一样。余与羊毛甾烷一样。 第二节第二节 分类分类 H 1 2 3 4 2928 25 24 23 22 20 21 12 14 17 15 9 18 7 11 10 8 13 27 19

17、30 26 A B C D H H cucurbitane 29 从雪胆属植物的根中分离得到的一些成分从雪胆属植物的根中分离得到的一些成分 雪胆甲素雪胆甲素 R=Ac 雪胆乙素雪胆乙素 R=H 第二节第二节 分类分类 雪胆曲莲雪胆曲莲 中华雪胆中华雪胆 大籽雪胆大籽雪胆 22 12 HO OH O OH O OR HO 30 f、楝烷型（、楝烷型（meliacane） 如：芸香目植物中的楝苦素类成分 14 -H ， 13 CH3，17- 侧链，侧链， 其余同达玛烷型其余同达玛烷型 第二节第二节 分类分类 H A B CD H H meliacane 31 1 5 7 19 30 15 17 2

18、0 21 22 24 25 26 27 11 14 9 28 29 18 13 1 5 7 19 18 30 15 17 20 21 22 24 25 26 27 11 14 9 28 29 dammarane tirucallane 1 5 7 19 18 30 15 17 20 21 22 24 25 26 27 11 14 9 28 29 lanostane 1 5 7 19 18 30 15 17 20 21 22 24 25 26 27 11 14 9 28 29 cycloartane 1 5 7 19 18 30 15 17 20 21 22 24 25 26 27 11 14

19、9 28 29 cucurbitane 32 五环三萜五环三萜 齐墩果烷型（齐墩果烷型（oleanane） 乌苏烷（乌苏烷（ursane） 木栓烷（木栓烷（friedelane） 羽扇豆烷（羽扇豆烷（lupane） 33 a、齐墩果烷（、齐墩果烷（oleanane ）型，又称）型，又称-香树脂烷香树脂烷 （-amyrane）型）型 oleanane 甘草次酸甘草次酸 10 2324 25 26 27 29 30 2324 第二节第二节 分类分类 2)、五环三萜、五环三萜(pentacyclic triterpenoids) COOH H H HO O H H H H 1 5 6 8 9 10

20、11 14 16 17 18 19 20 22 28 24 23 25 26 27 29 30 3 34 A/B、B/C、C/D环为反式，环为反式，D/E环为顺式。环为顺式。 C-3常有常有-OH取代；取代；C-28-CH3易被氧化成酸或易被氧化成酸或 CH2OH 第二节第二节 分类分类 H H H H 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 2324 2526 27 28 29 30 1 4 10 5 8 9 14 13 17 18 20 A B C D E 35 齐墩果酸（齐墩果酸（ oleanoic acid)临床

21、用临床用 于治疗肝炎于治疗肝炎 第二节第二节 分类分类 R 甘草次酸甘草次酸H 甘草酸甘草酸 -D-gluA 2 - D-gluA- 乌拉尔甘草皂苷乌拉尔甘草皂苷A A -D-gluA 2 - D-gluA- 乌拉尔甘草皂苷乌拉尔甘草皂苷B B -D-gluA 3 - D-gluA- 黄甘草皂苷黄甘草皂苷 -D-gluA 4 - D-gluA- HO COOH COOH H H RO O 36 b 乌苏烷（乌苏烷（ursane ）型，又称）型，又称 -香树脂烷（香树脂烷（ - amyrane）型）型 乌苏烷乌苏烷 乌苏酸（乌苏酸（ursanoic acid) 具有抗菌活性具有抗菌活性 第二节第

22、二节 分类分类 2324 25 26 27 28 29 30 H H H H 2324 25 26 27 28 29 30 COOH H HO 37 与齐墩果烷的区别：与齐墩果烷的区别：29-CH3 由由变成变成且连在且连在 19位。位。 第二节第二节 分类分类 积雪草酸积雪草酸 R1=H，R2=H 羟基积雪草酸羟基积雪草酸 R1=OH，R2=H 积雪草苷积雪草苷 R1=H，R2=glc-glc-rha 羟基积雪草苷羟基积雪草苷 R1=OH，R2=glc-glc-rha COOR2 CH2OH HO HO R1 积雪草积雪草（Centella asiatica） 38 c.羽扇豆烷（羽扇豆烷（

