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文档简介
1、 第7章 球菌 球菌(cocci) 菌体形态为球形的一类细菌。临床上通常引起化脓 性感染,又称化脓性球菌(pyogenic cocci)。 与医学有关的革兰阳性兼性厌氧球菌有9属。本章主 要介绍临床最常见的兼性厌氧球菌,包括葡萄球菌 属、链球菌属、肠球菌属。 革兰阴性球菌主要包括奈瑟菌属(Neisseria)和莫 拉菌属(Moraxella)。 第一节 葡萄球菌属 葡萄球菌属(Staphylococcus)在自然界 广泛分布。存在于人和动物的皮肤黏膜上 的菌株可致多种化脓性感染,如疖、痈、 脓肿、菌血症等,还可引起烫伤样皮肤综 合征和毒性休克综合征等疾病。 葡萄球菌属 目前有35个种、17个亚
2、种,引起人类疾病的重要菌 有金黄色葡萄球菌(S.aureus),表皮葡萄球菌 (S.epidermidis),头状葡萄球菌(S.capitis), 人葡萄球菌(S.hominis)等。 临床常以是否产生凝固酶分为凝固酶阳性和凝固酶 阴性葡萄球菌(Coagulase negative staphylococcus, CNS)。 根据噬菌体分型,可分成45群26型。 利用质粒大小分型、血清学分型、抗生素分型和细 菌DNA的RFLP或PFGE分型,用来研究细菌的致病 性、耐药性、流行病学特点和细菌鉴别的关系。 该属细菌DNA G+C mol%为30%39%。 二、临床意义 (一)致病因素 1.酶类
3、(1)凝固酶 (2)耐热核酸酶 (3)透明质酸酶、磷脂酶 2.毒素 (1)葡萄球菌溶素 (2)肠毒素 (3)毒性休克综合征毒素 (4)杀白细胞素 (5)表皮剥脱毒素 (1)凝固酶 葡萄球菌属产生2种血浆凝固酶: 结合凝固酶或聚集因子,是结合在菌体表面 的凝固酶,能与血浆中的纤维蛋白原交联使 菌体快速凝集; 游离凝固酶,是细菌分泌到菌体外的凝固酶, 能被血浆中的协同因子(cofactor)激活形成 复合物,再使纤维蛋白原转变成纤维蛋白, 而使血浆凝固;保护病原菌不被吞噬或免受 抗体等的作用。 (二)所致疾病 1.化脓性疾病 1)皮肤化脓性感染 2)各种器官的化脓性感染 3)全身感染 2.毒素性疾
4、病 1)食物中毒 2)烫伤样皮肤综合征 3)毒素性休克综合征(TSS) 4)假膜性肠炎 3.医院感染 三、微生物学检验 (一)葡萄球菌的基本特性 1.形态结构 2.抗原成分 1.葡萄球菌A蛋白(Staphylococcal protein A,SPA) 位于菌体表面,存在于菌细胞壁的一种表面蛋白。可与 IgG的Fc段结合,应用于协同凝集试验。 A蛋白有抗吞噬作用,还有激活补体替代途等活性。是完 全抗原,具属特异性。 2.多糖抗原 具有群特异性,细胞壁中的磷壁酸包含的N-乙酰葡胺核糖 醇残基为A群多糖抗原;N-乙酰区糖胺甘油残基为B群多糖 抗原。 3.荚膜抗原 几乎所有金黄色葡萄球菌菌株的表面有
5、荚膜多糖抗原的存 在。表皮葡萄球菌仅个别菌株有此抗原。 3.变异性 (1)细菌细胞壁缺陷型 受抑制破坏细胞壁药物或外界因素作用,可以 形成细胞壁缺陷型细菌,在高渗环境中生存。 (2)耐药性变异 部分菌株通过获得外源性的mecA而产生青霉 素结合蛋白2a(PBP2a),导致对所有内酰 胺类抗生素耐药。 4.培养特性 兼性厌氧菌,有氧条件下生长较厌氧条件迅速和旺盛 对营养要求不高,最适生长温度3537,最适 pH7.47.6。 普通培养基上形成直径23mm不透明的圆形凸起菌 落。产生金黄色、白色、柠檬色等非水溶性色素附着 在菌落上。 金黄色葡萄球菌 血琼脂平板上菌落周围有透明溶血环 能在含10%1
