胃蛋白酶原PG临床推广-讲义PPT课件

1、 胃蛋白酶原胃蛋白酶原I/II （PG I/II）分泌部位）分泌部位 PG是胃底腺的主细胞和颈粘液细胞分泌是胃底腺的主细胞和颈粘液细胞分泌; PG除主细胞和颈粘液细胞分泌外，幽门腺和十二指肠除主细胞和颈粘液细胞分泌外，幽门腺和十二指肠 腺亦可产生腺亦可产生. PGI&PGII 胃蛋白酶原胃蛋白酶原I/II( PG I/II) 介绍内容介绍内容 检测方法 n放射免疫测定法放射免疫测定法(RIA)(RIA)：有放射性有放射性 n酶免疫测定法酶免疫测定法( EIA)( EIA)： 需样少需样少, , 较较低低特异性和灵特异性和灵 敏度敏度 n时间分辨荧光免疫分析法时间分辨荧光免疫分析法( TRFIA

2、)( TRFIA)：灵敏、简便灵敏、简便, , 较高特异性较高特异性、灵敏度灵敏度较低、易受干扰。较低、易受干扰。 n乳胶增强免疫比浊法：乳胶增强免疫比浊法：较较低低灵敏度及特异灵敏度及特异性性, ,方便方便 , ,适合大规模筛查适合大规模筛查，易受干扰，易受干扰。 五五、胃蛋白酶原检测、胃蛋白酶原检测 五五、胃蛋白酶原检测、胃蛋白酶原检测 酶标板酶标板 反应底物反应底物 包被抗体包被抗体 检测抗原检测抗原 酶标抗体酶标抗体 酶标抗体酶标抗体反应产物反应产物 酶免疫测定法酶免疫测定法 乳胶免疫测定法（乳胶免疫测定法（LIALIA法）法） n以血清或血浆为样本，利用全自动生化分析仪对以血清或血浆

3、为样本，利用全自动生化分析仪对 样本的乳胶凝集反应所导致的吸光度变化进行检样本的乳胶凝集反应所导致的吸光度变化进行检 测。测。 n将抗将抗PG IPG I（IIII）抗体与乳胶颗粒表面结合制成乳）抗体与乳胶颗粒表面结合制成乳 胶试剂，与试验样本中的胶试剂，与试验样本中的PG IPG I（IIII）反应，使乳）反应，使乳 胶颗粒产生凝集。在确定的波长下测定该反应的胶颗粒产生凝集。在确定的波长下测定该反应的 浊度变化，其变化量会随着检测样本中浊度变化，其变化量会随着检测样本中PG IPG I（IIII ）的浓度而成比例增加。根据已知浓度的）的浓度而成比例增加。根据已知浓度的PG IPG I（ II

4、II）标准液制备标准曲线，求出样本中）标准液制备标准曲线，求出样本中PGIPGI（IIII） 的浓度。的浓度。 + 乳胶颗粒 抗体 抗原 乳胶免疫测定法（乳胶免疫测定法（LIALIA法）法） 凝集产生浊度 化学发光（化学发光（chemiluminescencechemiluminescence）是指伴随化学）是指伴随化学 反应过程所产生的光的发射现象。反应过程所产生的光的发射现象。 某些物质某些物质( (发光剂发光剂) )在化学反应时，吸收了在化学反应时，吸收了 反应过程中所产生的化学能，使反应的产物分反应过程中所产生的化学能，使反应的产物分 子或反应的中间态分子中的电子跃迁到激发态，子或反应

5、的中间态分子中的电子跃迁到激发态， 当电子从激发态回复到基态时，以发射光子的当电子从激发态回复到基态时，以发射光子的 形式释放出能量，这一现象称为化学发光。形式释放出能量，这一现象称为化学发光。 化学发光法原理化学发光法原理 底物底物A A底物底物B B发光反应发光反应 化学发光酶免疫分析法（化学发光酶免疫分析法（CLEIACLEIA） 胃蛋白酶原胃蛋白酶原I/II I/II （PGI/PGIIPGI/PGII） 试剂盒性能指标试剂盒性能指标 BSBE 最低检测限为最低检测限为PGI:PGI:1 1ng/ml,PGII:ng/ml,PGII:1 1ng/mlng/ml 线性范围线性范围,PGI

6、:,PGI:200200ng/mLng/mL，PGII:PGII:100100ng/mLng/mL 抗干扰性：抗干扰性：0.1g/l0.1g/l的胆红素、的胆红素、18g/l18g/l的甘油三酯和的甘油三酯和2.5g/l2.5g/l 的血红蛋白的血红蛋白, RF, RF为为520IU/ml520IU/ml， 小于上述浓度的物质不会小于上述浓度的物质不会 对该试验产生干扰对该试验产生干扰 稳定性：开盖放在试剂仓中稳定性：开盖放在试剂仓中1414天，空白无变化，质控结果天，空白无变化，质控结果 基本无变化，基本无变化，可两点可两点定标定标 采血要求采血要求 n静脉采血静脉采血2-3mL2-3mL于

7、普通管中（不能使用含于普通管中（不能使用含 EDTAEDTA、枸橼盐酸试管），离心分离出血清、枸橼盐酸试管），离心分离出血清 。 n2-82-8条件下，样本可保存条件下，样本可保存7 7天，天，-20-20可长可长 期保存。避免样本反复冻融。期保存。避免样本反复冻融。 五五、胃蛋白酶原检测、胃蛋白酶原检测 检验方法检验方法 实验前准备：实验前准备： 1. 将试剂盒从冷藏环境中取出，放置室温（1825）平 衡至少30分钟。 2. 将恒温箱或恒温水浴锅温度调到37，待温度稳定后使 用。 3. 取1包固体洗液用500mL纯化水溶解后备用。 实验步骤：实验步骤： 较准品较准品 或血清或血清 酶结酶结 合物合物 室温室温 振荡振荡 洗板洗板 拍干拍干 发光底发光底 物物A A、B B 发光发光 仪检测仪检测 包被板包被板 3737温育温育 60min60min 河南美凯生物其他二类产品河南美凯生物其他二类产品 A A：化学发光定量检测系列产品：化学发光定量检测系列产品 1）性激素系列 LH、FSH、PRL、T、P、E2、fE3 2）甲功系列 T3、fT3、T4、fT4、TSH、Anti-TG、Anti-TPO 3）糖尿病系列 C-P、INS B B：胶体金快速检测系列产品：胶体金快速检测系列产品 LH、HCG C C：微生物类系列产品：微生物类系列产品 BV诊断（唾液