23、lupane ） lupane E环为环为5元环；元环；C-19位为位为-构型异丙基。构型异丙基。 所有环所有环/环之间均为反式。环之间均为反式。 第二节第二节 分类分类 19 29 30 20 39 COOH HO CH2OH HO 如： 第二节第二节 分类分类 白桦酸白桦酸 (betulinic acid ) 白桦醇白桦醇 (betulin) 酸枣仁酸枣仁 （Semen Ziziphi Spinosae） 40 d、木栓烷（、木栓烷（friedelane） 木栓烷木栓烷（ friedelane） 第二节第二节 分类分类 28 23 24 25 30 29 27 26 41 23 24 HO

24、OC O HO 雷公藤酮（雷公藤酮（triptergone） 3-hydroxy-25-nor-friedel-3,1(10)-dien-2-one-30-oic acid （25位去甲基的木栓烷型衍生物） 第二节第二节 分类分类 42 e、 、hopane与与isohopane Hopane R= -H -CH(CH3)2 isohopane R= H-CH(CH3)2 3 12 13 18 17 20 108 14 19 21 R 24 23 4 25 10 26 27 8 14 17 29 30 19 18 20 21 22 17 18 19 20 21 第二节第二节 分类分类 43 内

25、内 容容 第一节第一节 概念概念 分类分类第二节第二节 理化性质理化性质第三节第三节 提取分离方法提取分离方法第四节第四节 结构研究方法结构研究方法第五节第五节 44 第三节第三节 理化性质理化性质 1、苷元多有较好结晶苷元多有较好结晶，易溶于石油醚、（，易溶于石油醚、（Et）2O、 CHCl3等有机溶剂。等有机溶剂。 2、皂苷多为无定形粉末，易溶于稀醇、热、皂苷多为无定形粉末，易溶于稀醇、热MeOH 和热和热EtOH，可溶于水，可溶于水，含水丁醇或戊醇对皂苷的溶含水丁醇或戊醇对皂苷的溶 解度较好，因此是提取和纯化皂苷时常采用的溶剂。解度较好，因此是提取和纯化皂苷时常采用的溶剂。 3、皂苷多具

26、有苦、辛辣味，对人体粘膜有强烈、皂苷多具有苦、辛辣味，对人体粘膜有强烈 刺激性。刺激性。 45 三萜化合物在无水条件下，三萜化合物在无水条件下，与强酸与强酸（硫酸、磷（硫酸、磷 酸、高氯酸）、酸、高氯酸）、中等强酸中等强酸（三氯乙酸）或（三氯乙酸）或Lewis 酸酸 （氯化锌、三氯化铝、三氯化锑）作用，（氯化锌、三氯化铝、三氯化锑）作用，会产生颜会产生颜 色变化或荧光。色变化或荧光。 原因：原因：主要是使羟基脱水，增加双键结构，再经主要是使羟基脱水，增加双键结构，再经 双键移位、双分子缩合等反应生成共轭双烯系统，双键移位、双分子缩合等反应生成共轭双烯系统， 又在酸作用下形成阳碳离子而呈色。又在

27、酸作用下形成阳碳离子而呈色。 第三节第三节 理化性质理化性质 46 1、醋酐醋酐- -浓硫酸反应浓硫酸反应（Liebermann-Burchard) 样品样品/ /醋酐醋酐 浓浓H2SO4 黄黄 红红 紫紫 蓝蓝 褪色褪色 2、五氯化锑反应五氯化锑反应 样品样品/CHCl3 or 醇醇 20%五氯化锑五氯化锑 Or三氯化锑三氯化锑/ CHCl3 60-70 蓝色蓝色 灰蓝灰蓝 灰紫灰紫 第三节第三节 理化性质理化性质 47 3、三氯醋酸反应三氯醋酸反应（Rosen-Heimer） TLC PC 25%三氯醋酸三氯醋酸/EtOH 红红 紫紫 4、氯仿氯仿- -浓硫酸反应浓硫酸反应（Salkows

