干热灭菌与湿热灭菌教学资料

1、 7/23/20214 n干热灭菌法干热灭菌法 n湿热灭菌法湿热灭菌法 n过滤灭菌法过滤灭菌法 n射线灭菌法射线灭菌法 灭菌方法分类 7/23/20215 n1.1 定义：系指在干燥环境中进行的灭菌定义：系指在干燥环境中进行的灭菌 技技 术。术。 一、干热灭菌法定义 7/23/20216 一、干热灭菌法机理 n干热灭菌干热灭菌与与湿热灭菌湿热灭菌的动力学特征相似，符合的动力学特征相似，符合 “ 对数规则对数规则” ，但灭菌的机理却并不相同。，但灭菌的机理却并不相同。 n干热灭菌为何需较高的温度？干热灭菌为何需较高的温度？ n水份的影响：湿度低水份的影响：湿度低 n机理不同：干热灭菌是使微生物氧

2、化而不是使蛋机理不同：干热灭菌是使微生物氧化而不是使蛋 白质变性白质变性 7/23/20217 特点 n干热灭菌的介质通常是热空气干热灭菌的介质通常是热空气 n用对数规则描述微生物杀灭过程，准确性较用对数规则描述微生物杀灭过程，准确性较 差差 n温度高，温度高，200 以上，有可能到以上，有可能到320 n用于玻璃容器、手术器械等用于玻璃容器、手术器械等 n无菌生产工艺中安瓿、西林瓶的灭菌和去热无菌生产工艺中安瓿、西林瓶的灭菌和去热 源源 7/23/20218 n1.2 分类分类 ： n火焰灭菌法火焰灭菌法 n干热空气灭菌法干热空气灭菌法 一、干热灭菌法分类 7/23/20219 n1.2.1

3、 火焰灭菌法：系指用火焰直接灼烧火焰灭菌法：系指用火焰直接灼烧 的方法。的方法。 特点：灭菌迅速、可靠、简便，适用于特点：灭菌迅速、可靠、简便，适用于 耐火焰材质（如金属、玻璃、瓷器等）耐火焰材质（如金属、玻璃、瓷器等） 的物品与用具的灭菌，一般不适合药品的物品与用具的灭菌，一般不适合药品 的灭菌。的灭菌。 7/23/202110 n1.2.2 干热空气灭菌法：系指用高温干热干热空气灭菌法：系指用高温干热 空气灭菌的方法。空气灭菌的方法。 特点特点：该法适用于耐高温金属、玻璃、：该法适用于耐高温金属、玻璃、 等物品与用具的灭菌制品以及不允许湿等物品与用具的灭菌制品以及不允许湿 气穿透的油脂类（

4、如油性软膏基质、注气穿透的油脂类（如油性软膏基质、注 射用油等）和耐高温的粉末化学药品的射用油等）和耐高温的粉末化学药品的 灭菌，不适与橡胶、塑料及大部分药品灭菌，不适与橡胶、塑料及大部分药品 的灭菌。的灭菌。 7/23/202111 n1.3 注意注意 ：在干燥的状态下，由于热穿透力：在干燥的状态下，由于热穿透力 较差，微生物耐热性较强，必须长时间受较差，微生物耐热性较强，必须长时间受 高温的作用才能达到灭菌的目的。因此干高温的作用才能达到灭菌的目的。因此干 热空气灭菌法采用的温度一般比湿热灭菌热空气灭菌法采用的温度一般比湿热灭菌 法要高。一般规定为法要高。一般规定为135145灭菌灭菌35

5、 小时小时;160-170灭菌灭菌24小时；小时；180-200 灭菌灭菌0.5-1小时。小时。 7/23/202112 n2.1 定义：定义： 指用饱和蒸汽、沸水或流通蒸汽进行灭菌指用饱和蒸汽、沸水或流通蒸汽进行灭菌 的方法。实际上只要微生物处于达到水水的方法。实际上只要微生物处于达到水水 蒸气平衡状态下的灭菌过程，都是湿热灭菌蒸气平衡状态下的灭菌过程，都是湿热灭菌. 二、湿热灭菌法定义 7/23/202113 n例：实验室给微生物取样瓶灭菌时通例：实验室给微生物取样瓶灭菌时通 常加入常加入1ml水并密封。水并密封。 n水分的存在有利于灭菌水分的存在有利于灭菌 n蒸汽有利于蛋白质的变性和酶的

