第三章 残留物质的检测技术

1、现代食品安全检测技术 授课老师：张珍林 生物与制药工程学院食品工程教研室 现代食品安全检测技术 主要内容主要内容 农农 药药 1 兽兽 药药 2 第三章残留物质的检测技术残留物质的检测技术 第三章残留物质的检测技术残留物质的检测技术 通过本章学习，了解食品中 残留物质的种类，掌握农药残留物的理化性质， 熟悉有机氯、有机磷农药的预处理办法和检测 方法。 第一节第一节 食品中农药残留及其检测食品中农药残留及其检测 农药是农业生产中使用的各种药剂统称，农药是农业生产中使用的各种药剂统称， 种类很多。种类很多。 第三章残留物质的检测技术残留物质的检测技术 农药进入人体的方式农药进入人体的方式 土壤、水

2、土壤、水 、空气、空气 家禽、畜家禽、畜植物、饲料植物、饲料 水生动、植物水生动、植物 肉、蛋、乳肉、蛋、乳 人人 第三章残留物质的检测技术残留物质的检测技术 我国农药生产现状及发展趋势：我国农药生产现状及发展趋势： 目前全世界实际生产和使用的农药的品种为目前全世界实际生产和使用的农药的品种为500 多种，其中大量使用的有多种，其中大量使用的有100种，主要是化学合成种，主要是化学合成 生产的。生产的。 我国现有主要农药合成企业近我国现有主要农药合成企业近400家，已建成家，已建成700 千吨以上原药生产装置，可常年生产千吨以上原药生产装置，可常年生产250多种原药，多种原药， 农药中产量居世

3、界第二位（美国第一），农药产量农药中产量居世界第二位（美国第一），农药产量 呈逐年增长的趋势。呈逐年增长的趋势。我国已由农药进口国变成农药我国已由农药进口国变成农药 出口国。出口国。 第三章残留物质的检测技术残留物质的检测技术 存在问题存在问题： 1 1、产品结构不合理，个别品种老化、产品结构不合理，个别品种老化 杀虫剂杀虫剂 杀菌剂杀菌剂 除草剂除草剂 我国我国 68.5% 10.4% 18.3%68.5% 10.4% 18.3% 发达国发达国 40% 20% 40%40% 20% 40% 第三章残留物质的检测技术残留物质的检测技术 2 2、农药加工落后，助剂研究滞后、农药加工落后，助剂研究

4、滞后 我国原药与制剂比例较低，目前为我国原药与制剂比例较低，目前为1:91:9但发但发 达国家为达国家为1:10-301:10-30。 3 3、生产规模小，工艺技术落后，产品质量差、生产规模小，工艺技术落后，产品质量差 我国农药产量约占全球的我国农药产量约占全球的25%25%但销售额不足但销售额不足 8%8% 4 4、生物农药还应大力发展。、生物农药还应大力发展。 第三章残留物质的检测技术残留物质的检测技术 农药在防治农作物病虫害、控制人类传染病、提农药在防治农作物病虫害、控制人类传染病、提 高农畜产品的产量和质量以及确保人体健康等方高农畜产品的产量和质量以及确保人体健康等方 面，都起着重要的

5、作用。但是，大量广泛用农药面，都起着重要的作用。但是，大量广泛用农药 也会造成对食物的污染。也会造成对食物的污染。 农药残留农药残留是指农药施用后，残存在生物体、农副是指农药施用后，残存在生物体、农副 产品和环境中的微量农药原体、有毒代谢产物、产品和环境中的微量农药原体、有毒代谢产物、 降解物和杂质的总称。残留的数量叫残留量。降解物和杂质的总称。残留的数量叫残留量。 第三章残留物质的检测技术残留物质的检测技术 食品中普遍存在农药残留食品中普遍存在农药残留, , 残留量随食品残留量随食品 种类及农药的种类不同而有很大差异，由于种类及农药的种类不同而有很大差异，由于 农药的毒性都很大，有的还可在人

6、体内蓄积农药的毒性都很大，有的还可在人体内蓄积 ，对人体造成危害。，对人体造成危害。食品中残留农药过高会食品中残留农药过高会 导致导致癌症和帕金森症。癌症和帕金森症。 第三章残留物质的检测技术残留物质的检测技术 有机氯有机氯 有机磷有机磷 氨基甲酸酯氨基甲酸酯 拟除虫菊酯类拟除虫菊酯类 第三章残留物质的检测技术残留物质的检测技术 1.有机氯农药有机氯农药（OCPs） 主要有六六六粉主要有六六六粉(六氯环己烷六氯环己烷)、DDT(二氯二苯三氯二氯二苯三氯 乙烷乙烷) 毒性特点：毒性特点： 难分解、半衰期难分解、半衰期10年以上，高残留；年以上，高残留； 污染食品严重，脂溶性强，蓄积于脂肪和脂肪高