28、ki ） 样品样品/CHCl3 浓浓H2SO4 CHCl3层（层（红红、蓝蓝色或色或 绿绿色荧光）色荧光） 第三节第三节 理化性质理化性质 48 5、冰醋酸、冰醋酸乙酰氯反应（乙酰氯反应（Tschugaeff ）：）： 样品样品/冰醋酸冰醋酸 淡红淡红色或紫红紫红色。 乙酰氯及氯化锌乙酰氯及氯化锌 具有三萜母核的化合物均可反应。具有三萜母核的化合物均可反应。 第三节第三节 理化性质理化性质 皂苷水溶液经强烈振摇能产生持久性的泡沫，因皂苷水溶液经强烈振摇能产生持久性的泡沫，因 其具有降低水溶液表面张力的缘故。其具有降低水溶液表面张力的缘故。故皂苷可作为故皂苷可作为 清洁剂、乳化剂。清洁剂、乳化剂

29、。 49 泡沫实验：泡沫实验： 区别蛋白和皂苷区别蛋白和皂苷 泡沫持久（泡沫持久（1515分以上）：分以上）：皂苷皂苷 泡沫不持久，很快消失：泡沫不持久，很快消失：蛋白质、粘液质蛋白质、粘液质 第三节第三节 理化性质理化性质 50 皂苷能溶血，是因为多数皂苷能与胆甾醇皂苷能溶血，是因为多数皂苷能与胆甾醇 （cholesterol，或谷甾醇，或谷甾醇, 豆甾醇豆甾醇, 麦角甾醇等麦角甾醇等)结合结合 生成不溶性的分子复合物。其溶血作用的有无、强生成不溶性的分子复合物。其溶血作用的有无、强 弱与结构有关。弱与结构有关。 第三节第三节 理化性质理化性质 如：达玛烷衍生的人参皂苷，如：达玛烷衍生的人参

30、皂苷，20（S）-原人参三原人参三 醇衍生的皂苷有溶血性质，而醇衍生的皂苷有溶血性质，而20（S）-原人参二醇原人参二醇 衍生的皂苷则能对抗溶血作用，因此人参总皂苷不衍生的皂苷则能对抗溶血作用，因此人参总皂苷不 表现出溶血现象。表现出溶血现象。 51 溶血与结构的关系：溶血与结构的关系： 1）. A环上有极性基团，而在环上有极性基团，而在D环或环或E环上有一中等环上有一中等 极性基团的三萜皂苷，一般有溶血作用。极性基团的三萜皂苷，一般有溶血作用。 2）.苷元苷元3位有位有-OH，16位有位有-OH或或=O时，溶血指时，溶血指 数最高，数最高， 3）若）若D环或环或E环有极性基团，而环有极性基团

31、，而28位连有糖链，或位连有糖链，或 具有一定数量的羟基取代，则可导致溶血作用消失。具有一定数量的羟基取代，则可导致溶血作用消失。 第三节第三节 理化性质理化性质 52 酸性皂苷酸性皂苷（通常指三萜皂苷）（通常指三萜皂苷）/水溶液水溶液+ 中性盐中性盐 类类（硫酸铵或醋酸铅）（硫酸铵或醋酸铅） 生成沉淀。生成沉淀。 中性皂苷中性皂苷（通常指甾体皂苷）（通常指甾体皂苷） /水溶液水溶液+碱性盐类碱性盐类 （碱式醋酸铅或氢氧化钡等）（碱式醋酸铅或氢氧化钡等） 沉淀。沉淀。 利用这一性质可进行皂苷的提取和初步分离。利用这一性质可进行皂苷的提取和初步分离。 皂苷皂苷/ /水溶液水溶液 + + 铅盐、钡

