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文档简介
1、 层析液层析液 DNA复制复制 碱基互补配对碱基互补配对 6 F2 因为因为 C与与F2的指纹图谱完全相同的指纹图谱完全相同 探究尖尖角探究尖尖角 体验步步高体验步步高 15 BBBBD 6 受精卵受精卵 转基因转基因 限制酶限制酶 DNA连接酶连接酶 用相用相 同的限制酶切出了相同的粘性末端(或不同生物同的限制酶切出了相同的粘性末端(或不同生物DNA 的结构具有统一性)的结构具有统一性) DNA分子杂交;分子杂交;DNA分子与分子与 mRNA分子杂交;抗原分子杂交;抗原抗体杂交;从羊的乳汁中提抗体杂交;从羊的乳汁中提 取干扰素。取干扰素。 第二节第二节 基础巩固基础巩固 7、蛋白质、蛋白质
2、限制酶限制酶 DNA连接酶连接酶 干扰素干扰素 密码子密码子 亲缘亲缘 8、 (1)反转录反转录 (2)侵染侵染 CaCl2 细胞壁细胞壁 将得到的大肠杆菌将得到的大肠杆菌B涂布在一个含有氨苄青霉素的培养涂布在一个含有氨苄青霉素的培养 基上,能够生长的,说明已导入了质粒基上,能够生长的,说明已导入了质粒A或重组质粒,或重组质粒, 反之则没有导入。反之则没有导入。 因为普通质粒因为普通质粒A和重组质粒上都有和重组质粒上都有 抗氨苄青霉素基因抗氨苄青霉素基因 (3)有的能生长,有的不能生长有的能生长,有的不能生长 导入普通质粒导入普通质粒A的细菌的细菌 能生长,因为普通质粒能生长,因为普通质粒A上
3、有四环素抗性基因;导入重上有四环素抗性基因;导入重 组质粒的细菌不能生长,因为目的基因正插在四环素抗组质粒的细菌不能生长,因为目的基因正插在四环素抗 性基因中,破坏了其结构和功能。性基因中,破坏了其结构和功能。 9、载体、载体 环状环状DNA DNA连接连接 TTAAG和和GAATT DNA扩增(复制)扩增(复制) 蛋白质蛋白质 转录和翻译转录和翻译 能力提高能力提高 (1)第二步:从)第二步:从SCID病人体内分离出免疫系统有缺陷的病人体内分离出免疫系统有缺陷的 T淋巴细胞淋巴细胞 第三步:将这些第三步:将这些T淋巴细胞与携带了正常淋巴细胞与携带了正常ada 基因的反转录病毒混合在一起,让病
4、毒感染基因的反转录病毒混合在一起,让病毒感染T淋巴细胞,淋巴细胞, 使正常使正常ada基因拷贝插入到基因拷贝插入到T淋巴细胞的基因组中淋巴细胞的基因组中 第四步:第四步: 在实验室中通过细胞培养并确认转入的基因表达后,用注在实验室中通过细胞培养并确认转入的基因表达后,用注 射器将成千上万个重建的转基因射器将成千上万个重建的转基因T淋巴细胞注射到淋巴细胞注射到SCID患患 者的人体组织中者的人体组织中 (2)血友病、镰刀型细胞贫血症)血友病、镰刀型细胞贫血症 探究尖尖角探究尖尖角 第三节第三节 体验步步高体验步步高 15 ABCDC 基础巩固基础巩固 6 7 8 9 步骤步骤1:从人体内分离和纯
5、化胰岛素,通过相应的方法,测定:从人体内分离和纯化胰岛素,通过相应的方法,测定 胰岛素分子中氨基酸的排列顺序即一级结构。胰岛素分子中氨基酸的排列顺序即一级结构。 步骤步骤2:将胰岛素高度纯化,利用:将胰岛素高度纯化,利用X射线晶体衍射、核磁共振等射线晶体衍射、核磁共振等 技术手段,充分了解胰岛素的二级结构和三级结构。技术手段,充分了解胰岛素的二级结构和三级结构。 步骤步骤3:实验证明,胰岛素在低浓度:实验证明,胰岛素在低浓度(小于小于109molL,)时主要时主要 以单体形式存在;在高浓度以单体形式存在;在高浓度(大于大于10 105molL)时则以二聚体形时则以二聚体形 式存在,从而延长了胰
6、岛素从注射部位进入血液所需的时间。这式存在,从而延长了胰岛素从注射部位进入血液所需的时间。这 说明胰岛素结构的变化对其活性和功能具有一定的影响。说明胰岛素结构的变化对其活性和功能具有一定的影响。 步骤步骤4:根据胰岛素结构与功能的关系设计对胰岛素基因的:根据胰岛素结构与功能的关系设计对胰岛素基因的 改造方案。通过碱基替换的方法,改变其基因序列改造方案。通过碱基替换的方法,改变其基因序列(使其控制合成使其控制合成 的胰岛素的的胰岛素的 链第链第28位改为赖氨酸、位改为赖氨酸、29位改为脯氨酸位改为脯氨酸)从而改从而改 变胰岛素的一级结构,这种胰岛素不会形成二聚体。变胰岛素的一级结构,这种胰岛素不