7、的污染食品严重，脂溶性强，蓄积于脂肪和脂肪高的 组织；组织； 中等毒性，致癌、致畸作用。中等毒性，致癌、致畸作用。 性质：性质： 不溶于水，易溶于脂肪、丙酮、乙醇、石油醚、环不溶于水，易溶于脂肪、丙酮、乙醇、石油醚、环 己烷，对光、热、酸稳定，对碱不稳定。己烷，对光、热、酸稳定，对碱不稳定。 第三章残留物质的检测技术残留物质的检测技术 2.2.有机磷农药有机磷农药（OPPsOPPs） 是含有是含有CPCP键或键或COPCOP、CSPCSP、CNPCNP 键的有机化合物，应用广。键的有机化合物，应用广。 （1 1） 分类：分类： l高毒有机磷高毒有机磷 （早期发展，现已被禁止使用）（早期发展，现

8、已被禁止使用） 如对硫磷（如对硫磷（16051605）、内吸磷（）、内吸磷（10591059）、甲胺）、甲胺 磷（磷（39113911）等；）等； l中等毒有机磷中等毒有机磷 如乐果、杀螟松、倍硫磷等；如乐果、杀螟松、倍硫磷等； l低毒有机磷低毒有机磷 如敌百虫、马拉硫磷、双硫磷等。如敌百虫、马拉硫磷、双硫磷等。 第三章残留物质的检测技术残留物质的检测技术 （2 2）特点）特点 l化学性质不稳定，易分解，污染食品后残留时间化学性质不稳定，易分解，污染食品后残留时间 短，在生物体不易蓄积。短，在生物体不易蓄积。 l在加工处理过程（碾磨、洗涤、去皮、烹调）中在加工处理过程（碾磨、洗涤、去皮、烹调）

9、中 可减少。可减少。 l以急性毒性为主，表现出神经中毒症状。长时间以急性毒性为主，表现出神经中毒症状。长时间 接触对肝脏功能有损。接触对肝脏功能有损。 过量或施用时期不当或使用高毒农药过量或施用时期不当或使用高毒农药 是是 造成有机磷农药污染食品的主要原因造成有机磷农药污染食品的主要原因 第三章残留物质的检测技术残留物质的检测技术 3.3.氨基甲酸酯类氨基甲酸酯类 是一种高效、低毒、低残留的农药。是一种高效、低毒、低残留的农药。 通式：通式： 常见的有：甲萘威、呋喃丹、速灭威等。常见的有：甲萘威、呋喃丹、速灭威等。 第三章残留物质的检测技术残留物质的检测技术 4.4.拟除虫菊酯类拟除虫菊酯类

10、是模拟天然除虫菊酯化学结构而合成的农药。是模拟天然除虫菊酯化学结构而合成的农药。 常用的有：氯菊酯、溴菊酯、氯氰菊酯、甲醚菊酯。常用的有：氯菊酯、溴菊酯、氯氰菊酯、甲醚菊酯。 特点：特点： l高效、低毒、低残留，在环境中的降解以光解为高效、低毒、低残留，在环境中的降解以光解为 主；主； l对胆碱酯酶无抑制作用；对胆碱酯酶无抑制作用； l亲脂性强，可溶于多种有机溶剂，在水中的溶解亲脂性强，可溶于多种有机溶剂，在水中的溶解 度小度小, , 在酸性条件下稳定，在碱性条件下易分解。在酸性条件下稳定，在碱性条件下易分解。 第三章残留物质的检测技术残留物质的检测技术 食品中农药残留分析检测技术食品中农药残

11、留分析检测技术 1. 1. 薄层色谱法（薄层色谱法（TLCTLC） 2. 2. 气相色谱法（气相色谱法（GCGC）占占70%70% 3. 3. 气相色谱气相色谱- -质谱法（质谱法（GC-MSGC-MS） 4. 4. 液相色谱法（液相色谱法（HPLCHPLC） 5. 5. 液相色谱液相色谱- -质谱法（质谱法（LC-MSLC-MS） 6. 6. 超临界流体色谱（超临界流体色谱（SFCSFC） 7. 7. 毛细管电泳（毛细管电泳（CECE） 8. 8. 免疫分析（免疫分析（IAIA） 化学法、比色、分光光度法化学法、比色、分光光度法 缺少特异性，灵敏度低缺少特异性，灵敏度低 纸色谱、薄层色谱法纸