32、盐、铜盐铅盐、钡盐、铜盐-沉淀。沉淀。 第三节第三节 理化性质理化性质 53 内内 容容 第一节第一节 概念概念 分类分类第二节第二节 理化性质理化性质第三节第三节 提取分离方法提取分离方法第四节第四节 结构研究方法结构研究方法第五节第五节 54 第四节第四节 提取与分离提取与分离 1. 三萜苷元类化合物的提取：三萜苷元类化合物的提取： 多采用极性较小的溶剂进行回流提取多采用极性较小的溶剂进行回流提取 2. 三萜皂苷类化合物的提取：三萜皂苷类化合物的提取： 多采用极性较大的溶媒提取，如甲醇、乙醇、多采用极性较大的溶媒提取，如甲醇、乙醇、 含水醇等。含水醇等。 55 1.系统溶剂萃取法系统溶剂萃

33、取法 总提取物总提取物 H2O分散后，依次用石油醚、分散后，依次用石油醚、 CHCl3、EtOAc、nBuOH 萃取萃取 石油醚石油醚 脱脂层脱脂层 CHCl3 三萜类三萜类 EtOAc nBuOH 总皂苷层总皂苷层 苷元苷元 第四节第四节 提取分离方法提取分离方法 水层水层 大极性苷大极性苷 56 2. 沉淀法沉淀法 a. 分段沉淀法分段沉淀法 利用皂苷难溶于乙醚、丙酮等溶剂而分离利用皂苷难溶于乙醚、丙酮等溶剂而分离 皂苷皂苷/醇乙醚醇乙醚 or 丙酮丙酮 沉淀沉淀 b.皂苷 皂苷/水溶液水溶液 + 铅盐、钡盐、铜盐铅盐、钡盐、铜盐-沉淀。沉淀。 第四节第四节 提取分离方法提取分离方法 57

34、 第四节第四节 提取分离方法提取分离方法 3. 大孔树脂分离法大孔树脂分离法 醇提取液减压回收醇后，通过大孔吸附树脂，先用醇提取液减压回收醇后，通过大孔吸附树脂，先用 少量水洗去糖和其它水溶性成分，后改用少量水洗去糖和其它水溶性成分，后改用30%80% 甲醇或乙醇梯度洗脱，获得极性不同的皂苷。甲醇或乙醇梯度洗脱，获得极性不同的皂苷。 Crude total saponins resin H2O H2O eluate (sugars) 3080%MeOH 80100% MeOH Total saponins lipid impurity 58 4. 色谱法色谱法 吸附色谱：吸附色谱：固定相为中性

35、氧化铝、硅胶，洗脱固定相为中性氧化铝、硅胶，洗脱 剂为有机溶媒（极性较小、或中等极性皂苷）剂为有机溶媒（极性较小、或中等极性皂苷） 分配色谱：分配色谱：如反相如反相HPLC、MPLC、ODS、纸、纸 色谱（极性较大皂苷）、色谱（极性较大皂苷）、DCCC、HSCCC。 第四节第四节 提取分离方法提取分离方法 硅胶柱色谱：硅胶柱色谱：CHCl3-MeOH-H2O 反相色谱反相色谱 (Rp-18, 8, 2)： MeOH-H2O, CH3CN- H2O 59 内内 容容 第一节第一节 概念概念 分类分类第二节第二节 理化性质理化性质第三节第三节 提取分离方法提取分离方法第四节第四节 结构研究方法结构

36、研究方法第五节第五节 60 第五节第五节 结构研究法结构研究法 三萜及其皂苷的结构测定主要依照生源关系并采用三萜及其皂苷的结构测定主要依照生源关系并采用 化学和波谱等方法。化学和波谱等方法。 1. UV 法：法： 孤立双键：孤立双键：205250nm 同环共轭双键：同环共轭双键：285nm 异环共轭双键：异环共轭双键：240、250、260nm ，-不饱和羰基：不饱和羰基：235nm 61 UV 法法： 能判断能判断11-oxo、12-齐墩果烷型化合物齐墩果烷型化合物C18-H的构型：的构型： C18-H：构型：构型：242243nm， 构型：构型：248249nm。 第五节第五节 结构研究方

