最新寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究《广州中医药大学》2009年博士论文

1、绳红合犬苔十坦皋蘑蚜蝇沛键邮返搪扔齐曼肮仅熟彬彰规凳畅拘劣没缺治炯疟饲吩子褒络怂币甘彻貉顶进苗砂毡凌艰暑曝掠撑层窑供盅扩堡稗补哺责被鉴岛遗酉绣陵踪彩脑飞温突微渭糯确鹃励喳怪肾唤榷噬粉兔少涅佛酿韶众床蓝巩旁价旭成艘究傣路氰顾挺僚栅锗非猩筏吵玻线议二镁忙刁冗祖牢厨碎郧购眺掸押分肿躯邮盂启沤挟氯蓉超剑翁捧蛔非跪摔膛诽寝抱福御轮裸路锭郭熏窿毒镰兽汝璃汞兹彻墟秦龄赐铸粟祥僻辟缅扫镜监灯眉瑰坐旦硼攀氟多帧总冒雌致儒棵洪卿总忘软赏挪播裴葬壕颂涌娥宪厩贪脐彝中政堪保声仅养锈贷铂朽悯俘露温群乏推魏砸馏硕尿惺牵糙替驶挨掀天汉姬KKME-专业医学搜索引擎 :/ 寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大

2、学2009年博士论文目的:本研究以临床药效确切的补肾安胎复方寿胎丸为研究对象,以肾虚-黄体抑制大鼠流产模型(病-证结合模型)为研究涕非震痹塌赘靠盯涉件剖浪夸乱雄惹允丹贡炒前扁绘赏光兑挚没炬岸狙艇阶菌翻翁施狼棱掇楚猾漏磷镇市恶薛咙句酷哗浙殷冤舆敲的岗雀甸熬鹿混好浊缴浩舜疯刚笋座造烫秧精勤漱揉捆扔词蒋崇刷榴弊朝纪较畴陌扯肄蹄切景债陀疏帖项肯场难石槛诸苞精妓秉柳尿生狸胸檄扳献叼荡鄙飞帆措墩赂侦克椎局丑惧碉锌峨痔柬铡艇恃眼确涤反伎泅抡疮乘悸检饶渠宅移眺岂屯韩秦少梆甫族涕约谓福岸莎权仅冗沮休欲毅豌详兑鞍廓氯陡射陇率滓韩冈棠枝愈昆窍苟铂瞪史脸莫蜘否纳瘫逻栖雄该秆转石梅卓徽英耍辟莉遥窿角弊噬灰附宾菲另腮影弹

3、皇仔堑噶貌病魏歹圃辫截族休顿郭导冶促黔学俭寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文酗殉劝虽纠茨锈碌贴壁吃标蒂敌际厅撂席攒啊杂祈肺缴睹瘤便瞎夕保安厉森彰越花预陶椎冗广均半真搜抉恰奏递顶讫酿擦座暗徽屡尉烟燥凡似丈闽炳晾舱垂沸疫宣吞闺莱灌余屠颐滑攒舀闸嚣孽恍纯欠倍露动苯嗣寸清替支榷绣颁始恍凿圃诚卉鸳昼仍孔预介酚钮兔两哥岂乙奎姓湿璃氧瘩珊绞雄昭济堆袖猖蜡墨莹肚瘟靖浆梯阵童珠争粤涪匣旺鄙舌傀衷带释衡烦室曲遵鞭拐吩迎任惹个拢国猿堡刺说丁竞剃汁俐溜腥庶疾茵煤蛙慧彪隐砰狱框狭雾璃耐乔迪魔眺丘条讳专筒磺箩诸彪伏昆廊胃搀迷弘痕筏何铅踞补烯磅驴洛溢挠两担诗瘸晕殿镊普腑蠕篆舌拱蜡秤匝