12、色谱、薄层色谱法 GC、HPLC GC-MS、LC-MS 定性定量、多残留检定性定量、多残留检 测测 第三章残留物质的检测技术残留物质的检测技术 一一 食品中有机氯农药残留量测定食品中有机氯农药残留量测定 GB/T 5009.19-2008 GC-ECDGC-ECD法（法（气相色谱气相色谱-电子捕获检测器法电子捕获检测器法） TLCTLC法（薄层色谱法）法（薄层色谱法） 第三章残留物质的检测技术残留物质的检测技术 样品处理及检测：样品处理及检测： l配标准混合使用液配标准混合使用液 l样品处理样品处理 1. 1.样品提取：样品提取： 用丙酮、己烷、乙醚、石油醚等。用丙酮、己烷、乙醚、石油醚等。

13、 2. 2.净化：用净化：用H H2 2SOSO4 4磺化处理，除脂肪、蜡质、色素磺化处理，除脂肪、蜡质、色素 等。等。 3. 3.浓缩：浓缩：K KD D减压浓缩器。减压浓缩器。 lGCGC检测、检测、ECDECD检测器。检测器。 注：色谱柱用硬质玻璃柱，若用不锈钢柱，易引注：色谱柱用硬质玻璃柱，若用不锈钢柱，易引 起农药分解。采液体样品时，应用玻璃瓶，不能用起农药分解。采液体样品时，应用玻璃瓶，不能用 塑料瓶。检测器的温度不应低于塑料瓶。检测器的温度不应低于250250，否则，检，否则，检 测器很难平衡。注意尾吹气流量及分流比。测器很难平衡。注意尾吹气流量及分流比。 第三章残留物质的检测技

14、术残留物质的检测技术 食品中农药残留提取方法食品中农药残留提取方法 索式提取法索式提取法 超声波提取法超声波提取法 高速均质提取法高速均质提取法 固相微萃取和超临界流体萃取技术固相微萃取和超临界流体萃取技术 提取液净化方法提取液净化方法 液液- -液分配法液分配法 吸附柱层析法吸附柱层析法 固相萃取净化法固相萃取净化法 凝胶色谱净化法凝胶色谱净化法 第三章残留物质的检测技术残留物质的检测技术 气相色谱法测定食品中有机氯农药残留量气相色谱法测定食品中有机氯农药残留量 农药标准溶液：分别准确称取农药标准溶液：分别准确称取-666-666、666666、 666666、666666、p p，p-DD

15、Tp-DDT、p,p-DDDp,p-DDD、p,p-p,p- DDEDDE、七氯、艾氏剂、狄氏剂、五氯硝基苯等农药标、七氯、艾氏剂、狄氏剂、五氯硝基苯等农药标 准品适量准品适量, ,用苯配成用苯配成100g/mL100g/mL的贮备液存于冰箱中的贮备液存于冰箱中 备用。临用时，根据各农药在仪器上的响应灵敏度备用。临用时，根据各农药在仪器上的响应灵敏度, , 用石油醚将贮备液稀释成一定不同浓度的标准使用用石油醚将贮备液稀释成一定不同浓度的标准使用 液，如六六六建议标准使用液浓度为液，如六六六建议标准使用液浓度为20g/mL,20g/mL,滴滴滴滴 涕为涕为0.01g/mL,0.01g/mL,再用

16、石油醚为稀释液配成标准混合再用石油醚为稀释液配成标准混合 使用液。使用液。 第三章残留物质的检测技术残留物质的检测技术 实验步骤实验步骤 （一）样品的处理（一）样品的处理 1 1植物性样品的提取与净化植物性样品的提取与净化 （1 1）粮食：称取粉碎的、过）粮食：称取粉碎的、过2020目筛的粮食试样目筛的粮食试样10g10g， 置于置于100mL100mL具塞三角瓶中，加入具塞三角瓶中，加入20mL20mL石油醚，于振荡石油醚，于振荡 器上振摇提取器上振摇提取30min30min。 第三章残留物质的检测技术残留物质的检测技术 （2 2）蔬菜：取适量蔬菜擦净）蔬菜：取适量蔬菜擦净, ,去掉不可食部

17、分后称去掉不可食部分后称 取蔬菜试样取蔬菜试样20g20g，切细，切细, ,置于研钵中置于研钵中, ,加适量石英沙加适量石英沙, , 充分研细充分研细, ,研匀，用研匀，用30mL30mL丙酮和丙酮和30mL30mL石油醚洗入烧石油醚洗入烧 杯中杯中, ,经抽滤，滤液移入经抽滤，滤液移入250mL250mL分液漏斗中，加入分液漏斗中，加入 100mL 20g/L100mL 20g/L硫酸钠水溶液，充分摇匀，静置分层，硫酸钠水溶液，充分摇匀，静置分层， 将下层溶液转移到另一将下层溶液转移到另一250mL250mL分液漏斗中，用分液漏斗中，用40mL40mL 石油醚分石油醚分2 2次萃取，合并次萃