6、5% NaCl琼脂中生长 甘露醇高盐平板上为黄色菌落。 5.抵抗力 该菌的抵抗力比其他无芽胞细菌强,耐干 燥;近年来耐药性增强,对多种抗菌药物 不敏感。葡萄球菌内携带诱导性的青霉素 酶和乙酰基转移酶质粒,通过转导进行质 粒的转移。 (二)葡萄球菌的临床检验程序 标本采集:根据感染的部位,采集不同的 标本。该属细菌广泛分布在人体皮肤和黏 膜,采取时避免病灶周围正常菌群污染。 标本直接检查 显微镜检查 无菌体液如脑脊液和关节穿刺液等可 直接涂片、革兰染色后,显微镜检查见类似葡萄 球菌的革兰阳性球菌,则具有重要临床价值;其 他体液标本查见细菌的同时伴有炎性细胞则也具 有参考价值。可初步报告“查见类似
7、葡萄球菌属 革兰阳性球菌”,并进一步进行分离和鉴定。 抗原检测 乳胶凝集试验测定SPA及荚膜抗原。 核酸检测 针对耐热核酸酶nuc、16S rRNA可鉴 定葡萄球菌,测定macA可以快速检出MRSA。 分离培养与鉴定 分离培养 脓液、分泌物等临床标本可接种血琼脂平板; 有污染的标本如粪便等应接种在选择平板上, 如甘露醇高盐平板、哥伦比亚多粘菌素奈啶酸 平板; 血液标本则用肉汤增菌培养基增菌后。 初步鉴定 1)菌落性状 平板培养基上孵育24h后,菌落外观 疑为葡萄球菌者应进行革兰染色证实。 2)鉴别试验 触酶试验阳性、溶葡萄球菌素(200g/ml)和呋 喃唑酮100g敏感,氧化酶试验阴性可以与其
8、他 革兰阳性球菌区别。 红霉素(0.4g/ml)耐药和甘油需氧产酸可以与 微球菌区别。 (3)种的鉴定 1)凝固酶试验 玻片法测定结合型凝固酶;试管 法测定分泌型凝固酶。金黄色葡萄球菌、中间型 葡萄球菌呈现阳性反应。路邓葡萄球菌产生结合 型凝固酶而不分泌游离型凝固酶, 因而玻片凝固酶 试验阳性、试管凝固酶试验阴性。 2)耐热核酸酶试验 大多数金黄色葡萄球菌、施 氏葡萄球菌、中间葡萄球菌、猪葡萄球菌能产生 耐热核酸酶。此外表皮葡萄球菌、模仿葡萄球菌、 肉葡萄球菌含微弱耐热核酸酶。 3)其他鉴定试验 磷酸酶试验、吡咯烷酮芳基酰胺酶试验、鸟氨 酸脱羧酶试验、脲酶试验、-半乳糖苷酶、3- 羟基丁酮酸试
9、验、新生霉素敏感试验、多粘菌 素B耐药试验、糖产酸试验是常用的葡萄球菌 属种间细菌的鉴定生化试验。 (3)肠毒素检测 1)生物学试验 采用幼猫腹腔注射(肉汤培养物或呕 吐物),4h 内发生呕吐腹泻和体温升高或死亡等现象 者,提示金黄色葡萄球菌肠毒素存在。 2)琼脂扩散试验或ELISA法测定 用琼脂扩散试验、 ELISA法或放射免疫分析法检测样本中的肠毒素。 3)肠毒素基因测定 针对肠毒素基因设计毒素的通 用引物及特异性引物,应用PCR技术可直接进行分 型测定。 第二节 链球菌属 链球菌属(Streptococcus)细菌种类多, 分布广,是人和某些动物的寄生菌。其中 某些菌种为毒力强的致病菌,
10、另一些则是 作为正常菌群栖居于宿主的呼吸道、消化 道、泌尿生殖道,还有一些是皮肤上的过 路菌和黏膜上的定居菌 一、分类 (一)A、C、G群溶血性链球菌 菌落直径大于0.5mm A群的化脓性链球菌(S. pyogenes)、C群、G群的马链球菌(S.equi) 和似马链球菌(S.equismilis); 菌落直径小于0.5mm 具A、C、G群抗原,统称米勒链球菌(S.milleri),主要分为3种:咽 喉炎链球菌、中间型链球菌和星座链球菌。除此之外,米勒链球菌还 有溶血和不溶血的细菌。 (二)B群溶血性链球菌又称无乳链球菌 (S.agalactiae)。 (三)溶血性链球菌 包括肺炎链球菌(S.