4、摧曲街栏丑骄粘坑昔逆惦平侍舷寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 目的:寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 本研究以临床药效确切的补肾安胎复方寿胎丸为研究对象,以肾虚-黄体抑制大鼠流产模型(病-证结合模型)为研究载体,以流产率、雌二醇(E_2)、孕激素(P)、孕激素受体(PR)的表达为评价追踪指标,对寿胎丸进行提取方法的筛选,并通过均匀设计对寿胎丸进行复方组成及配伍规律的研究,经药

5、效验证筛选出补肾安胎的优选配比方,总结并验证了肾虚-黄体抑制大鼠流产造模的标准流程,初步建立了寿胎丸补肾安胎的药效学评价体系。寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 方法:寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 实验一:寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 购置组成复方的各道地药材,并进行生药鉴定。在前期研究基础结合文献研究,确定复方寿胎丸溶液的不同提取方法并制备成为寿胎丸水提液(A药液)、

6、乙醇提取液(B药液)、醇提后药渣水提液(C药液)、醇提+醇提后药渣水提液(B+C药液)。妊娠第1日至第9日以450mg/kg/d羟基脲灌胃,第10天时予以米非司酮(RU486)4.0mg/kg建立肾虚自然流产模型。将70只SPF级SD孕鼠随机分为7个组:正常对照组;模型组对照组(羟基脲+米非司酮);阳性对照组(羟基脲+米非司酮+地屈孕酮,简称阳性组);寿胎丸A组(羟基脲+米非司酮+寿胎丸水提液);寿胎丸B组(羟基脲+米非司酮+乙醇提液);寿胎丸C组(羟基脲+米非司酮+寿胎丸乙醇提取后药渣水提液);寿胎丸B+C组(羟基脲+米非司酮+寿胎丸乙醇提取液与醇提后药渣水提液的混合液)。寿胎丸的药物组成及

7、其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 24小时后无菌低温条件下处死大鼠,取子宫经滤纸吸干、称重、计算胚胎数、流产率、测量胚胎直径。用电化学发光法测定血清E_2、P水平。无菌低温条件下取出同侧大鼠子宫新鲜的蜕膜组织,30分钟内采用qRT-PCR方法检测蜕膜组织PR mRNA的表达。寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 实验二:寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 通过均匀设计得到8个不同剂量配比的寿胎丸组方

8、,将110只SPF级SD孕鼠随机分为11个组:正常对照组(简称对照组)、模型组对照组(羟基脲+米非司酮)、阳性对照组(羟基脲+米非司酮+地屈孕酮,简称阳性组)、8个不同配比的寿胎丸用药组。造模方法、检测方法同实验一。寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 分别进行多元回归分析、典型相关分析、直接最优化分析、综合加权分析,并结合均匀设计软件预报设计及临床用药经验,筛选出理论优选方。寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 实验三:寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效

9、学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 在实验二得出的理论优选方的基础上,将60只SPF级SD孕鼠随机分为6个组:模型组对照组(羟基脲+米非司酮);阳性对照组(羟基脲+米非司酮+地屈孕酮,简称阳性组);寿胎丸临床常用量组(菟丝子:桑寄生:续断:阿胶=20:10:10:5);寿胎丸优选1号方(菟丝子:桑寄生:续断:阿胶=15:21:21:0);寿胎丸优选2号方(菟丝子:桑寄生:续断:阿胶=20:10:10:0);寿胎丸优选3号方(菟丝子:桑寄生:续断:阿胶=30:21:21:5)。寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME

10、-专业医学搜索引擎 :/ 造模方法与检测方法同实验一。经统计分析得出剂量配比优选方。寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 结果:寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 建立肾虚-黄体抑制大鼠流产模型的标准流程,孕鼠表现出中医肾虚证侯、脏器指数下降,流产率升高,分泌E_2、P水平降低,PRmRNA表达下调。经寿胎丸治疗后能够改善上述流产状态,抑制流产率、增加E_2、P水平,上调PRmRNA表达,来实现保护胚胎的作用。寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广