6、失活，蒸汽有利于蛋白质的变性和酶的失活， 从而杀灭细胞从而杀灭细胞 7/23/202114 湿热灭菌法特点 n蒸汽热穿透性强蒸汽热穿透性强 n 灭菌效率高灭菌效率高 n温度相对较低温度相对较低 n灭菌时间相对短灭菌时间相对短 n灭菌过程不产生任何化学物理污染灭菌过程不产生任何化学物理污染 n灭菌设备控制参数少，运行稳定，方便管理药灭菌设备控制参数少，运行稳定，方便管理药 物制剂生产过程中最常用的方法物制剂生产过程中最常用的方法 7/23/202115 n热压灭菌法热压灭菌法 n流通蒸汽灭菌法流通蒸汽灭菌法 n煮沸灭菌法煮沸灭菌法 n低温间歇灭菌法低温间歇灭菌法 二、湿热灭菌法分类 7/23/2

7、02116 n2.2.1 热压灭菌法：系指用高压饱和水热压灭菌法：系指用高压饱和水 蒸气加热杀灭微生物的方法。蒸气加热杀灭微生物的方法。 特点特点：该法具有很强的灭菌效果，灭该法具有很强的灭菌效果，灭 菌可靠，能杀灭所有细菌繁殖体和芽菌可靠，能杀灭所有细菌繁殖体和芽 孢，适用于耐高温和耐高压蒸汽的所孢，适用于耐高温和耐高压蒸汽的所 有药物制剂、玻璃容器、金属容器、有药物制剂、玻璃容器、金属容器、 瓷器、橡胶塞、滤膜过滤器等瓷器、橡胶塞、滤膜过滤器等 二、湿热灭菌之热压灭菌法 7/23/202117 n在一般情况下，热压灭菌法所需的温度在一般情况下，热压灭菌法所需的温度 （蒸汽表压）和时间的关系

8、为：（蒸汽表压）和时间的关系为：115 （67kPa）、）、30min; 121（97kPa）、）、 20min; 126（139kPa）、）、15min。在特。在特 殊情况下，可以通过试验确认合适的灭殊情况下，可以通过试验确认合适的灭 菌温度和时间。菌温度和时间。 7/23/202118 n湿热灭菌条件采用的程序多种，但必须保证湿热灭菌条件采用的程序多种，但必须保证 物品灭菌后的物品灭菌后的SAL10-6。对热稳定的物品，。对热稳定的物品， 可采用过度杀灭法，其可采用过度杀灭法，其SAL应应10-12。热敏感。热敏感 产品的标准灭菌时间产品的标准灭菌时间F0可低于可低于8min，但应在，但应

9、在 生产全过程中，对产品中污染的微生物严加生产全过程中，对产品中污染的微生物严加 监控，并采取各种措施防止耐热菌污染及降监控，并采取各种措施防止耐热菌污染及降 低微生物污染水平，确保被灭菌产品达到无低微生物污染水平，确保被灭菌产品达到无 菌保证要求菌保证要求 7/23/202119 湿热灭菌工艺验证湿热灭菌工艺验证 n进行热分布试验、热穿透试验和生物指示剂进行热分布试验、热穿透试验和生物指示剂 验证试验。验证试验。 n以确定灭菌柜空载及不同装载时腔室中的热以确定灭菌柜空载及不同装载时腔室中的热 分布状况及可能存在的冷点；在空载条件下，分布状况及可能存在的冷点；在空载条件下， 确认确认121时腔

10、室各点的温度差值应时腔室各点的温度差值应1； n使用插入实际物品或模拟物品内的温度探头，使用插入实际物品或模拟物品内的温度探头， 确认灭菌柜在不同装载时，最冷点物品的标确认灭菌柜在不同装载时，最冷点物品的标 准灭菌时间（准灭菌时间（F0）达到设定的标准；）达到设定的标准； n用生物指示剂进一步确认在不同装载时冷点用生物指示剂进一步确认在不同装载时冷点 处的灭菌物品达到无菌保证水平。处的灭菌物品达到无菌保证水平。 7/23/202120 n2.2.2 流通蒸汽灭菌法：系指在常温流通蒸汽灭菌法：系指在常温 下，采用下，采用100流通蒸汽加热杀灭微流通蒸汽加热杀灭微 生物的方法。生物的方法。 n特点