11、pneumoniae)和草绿色链球菌 群(Viridans streptococci)。 (四)不溶血D群链球菌 牛链球菌(S.bovis) 二、临床意义 (一)致病因素 1.菌体细胞壁成分 (1)脂磷壁酸 位于细胞壁中并伸展至菌体表 面,与黏附宿主细胞有关。 (2)M蛋白 是链球菌细胞壁中的表面蛋白质, 具有抗吞噬和抵抗细胞内杀菌作用。M蛋白有 抗原性,能刺激机体产生型特异性抗体;与心 肌、肾小球基底膜有共同抗原成分。 2.侵袭性酶 (1)链道酶(SD) 也称链球菌DNA酶,能分解黏 稠脓液中具有高度黏性的DNA,使脓汁稀薄易于扩散。 主要由A、C、G群链球菌产生。 (2)透明质酸酶 能分解
12、细胞间质的透明质酸,使病 菌易于在组织中扩散,又称扩散因子。 (3)链激酶(SK) 又称链球菌溶纤维蛋白酶,能 激活血液中溶纤维蛋白酶原转化为溶纤维蛋白酶,使 之溶解血块或阻止血浆凝固,有利于细菌在组织中扩 散。重组链激酶目前用于治疗血栓性疾病。 (4)胶原酶 能水解肌肉和皮下组织中的胶原蛋白纤 维,便于细菌在组织中扩散。 3.外毒素 (1)链球菌溶素 (2)致热外毒素 (1)链球菌溶素 有溶解红细胞,破坏白细胞、血小板及毒害心脏作用 根据对O 2 稳定性:链球菌溶素O和链球菌溶素 S1.SLO 绝大多数A群链球菌株和许多C、G群菌株 能产生SLO,SLO为含-SH基的蛋白质,遇氧时-SH基
13、被氧化为-S-S-基,失去溶血能力。若加入亚硫酸钠和 半胱氨酸等还原剂,溶血作用可以逆转。SLO对中性 粒细胞有破坏作用;对哺乳动物的血小板、心肌细胞、 巨噬细胞、神经细胞等也有毒性作用。抗原性强,感 染后患者机体产生抗SLO抗体,病愈后可持续数月甚 至数年。风湿热患者血清SLO抗体显著增高,活动性 病例升高更显著,可作为新近链球菌感染或风湿活动 的辅助诊断。 2.SLS 是一种小分子的糖肽,无抗原性。 对氧稳定,对热和酸敏感。多数A、C、G 群及某些其他群链球菌产生。能破坏白细 胞和血小板。血琼脂平板上菌落周围的溶 血环是由SLS所致。 (2)致热外毒素 由A群链球菌溶原菌株产生的致热外毒素
14、(SPE), 曾称红疹毒素或猩红热毒素。 为蛋白质,对热稳定,具有抗原性,是人类猩红热的 主要致病物质,具有损害细胞或组织,使患者产生红 疹并具内毒素样致热作用。 分为A、B、C三型,A型和C型分别由噬菌体携带的 speA和speC编码,B型由染色体基因speB编码。均 为超抗原,刺激T细胞诱发淋巴细胞合成和释放TNF、 IL-1和IL-6,进一步导致发热、休克及组织损伤。 (二)所致疾病 1侵袭性疾病 皮肤和皮下组织急性化脓性炎症 感染部位界限不明 显,脓性分泌物稀薄,常引起蜂窝组织炎;沿淋巴管 和血流扩散引起急性淋巴管炎、淋巴结炎及败血症。 其他感染 如扁桃体炎、咽炎、中耳炎、乳突炎、肾
15、盂肾炎、产褥热等。无乳链球菌引起新生儿菌血症和 脑膜炎。肺炎链球菌是大叶性肺炎、支气管炎的病原 菌,还可引起中耳炎、乳突炎、鼻窦炎、脑膜炎和菌 血症。 草绿色链球菌是人体口腔、消化道、女性生殖道的正 常菌群;可引起心脏瓣膜异常患者的亚急性细菌性心 内膜炎。 2毒素性疾病 (1)猩红热 是由产生SPE的A群链球菌引 起的全身中毒症状。常继发于严重的咽炎 或皮肤软组织感染。少数还可见心肌炎、 肾小球肾炎等病变。 3变态反应性疾病 (1)风湿热 由A群链球菌的多种型别引起, 常继发于A群链球菌感染的咽炎,潜伏期为 15周,易感人群为10岁以下儿童。临床表现 以风湿性关节炎、风湿性心脏病为主。致病机