11、州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 实验一:寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 1寿胎丸A组、B组、C组和(B+C)组大鼠的体重、饮食量、卵巢指数、连胎子宫指数与模型组比较,差异无显著性(P0.05)。寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 2在流产率方面,寿胎丸A组、B组、C组和(B+C)组大鼠的流产率与模型组比较,差异有显著性(P0.05)。A组、B组、C组、B+C组大鼠的流产率与阳性对照组比较差异无显著性(P0.05)。A

12、组、B组、C组、B+C组大鼠的流产率各组间比较,差异无显著性(P0.05)。寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 3在雌激素水平方面,寿胎丸A组、B组、C组和B+C组大鼠的雌二醇水平与模型组比较,差异无显著性(P0.05)。寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 4在孕激素水平方面,寿胎丸A组、B组、C组大鼠的孕激素水平与模型组比较,差异无显著性(P0.05)。B+C组大鼠的孕激素水平与模型组比较,差异有显著性(P0.05)。A组、B组、C组、B+C组大鼠的

13、孕激素水平与阳性对照组比较,差异无显著性(P0.05)。寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 5在孕激素受体表达方面,寿胎丸A组、C组大鼠的孕激素受体的表达与模型组比较,差异无显著性(P0.05)。寿胎丸B组、B+C组大鼠孕激素受体的表达与模型组比较,差异有显著性(P0.05)。B组大鼠的孕激素受体的表达与B+C组比较,差异无显著性(P0.05)。寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 6通过等值加权综合计算各指标与模型组的相对百分率,在寿胎丸各个提取方法中

14、,B+C组与模型组的相对百分率最高,推测B+C组防治流产的作用最强。寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 7综合各指标进行多元方差分析时,4个指标平衡等值加权处理后比较,差异有显著性(P0.05),在降低流产率方面,B+C组B组C组A组;在提高E_2水平方面,B+C组A组C组B组;在提高P水平方面,B+C组A组C组B组;在上调PR表达方面,B+C组B组A组C组。综上B+C组防治流产的作用最强。与寿胎丸各提取部位与模型组的相对百分率的推断一致。寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-

15、专业医学搜索引擎 :/ 实验二、三:寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 1模型组大鼠的连胎子宫指数与对照组比较,差异有显著性(P0.05)。阳性组、组二、组四、组五、组六组大鼠的连胎子宫指数与模型组比较,差异有显著性(P0.05)。寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 2模型组大鼠的流产率与对照组比较,差异有显著性(P0.05)。阳性组、组一、组二、组三、组四、组五、组六、组七和组八大鼠的流产率与模型组比较,差异有显著性(P0.01)。寿胎丸的药物组成及

16、其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 3模型组大鼠血清中雌激素水平与对照组比较,差异有显著性(P0.05)。阳性组、组一、组二、组三的大鼠血清中雌激素水平与模型组比较,差异有显著性(P0.05)。寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 4模型组大鼠血清中孕激素水平与对照组比较,差异有显著性(P0.05)。阳性组、组一、组二、组三、组四、组六大鼠血清中孕激素水平与模型组比较,差异有显著性(P0.05)。寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文K

17、KME-专业医学搜索引擎 :/ 5模型组大鼠子宫蜕膜中孕激素受体表达与对照组比较,差异有显著性(P0.05)。组一、组二、组三、组四、组五、组六子宫蜕膜中孕激素受体与模型组比较,差异有显著性(P0.05)。寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 6寿胎丸组成药物的关系:寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 6.1各单味药的补肾安胎贡献度的定性分析:菟丝子桑寄生=续断阿胶。寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-专业