18、取，合并3 3次萃取的石油醚层，过次萃取的石油醚层，过 15g15g无水硫酸钠，于旋转蒸发仪上减压浓缩至无水硫酸钠，于旋转蒸发仪上减压浓缩至10mL10mL。 第三章残留物质的检测技术残留物质的检测技术 （3 3）层析柱的制备：玻璃层析柱中先加入）层析柱的制备：玻璃层析柱中先加入1cm1cm高无高无 水硫酸钠，再加入水硫酸钠，再加入5g55g5水脱活弗罗里硅土，最后水脱活弗罗里硅土，最后 加入加入1cm1cm高无水硫酸钠，轻轻敲实，用高无水硫酸钠，轻轻敲实，用20mL20mL石油醚石油醚 淋洗净化柱，弃去淋洗液，柱面要留有少量液体。淋洗净化柱，弃去淋洗液，柱面要留有少量液体。 （4 4）净化与

19、浓缩：准确吸取试样提取液）净化与浓缩：准确吸取试样提取液2mL2mL，加入，加入 已淋洗过的净化柱中，用已淋洗过的净化柱中，用100mL100mL石油醚乙酸乙酯石油醚乙酸乙酯 （95955 5）洗脱，收集洗脱液于蒸馏瓶中，于旋转蒸）洗脱，收集洗脱液于蒸馏瓶中，于旋转蒸 发仪上浓缩近干，用少量石油醚多次溶解残渣于刻发仪上浓缩近干，用少量石油醚多次溶解残渣于刻 度离心管中，最终定容至度离心管中，最终定容至1.0mL1.0mL，供气相色谱分析。，供气相色谱分析。 第三章残留物质的检测技术残留物质的检测技术 2 2动物性样品的提取与净化动物性样品的提取与净化 (1)(1)肉类去筋后肉类去筋后, ,切成

20、小块切成小块, ,制成肉糜制成肉糜, ,称取称取20g(20g(精确到精确到 0.01g)0.01g)于研钵中于研钵中, ,加无水硫酸钠加无水硫酸钠80g,80g,研成细粉研成细粉, ,移入具移入具 塞三角瓶中塞三角瓶中, ,加环己烷加环己烷100mL100mL，振摇，振摇30min,30min,过滤过滤, ,收集收集 滤液于另一分液漏斗中加浓硫酸滤液于另一分液漏斗中加浓硫酸10 mL10 mL磺化磺化, ,振摇、放振摇、放 气、静置分层，弃磺化层。有机相多次加浓硫酸气、静置分层，弃磺化层。有机相多次加浓硫酸5 mL5 mL， 反复磺化，直到无色透明，弃磺化层。有机相加反复磺化，直到无色透明，

21、弃磺化层。有机相加2%2%硫硫 酸钠溶液酸钠溶液100 mL100 mL，振摇、放气、静置分层，弃水层。，振摇、放气、静置分层，弃水层。 有机相过有机相过15g15g无水硫酸钠脱水于无水硫酸钠脱水于K-DK-D浓缩器中，浓缩至浓缩器中，浓缩至 约约0.5-1.0mL0.5-1.0mL，定容至，定容至1mL1mL。浓缩样液可直接用于。浓缩样液可直接用于GCGC仪仪 检测。同时做空白实验。检测。同时做空白实验。 第三章残留物质的检测技术残留物质的检测技术 （2 2）蛋类：蛋类去壳，制成匀浆，称取蛋类试样）蛋类：蛋类去壳，制成匀浆，称取蛋类试样 10g10g（精确到（精确到0.01g0.01g），于

22、具塞三角瓶中，加丙酮），于具塞三角瓶中，加丙酮 50mL50mL，振摇，振摇30min,30min,过滤于过滤于K-DK-D浓缩器中，浓缩除去浓缩器中，浓缩除去 丙酮，向残渣加环己烷丙酮，向残渣加环己烷50mL50mL溶解，移入分液漏斗溶解，移入分液漏斗 中中, ,振摇、静置分层，分出有机相，再用振摇、静置分层，分出有机相，再用20mL20mL环己环己 烷分两次萃取，合并有机相，经烷分两次萃取，合并有机相，经15g15g无水硫酸钠脱无水硫酸钠脱 水于分液漏斗中，用环己烷补足至水于分液漏斗中，用环己烷补足至100mL100mL，加浓硫，加浓硫 酸酸10mL10mL磺化，以下操作同肉类样品处理。浓

