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文档简介
1、实验二实验二 细胞内酸性蛋白和碱性蛋白的显示细胞内酸性蛋白和碱性蛋白的显示 掌握血涂片制作方法。掌握血涂片制作方法。 掌握酸性蛋白、碱性蛋白显示的原理。掌握酸性蛋白、碱性蛋白显示的原理。 熟悉上述化学成分在细胞中的分布。熟悉上述化学成分在细胞中的分布。 了解上述化学成分显示的方法。了解上述化学成分显示的方法。 一、目的要求一、目的要求 二、二、 实验原理实验原理 细胞内不同蛋白质分子中所带的碱性基团和细胞内不同蛋白质分子中所带的碱性基团和 酸性基团的数量不同,在不同酸性基团的数量不同,在不同PH溶液中,整个溶液中,整个 蛋白质所带静电荷多少也不同。蛋白质所带静电荷多少也不同。在一定生理条件在一
2、定生理条件 下,如整个蛋白质所带的负电荷多,就为酸性蛋下,如整个蛋白质所带的负电荷多,就为酸性蛋 白;带正电荷多,就为碱性蛋白。据此,可将细白;带正电荷多,就为碱性蛋白。据此,可将细 胞经三氯醋酸处理抽提掉核酸后,用不同胞经三氯醋酸处理抽提掉核酸后,用不同PH的的 固绿染液分别染色,使细胞内的酸性和碱性蛋白固绿染液分别染色,使细胞内的酸性和碱性蛋白 质分别显示出来质分别显示出来 蛋白质的基本组成单位是氨基酸,它们同蛋白质的基本组成单位是氨基酸,它们同 时具有氨基和羧基。正常生理条件下细胞内时具有氨基和羧基。正常生理条件下细胞内 酸性蛋白负电荷多,在染色时需带正离子多酸性蛋白负电荷多,在染色时需带正离子多 酸性染料与之反应;而碱性蛋白正电荷多,酸性染料与之反应;而碱性蛋白正电荷多, 在染色时需带负离子多碱性染料与之反应。在染色时需带负离子多碱性染料与之反应。 三三 实验方法实验方法
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