11、：该法适用于消毒及不耐高热特点：该法适用于消毒及不耐高热 制剂的灭菌。但不能保证杀灭所有制剂的灭菌。但不能保证杀灭所有 的芽孢，是非可靠的灭菌法，灭菌的芽孢，是非可靠的灭菌法，灭菌 时间通常为时间通常为3060min。 二、湿热灭菌法之流通蒸汽灭菌法 7/23/202121 n2.2.3 煮沸灭菌法：系指将待灭菌物置沸水煮沸灭菌法：系指将待灭菌物置沸水 中加热灭菌的方法。中加热灭菌的方法。 特点：该法灭菌效果较差，常用于注射器、特点：该法灭菌效果较差，常用于注射器、 注射针等器皿的消毒。必要时可加入适量注射针等器皿的消毒。必要时可加入适量 的抑菌剂，如三氯叔丁醇、甲酚、氯甲酚，的抑菌剂，如三氯

12、叔丁醇、甲酚、氯甲酚， 以提高灭菌效果，煮沸时间通常为以提高灭菌效果，煮沸时间通常为30 60min。 二、湿热灭菌法之煮沸灭菌法 7/23/202122 n2.2.4 低温间歇灭菌法：系指将待灭物置低温间歇灭菌法：系指将待灭物置 6080的水或流通蒸汽中加热的水或流通蒸汽中加热60min，杀，杀 灭微生物繁殖体后，在室温条件下放置灭微生物繁殖体后，在室温条件下放置24h， 让待灭菌物中的芽孢发育成繁殖体，再次让待灭菌物中的芽孢发育成繁殖体，再次 加热灭菌、放置，反复多次，直至杀灭所加热灭菌、放置，反复多次，直至杀灭所 有芽孢。有芽孢。 二、低温间歇灭菌法 7/23/202123 低温间歇灭菌

13、法特点： n优点：该法适用于不耐高温、热敏感物优点：该法适用于不耐高温、热敏感物 料和制剂的灭菌。料和制剂的灭菌。 n缺点：费时、功效低、灭菌效果差，加缺点：费时、功效低、灭菌效果差，加 入适量灭菌剂可提高灭菌效率。入适量灭菌剂可提高灭菌效率。 7/23/202124 2.3.1 微生物的种类和数量微生物的种类和数量:微生物的种类、微生物的种类、 发育阶段、微生物的数量等。发育阶段、微生物的数量等。 2.3.2 蒸汽性质：蒸汽有饱和蒸汽、湿饱和蒸汽性质：蒸汽有饱和蒸汽、湿饱和 蒸汽和过热蒸汽。热压灭菌应采用饱和蒸蒸汽和过热蒸汽。热压灭菌应采用饱和蒸 汽。汽。 二、影响湿热灭菌的因素 7/23/

14、202125 二、影响湿热灭菌的因素 2.3.3 药品性质和灭菌时间药品性质和灭菌时间: 一般而言，灭菌温度愈高，时间愈长，一般而言，灭菌温度愈高，时间愈长， 药品被破坏的可能性愈大。因此，在设药品被破坏的可能性愈大。因此，在设 计灭菌温度和时间时必须考虑药品的稳计灭菌温度和时间时必须考虑药品的稳 定性。定性。 2.3.4 其他：介质其他：介质PH等等 7/23/202126 湿热灭菌工艺之一湿热灭菌工艺之一 n美国美国FDA规定的残存概率法规定的残存概率法 n灭菌过程灭菌过程8 F012分钟分钟 n适用于热稳定性不很好的产品适用于热稳定性不很好的产品 n通过控制工艺过程的微生物污染和灭菌工艺通过控制工艺过程的微生物污染和灭菌工艺 参数使产品无菌参数使产品无菌 n无菌保证值不小于无菌保证值不小于6 7/23/202127 湿热灭菌工艺之二湿热灭菌工艺之二 n过度杀灭法过度杀灭法 nF0不低于不低于12 n热稳定性好的产品热稳定性好的产品 n以彻底杀灭任何污染的微生物为实现无菌的以彻底杀灭任何污染的微生物为实现无菌的 手段手段 n无菌保证值不小于无菌保证值不小于6