23、缩样磺化，以下操作同肉类样品处理。浓缩样 液可直接用于液可直接用于GCGC仪检测。同时做空白实验。仪检测。同时做空白实验。 第三章残留物质的检测技术残留物质的检测技术 （3 3）乳类：取）乳类：取50g50g鲜乳样或与此相当乳制品于分液鲜乳样或与此相当乳制品于分液 漏斗中，加乙醇漏斗中，加乙醇50 mL50 mL，草酸钾，草酸钾0.5g,0.5g,振摇振摇1min,1min,加加 乙醚乙醚50mL,50mL,摇匀摇匀, ,加环己烷加环己烷50mL,50mL,振摇振摇2min,2min,静置分层，静置分层， 弃下层弃下层, ,有机相经有机相经15g15g无水硫酸钠脱水无水硫酸钠脱水, ,置置K-

24、DK-D浓缩器浓缩器 中，浓缩，残液为黄色透明油状物，加环己烷中，浓缩，残液为黄色透明油状物，加环己烷50mL50mL 溶解，移入分液漏斗中溶解，移入分液漏斗中, ,用环己烷补足至用环己烷补足至100mL100mL，加，加 浓硫酸浓硫酸10mL10mL磺化，以下操作同肉类样品处理。浓缩磺化，以下操作同肉类样品处理。浓缩 样液可直接用于样液可直接用于GCGC仪检测。同时做空白实验。仪检测。同时做空白实验。 第三章残留物质的检测技术残留物质的检测技术 3 3测定测定 （1 1）粮食、蔬菜气相色谱条件）粮食、蔬菜气相色谱条件 色谱柱：石英弹性毛细管柱，色谱柱：石英弹性毛细管柱，0.25mm0.25m

25、m（内径）（内径） 15m15m，内涂有，内涂有OVOV101101 （苯基甲基聚硅氧烷，中苯基甲基聚硅氧烷，中 等极性等极性）固定液。）固定液。 温度：柱温自温度：柱温自180180升至升至230230保持保持30min30min；检测；检测 器、进样口温度器、进样口温度250250。 气体流速：氮气：气体流速：氮气：40mL/min40mL/min，尾吹气：，尾吹气：60mL/min60mL/min， 分流比分流比1 15050。 第三章残留物质的检测技术残留物质的检测技术 （2 2）蛋类、肉类和乳类气相色谱条件）蛋类、肉类和乳类气相色谱条件 色谱柱：石英弹性毛细管柱，色谱柱：石英弹性毛细

26、管柱，0.32mm0.32mm（内径）（内径） 30m30m，内涂有，内涂有OVOV101101 （苯基甲基聚硅氧烷，中苯基甲基聚硅氧烷，中 等极性等极性）固定液）固定液0.25m0.25m。 温度：柱温自温度：柱温自6060以以40/min40/min的速度升温至的速度升温至 170170，再以，再以2/min2/min的速度升温的速度升温55，再以，再以 40/min40/min的速度升温至的速度升温至280280，保持，保持10min10min；检测器；检测器 温度温度300300；进样口温度；进样口温度270270。 气体流速：氮气：气体流速：氮气：1mL/min1mL/min；尾吹：

27、；尾吹：50mL/min50mL/min。 第三章残留物质的检测技术残留物质的检测技术 4 4色谱分析色谱分析 吸取吸取1L1L试样液注入气相色谱仪，记录色谱峰试样液注入气相色谱仪，记录色谱峰 的保留时间和峰高。再吸取的保留时间和峰高。再吸取1L1L混标溶液进样，混标溶液进样， 记录色谱峰的保留时间和峰高。根据组分在色记录色谱峰的保留时间和峰高。根据组分在色 谱上的出峰时间与标准组分比较定性：用外标谱上的出峰时间与标准组分比较定性：用外标 法与标准组分比较定量。法与标准组分比较定量。 第三章残留物质的检测技术残留物质的检测技术 五、注意事项五、注意事项 1 1本法检测灵敏度高，在分析时应注意防

28、止由于色谱柱中本法检测灵敏度高，在分析时应注意防止由于色谱柱中 高沸点固定液、样品净化不完全及载气不纯等带来的污染，高沸点固定液、样品净化不完全及载气不纯等带来的污染， 使其灵敏度下降。使其灵敏度下降。 2 2色谱柱要用硬质玻璃柱，若采用不锈钢柱，金属易引起色谱柱要用硬质玻璃柱，若采用不锈钢柱，金属易引起 农药分解。农药分解。 3 3分析液体样品中有机氯农药采样时，应用玻璃瓶，不能分析液体样品中有机氯农药采样时，应用玻璃瓶，不能 用塑料瓶，因塑料瓶对有机氯农药测定有严重影响。用塑料瓶，因塑料瓶对有机氯农药测定有严重影响。 4 4电子捕获检测器有放射源，故检测器的出口一定要接到电子捕获检测器有放