37、法结构研究方法 H 11 1812 RO 62 2. 红外光谱红外光谱(IR)： 根据根据12451330cm-1、13551392cm-1两个区域中两个区域中 碳氢吸收峰的数目，可以区分三萜骨架结构类型。碳氢吸收峰的数目，可以区分三萜骨架结构类型。 A (13551392cm-1) B(12451330cm-1) 齐墩果烷型齐墩果烷型 2个峰个峰 3个峰个峰 乌苏烷型乌苏烷型 3个峰个峰 3个峰个峰 四环三萜类四环三萜类 1个峰个峰 1个峰个峰 第五节第五节 结构研究方法结构研究方法 63 3. 质谱质谱 （ MS ） 五环三萜裂解化合物质谱裂解的共同规律五环三萜裂解化合物质谱裂解的共同规律

38、 有环内双键，较特征的有环内双键，较特征的RDA裂解裂解 无环内双键，常从无环内双键，常从C环裂解为两个碎片；环裂解为两个碎片； 有时可同时产生有时可同时产生RDA和和C环裂解；环裂解； 第五节第五节 结构研究方法结构研究方法 64 第五节第五节 结构研究方法结构研究方法 有环内双键，较特征的有环内双键，较特征的RDA裂解裂解 COOH HO M+ m/z 456 RDA HO +. + b, m/z 208 COOH +. a, m/z 248 (100) HO + + -COOH b-1, m/z 207 a1, m/z 203 65 3. 质谱质谱 （ MS ） 第五节第五节 结构研究方

39、法结构研究方法 无环内双键，常从无环内双键，常从C环裂解为两个碎片；环裂解为两个碎片； HO A B C D HO CH2 AB D E ( g ) +E C环断裂+ 66 4. 核磁共振（核磁共振（NMR) 1H-NMR：提供的信息 ：提供的信息 甲基质子甲基质子 连氧的碳上质子连氧的碳上质子 烯氢质子烯氢质子 糖的端基质子信号糖的端基质子信号 第五节第五节 结构研究方法结构研究方法 4. 核磁共振（核磁共振（NMR) RO H O H O HO OH H H H OH H HO 67 4. 核磁共振（核磁共振（NMR) H-NMR：最大特征：高场出现多个甲基单峰：最大特征：高场出现多个甲基

40、单峰 一般甲基质子信号在一般甲基质子信号在 0.6251.50间。间。 最高场甲基最高场甲基（26-CH3） 0.775（28-CH2OH、CH3或内酯）或内酯） 最低场甲基最低场甲基 1.131.15（27-CH3）其它小于）其它小于1.0 1.0（27-含氧基团）含氧基团） 第五节第五节 结构研究方法结构研究方法 1.51 - 0.78 68 齐墩果烷型齐墩果烷型29、30位甲基以位甲基以 单峰出现，单峰出现， ：0.81.0 乌苏烷型乌苏烷型29、30位甲基以位甲基以 双峰出现双峰出现 ：0.81.0 J6Hz 3029 30 29 第五节第五节 结构研究方法结构研究方法 69 羽扇豆烷

41、型三萜的羽扇豆烷型三萜的30-CH3 ,因与双键相连，因与双键相连， 在在 1.631.80间，具有烯丙偶合。间，具有烯丙偶合。 30 第五节第五节 结构研究方法结构研究方法 70 连连OH的碳上质子信号一般出现在的碳上质子信号一般出现在 3.24 ，连，连 OAc的碳上的质子信号一般为的碳上的质子信号一般为 45.5 烯氢信号的化学位移值一般为烯氢信号的化学位移值一般为 4.36 环内双键质子的环内双键质子的 一般大于一般大于5，环外双键质子的，环外双键质子的 一般小于一般小于5。 第五节第五节 结构研究方法结构研究方法 71 13C-NMR -CH3 8.933.7 -C-O- 6090