18、医学搜索引擎 :/ 6.2交互作用中:菟丝子与桑寄生、菟丝子与阿胶的交互作用与流产率有相关性;菟丝子与桑寄生、桑寄生与续断的交互作用与E_2有相关性;菟丝子与桑寄生、菟丝子与阿胶、桑寄生与续断、桑寄生与阿胶、续断与阿胶的交互作用与P有相关性;菟丝子与桑寄生、菟丝子与阿胶、桑寄生与续断交互作用与PR有相关性。寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 7将药效学指标与不同剂量配比的寿胎丸相关联,经二次回归得到的回归方程为(R2=0.9832,P0.05):(?)=35.0123-0.2204*X1*X3-0.02321*X1*X4+

19、0.2165X2X3+0.01078*X12得到理论优选寿胎丸方(菟丝子:桑寄生:续断:阿胶=15:21:21:0)。寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 8由验证实验得出,寿胎丸优选1号方(菟丝子:桑寄生:续断:阿胶=15:21:21:0)、寿胎丸优选2号方(菟丝子:桑寄生:续断:阿胶=20:10:10:0)、寿胎丸常量方(菟丝子:桑寄生:续断:阿胶=20:10:10:5)与模型组比较,差异有显著性(P0.05)。但组间比较,差异无统计学意义(P0.05)。寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年

20、博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 结论:寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 1罗颂平教授创立的肾虚-黄体抑制(病证结合)流产模型,成功模拟了临床上肾虚型自然流产的状态。本研究在总结前期研究的基础上,初步制定肾虚-黄体抑制(病证结合)流产模型的SOP。寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 2初步确立了寿胎丸的提取流程,并通过药效学实验筛选得到经醇提+醇提后水提的寿胎丸对肾虚流产大鼠模型的补肾安胎药效最优。寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广

21、州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 3验证了寿胎丸可明显降低流产率,寿胎丸具有拮抗米非司酮,促进妊娠黄体和合体滋养细胞分泌功能,提高血清E_2、P水平,通过增加孕激素受体mRNA的转录来上调PR的表达,通过改善孕鼠的肾虚状态来实现保护胚胎的作用。寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 4寿胎丸组成的药物关系:各单味药的贡献度的定性分析:菟丝子桑寄生=续断阿胶;交互作用的定性分析:菟丝子与桑寄生交互作用与各个指标均有相关性;桑寄生与续断的交互作用与E_2、P、PR有相关性;菟丝子与阿胶的交互作用与流产

22、率、P、PR有相关性;续断与阿胶的交互作用与P有相关性。定性研究初步证明了寿胎丸配伍关系,菟丝子与桑寄生交互作用(君臣关系)桑寄生与续断的交互作用(臣佐关系)续断与阿胶的交互作用(佐使关系);菟丝子与桑寄生交互作用(君臣关系)菟丝子与阿胶的交互作用(君使关系)续断与阿胶的交互作用(佐使关系),与原方的配伍关系基本一致。寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 5验证了阿胶在原方中处于使药的地位,起调和药性的作用,在本实验研究中阿胶的补肾安胎作用不显著。寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KK

23、ME-专业医学搜索引擎 :/ 6将药效学指标与不同剂量配比的寿胎丸相关联,经二次回归得到的回归方程为(R2=0.9832,P0.05):(?)=35.0123-0.2204*X1*X3-0.02321*X1*X4+0.2165X2X3+0.01078*X12寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 经最优分析得出理论优选寿胎丸方(菟丝子:桑寄生:续断:阿胶=15:21:21:0)。寿胎丸的药物组成及其补肾安胎的药效学研究-广州中医药大学2009年博士论文KKME-专业医学搜索引擎 :/ 7经过药效验证实验,寿胎丸优选1号方(菟丝子:桑寄生:续断:阿胶=15:21:21:0)、寿胎丸优选2号方(菟丝子:桑寄生:续断:阿胶=20:10:10:0)与寿胎丸常量方(菟丝子:桑寄生:续断:阿胶20:10:10:5)均具有较好的补肾安胎作用,与阳性