16、制链球菌细胞壁多糖抗原与心肌瓣膜、关节 组织糖蛋白有共同抗原性;胞壁蛋白抗原与心 肌有共同抗原性;属第型变态反应。可能 是M蛋白的免疫复合物沉积于心瓣膜和关节滑 液膜上造成。属第III型变态反应。 3变态反应性疾病 (2)急性肾小球肾炎 大多数由A群12型链球 菌引起,多见于儿童和少年。临床表现为蛋白 尿、浮肿和高血压。其致病机制:链球菌的 某些抗原与肾小球基底膜有共同抗原,机体针 对链球菌所产生的抗体与肾小球基底膜发生反 应,属第II型变态反应;由链球菌的M蛋白 所产生的相应抗体形成的免疫复合物沉积于肾 小球基底膜,造成基底膜损伤,属于第III型变 态反应。 猪链球菌病 猪链球菌病主要是由几
17、种C、D、E及L群链 球菌引起,现已发现其荚膜抗原血清型有 35种以上。大多数致病性血清型在19血清 型。血清型2为最常见和毒力最强的血清型。 人主要通过接触病死猪感染。 三、微生物学检验 链球菌的基本特性 1. 形态结构 链球菌是直径小于2m的球形或卵圆形革兰阳 性球菌,呈链状排列,链的长短和细菌的种类 及生长环境有关。 肺炎链球菌呈矛尖状,宽端相对尖端向外,成 双排列,无芽胞、无动力,但能形成荚膜和黏 液层。 2.抗原结构 抗原结构复杂,主要有多糖抗原和蛋白抗 原,前者位于细胞壁以此可将链球菌分类 为A、B、C、D、F、G等20群,后者主要 有M蛋白、F蛋白和G蛋白等。 3.变异性 肺炎淋
18、球菌的pbp 1a、pbp 2x和pbp 2b的单 个突变或多个同时突变,导致对青霉素或 头孢菌素的耐药。 4.培养特性 兼性厌氧菌,肺炎链球菌和草绿色链球菌某些 种需要CO2促进其生长 营养要求高,须在培养基中加入血液、血清。 最适生长温度3537,pH7.47.6 血平板上形成灰白色,透明或半透明,表面光 滑的小菌落;不同菌种的菌落可分别形成、 三种溶血现象; 4.培养特性 B群链球菌菌落较大,溶血环较A、C、 G群模糊,某些B群链球菌无溶血环。 牛型链球菌则为无溶血环呈灰色菌落 液体培养基中表现为絮状和颗粒沉淀 肺炎链球菌因荚膜多糖使菌落呈黏液状, 因产生自溶酶,在平板上培养48小时后
19、出现中心凹陷的“脐窝状”菌落。 5.抵抗力 本菌属大多数细菌对干燥和消毒剂敏感, 除肺炎链球菌外,本菌属细菌较少引起细 菌耐药性,但近年对青霉素耐药甚至多重 耐药的肺炎链球菌的出现并在全球播散, 引起高度关注。 (二)链球菌的临床检验程序 标本采集 咽拭子、痰液、脓汁和血液等标本采集后 在2h内运送到实验室,立即进行检查和接 种。对B群溶血链球菌的检查,用无菌棉签 采集第35周37周妊娠妇女的阴道分泌物, 置于含多粘菌素(10g/ml)和萘啶酸 (15g/ml)选择性培养肉汤中孵育1824h, 再作分离培养。 2.标本直接检查 显微镜检查 标本涂片、革兰染色、显微镜检查见链状排列 革兰阳性球菌