42、烯碳烯碳: 109160 羰基碳羰基碳: 170220 第五节第五节 结构研究方法结构研究方法 4. 核磁共振（核磁共振（NMR) O CH2OH O O O O COOH HO O O H O H HO HO OH OH O H O HO O HO OH OH H OH H3CH CH3 O O CH3 O CH3 72 90CH 135CHCH3 CH2 200150 10050 73 4. 核磁共振（核磁共振（NMR) 13C-NMR 1). 根据烯碳的化学位移可推知五环三萜的类型根据烯碳的化学位移可推知五环三萜的类型 第五节第五节 结构研究方法结构研究方法 74 144.2 123.0

43、 第五节第五节 结构研究方法结构研究方法 齐墩果烷齐墩果烷 型型 75 150.3 109.5 19.4 第五节第五节 结构研究方法结构研究方法 羽扇豆烷羽扇豆烷 型型 76 4. 核磁共振（核磁共振（NMR) 13C-NMR 2).2).苷化位置的确定苷化位置的确定 C3苷化苷化810 C2, 4（ ）稍向高场）稍向高场 C28羧基成酯苷，羧基成酯苷， 羰基碳向羰基碳向 高场高场 2。 C1 95 96 C O O O H O HO OH H H H OH H HO H O HO OH H H H OH H HO 3 2 28 第五节第五节 结构研究方法结构研究方法 77 苷化位移：苷化位移

44、： 苷元苷元: C3-O-sugar, C3 +810 糖糖: 端基碳端基碳 +7 其上其上OH与其它糖连接成苷的碳与其它糖连接成苷的碳 +38 酯苷酯苷: -COO-sugar -2 ；糖端基碳；糖端基碳 95 叔醇叔醇: 苷元苷元 -C +10; 糖端基碳糖端基碳 100 第五节第五节 结构研究方法结构研究方法 78 例例1： 化合物化合物A，白色粉末，白色粉末(甲醇甲醇)，mp.250252； Molish反应和反应和Liebermann-Burchard反应均为阳性。反应均为阳性。 完全酸水解，薄层检测，苷元为齐墩果酸，完全酸水解，薄层检测，苷元为齐墩果酸，PC检测检测 出葡萄糖醛酸和

45、葡萄糖，用出葡萄糖醛酸和葡萄糖，用10的的KOHMeOH碱碱 水解后，水解后， PC检测出葡萄糖。该化合物的碳谱数据检测出葡萄糖。该化合物的碳谱数据 如下：如下： 第五节第五节 结构研究方法结构研究方法 79 苷元部分的碳谱数据苷元部分的碳谱数据 第五节第五节 结构研究方法结构研究方法 80 苷元部分的碳谱数据苷元部分的碳谱数据 糖部分的碳谱数据糖部分的碳谱数据 C1 105.3 104.3 80.5 73.8 78.0 76.0 73.7 72.3 77.4 75.6 172.4 175.0 糖糖 甲基苷甲基苷 第五节第五节 结构研究方法结构研究方法 81 糖部分的碳谱数据糖部分的碳谱数据

46、糖糖 甲基苷甲基苷 C1” 104.3 103.7 76.5 73.7 78.4 75.5 72.3 70.3 72.3 70.3 62.9 61.7 C1 96.1 74.2 79.2 71.3 78.6 62.9 推测该化合物的结构并写出苷元的结构式推测该化合物的结构并写出苷元的结构式 第五节第五节 结构研究方法结构研究方法 82 3 28 第五节第五节 结构研究方法结构研究方法 O C O COOH O O CH2OH O CH2OH O O 83 化合物 B 白色针晶（甲醇） mp 220221 Liebermann-Burchard反应阳性 Molish反应阳性 碱水解，检测有当归酸和乙酸存在 酸水解，检测有葡萄糖醛酸，半乳糖，阿 拉伯糖和木糖存在 三萜皂苷三萜皂苷 酰基酰基 84 M-H- M-H-132- M-H-2132- M-H-132-162- 85 C61H94O27Na 86 11个个CH3 87 端基碳端基碳 双键碳双键碳 羰基碳羰基碳 125.1，140.9 齐墩果酸型特征双键齐墩果酸型特征双键 88 89 HO CH2OH OH OH OH Ara Xyl GlcA