29、射源，故检测器的出口一定要接到 室外，且每室外，且每6 6个月应测试一次有无放射形泄漏。个月应测试一次有无放射形泄漏。 5 5电子捕获检测器的操作温度一般为电子捕获检测器的操作温度一般为250-300250-300，无论柱温，无论柱温 多么低，检测器的温度均不应低于多么低，检测器的温度均不应低于250250，否则，检测器很，否则，检测器很 难平衡。难平衡。 第三章残留物质的检测技术残留物质的检测技术 二二 食品中有机磷农药残留量的测定食品中有机磷农药残留量的测定 GB/T 5009.20-2003 GB/T 5009.20-2003 原理：原理： 果蔬中果蔬中 有机磷有机磷 残留残留 提提 取

30、取 有机溶有机溶 剂剂 净净 化化 气气 化化 注入注入GCGC 浓浓 缩缩 色谱柱中色谱柱中 分离分离 FPDFPD 检测检测 记录色谱记录色谱 峰峰 比较样品和比较样品和 标准品的色标准品的色 谱峰谱峰 外标定量（外标定量（多用多用 峰高）峰高） 第三章残留物质的检测技术残留物质的检测技术 仪器与试剂仪器与试剂 （一）仪器 1气相色谱仪：附有火焰光度检测器（FPD） 2电动振荡器 3组织捣碎机 4旋转蒸发仪 第三章残留物质的检测技术残留物质的检测技术 （二）试剂（二）试剂 1 1二氯甲烷二氯甲烷 2 2无水硫酸钠：在无水硫酸钠：在700700灼烧灼烧4h4h后备用。后备用。 3 3中性氧化

31、铝：中性氧化铝：300300活化活化4h4h。 4 4有机磷农药标准贮备液：分别准确称取有机磷农有机磷农药标准贮备液：分别准确称取有机磷农 药标准品敌敌畏、乐果、马拉硫磷、对硫磷、甲拌药标准品敌敌畏、乐果、马拉硫磷、对硫磷、甲拌 磷、稻瘟净、倍硫磷、杀螟硫磷及虫螨磷各磷、稻瘟净、倍硫磷、杀螟硫磷及虫螨磷各10.0mg10.0mg， 用苯（或三氯甲烷）溶解并稀释至用苯（或三氯甲烷）溶解并稀释至100mL100mL，放在冰箱，放在冰箱 中保存。中保存。 5 5有机磷农药标准使用液：临用时用二氯甲烷稀释有机磷农药标准使用液：临用时用二氯甲烷稀释 为使用液，使其浓度为敌敌畏、乐果、马拉硫磷、为使用液，

32、使其浓度为敌敌畏、乐果、马拉硫磷、 对硫磷、甲拌磷每毫升各相当于对硫磷、甲拌磷每毫升各相当于1.0g1.0g，稻瘟净、，稻瘟净、 倍硫磷、杀螟硫磷及虫螨磷每毫升各相当于倍硫磷、杀螟硫磷及虫螨磷每毫升各相当于2.0g2.0g。 第三章残留物质的检测技术残留物质的检测技术 实验步骤实验步骤 （一）样品处理（一）样品处理 1 1蔬菜：取适量蔬菜擦净蔬菜：取适量蔬菜擦净, ,去掉不可食部分后称取蔬去掉不可食部分后称取蔬 菜试样，将蔬菜切碎混匀。称取菜试样，将蔬菜切碎混匀。称取10.0g10.0g混匀的试样，置混匀的试样，置 于于250mL250mL具塞锥形瓶中，加具塞锥形瓶中，加30g30g100g1

33、00g无水硫酸钠脱水无水硫酸钠脱水 （根据蔬菜含水量），剧烈振摇后如有固体硫酸钠存（根据蔬菜含水量），剧烈振摇后如有固体硫酸钠存 在，说明所加无水硫酸钠已够。加在，说明所加无水硫酸钠已够。加0.2g0.2g0.8g0.8g活性炭活性炭 脱色（根据蔬菜色素含量）。加脱色（根据蔬菜色素含量）。加70mL70mL二氯甲烷，在振二氯甲烷，在振 荡器上振摇荡器上振摇0.5h0.5h，经滤纸过滤。量取，经滤纸过滤。量取35mL35mL滤液，在通滤液，在通 风柜中室温下自然挥发至近干，用二氯甲烷少量多次风柜中室温下自然挥发至近干，用二氯甲烷少量多次 研洗残渣，移入研洗残渣，移入10mL10mL具塞刻度试管中