20、有助于无正常菌群污染标本的诊 断。 抗原检测 咽拭标本的A群链球菌和女性生殖道标本的B群 链球菌可用抗原检测 荚膜肿胀试验用于检查肺炎链球菌。 3.分离培养与鉴定 分离培养采用羊血琼脂平板培养有助于识 别溶血特性和进一步鉴定。 初代分离需用5%CO2环境,3537孵育 24h,观察菌落性状 菌落周围呈现透明溶血环的为溶血性链球菌, 菌落直径大于0.5mm或小于0.5mm。 草绿色溶血环的为溶血性链球菌 有些菌落灰白色不出现溶血环。 (2)初步鉴定 取分离平板上生长的菌落周围呈现溶血或 不溶血的单个菌落作涂片,革兰染色镜检 革兰阳性球菌,链状或短链状排列 触酶试验阴性,6.5%NaCl不生长者
21、可确定为链球菌属细菌 (3)溶血性链球菌鉴定 Lancefield群特异性抗原鉴定 根据Lancefield分群的要求提取各菌落的抗原,与 相应的分群血清进行凝集试验。 与B群抗血清凝集的菌株可直接确认为无乳链菌 与F群抗血清凝集并且菌落直径0.5mm可确定为 米勒链球菌 与A、C、G群抗血清凝集的菌株不能确定种类, 还需根据菌落大小和生化反应进一步鉴定。 Lancefield 抗原群 菌落大 小(mm) 菌种名PYRVP CA MP BGU R A0.5化脓性链球菌 A0.5米勒链球菌 B 无乳链球菌 C0.5马链球菌 C0.5米勒链球菌 F0.5米勒链球菌 G0.5似马链球菌 G0.5米勒
22、链球菌 未分群0.5米勒链球菌 杆菌肽敏感试验 A群链球菌对0.04U杆菌肽几乎全部敏感。 从临床分离的菌株中有5%15%非A群链球菌 如B、C和G群链球菌等也敏感。 而其他群链球菌绝大多数对其耐药。 可作为A群链球菌的筛选试验。有别于其他 PYR阳性的溶血性细菌(猪链球菌、海豚链 球菌)和A群小菌落溶血性链球菌(米勒链 球菌)。 CAMP试验 无乳链球菌能产生CAMP因子,它可促进金 黄色葡萄球菌溶血能力,使其产生显著的 协同溶血作用。本法可作为无乳链球菌的 初步鉴定试验 非溶血链球菌鉴定 菌 种optochin敏感试验胆汁溶菌试验胆汁七叶苷试验 肺炎链球菌 S+ 草绿色链球菌 R 牛链球菌
23、 R+ 草绿色链球菌鉴定 菌 群VP脲酶精氨酸七叶苷甘露醇山梨醇 温和链球菌群 变异链球菌群 唾液链球菌群 / 米勒链球菌群 / 第三节 肠球菌属 一、概述 肠球菌属(Enterococus) 广泛分布在自然界,常栖居在人、动物的 肠道和女性生殖道 为医院感染的重要病原菌 二、临床意义 肠球菌广泛分布于自然环境及人和动物消 化道内。近年来,研究者在肠球菌内发现 了一个约包含150个基因的致病DNA片段, 称为“致病岛”。包括多种致病因子,可 增强肠球菌离开人类肠道后的侵袭力,引 起肠道外感染。 二、临床意义 致病因素 表面黏附素、炎症调节因子 、毒性分泌物。 所致疾病 泌尿系感染。 心内膜炎
24、腹膜炎 牙髓疾病 腹腔和盆腔创伤时肠球菌感染较常见。 肠球菌引起的菌血症常发生于有严重基础疾患的老年人、 长期住院接受抗菌药物治疗的免疫功能低下患者。 临床标本中分离最常见的是粪肠球菌,约占 80%90%,屎肠球菌约占5%10%,很少分离到肠 球菌属的其他种。 三、微生物学检验 肠球菌的基本特性 形态结构 为革兰阳性球菌、呈单个,成对或短链状排列, 呈球杆状;液体培养基中呈卵圆形、链状排列。 无芽胞和荚膜,个别菌种有稀疏鞭毛。 抗原成分 含链球菌D群抗原。 培养特性 兼性厌氧,最适生长温度35,多数菌株 在10和45均能生长。 营养要求不高。 部分粪肠球菌菌株在含有兔血、马血或人 血的平板上出