7、会形成二聚体。 探究尖尖角探究尖尖角第四节第四节 体验步步高体验步步高 16 DBCCCA 基础巩固基础巩固 7、功能、功能 结构结构 中心中心 天冬氨酸激酶和二氢吡啶二天冬氨酸激酶和二氢吡啶二 羧酸合成酶羧酸合成酶 天冬氨酸激酶天冬氨酸激酶 异亮氨酸异亮氨酸 二氢吡啶二二氢吡啶二 羧酸合成酶羧酸合成酶 异亮氨酸异亮氨酸 8、蛋白质的合成、蛋白质的合成 脱氧核苷酸脱氧核苷酸 A与与T配对、配对、C与与G配对配对 转录转录 信使信使RNA 转运转运RNA 核糖体核糖体 4 20 转运转运RNA 雌、雄雌、雄 能力提高能力提高 9、基因突变、基因突变 A 过敏反应过敏反应 能根据人类的需要,能根据
8、人类的需要, 定向改造遗传物质,获得优良遗传性状定向改造遗传物质,获得优良遗传性状 10、限制酶、限制酶 质粒质粒 DNA 复制并稳定地保存复制并稳定地保存 在大肠杆菌内表达在大肠杆菌内表达 Ca2+ aB Ab 纤维素酶(或纤维素酶和果胶酶)纤维素酶(或纤维素酶和果胶酶) 聚乙聚乙 二醇二醇 愈伤组织愈伤组织 2 甲乙两品种的花粉甲乙两品种的花粉 48 AaBb 7/16 探究尖尖角探究尖尖角 第一节第一节 体验步步高体验步步高 16 ABACAB基础巩固基础巩固 9、 原生质体原生质体 使用纤维素酶和果胶酶去掉细胞壁落使用纤维素酶和果胶酶去掉细胞壁落 离离 心、振动、电激等物理方法或用聚乙
9、二醇等试剂作为诱导心、振动、电激等物理方法或用聚乙二醇等试剂作为诱导 剂的化学法剂的化学法 原生质体融合原生质体融合 杂种特性杂种特性 具有双亲具有双亲 细胞的全部遗传物质细胞的全部遗传物质 四四 细胞融合后染色体组数是两细胞融合后染色体组数是两 亲本染色体组数之和亲本染色体组数之和 可育可育 杂种个体细胞有同源染色体,杂种个体细胞有同源染色体, 可形成正常配子,产生后代可形成正常配子,产生后代 远缘杂交不亲和远缘杂交不亲和 能力提高能力提高78 BD 脱分化脱分化 细胞的全能性细胞的全能性 S型增长型增长 细胞数量细胞数量 细胞所处的生长期细胞所处的生长期 保证氧气供应充足保证氧气供应充足
10、使细胞与使细胞与 培养液接触培养液接触 探究尖尖角探究尖尖角 第二节第二节 体验步步高体验步步高 15 CDDDC 培养基培养基 芽发育成叶,叶肉细胞中叶绿素的合芽发育成叶,叶肉细胞中叶绿素的合 成需要光照条件成需要光照条件 选择性表达选择性表达 基础巩固基础巩固 8、同种限制、同种限制 质粒(或动植物病毒、噬菌体等)质粒(或动植物病毒、噬菌体等) 标记标记 基因基因 脱分化(或去分化)脱分化(或去分化) 胚状体胚状体 人造种皮人造种皮 能力提高能力提高 7 A 9、诱变育种、诱变育种 基因工程育种(转基因育种)基因工程育种(转基因育种) 突变突变 多害少利(突变是不定向的)多害少利(突变是不
11、定向的) 脱分化脱分化 再分化再分化 植植 物组织培养物组织培养 全能全能 不定向不定向 人为定向人为定向 7、蛋白质、蛋白质 限制酶限制酶 DNA连接酶连接酶 干扰素干扰素 密码子密码子 亲缘亲缘 8、 (1)反转录反转录 (2)侵染侵染 CaCl2 细胞壁细胞壁 将得到的大肠杆菌将得到的大肠杆菌B涂布在一个含有氨苄青霉素的培养涂布在一个含有氨苄青霉素的培养 基上,能够生长的,说明已导入了质粒基上,能够生长的,说明已导入了质粒A或重组质粒,或重组质粒, 反之则没有导入。反之则没有导入。 因为普通质粒因为普通质粒A和重组质粒上都有和重组质粒上都有 抗氨苄青霉素基因抗氨苄青霉素基因 (3)有的能
12、生长,有的不能生长有的能生长,有的不能生长 导入普通质粒导入普通质粒A的细菌的细菌 能生长,因为普通质粒能生长,因为普通质粒A上有四环素抗性基因;导入重上有四环素抗性基因;导入重 组质粒的细菌不能生长,因为目的基因正插在四环素抗组质粒的细菌不能生长,因为目的基因正插在四环素抗 性基因中,破坏了其结构和功能。性基因中,破坏了其结构和功能。 9、载体、载体 环状环状DNA DNA连接连接 TTAAG和和GAATT DNA扩增(复制)扩增(复制) 蛋白质蛋白质 转录和翻译转录和翻译 能力提高能力提高 9 体验步步高体验步步高 16 DBCCCA 基础巩固基础巩固 7、功能、功能 结构结构 中心中心 天冬氨
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