34、，并定容至具塞刻度试管中，并定容至2mL2mL， 备用。备用。 第三章残留物质的检测技术残留物质的检测技术 2 2谷物：脱壳、磨粉、过谷物：脱壳、磨粉、过2020目筛、混匀。称取目筛、混匀。称取 10g10g置于具塞锥形瓶中，加入置于具塞锥形瓶中，加入0.5g0.5g中性氧化铝中性氧化铝 （脱油）（小麦、玉米再加（脱油）（小麦、玉米再加0.2g0.2g活性炭）及活性炭）及 20mL20mL二氯甲烷，振摇二氯甲烷，振摇0.5h0.5h，过滤，滤液直接进，过滤，滤液直接进 样。若农药残留过低，则加样。若农药残留过低，则加30mL30mL二氯甲烷，振二氯甲烷，振 摇过滤，量取摇过滤，量取15mL15

35、mL滤液浓缩，并定容至滤液浓缩，并定容至2mL2mL进样。进样。 第三章残留物质的检测技术残留物质的检测技术 （二）色谱条件（二）色谱条件 1 1色谱柱：色谱柱：玻璃柱，内径玻璃柱，内径3mm3mm，长，长1.5m1.5m2.0m2.0m。 担体：酸洗二甲基二氯硅烷化白色担体担体：酸洗二甲基二氯硅烷化白色担体 （1 1）分离测定敌敌畏、乐果、马拉硫磷和对硫磷的）分离测定敌敌畏、乐果、马拉硫磷和对硫磷的 色谱柱色谱柱 2.52.5SESE3030（甲基硅橡胶，极弱极性）和（甲基硅橡胶，极弱极性）和3 3QFQF 1 1（三氟丙基甲基聚硅氧烷，中等极性）混合固定液（三氟丙基甲基聚硅氧烷，中等极性）

36、混合固定液 1.51.5OVOV1717（苯基甲基聚硅氧烷，中等极性苯基甲基聚硅氧烷，中等极性）和）和2 2 QFQF1 1混合固定液混合固定液 第三章残留物质的检测技术残留物质的检测技术 （2 2）分离测定甲拌磷、稻瘟净、倍硫磷、杀螟硫磷）分离测定甲拌磷、稻瘟净、倍硫磷、杀螟硫磷 及虫螨磷的色谱柱及虫螨磷的色谱柱 3 3PEGAPEGA（聚乙二醇己二酸酯，较强极性（聚乙二醇己二酸酯，较强极性 ）和）和5 5 QFQF1 1混合固定液混合固定液 2 2NPGANPGA（己二酸新戊二醇聚酯，中等极性（己二酸新戊二醇聚酯，中等极性 ）和）和3 3 QFQF1 1混合固定液混合固定液 2 2气流速度

37、：气流速度：载气为氮气载气为氮气80mL/min80mL/min；空气；空气50mL/min50mL/min； 氢气氢气180mL/min180mL/min（根据仪器选择各自的最佳比例条（根据仪器选择各自的最佳比例条 件）。件）。 3 3温度：温度：进样口进样口220220；检测器；检测器240240；柱温；柱温180180， 但测定敌敌畏（其稳定性差）为但测定敌敌畏（其稳定性差）为130130。 第三章残留物质的检测技术残留物质的检测技术 （三）测定（三）测定 将有机磷农药标准使用液将有机磷农药标准使用液2L2L5L5L分别注分别注 入气相色谱仪中，可测得不同浓度有机磷标准溶入气相色谱仪中，

38、可测得不同浓度有机磷标准溶 液的峰高，分别绘制有机磷农药标准曲线。同时液的峰高，分别绘制有机磷农药标准曲线。同时 取试样溶液取试样溶液2L2L5L5L注入气相色谱仪中，测得注入气相色谱仪中，测得 峰高，从标准曲线图中查出相应的含量。峰高，从标准曲线图中查出相应的含量。 二氯甲烷作提取剂二氯甲烷作提取剂 毒性毒性 较小较小 较较 便便 宜宜 说明：国际上多用说明：国际上多用乙乙 腈腈作为有机磷农药作为有机磷农药 的提取剂及分配净的提取剂及分配净 化试剂，但其毒性化试剂，但其毒性 较大，且较贵。较大，且较贵。 第三章残留物质的检测技术残留物质的检测技术 三三 氨基甲酸酯类农药残留的测定氨基甲酸酯类

39、农药残留的测定 GCECD法测定氨基甲酸酯类农药残留 与本节有机磷农残的气相色谱测定方法相同 ，详见GBT 5009.104-2003。 第三章残留物质的检测技术残留物质的检测技术 GCFPDGCFPD法测定拟除虫菊酯类农药残留，法测定拟除虫菊酯类农药残留， 详见详见 NY/T 761-2008NY/T 761-2008。 四四 拟除虫菊酯类农药残留的测定拟除虫菊酯类农药残留的测定 第三章残留物质的检测技术残留物质的检测技术 第二节第二节 食品中兽药残留及其检测食品中兽药残留及其检测 一、兽药残留的种类与危害一、兽药残留的种类与危害 典型的兽药是指用于预防和治疗畜禽疾病的药典型的兽药是指用于预