25、现溶血,而在羊血平板上不 出现。其他菌种出现溶血或不溶血。 所有菌株在含6.5%NaCl肉汤中能生长,在 40%胆汁培养基中能分解七叶苷。 抵抗力 肠球菌属细菌 对头孢菌素类、林可霉素类和磺胺类抗菌 药物耐药。 近年来主要表现为对氨基糖苷类耐药和对 万古霉素耐药。 对万古霉素的耐药是由van A、van B和van C等基因介导。 (二)肠球菌的临床检验程序 标本采集 常规方法采集血、尿、创伤标本和其他拭子。 标本直接检查 显微镜检查 涂片染色显微镜检查可见单个、成双或短链排列卵圆形革兰阳 性球菌。 核酸检测 16s rRNA基因、efaA、ace是常用的检测肠球菌的靶基因。 万古霉素耐药基因
26、van的检测可直接指示对万古霉素的耐药性。 分离培养与鉴定 标本接种于含血琼脂平板,若送检标本中含革兰 阴性杆菌,可选用选择鉴别培养基,常用的有: 叠氮胆汁七叶苷琼脂,可抑制革兰阴性菌生长,而肠 球菌分解七叶苷产生黑色菌落; 哥伦比亚多粘菌素-萘啶酸琼脂(CAN) 苯乙基乙醇琼脂(PEA) 接种标本平板置于3537,孵育24h后形成灰白、 不透明、表面光滑、直径0.51mm大小的圆形菌 落,血平板上为溶血或不溶血,粪肠球菌的某些 菌株在马血、兔血平板上出现溶血。 初步鉴定 肠球菌属细菌革兰染色阳性,卵圆形,单 个、成双或短链排列。 触酶阴性、胆汁七叶苷和PYR阳性、6.5% NaCl肉汤中能生
27、长。 但粪肠球菌培养于含血的培养基中,可合 成细胞色素或触酶或两者皆有,因而某些 菌株可表现为触酶弱阳性。 与其他触酶阴性、兼性厌氧革兰 阳性球菌鉴别 菌属万古霉素 分解葡萄 糖产气 PYR胆汁七叶苷6.5%NaCl 生长温度 1045 肠球菌属敏感 乳球菌属敏感VV 链球菌属敏感aV 明串珠菌属耐药VbVV 肠球菌属间的菌种鉴定 有赖于糖代谢试验。根据对甘露醇,山梨醇和精氨酸 的代谢分成五群。 第一群 分解甘露醇、山梨糖产酸,不水解精氨酸; 第二群 分解甘露醇和水解精氨酸; 第三群 水解精氨酸,不分解甘露醇、山梨醇和山梨糖, 第四群为 不分解甘露醇,山梨糖,不水解精氨酸, 第五群为 分解甘露
28、醇,不分解山梨糖,不水解精氨酸, 第四节 其他需氧革兰阳性球菌 一、触酶阳性的革兰阳性球菌 微球菌属(Micrococcus)、巨球菌属(Macrococcus)、动 球菌属(Planococcus)、考氏考克氏菌(Kocuria kristinae)以 及触酶微弱阳性的差异球菌属(Alloiococcus)和粘性罗氏菌 (Rothia mucilaginosa) 二、触酶阴性的革兰阳性球菌 乳球菌属(Lactococcus)、气球菌属(Aerococcus)、片 球菌属(Pediococcus)、孪生球菌属(Gemella)、白联 球菌属(Leuconostoc)和生活力缺损菌属(Abiot
