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文档简介
1、 检验医学 近代物理学 生物化学 分子生物学 仪器材料学 计算机 电子技术 激光 色谱、质谱 荧光 2121世纪:现代信息网络技术(远程诊世纪:现代信息网络技术(远程诊 断)与系统生物工程(包括分子生物断)与系统生物工程(包括分子生物 学)、临床医学结合。学)、临床医学结合。 以简便、快以简便、快 速的检测结速的检测结 果,基本满果,基本满 足临床医学足临床医学 检验检验筛检筛检疾疾 病的需求。病的需求。 将待测血液涌洁净的电解液充分稀释,使血细胞在电解液中 成为游散状态,在施以负压,单个血细胞流过小孔,电解液 电阻瞬间变大,经电路处理形成一定的电压值,进行计数。 体积不同,产生的脉冲幅度也不
2、同;白细胞最大,红细胞 次之,血小板最小。根据阈值选择,进行不同细胞的计数。 红细胞的计数红细胞的计数 血小板的计数血小板的计数 血液在血管中的流动血液在血管中的流动 血液在血管中的流动血液在血管中的流动 血液在血管中的流动血液在血管中的流动 1 1影响红细胞聚集性的因素影响红细胞聚集性的因素 F F聚集力聚集力=F=F大分子力大分子力F F电斥力电斥力 F F 切应力切应力 F F表面曲力。表面曲力。 红细胞膜的活性、渗透压、红细胞膜的活性、渗透压、pHpH值、炎症反应、毒值、炎症反应、毒 性等因素性等因素 2 2红细胞聚集性测定的意义红细胞聚集性测定的意义 红细胞的聚集性增高可导致血液黏度
3、增加,使局部血 液停滞,聚集体可闭塞小动脉的入口,造成血液循环 障碍。血流减缓及组织灌注的减低又可加重红细胞的 聚集程度。出现一系列的恶性循环,进而殃及血细胞 本身及血管壁基质。 红细胞聚集性红细胞聚集性 三、红细胞变形性 1 1影响红细胞变形性的因素影响红细胞变形性的因素 红细胞自身因素:红细胞自身因素: 膜粘弹性:膜粘弹性:ATPATP酶活性酶活性,脂质,脂质 组成改变;组成改变; 内黏度:内黏度:A A、HbHb性质的改变,性质的改变,B B、 HbHb浓度的改变;浓度的改变; S/VS/V:正常情况下,红细胞膜有:正常情况下,红细胞膜有 50%50%的膜贮量;的膜贮量;S/VS/V细胞
4、更趋细胞更趋 于球形,张力于球形,张力变形性变形性。 切变率的大小:切变率切变率的大小:切变率变形变形( (激光激光 衍射仪衍射仪) ); 血浆渗透量:渗透量血浆渗透量:渗透量细胞内液外渗细胞内液外渗 内粘内粘,渗透量,渗透量细胞肿胀细胞肿胀 S/VS/V变形变形; 温度:温度: 当当 温度达温度达40-4140-41时、时、RBCRBC膜膜 构象改变构象改变变形变形; 氧化剂:氧化剂氧化剂:氧化剂HbHb变性,膜蛋白交链。变性,膜蛋白交链。 外部因素外部因素 血管中的红细胞血管中的红细胞 血管中的红细胞血管中的红细胞 由一圆平板和一同轴圆锥组成,待测的液体放在圆锥和圆板 间隙内。一般固定圆板
5、,圆锥以已知角速度旋转,通过测量 液体加在圆锥上的扭力矩换算成液体的黏度。 锥板式锥板式黏度计黏度计 采用激光作为激发光源,保证其具有更好的单色性与激发采用激光作为激发光源,保证其具有更好的单色性与激发 效率;效率; 利用荧光染料与单克隆抗体技术结合的标记技术,保证检利用荧光染料与单克隆抗体技术结合的标记技术,保证检 测的灵敏度和特异性;测的灵敏度和特异性; 用计算机系统对流动的单细胞悬液中单个细胞的多个参数用计算机系统对流动的单细胞悬液中单个细胞的多个参数 信号进行数据处理分析,保证了检测速度与统计分析精确信号进行数据处理分析,保证了检测速度与统计分析精确 性。性。 一、工作原理一、工作原理
6、 1.液流系统液流系统 2.光学系统光学系统 3.细胞信号处理细胞信号处理 4.细胞分选器细胞分选器 (1)液流系统)液流系统 采用激光作为激发光源,保证其具有更好的单色性与激发采用激光作为激发光源,保证其具有更好的单色性与激发 效率;效率; 利用荧光染料与单克隆抗体技术结合的标记技术,保证检利用荧光染料与单克隆抗体技术结合的标记技术,保证检 测的灵敏度和特异性;测的灵敏度和特异性; 用计算机系统对流动的单细胞悬液中单个细胞的多个参数用计算机系统对流动的单细胞悬液中单个细胞的多个参数 信号进行数据处理分析,保证了检测速度与统计分析精确信号进行数据处理分析,保证了检测速度与统计分析精确 性。性。
7、 一、工作原理一、工作原理 (1)液流系统)液流系统 FCMFCM的液流系统(如的液流系统(如 何形成单个细胞流)何形成单个细胞流) 样本管样本管 鞘液管鞘液管 (2)光学系统)光学系统 FACSCalibur 光路图 分析直方图分析直方图 单参数直方图(Histogram) X轴:代表荧光信号或 散射光信号的强度,用 “通道数”表示,可以 与光强度之间线性关系 或对数关系 Y轴:代表该通道内所 出现具有相同光信号特 征性细胞的频率 二维等高图和密度图 Pseudo 3D Plot 3D Plot 通过流式细胞仪进行细胞分选通过流式细胞仪进行细胞分选 主要是在对具有某种特征的细胞需主要是在对具有某种特征的细胞需 进一步培养和研究时进行的。进一步培养和研究时进行的。 细胞悬液形成液流柱细胞悬液形成液流柱 流动室振动流动室振动 液流断裂成液滴液流断裂成液滴 空白液滴空白液滴含细胞的液滴含细胞的液滴 弃去弃去 偏转落入收集器偏转落入收集器 压电晶体压电晶体产生产生机械振动机械振动 不充电不充电充电充电 (一)分选基本原理(一)分选基本原理 PCO2电极工作原理图电
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