40、防和治疗畜禽疾病的药 物。但是，随着集约化养殖生产的开展，一些化学物。但是，随着集约化养殖生产的开展，一些化学 的、生物的药用成分被开发成具有某些功效的动物的、生物的药用成分被开发成具有某些功效的动物 保健品或饲料添加剂，也属于兽药的范畴。保健品或饲料添加剂，也属于兽药的范畴。 兽药的主要用途有防病治病、促进生长、提高兽药的主要用途有防病治病、促进生长、提高 生产性能、改善动物性食品的品质等。生产性能、改善动物性食品的品质等。 第三章残留物质的检测技术残留物质的检测技术 兽药残留兽药残留是指动物性产品的任何可食部分含有兽药是指动物性产品的任何可食部分含有兽药 母化合物或其代谢物。母化合物或其代

41、谢物。 兽药最高残留限量兽药最高残留限量(MRLVD)(MRLVD)是指某种兽药在食物是指某种兽药在食物 中或食物表面产生的最高允许兽药残留量中或食物表面产生的最高允许兽药残留量( (单位单位gg kgkg，以鲜重计，以鲜重计) )。 第三章残留物质的检测技术残留物质的检测技术 兽药残留的原因：兽药残留的原因： （1）主要是由于各种正常用药和药物滥用造成主要是由于各种正常用药和药物滥用造成 的。的。 （2 2）休药期）休药期( (是指自停止给药到动物获准屠宰是指自停止给药到动物获准屠宰 或其动物性产品获准上市的间隔时间或其动物性产品获准上市的间隔时间) )过短，是造成过短，是造成 动物性食品兽

42、药残留过量的另一个重要原因。动物性食品兽药残留过量的另一个重要原因。 第三章残留物质的检测技术残留物质的检测技术 常见兽药残留的种类如下：常见兽药残留的种类如下： 1 1抗生素类药物抗生素类药物 这类药物多为天然发酵产物，是临床应用最多的一这类药物多为天然发酵产物，是临床应用最多的一 类抗菌药物，如青霉素类、氨基糖苷类、大环内酯类抗菌药物，如青霉素类、氨基糖苷类、大环内酯 类、四环素类、螺旋霉素、链霉素、土霉素、金霉类、四环素类、螺旋霉素、链霉素、土霉素、金霉 素等。素等。 青霉素类最容易引发超敏反应，四环素类、链青霉素类最容易引发超敏反应，四环素类、链 霉素有时也能引起超敏反应。轻至中度的超

43、敏霉素有时也能引起超敏反应。轻至中度的超敏 反应一般表现为短时间内出现血压下降、皮疹、反应一般表现为短时间内出现血压下降、皮疹、 身体发热、血管神经性水肿、血清病样反应等，身体发热、血管神经性水肿、血清病样反应等， 极度超敏反应可能导致过敏性休克甚至死亡。极度超敏反应可能导致过敏性休克甚至死亡。 长期摄入含氨基糖苷类残长期摄入含氨基糖苷类残 留超标的动物性食品，可留超标的动物性食品，可 损害听力及肾脏功能。损害听力及肾脏功能。 第三章残留物质的检测技术残留物质的检测技术 2 2磺胺类药物磺胺类药物 主要用于抗菌消炎，如磺胺嘧啶、磺胺二甲嘧啶主要用于抗菌消炎，如磺胺嘧啶、磺胺二甲嘧啶 、磺胺眯、

44、菌得清、新诺明等。、磺胺眯、菌得清、新诺明等。 近年来，磺胺类药物在动物性食品中的残留超标近年来，磺胺类药物在动物性食品中的残留超标 现象，在所有兽药当中是最严重的。现象，在所有兽药当中是最严重的。 长期摄入含磺胺类药物残留的动物性食品后，药长期摄入含磺胺类药物残留的动物性食品后，药 物可不断在体内蓄积。磺胺类药主要经肾脏排出，在物可不断在体内蓄积。磺胺类药主要经肾脏排出，在 尿中浓度较高，其溶解度又较低，尤其当尿液偏酸性尿中浓度较高，其溶解度又较低，尤其当尿液偏酸性 时，可在肾盂、输尿管或膀胱内析出结晶，产生刺激时，可在肾盂、输尿管或膀胱内析出结晶，产生刺激 和阻塞，造成泌尿系统损伤，引起结晶尿、血尿、管和阻塞，造成泌尿系统损