29、rophia) 第五节 奈瑟菌属 奈瑟菌属包括 淋病奈瑟菌(N.gonorrhoeae) 脑膜炎奈瑟菌(N.meningitidis) 解乳糖奈瑟菌、干燥奈瑟菌、微黄奈瑟菌、粘 液奈瑟菌、浅黄奈瑟菌、灰色奈瑟菌、延长奈 瑟菌、去氮奈瑟菌和多糖奈瑟菌等 仅淋病奈瑟菌和脑膜炎奈瑟菌对人致病 二、临床意义 脑膜炎奈瑟菌 致病因素 荚膜 菌毛 内毒素 所致疾病 流行性脑脊髓膜炎 可导致机体免疫缺陷患者的非脑脊髓膜炎、急性或慢性菌血症 引起老年人肺炎、结膜炎等 可以在鼻咽部形成带菌状态 二、临床意义 淋病奈瑟菌 致病因素 菌毛 脂多糖 IgA1蛋白酶 外膜蛋白P 所致疾病 单纯性淋病 盆腔炎 口咽部和肛
30、门直肠淋病; 淋菌性结膜炎 播散性淋病 微生物学检验 奈瑟菌属的基本特性 形态结构 革兰阴性双球菌,菌体直径0.61.5m,形似双肾或咖 啡豆样,凹面相对 抗原成分 脑膜炎奈瑟菌 荚膜多糖抗原 具有群特异性。分为至少13个血清群,与人类疾 病关系密切的主要是A、B、C、Y及W-135群。A群及C群是引 起流行性脑脊髓膜炎的主要血清群。 外膜蛋白 淋病奈瑟菌 菌毛蛋白抗原、外膜蛋白抗原、脂寡糖抗原 培养特性 大多数奈瑟菌属细菌需要在培养基中添加羊血、兔血 或血清,对脂肪酸敏感,在培养基中需加入可溶性淀 粉。需氧生长,初次分离需要5%7%CO2和高湿度刺 激生长。最适生长温度3537,低于30不生
31、长。 血琼脂平板或巧克力(色)琼脂平板上呈光滑、湿润、 透明或半透明、直径12mm的不溶血、圆形、灰蓝色 菌落; 卵黄琼脂平板上为无色、光滑、湿润奶油状的菌落。 在液体培养基中呈轻度或中度混浊生长,无菌膜。 脑膜炎奈瑟菌于孵育24小时后在培养基上发生自溶。 抵抗力 奈瑟菌属细菌对寒冷、干燥和热的抵抗力 弱,对化学消毒剂敏感。对青霉素敏感, 但近年来由质粒介导的内酰胺酶所致的耐 药在淋病奈瑟菌中产生较多。 生化特性 菌 种 在巧克力平板 上的菌落形态 M T M M L NY C 生长试验氧化分解产酸硝 酸 盐 还 原 多 糖 合 成 D N A 酶 巧克力 平板或 血平板 (22) 营养 琼脂
32、 ( 35 ) 葡 萄 糖 麦 芽 糖 乳 糖 蔗 糖 果 糖 脑膜炎奈瑟菌灰褐色、半透 明 、 光 滑 1 2mm +-V+- 淋病奈瑟菌灰褐色,半透 明,光滑0.5 1mm +-+- 卡他莫拉菌浅红棕色,不 透明,干燥1 3mm V+-+-+ 奈瑟菌属的临床检验程序 1.标本采集 脑膜炎奈瑟菌 无菌方法抽取脑脊液、关节液、血液、瘀点穿刺液等标本,采 集后立即送往实验室,或用血平板进行床边接种后置35孵育。 血液标本接种在血液培养瓶中置35孵育。标本运送时需要 35保温。 淋病奈瑟菌 用无菌塑料棒涤纶拭子,伸入阴道后穹隆或宫颈内1cm处停留 1015秒时间,蘸取阴道和宫颈分泌物; 采集尿道分泌物时应弃去前段脓性分泌物,留取后段作为标本; 尿液可作为检查标本; 直肠肛拭标本应废弃第一根污染棉签,用第二根棉签醮取的分 泌物; 新生儿结膜炎时应采取眼结膜表面分泌物。 标本直接检查 显微镜检查 脑脊液 直接或经离心后取沉淀涂片 皮肤瘀点渗出液涂片 革兰染色后显微镜下见白细胞内外的革兰阴性
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